Abstract The aim of this study was to assess the in vitro ovicidal activity of an ethyl acetate extract from Arceuthobium vaginatum (EtOAc-E) and their subfractions (AvR5-AvR14) against Haemonchus contortus using the egg hatching inhibition (EHI) test. The EtOAc-E and subfractions were tested at 0.12-2.00 and at 0.015-2.0 mg/mL, respectively. Distilled water and methanol (2%) were used as negative controls and Thiabendazole (0.10 mg/mL) as a positive control. Treatments with a dependent effect on concentration were subjected to regression analysis to determine the effective concentrations (EC50 and EC90). The major secondary compounds present in the extract and subfractions were identified by high performance liquid chromatography (HPLC). The EtOAc-E and AvR9 exhibited the best ovicidal effect recording 97.5 and 100% of EHI at 0.25 mg/mL, respectively. The EtOAc-E and AvR9 displayed an EC50= 0.12 and 0.08 mg/mL, respectively. The HPLC analysis in the EtOAc-E and bioactive fractions indicated the presence of a polyphenol, glycosylated flavanones, quercetin glucoside, cinnamates, coumarin, cinnamic acid derivative, ferulic acid, coumarate, naringenin, protocatechuic acid and naringin. Results demonstrated that A. vaginatum extract and fraction is able to inhibit the egg hatch process of H. contortus and could be a viable option for the control of small ruminant haemonchosis. EtOAcE EtOAc E (EtOAc-E AvR5AvR14 AvRAvR AvR5 AvR14 AvR (AvR5-AvR14 (EHI test 0.122.00 012200 2.00 0 12 2 00 0.12-2.0 0.0152.0 001520 0.015 2.0 015 0.015-2. mgmL mg mL mg/mL respectively 2% (2% 0.10 010 10 (0.1 EC50 EC (EC5 EC90. EC90 . EC90) HPLC. (HPLC) 975 97 5 97. 100 025 25 0.2 012 0.1 008 08 0.0 polyphenol flavanones glucoside cinnamates coumarin derivative coumarate naringenin naringin A H haemonchosis AvR5AvR1 AvR1 (AvR5-AvR1 122 0.122.0 01220 200 1 0.12-2. 0152 0.0152. 00152 0015 0.01 20 2. 01 0.015-2 (2 (0. EC5 (EC EC9 (HPLC 9 02 0. AvR5AvR (AvR5-AvR 0.122. 0122 0.12-2 0.0152 001 0.015- ( (0 0.122 0.12-

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade ovicida in vitro de um extrato de acetato de etila de Arceuthobium vaginatum (EtOAc-E) e suas subfrações (AvR5-AvR14) contra Haemonchus contortus, utilizando-se o teste de inibição da eclosão de ovos (EHI). O extrato foi testado em 0.12-2.00 mg/mL, e as subfrações foram testadas em 0.15-2.0 mg/mL. Água destilada e metanol (2%) foram utilizados como controles negativos e Tiabendazol (0.10 mg/mL) como controle positivo. Os tratamentos com efeito concentração dependente foram submetidos à análise de regressão para determinação das concentrações efetivas (CE50 e CE90). Os principais compostos secundários, presentes no extrato e nas subfrações, foram identificados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). EtOAc-E e subfração AvR9 exibiram o melhor efeito ovicida, registrando-se 97.5 e 100% do EHI a 0.25 mg/mL, respectivamente. O EtOAc-E e AvR9 apresentaram CE50= 0,12 e 0,08 mg/mL, respectivamente. A análise por HPLC nas frações EtOAc-E e bioativas indicou a presença de um polifenol, flavanonas glicosiladas, glicosídeo de quercetina, cinamatos, cumarina, derivado de ácido cinâmico, ácido ferúlico, cumarato, naringenina, ácido protocatecuico e naringina. Os resultados demonstraram que extrato e frações de A. vaginatum são capazes de inibir o processo de eclosão dos ovos de H. contortus, podendo ser uma opção viável para o controle da hemoncose em pequenos ruminantes. EtOAcE EtOAc E (EtOAc-E AvR5AvR14 AvRAvR AvR5 AvR14 AvR (AvR5-AvR14 contortus utilizandose utilizando se EHI. . (EHI) 0.122.00 012200 0.12 2.00 0 12 2 00 0.12-2.0 mgmL mg mL mg/mL 0.152.0 01520 0.15 2.0 15 0.15-2. 2% (2% 0.10 010 10 (0.1 positivo CE50 CE (CE5 CE90. CE90 CE90) secundários HPLC. (HPLC) registrandose registrando 975 97 5 97. 100 025 25 0.2 respectivamente 012 0,1 008 08 0,0 polifenol glicosiladas quercetina cinamatos cumarina cinâmico ferúlico cumarato naringenina naringina H ruminantes AvR5AvR1 AvR1 (AvR5-AvR1 (EHI 122 0.122.0 01220 0.1 200 1 0.12-2. 152 0.152. 0152 015 20 2. 0.15-2 (2 01 (0. CE5 (CE CE9 (HPLC 9 02 0. 0, AvR5AvR (AvR5-AvR 0.122. 0122 0.12-2 0.152 0.15- ( (0 0.122 0.12-

Abstract The objective was to evaluate the nematocidal effect of four hydroalcoholic extracts (HAE) of Brosimum alicastrum (HAE-Ba), Guazuma ulmifolia (HAE-Gu), Erythrina americana (HAE-Ea) and Leucaena leucocephala (HAE-Ll) against Haemonchus contortus. The tests of egg hatching inhibition (EHI) and larval (infective larvae) mortality were used. The treatments were HAEs at concentrations of 6.25-50 mg/mL for EHI and 25-100 mg/mL for larval mortality, ivermectin (5 mg/mL, positive control) and distilled water (negative control). Data were analyzed using an ANOVA and treatments with a concentration-dependent effect were subjected to a regression analysis to determine lethal concentrations (LC50 and LC90). In addition, a phytochemical analysis was performed on the extracts to identify the presence of the main secondary metabolites. The best ovicidal and larvicidal activity was observed in HAE-Gu with 96.78 % EHI at 6.25 mg/mL and 57.2 % larval mortality at 75 mg/mL. Followed by HAE-Ba showing 90 % EHI at 6.25 mg/mL and 58.0 % larval mortality at 75 mg/mL. The LC50 and LC90 of HAE-Gu on EHI were 2.7 and 4.4 mg/mL, respectively. While the LCs of this same extract on larvae were LC50= 64 and LC90= 125 mg/mL. The phytochemical analysis indicates that all extracts contain tannins, coumarins, flavonoids and terpenes. The fodder species G. ulmifolia and E. americana could be candidate plants for the control of H. contortus.

Resumen El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto nematicida de cuatro extractos hidroalcohólicos (EHA) de Brosimum alicastrum (EHA-Ba), Guazuma ulmifolia (EHA-Gu), Erythrina americana (EHA-Ea) y Leucaena leucocephala (EHA-Ll) contra Haemonchus contortus. Se usaron las pruebas de inhibición de la eclosión de huevos (IEH) y mortalidad larval (larvas infectantes). Los tratamientos fueron los EHA´s a concentraciones de 6.25-50 mg/ml para IEH y de 25-100 mg/ml para mortalidad larval, ivermectina (5 mg/ml, control positivo) y agua destilada (control negativo). Los datos se analizaron mediante un ANOVA y los tratamientos con efecto dependiente a la concentración se sometieron a un análisis de regresión para determinar las concentraciones letales (CL50 y CL90). Además, se realizó un análisis fitoquímico a los extractos para identificar la presencia de los principales metabolitos secundarios. La mejor actividad ovicida y larvicida fue observada en EHA-Gu con un 96.78 % de IEH a 6.25 mg/ml y 57.2 % de mortalidad larval a 75 mg/ml. Seguido de EHA-Ba mostrando 90 % IEH a 6.25 mg/ml y un 58.0 % de mortalidad larval a 75 mg/ml. Las CL50 y CL90 del EHA-Gu sobre la IEH fueron 2.7 y 4.4 mg/ml, respectivamente. Mientras que las CL´s de este mismo extracto sobre larvas fue de CL50=64 y CL90=125 mg/ml. El análisis fitoquímico indica que todos los extractos contienen taninos, cumarinas, flavonoides y terpenos. Las especies forrajeras G. ulmifolia y E. americana podrían ser plantas candidatas para el control de H. contortus.

Abstract This study aimed to evaluate the effect of supplementing the maintenance diet of Boer goat kids with Acacia cochliacantha leaves. The endpoints evaluated were Haemonchus contortus fecal egg count (FEC) and water and dry matter intake. Two experimental treatments were evaluated on ten recently weaned goat kids (16.850 ± 1.630 kg of initial live weight and three months of age) experimentally infested with H. contortus larvae (L3) (350 larvae per live weight kilogram). Treatment 1 (T1) served as the control and consisted of infested animals without diet supplementation with A. cochliacantha leaves. Treatment 2 (T2) consisted of infested animals fed diets supplemented with 5% of A. cochliacantha leaves. Animals were grouped from highest to lowest based on their FEC. The two animals groups with the highest values were randomly assigned to T1 or T2; this was repeated until completing five repetitions per treatment. The evaluated variables were: FEC (per gram of feces), water intake, and dry matter intake (DMI). The results show that goat kids fed diets with 5% of A. cochliacantha leaves have lower (P<0.05) FEC than the control. There were no significant differences in water intake and DMI (g d-1) between treatments. This study demonstrates the anthelmintic activity of diets supplemented with A. cochliacantha leaves in goat kids. Thus, this arboreal legume could represent a viable option for the comprehensive management of the nematodiasis of growing Boer goat kids.

Resumen: El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de la inclusión de hojas de Acacia cochliacantha en una dieta de mantenimiento para cabritos de la raza Boer en el conteo fecal de huevos (CFH) de Haemonchus contortus, consumo de agua y materia seca. Diez cabritos recién destetados (16.850 ± 1.630 kg de peso vivo inicial y 3 meses de edad), fueron experimentalmente infestados con larvas (L3) de H. contortus (350 larvas por kilogramo de peso vivo), para probar dos tratamientos: T1: testigo (animales infectados con larvas L3 de H. contortus, sin inclusión de hojas de A. cochliacantha) y T2: animales infectados con larvas L3 de H. contortus, con inclusión de 5% hojas de A. cochliacantha en la dieta. Antes de asignar los tratamientos a los animales, se realizó un CFH por gramos de heces en cada uno de ellos y de esta manera agruparlos de mayor a menor en relación a la cantidad de huevos presentes en las heces, en los dos animales con valores más altos se asignaron aleatoriamente T1 o T2 y así sucesivamente hasta completar cinco repeticiones verdaderas para cada tratamiento. Las variables medidas fueron: CFH (por gramo de heces), consumo de agua y consumo de materia seca (CMS). Los resultados encontrados demostraron reducción (P<0.05) en el CFH de H. contortus en los cabritos donde se incluyó el 5% de hojas de A. cochliacantha en su dieta. Para el consumo de agua y CMS (g día-1) no existieron diferencias entre tratamientos (P> 0.05). Se concluye que la adición de hojas de A. cochliacantha en dietas para cabritos tienen actividad antihelmíntica, por lo que esta leguminosa arbórea podría representar una opción en el manejo integral de la nematodiasis de cabritos Boer en crecimiento.

Abstract Nematode parasites are an ongoing challenge in livestock production. Pharmaceutical anthelmintics are effective but pose their own risks. This is an overview of nematodiasis in small ruminants in Mexico focusing on the main problems faced by producers to maintain productivity. It includes general information on gastrointestinal nematodes and their effects on animal health and productivity. It also summarizes the main challenges faced by livestock producers in combating these parasites and current control and prevention strategies, including pharmaceuticals, anthelmintic resistance, grazing management, selective deworming, protein nutritional strategy, vaccination, and selection of animals genetically resistant to nematodes. The potential use of plants and compounds with nematocidal activity, and nematophagous fungi as biological control agents are also covered. Research by the Helminthology Department of the CENID-SAI of the INIFAP is highlighted, and a comprehensive nematode control method is proposed that targets different control strategies at specific nematode developmental stages. Controlling nematodiasis in small ruminants is vital to the success of production systems since it negatively affects animal health and producer results. Continued development of new nematode control options holds promise for successful long-term management of this disease.

Resumen En esta revisión se presenta un panorama general de las nematodosis en pequeños rumiantes en México; así como los principales problemas que enfrentan los productores para mantener su actividad productiva. Del mismo modo, se muestra información general sobre las nematodosis gastrointestinales y sus efectos en la salud animal y en la productividad. Por otra parte, se analizan los principales retos o desafíos que se enfrenta el sector pecuario para contrarrestar estas importantes enfermedades, haciendo énfasis en las distintas estrategias de control y prevención incluyendo la quimioterapia, resistencia antihelmíntica, manejo del pastoreo, desparasitación selectiva, estrategia nutricional proteica, vacunación, selección de animales genéticamente resistentes a los nematodos, el uso de plantas y compuestos con actividad nematicida; así como los resultados más recientes en cuanto al uso de hongos nematófagos como agentes de control biológico, entre otras herramientas de control. En este trabajo se hace mención a importantes resultados obtenidos en la investigación generada en el Área de Helmintología del CENID-SAI del INIFAP y se plantea como perspectiva el establecimiento de un método integral de control de estas enfermedades a las distintas fases de desarrollo de los parásitos como “blancos” de ataque hacia dónde dirigir las estrategias de control, a los diferentes estadios evolutivos de estos parásitos, con lo que se esperan los mejores resultados contra este grupo de parásitos que tanto afectan a la salud de los rebaños y a la economía de los productores.

Abstract The ovicidal effect of hydro-alcoholic extracts from mature fruits and dried leaves of the Caesalpinia coriaria tree, against Haemonchus contortus and H. placei was evaluated by the egg hatching inhibition test (EHIT). Secondary compounds within the extracts were identified by high performance liquid chromatography. Five extract concentrations were assessed in the inhibition tests (25.0, 12.5, 6.2, 3.1 and 1.5 mg/mL), using distilled water and Thiabendazole (0.5 mg/mL) as negative and positive controls, respectively. The results were analysed under a 2 × 2 × 6 completely randomized factorial design, and mean differences were established by the Tukey’s post hoc test. The 50% (EC50) and 90% (EC90) effective concentrations for each extract were determined using a Probit analysis. A concentration-dependent ovicidal effect of hydro-alcoholic extracts from both leaves and fruits was observed, reaching a 100% efficacy against both nematode species with the 25.0 mg/mL concentration (p < 0.05). The EC50 for the fruit and leaves extracts were established as 1.63 and 3.91 mg/mL, and as 3.98 and 11.68 mg/mL, against H. contortus and H. placei, respectively. The most important secondary compounds identified in extracts were free-condensed tannins, gallic acid and methylgallate. In conclusion, hydro-alcoholic extracts from C. coriaria mature fruits and dried leaves inhibit in vitro egg hatching of H. contortus and H. placei.

Resumo Fungos nematófagos das fezes de búfalo de água e do solo no sudeste do México foram isolados, e a atividade predatória in vitro contra larvas infectantes de Haemonchus contortus (L3) (HcL3) foi avaliada.Os fungos foram isolados por aspersão de solo e de fezes em placas de agar água. Foram preparadas seis séries de 10 placas de Petri contendo uma cultura de 7 dias de idade de cada fungo e uma série sem fungos como controle. Quinhentos HcL3 foram adicionadas a cada placa. As placas foram incubadas à temperatura ambiente. O número médio de HcL3 recuperadas foi considerado para estimar a taxa de redução larval. Quatro isolados de fungos nematófagos corresponderam a Arthrobotrys oligospora, var microspora (estirpes 4-276, 269 e 50-80) e um isolado identificado como A. oligospora, var. oligospora (isolados 48-80 de fezes de búfalo de água. Do solo, dos cinco isolados três corresponderam a A. musiformis (Bajío, Yumca e Macuspana isolados), e dois isolados foram identificados como A. oligospora (isolados de Comalcalco e Jalapa de Méndez). A atividade predatória de isolados de fezes de búfalo de água variou entre 85,9 e 100%. Enquanto isso, os fungos do solo variaram entre 55,5 e 100% (p≤0,05). Os fungos nematófagos obtidos podem ter importantes implicações nesse controle de parasitos de importância na indústria pecuária.

Abstract Nematophagous fungi from the feces of water buffalo and soil from southeastern Mexico were isolated, and their in vitro predatory activity against Haemonchus contortus infective larvae (L3) (HcL3) was assessed. The fungi were isolated by sprinkling soil or feces on water agar plates. Six series of 10 Petri dishes containing a 7-day-old culture of each fungus and a series without fungi as the control were prepared. Five hundred HcL3 were added to each plate. The plates were incubated at room temperature. The average of recovered HcL3 was considered to estimate the larval reduction rate. Four nematophagous fungi isolates corresponding to Arthrobotrys oligospora, var microspora (strains 4-276, 269 and 50-80) and one identified as A. oligospora,var. oligospora (isolates 48-80) were obtained from water buffalo feces. From the soil, five isolates were isolated; three corresponded to A. musiformis (Bajío, Yumca and Macuspana isolates), and two isolates were identified as A. oligospora (Comalcalco and Jalapa de Méndez isolates). The predatory activity of isolates from water buffalo feces ranged between 85.9 and 100%. Meanwhile, the fungi from the soil ranged between 55.5 and 100% (p≤0.05). The nematophagous fungi obtained could have important implications in the control of parasites of importance in the livestock industry.

Resumen Antecedentes: La identificación del fenotipo relacionado con la resistencia contra nematodos gastrointestinales (GIN) es necesaria para conocer la inmunidad del huésped en ovejas en producción. Objetivo: Determinar los parámetros hematológicos e inmunológicos (IgA e IgG) en gestación y lactancia en ovejas Blackbelly infectadas naturalmente con GIN. Métodos: Se determinó el número de huevos por gramo de heces (EPG), se identificaron las larvas y se registró el porcentaje del volumen celular aglomerado (% PCV), proteína plasmática (PP) y eosinófilos periféricos durante ocho meses. Además, se colectó suero y saliva para determinar la cinética de IgG e IgA por medio de un ensayo inmuno-enzimático (ELISA) indirecto. Resultados: Los resultados mostraron 2.592 ± 2.403 EPG y 22,2 ± 4,0% PCV durante la lactancia y 595 ± 901 EPG y 25,1 ± 2,5% PCV durante la gestación. Se observó un mayor porcentaje de larvas de Trichostrongylus colubriformis en gestación (84 a 100%) que en lactancia (36 a 44%). La actividad de la IgA en las muestras de suero mostró una marcada reducción después del parto para ambos antígenos de Haemonchus contortus y T. colubriformis (80 a 10%). En saliva, la actividad de la IgA disminuyó de 56 a 30% del día 60 al 45 antes del parto y se mantuvo baja en los primeros 45 días de la lactancia (actividad de 23 a 32%). El número de eosinófilos fue de 2,0 x 109 células L-1 durante la gestación, y se redujo a 0,7 x 109 células L-1 en la lactancia. Conclusión: Las variables estudiadas reflejan la ruptura de la inmunidad contra GIN en ovejas Blackbelly antes y después del parto.

Abstract Background: It is necessary to identify phenotypic traits related to natural resistance against gastrointestinal nematodes (GIN) in order to know the host immunity status in productive ewes. Objetive: To determine haematological and immunological parameters (IgA and IgG) during pregnancy and lactation in Blackbelly ewes naturally infected with GIN Methods: The number of eggs per gram (EPG), packed cell volume (% PCV), plasmatic protein (PP), and peripheral eosinophils were determined during eight months. In addition, sera and saliva samples were collected to establish IgG and IgA kinetics by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: The results showed 2,592 ± 2,403 EPG and 22.2 ± 4.0% PCV during lactation and 595 ± 901 EPG and 25.1 ± 2.5% PCV during pregnancy. A higher percentage of Trichostrongylus colubriformis larvae were observed in pregnancy (84 to100%) than in lactation (36 to 44%). The IgA activity in serum samples showed a marked reduction (from 80 to 10%) during lambing for both Haemonchus contortus and T. colubriformis antigens. In saliva samples, IgA activity with regard to the standard decreased from 56% at 60 days to 30% at 45 days before lambing and remained low for 45 days during lactation (23 to 32% activity). The eosinophils numbers were 2.0 x 109 cells L-1 in pregnancy and remained low at 0.7 x 109 cells L-1 in lactation. Conclusion: The studied variables reflect the breakdown of immunity against GIN in Blackbelly ewes before and after lambing.

Resumo Antecedentes: A identificação de traços fenotípicos relacionados à resistência natural contra nematóides gastrintestinais (GIN) é necessária para saber a imunidade do hospedeiro em ovelhas produtivas. Objetivo: Determinar parâmetros hematológicos e imunológicos (IgA e IgG) em períodos de gestação e lactação em ovelhas Blackbelly naturalmente infectados com GIN. Métodos: O número de ovos por grama (EPG), volume empacotado de células (% PCV), proteína plasmática (PP) e eosinófilos periféricos foram determinados durante oito meses. Além disso, as amostras de soro e saliva foram recolhidas para determinar a cinética de IgG e IgA por ELISA indireto. Resultados: Os resultados mostraram 2.592 ± 2.403 EPG e 22,2 ± 4,0% PCV durante a lactação e 595 ± 901 EPG e 25,1 ± 2,5% PCV durante a gravidez. A percentagem mais elevada de larvas de Trichostrongylus colubriformis foi observada na gravidez (84 a 100%) do que na lactação (36 a 44%). A atividade de IgA em amostras de soro mostrou uma redução acentuada (80 a 10%) durante o parto nos antígenos de Haemonchus contortus e T. colubriformis. Em amostras de saliva, a atividade de IgA diminuiu de 56 a 30% do dia 60 ao 45 antes do parto e permaneceu baixa por 45 dias durante a lactação (atividade de 23 a 32%). O número de eosinófilos foi de 2,0 x 109 células L-1 na gravidez e manteve-se baixo, com 0,7 x 109 células L-1 na lactação. Conclusaõ: As variáveis estudadas refletem a quebra da imunidade contra GIN em ovelhas Blackbelly antes e depois do parto.

Abstract Bioactive plants might represent an alternative for Cooperia punctata control in grazing cattle. The objectives of this study were (1) to assess the ovicidal activity of extracts from 4 plant species against C. punctata, (2) to determine the role of the polyphenols in the plants’ anthelmintic (AH) activity, and (3) to evaluate the best plant extraction procedure when searching for ovicidal activity. The egg hatch assay was used with different extraction procedures, aqueous (AQ), acetone:water (AW) and acetonic (AC), to evaluate the ovicidal activity of Leucaena leucocephala, Gliricidia sepium, Guazuma ulmifolia and Cratylia argentea. Eggs of C. punctata were exposed in quadruplicate to 0.6, 1.2, 2.4, 4.8 and 9.6 mg mL-1 of each plant extract. The roles of the polyphenols were assessed using polyethylene glycol (PEG). The 12 plant extracts inhibited egg hatching in a dose-dependent manner. Best-fit LC50 values were 1.03 ± 0.17 and 7.90 ± 1.19 mg mL-1 for G. sepium-AC and L. leucocephala-AQ, respectively. Differences in AH activity were found among the extraction procedures (P < 0.05). At the highest concentration, L. leucocephala-AQ inhibited more than 50% of C. punctata hatching. The G. sepium-AC extract fully inhibited egg hatching. The addition of polyethylene glycol revealed the role of the polyphenols in the bioactivity of most plant extracts; however, for G. sepium-AC, the polyphenols were not the main bioactive compounds. Overall, acetone:water extraction represented the best extraction procedure to obtain both ovicidal activity and higher yield. The inhibition rates suggested that L. leucocephala and G. sepium should be evaluated as a means of reducing larval density in pastures.

Resumen El uso de plantas bioactivas representa una alternativa para el control de Cooperia punctata en el ganado de pastoreo. Los objetivos de este estudio fueron: (1) evaluar la actividad ovicida de extractos de cuatro especies de plantas contra C. punctata, (2) determinar la participación de los compuestos polifenólicos (CP) en la actividad antihelmíntica (AH) y (3) evaluar el mejor método de extracción para alcanzar una actividad ovicida. El bioensayo de inhibición de la eclosión de huevos (IEH) fue utilizado para evaluar el efecto ovicida de Leucaena leucocephala, Gliricidia sepium, Guazuma ulmifolia y Cratylia argentea; con diferentes métodos de extracción: acuoso (AQ), acetona:agua (AW) y acetónico (AC). Los huevos de C. punctata fueron incubados por cuadruplicado a 0.6, 1.2, 2.4, 4.8 y 9.6 mg mL-1 de cada uno de los extractos de plantas. La participación de los CP fue determinada mediante el uso de polietilenglicol (PEG). Los 12 extractos de plantas inhibieron la eclosión de huevos de modo dosis-dependiente, y las mejores concentraciones letales medias (CL50) fueron: 1.03 ± 0.17 para G. sepium-AC, y 7.90 ± 1.19 mg mL-1 para L. leucocephala-AQ. Se observaron diferencias en la actividad AH según el método de extracción (P < 0.05). A mayor concentración, L. leucocephala-AQ inhibió más del 50 % de la eclosión de C. punctata, entretanto, el extracto G. sepium-AC inhibió la eclosión en su totalidad. La adición de PEG demostró la participación de los CP en la actividad AH de la mayoría de los extractos; no obstante, con G. sepium-AC, los CP no fueron los principales compuestos bioactivos. En general, el mejor método de extracción fue acetona:agua, pues permitió obtener una buena actividad ovicida, con un mayor rendimiento del extracto. Las tasas de inhibición sugieren que L. leucocephala y G. sepium podrían ser evaluadas con la finalidad de reducir la densidad larvaria en pastos.

Abstract: Antihelmintic activity against Haemonchus contortus was searched as a new alternative for animal health improvement using three plants (Cydista aequinoctialis L., Heliotropium indicum L. and Momordica charantia L.) of traditional usage in the rural area of Tabasco State, Mexico. Aqueous extracts were obtained of dried material. Each extract was diluted in distilled water to obtain a concentration of 20 mg ml-1. The antihelmintic activity was evaluated at 24, 48 y 72 h of exposition with 100 μL of each extract and 50 L3 unsheathed larvaes of H. contortus in a 96 well ELISA plaque. Distilled water was used as negative control and fenbendazole as positive control. All extracts of the three studied plants presented antihelmintic activity and the highest mortality, 65.5% at 72 h, was recorded with the M. charantia fruit extract.

Resumen: En la búsqueda de nuevas alternativas para el mejoramiento de la salud animal se evaluó la actividad antihelmíntica de tres plantas de uso tradicional (Cydista aequinoctialis L., Heliotropium indicum L. y Momordica charantia L.) en el área rural del estado de Tabasco contra Haemonchus contortus. Los extractos acuosos crudos se obtuvieron del material deshidratado. Cada uno de ellos fue disuelto en agua destilada a una concentración de 20 mg ml-1 y la actividad antihelmíntica se evaluó en placas de ELISA de 96 pozos se colocaron alícuotas de 100 μL de extracto y 50 larvas L3 desvainadas de H. contortus. Como control negativo se utilizó agua destilada y como control positivo Febendazol, evaluando a las 24, 48 y 72 h de exposición. Los extractos de las tres plantas estudiadas presentaron diferente actividad antihelmíntica y la mayor mortalidad se presentó con el fruto de M. charantia con 65.5% a las 72 h.

The aim of this study was to evaluate the predatory behavior in vitro of the mite Lasioseius penicilliger on 3 nematode species: Teladorsagia circumcincta (L3) (a sheep-parasitic nematode), Meloidogyne sp. (J2) (a plant-parasitic nematode), and on various developmental stages of Caenorhabditis elegans (a free-living nematode). The coincubation of mites and nematodes was individually assessed in 2% water agar placed in plastic Petri dishes (2 cm x 1 cm diameter). One thousand nematodes of a species and 5 mites were placed into each plate (10 replicates) and incubated for 5 days at room temperature (18-25ºC). L. penicilliger showed predatory behavior against the 3 assessed nematode species. The percentages of predatory activity recorded were 95.1, 80.5 and 79.3 against Meloidogyne sp., C. elegans, and T. circumcincta, respectively (P ≤ 0.05). These results suggest that L. penicilliger has important potential as a biological control agent of parasitic nematodes.

El objetivo de este estudio fue evaluar el comportamiento depredador in vitro del ácaro Lasioseius penicilliger sobre tres especies de nemátodos: Teladorsagia circumcincta (L3, nemátodo parásito de ovejas), Meloidogyne sp. (J2, nemátodo parásito de plantas), y sobre varios estadios de desarrollo de Caenorhabditis elegans (nemátodo de vida libre). La coincubación de los ácaros y los nemátodos se evaluó en 2% agar-agua colocados en cajas de Petri de plástico (2 cm x 1 cm diámetro). Se colocaron 1 000 nemátodos de cada especie y cinco ácaros en cada caja (10 réplicas) y se incubaron por cinco días a temperatura ambiente (18-25ºC). L. penicilliger mostró comportamiento depredador contra las tres especies de nemátodos evaluadas. Los porcentajes de actividad depredadora registrados fueron 95.1, 80.5 y 79.3, contra Meloidogyne sp., C. elegans y T. circumcincta, respectivamente (P ≤ 0.05). Estos resultados sugieren que L. penicilliger tiene un importante potencial como agente de control biológico contra nemátodos parásitos.

This study aimed to evaluate the variability in the fecal egg count (FEC) and the parasitic burden of naive hair sheep after grazing in nematode infected paddocks. The research was carried out in Tabasco, Mexico, during two periods (August and December). In each period 32 lambs were grazed for one month on African star grass (Cynodon plectostachyus) contaminated with gastrointestinal parasitic nematodes. FEC, packed cell volume (PCV) and body weight (BW) were recorded. Gastrointestinal worms were recovered at necropsy. Data were analyzed with the MIXED procedure of SAS using a model of repeated measurements over time. A higher number of Haemonchus contortus worms was found in December (2814±838) than in August (1166±305). The opposite occurred with Cooperia curticei (2167±393 and 3638±441, respectively). The FEC and correlation coefficient in respect to the worm burden were higher in December (6516 ± 1599, r=0.83, respectively) than in August (4364±771, r=0.44, respectively). A high variability in resistance-susceptibility to gastrointestinal nematodes (GIN) occurred in Katahdin × Pelibuey lambs after grazing.

Bacillus thuringiensis is an entomopathogenic bacterium that produces crystal-proteins with cytotoxic activity against insects and nematodes. B. thuringiensis toxicity on agriculture pests is widely recognized; however, there is little information about the lethal action of B. thuringiensis against nematodes. Recently, the nematicide activity of B. thuringiensis proteins was showed against Haemonchus, Teladorsagia, Nippostrongylus, and Ancylostoma genera of mammals, and against the plant parasitic nematodes, Globodera and Meloidogyne. From a list of B. thuringiensis strains with nematicide effect, selected proteins from the IB-16 isolate showed 50 to 100 % nematocidal efficacy against different developing stages of H. contortus. Additionally the in vitro assay showed evidence about the lethal activity of this strain against the free-living nematodes Panagrellus redivivus and Caenorhabditis elegans. The Cry5B protein of B. thuringiesis caused tissue damage on the C. elegans mid-gut and its action probably involves specific gut-receptor, similar to reporte with nematodes of importance in agriculture. Also, Cry5B protein-receptors link appears to involve carbohydrate moieties on intestinal cells, and cause tissue damage and nematodes death. Through these studies, selected B. thuringiensis proteins could be considered in future trials as potential alternative tools of control against parasitic nematodes of domestic animals, such as ruminants and other pathogens of mammals and even from agriculture crops.

La bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis produce cristales proteicos con actividad citotóxica en contra de insectos y nematodos. La toxicidad de B. thuringiensis en plagas agrícolas es ampliamente conocida, pero poco se conoce acerca de su actividad en contra de nematodos parásitos. Recientemente, la actividad nematicida de las proteínas derivadas de B. thuringiensis se demostró en parásitos de mamíferos como Haemonchus, Teladorsagia, Nippostrongylus, y Ancylostoma, y en nematodos de plantas, Globodera y Meloidogyne. Entre el grupo de B. thuringiensis con efecto nematicida, las proteínas de la cepa IB-16 han mostrado actividad letal de 50 a 100 % en contra de diferentes estadios del principal género de rumiantes, Haemonchus contortus. Asimismo, los géneros de nematodos de vida libre, Panagrellus redivivus y Caenorhabditis elegans han sido blanco de estudios de la acción nematicida de B. thuringiensis. Por ejemplo, el efecto tóxico de la proteína Cry5B de B. thuringiensis se observó en las células intestinales de C. elegans, además esta acción parece involucrar receptores celulares específicos, similares a los que se han notificado en contra de plagas agrícolas. Asimismo, la unión de la proteína Cry5B ocurre en receptores específicos, como moléculas de carbohidratos, las cuales están presentes en la membrana de las células de intestino de los nematodos, ocasionando daño y muerte. A través de este tipo de estudios, los derivados de B. thuringiensis podrían considerarse una alternativa de control en nematodos que afectan a los animales domésticos, como rumiantes, así como en contra de otros nematodos patógenos de mamíferos e incluso de plantas agrícolas.

The objective of this study was to determine the prevalence of gastrointestinal parasitic nematodes in sheep at necropsy at a slaughterhouse in Tabasco, Mexico. Adult parasites from gastrointestinal tract were recovered and preserved in formaldehyde for their later counting and identification. Adult nematodes were separated by species and the final count was transformed to Log + 1 to decrease the variance. GLM procedure using SAS statistic program was performed for data analysis. Provenance, sex, physiological status, and sampling month were considered as the variation sources. From a total sample of 242 slaughtered animals necropsied for monitoring gastrointestinal parasites, 57.4% including Nematoda, Trematoda or Cestoda classes. The main identified species corresponded to Haemonchus contortus in the abomasum. Cooperia curticei, Trichostongylus colubriformis, Strongyloides papillosus and Bunostomum trigonocephalum were found in the small intestine and Oesophagostomum columbianum, and Trichuris ovis in the large intestine. Fasciola hepatica and Moniezia expansa were the Trematoda and Cestoda parasites found in liver and small intestine, respectively with prevalence lower than 7%. The average of the total count of adult nematodes in the gastrointestinal tract of the infested animals was 2175 ± 445. Among the factors studied, the slaughter month and the provenance of the animals affected the prevalence of parasite infestation in sheep at slaughter. The main adult parasites found were H. contortus, C. curticei and T. colubriformis with average counts higher than 1009, 813 and 335, respectively.

El objetivo de esta investigación fue conocer la prevalencia de parásitos en ovinos sacrificados en un rastro en el estado de Tabasco. Se realizó la recuperación y conservación en formol de parásitos adultos presentes en el tracto gastrointestinal, para su posterior conteo e identificación. Los conteos de nematodos adultos por especie se transformaron a Log + 1 para disminuir la varianza, y se realizó el análisis con el procedimiento GLM del SAS en el cual se incluyeron como fuentes de variación: origen, sexo, estado fisiológico y mes de muestreo. De una muestra total de 242 animales sacrificados, se observó que 57.4% se encontraban parasitados con alguna especie de las clases Nematoda, Trematoda o Cestoda. Las principales especies identificadas correspondieron a Haemonchus contortus en abomaso. Cooperia curticei, Trichostongylus colubriformis, Strongyloides papillosus y Bunostomum trigonocephallum en intestino delgado. Oesophagostomum columbianum, y Trichuris ovis en intestino grueso. De los trematodos se encontró Fasciola hepatica en hígado y de los cestodos Moniezia expansa se localizó en intestino delgado con prevalencia menor a 7%. El conteo total de los nematodos adultos en el tracto gastrointestinal de los animales parasitados fue, en promedio, 2175 ± 445. De los factores estudiados, el mes de sacrificio y el origen de los animales afectaron la prevalencia de parasitosis en los ovinos al sacrificio. Los tres principales parásitos fueron: H. contortus, C. curticei y T. colubriformis, con conteos promedio de adultos, superiores a 1009, 813 y 335, respectivamente.

This research was aimed at investigating the predatory behavior of three nematophagous fungi against the histotrophic larvae of H. contortus (L4). Infective larvae (L3) of H. contortus were used for comparison. Three nematophagous fungi were isolated from soil and identified as Arthrobotrys oligospora, A. musiformis and Monacrosporium thaumasium. Two series of agar plateswere used to grow the three NF. Two hundred histotrophic or infective larvae of H. contortus were added to series 1 plates and series 2 plates, respectively, and kept at room temperature. The reduction in larval population was estimated by comparing the mean number of larvae recovered from both series. Capture rates of infective larvae were as follows: A. oligospora 90.3%, A. musiformis 97%, and M. thaumasium 62.3% (P>0.0001). In comparison, the predatory capture rates of t the histotrophic larval populations were as follows: A. oligospora 63.3%; A. musiformis 73.2% and M. thaumasium 69.2% (P>0.0003). The lowest capture rate of histotrophic larvae was observed with A. oligospora and A. musiformis.

Este trabajo investigó el comportamiento depredador de tres hongos nematófagos (HN) contra larvas histiotróficas (L4) de Haemonchus contortus, usando a larvas infectantes (L3) como patrón de comparación. Los hongos fueron aislados de suelo e identificados como Arthrobotrys oligospora, A. musiformis y Monacrosporium thaumasium. Se utilizaron dos series de placas de agar conteniendo los tres HN. En cada placa de las series 1 y 2, se depositaron 200 larvas histotrópicas, e infectantes; respectivamente y se mantuvieron a temperatura ambiente. La reducción larval se estimó comparando las medias de larvas recuperadas en ambas series. Los tres hongos capturaron y se alimentaron de ambos tipos de larvas de la siguiente manera: Las larvas infectantes se redujeron por acción de A. oligospora en 90.3%, A. musiformis 97% y M. thaumasium 62.3% (P>0.0001). Para el caso de larvas histiotrópicas, los hongos redujeron la población de la siguiente manera: A. oligospora 63.3%; A. musiformis 73.2% y M. thaumasium 69.2% (P>0.0003). La más baja actividad de captura se observó con A. oligospora y A. musiformis sobre larvas histiotrópicas.

The study included two experiments. The objective of experiment one was to learn about the in vitro effect of different sodium hypochlorite concentrations and a commercially-available citric extract on the survival of infestant larvae of gastrointestinal nematodes by observation at different time points. With >0.05% sodium hypochlorite concentrations, larvae lost their sheaths in two minutes, while at 1.3% concentration larvae died within one hour. Larval mortality also occurred as late as 12 h after exposure to the concentrations tested of citric extract. The second study was performed to evaluate the effect of applying both compounds directly on the grasslands on the re-infestation of grazing sheep. Eleven (11) lambs per treatment group were used, i.e.: treatment TI, untreated control; TII, application of one (1) liter 0.5% sodium hypochlorite/20 m²; TIII, application of 5% citric extract on the grass also at the rate of 1 L/20m². Data on live weight, packed cell volume (pcv), and nematode egg counts per gram (epg) of feces was analyzed using the GLM (SAS) procedure. The highest effect on epg and pcv was obtained in the group of lambs grazing the paddock treated with sodium hypochlorite, with the lowest epg and the highest pcv values as compared to both the controls and the group treated with citric extract (1,088 vs 1,997 and 2,891 epg; 25.6 vs 23.1 and 23.5 %, respectively; P<0.05).

El estudio se realizó en dos experimentos. En el primero el objetivo fue conocer el efecto in vitro de diferentes concentraciones de hipoclorito de sodio y de un extracto de cítricos comercial sobre la sobrevivencia de larvas infestantes de nematodos gastrointestinales, mediante observación a diferentes tiempos. A concentraciones mayores al 0.05 % de hipoclorito de sodio, las larvas se desenvainaron en dos minutos y con concentraciones de 1.3 % las larvas murieron en una hora. Con el extracto de cítricos se observó mortalidad larvaria hasta las 12 h en todas las concentraciones utilizadas. En el segundo estudio el objetivo fue evaluar el efecto de la aplicación de los dos compuestos en los potreros sobre la reinfestación de ovinos en pastoreo. Se utilizaron 11 corderos en cada tratamiento; El grupo I) sin aplicación (testigo); II) aplicación de un litro de hipoclorito de sodio al 0.5 % por cada 20 m²; III) aplicación de extracto de cítricos al 5% en el pasto en la misma proporción que el anterior tratamiento. La información del peso vivo, volumen celular aglomerado (vca) y conteo de huevos de nematodos por gramo de heces (hpg) se analizó con el procedimiento GLM del SAS. El mayor efecto sobre el hpg y vca se obtuvo en el grupo de corderos en el potrero tratado con hipoclorito de sodio con menor hpg y mayor vca respecto al testigo y al extracto de cítricos (1,088 vs 1,997 y 2,891 hpg; 25.6 vs 23.1 y 23.5 %, respectivamente; P<0.05).