RESUMO O estudo experimental in vivo objetivou caracterizar o efeito ansiolítico do óleo essencial das cascas do fruto de Citrus limon (OECL) em modelos animais de ansiedade, além de avaliar in vitro a viabilidade de células J774.A1 através do método de redução do MTT nas concentrações de 10 e 100 µg/mL. O comportamento ansiolítico foi avaliado em camundongos Swiss (n = 8), utilizando a metodologia do Labirinto em Cruz Elevado (LCE) e do Campo Aberto (CA). O OECL foi testado por inalação nas doses de 100, 200 e 400 µL, e como controle, os grupos foram submetidos à inalação do veículo (Solução fisiológica 0,9% + Tween80®) e administração intraperitoneal de diazepam (1,5 mg/kg). No ensaio de viabilidade celular, observou-se que nenhuma das concentrações apresentou citotoxicidade. O teste de CA demonstrou atividade ansiolítica significativa em todas as doses testadas do OECL, comparada ao grupo controle, sem alterar a performance motora dos animais. Corroborando os dados do CA, o teste do LCE confirmou a atividade ansiolítica em pelo menos duas das doses do óleo testadas (200 e 400 µL), justificada pelo número de entradas e aumento na percentagem de tempo nos braços abertos. A análise dos dados deste estudo evidenciou que a inalação do OECL foi capaz de induzir um comportamento ansiolítico em camundongos; entretanto, outros estudos são necessários para garantir o seu uso seguro pela população.

ABSTRACT Experimental in vivo study aimed to characterize the anxiolytic-like effect of the Citrus limon fruit peel’s essential oil (CLEO) in animal models of anxiety, besides evaluating the viability J774.A1 cells in vitro through the MTT reduction method at the concentrations of 10 and 100 µg/mL. The anxiolytic behavior was evaluated in Swiss mice (n = 8) using the methodology of Elevated Plus-Maze (EPM) and Open-Field (OF). CLEO was tested by inhalation at the doses of 100, 200, and 400 µL, and as control, animals were subjected to inhalation of the vehicle (saline solution 0.9% + Tween80®) and intraperitoneal administration of diazepam (1.5 mg/kg). In the cell viability assay, it was observed that none of the concentrations showed cytotoxicity. OF test showed significant anxiolytic activity at all tested doses of OECL, compared to the control group, without changing the motor performance of the animals. Corroborating OF data, the EPM test confirmed anxiolytic activity in at least two doses of the tested oil (200 and 400 µL), justified by the number of entries and increase in the percentage of time in the open arms. The data analysis of this study evidenced that inhalation of OECL was able to induce an anxiolytic behavior in mice; however, further studies are required to ensure its safe use by the population.

RESUMO O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana, antioxidante e citotóxica da espécie Opuntia cochenillifera (L.) Mill. Foi realizada a prospecção fitoquímica e espectroscopia de absorção de infravermelho (IV) dos extratos etanólicos brutos e frações dos cladódios grande e pequeno. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método da capacidade sequestradora de radicais livres utilizando o radical sintético 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH). A atividade citotóxica foi obtida através do método colorimétrico do Metiltetrazolium (MTT). Já a atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) frente às estirpes bacterianas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. A prospecção fitoquímica revelou principalmente a presença de fenóis, esteroides livres, alcaloides, alcanos, além de outras classes químicas. O IV apresentou grupos funcionais como alcanos, carbonilas, grupos de metila, duplas ligações de carbono, grupamentos alquilamina, entre outros. Sobre a citotoxicidade na concentração de 100 μg/mL, os dois extratos brutos, todas as frações do cladódio grande e as frações de clorofórmio e metanol do cladódio pequeno não apresentaram toxicidade. Os extratos brutos e frações do cladódio grande e pequeno, não demonstraram atividade antibacteriana e nem antioxidante. Esses resultados podem fornecer suporte para pesquisas futuras, visando outras atividades biológicas da presente espécie vegetal.

ABSTRACT The purpose of this study was to evaluate the antibacterial, antioxidant, and cytotoxic activity of Opuntia cochenillifera (L.) Mill. A phytochemical screening and infrared (IR) absorption spectroscopy were performed in the crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladodes. The antioxidant activity was evaluated through the qualitative method of free-radical scavenging capacity using the synthetic radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). The cytotoxic activity was obtained by the cell viability assay using methyl thiazolyl tetrazolium (MTT). Antibacterial activity was evaluated by broth microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against the bacterial strains Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, and Escherichia coli. The phytochemical screening mainly revealed the presence of phenols, flavonoids, free steroids, alkaloids, alkanes, and other chemical classes. The IR spectroscopy presented functional groups such as alkanes, carbonyls, methyl groups, carbon double bonds, and alkylamino groups, among others. Regarding cytotoxicity in the concentration of 100 μg/mL, neither the crude extracts, the fractions of the large cladode, nor the chloroform and methanol fractions of small cladode presented toxicity. The crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladode showed no antibacterial or antioxidant activity. These results may provide support for future research aimed at other biological activities of this plant species.

Após sucessivos anos, aplicações do herbicida glyphosate em pomares de citros no Estado de São Paulo selecionaram biótipos resistentes de Conyza bonariensis e C. canadensis. Na ocorrência de plantas daninhas resistentes em uma área agrícola, tornam-se necessárias mudanças nas práticas de manejo para obtenção de adequado controle das populações resistentes, bem como para a redução da pressão de seleção sobre outras espécies. Assim, este trabalho foi realizado com o objetivo de identificar herbicidas alternativos para controle de biótipos de Conyza spp. resistentes ao herbicida glyphosate, com aplicações em diferentes estádios fenológicos da planta daninha. Três experimentos foram conduzidos em campo, em pomares de citros em formação, sobre plantas de buva em estádio fenológico de dez folhas e no pré-florescimento. Para plantas no estádio de dez folhas, controle satisfatório foi obtido com aplicações de glyphosate + bromacil + diuron (1.440 + 1.200 + 1.200 g ha-1), glyphosate + atrazina (1.440 + 1.500 g ha-1) e glyphosate + diuron (1.440 + 1.500 g ha-1). Quando em estádio de pré-florescimento de Conyza spp., a aplicação do herbicida amônio-glufosinato, na dose de 400 g ha-1, isolado ou associado a MSMA, bromacil+diuron, metsulfuron, carfentrazone e paraquat, foi a alternativa viável para controle dos biótipos resistentes ao glyphosate.

After successive years, glyphosate applications on São Paulo-Brazil citrus orchards selected resistant biotypes of Conyza bonariensis and C. canadensis. The occurrence of herbicide-resistant weed biotypes at some agricultural area makes it necessary to change the management practices to reach effective control of the selected resistant populations, as well as to reduce selection pressure on the other species. Thus, this work aimed to identify the alternative herbicides to control glyphosate-resistant biotypes of Conyza spp., with applications at different weed phenological stages. Three trials were developed under field conditions: in citrus orchards under formation, in plants with phenological stages of ten leaves and at pre-flowering. For plants at the ten leaf stage, satisfactory control was reached with applications of glyphosate + bromacil + diuron (1,440 + 1,200 + 1,200 g ha-1), glyphosate + atrazine (1,440 + 1,500 g ha-1) and glyphosate + diuron (1,440 + 1,500 g ha-1). For Conyza spp. plants at the pre-flowering stage, ammonium-glufosinate application, at the rate of 400 g ha-1, isolated or associated to MSMA, bromacil+diuron, metsulfuron, carfentrazone and paraquat, was a viable alternative to control glyphosate-resistant biotypes.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de curvas de dose-resposta, a ocorrência de biótipos resistentes ao herbicida glyphosate em populações de Conyza canadensis e C. bonariensis, bem como propor tratamentos alternativos para esses biótipos. Os experimentos foram realizados em casa de vegetação, utilizando-se três populações de cada espécie: duas com suspeita de resistência ao herbicida glyphosate, coletadas em pomares de laranja localizados em duas regiões diferentes do Estado de São Paulo; e uma suscetível, coletada em área sem histórico de aplicação do herbicida. O delineamento experimental adotado foi o de blocos ao acaso, com quatro repetições. Para cada espécie, os tratamentos foram resultado da combinação fatorial entre as três populações e os tratamentos herbicidas (oito doses de glyphosate ou cinco tratamentos alternativos). As doses de glyphosate foram (g e.a. ha¹): 90, 180, 360, 720, 1.440, 2.880, 5.760 e testemunha sem aplicação. Como alternativas de controle, foram testados os seguintes tratamentos (g ha-1): glyphosate + 2,4-D (1.440 + 1.005), glyphosate + metsulfuron (1.440 + 2,4), glyphosate + metsulfuron (1.440 + 3,6), glyphosate + metribuzin (1.440 + 480) e testemunha sem aplicação. A partir dos resultados, comprovou-se a existência de populações de ambas as espécies com biótipos resistentes ao herbicida glyphosate, com diferentes níveis de resistência. Todos os tratamentos herbicidas alternativos controlaram de forma eficiente as três populações de cada espécie.

The objective of this research was to evaluate, through dose-response curves, the occurrence of glyphosate-resistant biotypes in populations of Conyza canadensis and C. bonariensis; as well as to propose alternative treatments to these biotypes. The experiments were conducted in a greenhouse, using three populations of each species: two with suspicion of resistance to the herbicide glyphosate, and collected in orange orchards located in two different São Paulo state regions; and a susceptible one, collected in an area without herbicide application history. The experimental design adopted was randomized blocks, with four replicates. For each species, the treatments were the result of a factorial combination among the three populations and the herbicide treatments (eight rates of glyphosate or five alternative treatments). The glyphosate rates used were (g e.a. ha-1): 90, 180, 360, 720, 1.440, 2.880, 5.760 and checks without application. As control alternative, the following treatments (g ha-1) were tested: glyphosate + 2,4-D (1.440 + 1.005), glyphosate + metsulfuron (1.440 + 2,4), glyphosate + metsulfuron (1.440 + 3,6), glyphosate + metribuzin (1440 + 480) and checks without application. The results obtained proved the existence of populations of both species with glyphosate-resistant biotypes, with different levels of resistance. All the alternative herbicide treatments controlled efficiently the three populations of each species.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da adubação nitrogenada de cobertura sobre a seletividade dos herbicidas aplicados em pós-emergência na cultura do milho (Zea mays). Para isso, foram conduzidos dois experimentos. Em um deles utilizou-se uréia incorporada (67,5 kg N ha-1) como fonte nitrogenada e, no outro, sulfato de amônio (62 kg N ha¹) a lanço. Os tratamentos foram conseqüência da combinação fatorial entre quatro níveis do fator herbicida: mesotrione (144 g ha-1) + atrazine (1.500 g ha-1), foransulfuron + iodosulfuron (45 + 3 g ha-1), nicosulfuron (20 g ha-1) + atrazine (1.500 g ha-1) e testemunha capinada; e quatro níveis do fator época de adubação: 7, 3 e 0 dias antes e 7 dias após a aplicação dos herbicidas (DAA), perfazendo 16 tratamentos. Avaliaram-se: fitotoxicidade aos 7, 14, 21 e 28 DAA, altura das plantas de milho no florescimento, massa de 1.000 grãos e rendimento. Não foi detectada a interação significativa entre os herbicidas e as fontes nitrogenadas utilizadas para nenhuma das variáveis em estudo. Embora efeitos fitotóxicos tenham sido observados, não houve diferenças estatísticas para altura de planta, massa de 1.000 grãos ou rendimento.

The objective of this work was to evaluate the effects of cover nitrogen fertilization on selectivity of post-emergence applied herbicides in corn (Zea mays). Thus, two experiments were conducted: in one of them, urea (67.5 kg ha-1) was used as nitrogen source and in the other ammonium sulfate (62 kg N ha-1) was used. The treatments consisted of a factorial combination of four levels of herbicide: mesotrione (144 g ha-1 ) + atrazine (1,500 g ha-1 ), foransulfuron + iodosulfuron (45 + 3 g ha-1), nicosulfuron (20 g ha-1 ) + atrazine (1,500 g ha¹ ) and handweeded checks; and four levels fertilization timing: 7, 3 and 0 days before and 7 days after herbicide application (DAA), totalizing 16 treatments. Phytotoxicity at 7, 14, 21 and 28 DAA, height at flowering, mass of 1,000 grains and crop yield were evaluated. No significant interaction was detected between the herbicides and the nitrogen sources used for the variables evaluated. Although phytotoxicity effects were observed, no significant differences were found for plant height, mass of 1,000 grains or crop yield.

Cissampelos sympodialis Eichl species are used in folk medicine for the treatment of asthma, arthritis and rheumatism. In the present study, we investigated the immunomodulatory effect of an aqueous fraction of a 70% (v/v) ethanol extract of C. sympodialis leaves on B lymphocyte function. The hydroalcoholic extract inhibited the in vitro proliferative response of resting B cells induced by LPS (IC50 = 17.2 µg/ml), anti-delta-dextran (IC50 = 13.9 µg/ml) and anti-IgM (IC50 = 24.3 µg/ml) but did not affect the anti-MHC class II antibody-stimulated proliferative response of B cell blasts obtained by stimulation with IL-4 and anti-IgM. Incubation with the hydroalcoholic extract used at 50 µg/ml induced a 700% increase in intracellular cAMP levels. IgM secretion by resting B cells (obtained from normal mice) and polyclonally activated B cells (obtained from Trypanosoma cruzi-infected animals) was inhibited by the hydroalcoholic extract. The latter were more sensitive to the hydroalcoholic extract since 6.5 µg/ml induced a 20% inhibition in the response of cells from normal mice while it inhibited the response of B cells from infected animals by 75%. The present data indicate that the alcoholic extract of C. sympodialis inhibited B cell function through an increase in intracellular cAMP levels. The finding that the hydroalcoholic extract inhibited immunoglobulin secretion suggests a therapeutic use for the extract from C. sympodialis in conditions associated with unregulated B cell function and enhanced immunoglobulin secretion. Finally, the inhibitory effect of the hydroalcoholic extract on B cells may indicate an anti-inflammatory effect of this extract.

The aqueous fraction of the ethanolic extract (AFL) of Cissampelos sympodialis Eichl (Menispermaceae), popularly known as milona, has been shown to have both immunosuppressive and anti-inflammatory effects. In the present study we investigated the modulation of macrophage antimicrobicidal activity by in vitro treatment with the extract from C. sympodialis. Normal and thioglycolate-elicited mouse peritoneal macrophages were infected in vitro with the protozoan Trypanosoma cruzi DM28c clone. We observed that the AFL (used at doses ranging from 13 to 100 µg/ml) increased T. cruzi growth and induced a 75% reduction in nitric oxide production. This inhibition could be mediated by the stimulation of macrophage interleukin-10 (IL-10) secretion since the in vitro treatment with the AFL stimulated IL-10 production by T. cruzi-infected macrophages. These results suggest that the anti-inflammatory effect of the AFL from C. sympodialis could be, at least in part, mediated by the inhibition of macrophage functions and that the inhibition of macrophage microbicidal activity induced by the C. sympodialis extract may be mediated by the decrease in macrophage function mediated by interleukin-10 production.