Experimental murine L. major infection is characterized by the expansion of distinct CD4+ T cell subsets. The Th1 response is related to production of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> and resolution of infection, whereas Th-2 response with production of IL-4 and IL-10 and dissemination of infection. The objective of this study was to measure the circulating levels of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font>, IL-10 and TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> in patients with visceral leishmaniasis (VL) before, during and at the end of therapy and to examine the association between cytokine levels and activity of VL. Fifteen patients with VL were evaluated. The cytokine determinations were done by using the enzyme-linked immunoassay (ELISA) before, during and at the end of therapy. At baseline, we detected circulating levels of IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> in 13 of 15 patients (median = 60 pg/ml); IL-10 in 14 of 15 patients (median = 141.4 pg/ml); and TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> in 13 of 14 patients (median = 38.9 pg/ml). As patients improved, following antimonial therapy, circulating levels of IL-10 showed an exponential decay (y = 82.34 e–0,10367x, r = –0.659; p < 0.001). IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> was no longer detected after 7/14 days of therapy. On the other hand, circulating levels of TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> had a less pronounced decay with time on therapy, remaining detectable in most patients during the first seven days of therapy (y = 36.99-0.933x, r = –0.31; p = 0.05). Part of the expression of a successful response to therapy may, therefore, include reduction in secretion of inflammatory as well as suppressive cytokines. Since IL-10 and IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> are both detected prior to therapy, the recognized cellular immune depression seen in these patients may be due to biological predominance of IL-10 (type 2 cytokine), rather than lack of IFN-<FONT FACE="Symbol">g </font>(type 1 cytokine) production.

Infecção murina experimental por L. major caracteriza-se pela expansão de subpopulações distintas de células T CD4+. A resposta Th-1 relaciona-se com a produção de IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> e resolução da infecção, enquanto a resposta Th-2 com a produção de IL-4 e IL-10 e disseminação da infecção. O objetivo deste estudo foi de medir os níveis circulantes de IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font>, IL-10 e TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> em pacientes com leishmaniose visceral antes, durante e ao final do tratamento, e verificar a associação da presença destas citocinas com expressão da doença. Quinze pacientes com LV e quinze controles foram avaliados. As citocinas foram medidas por ensaio imunoenzimático (ELISA). Níveis circulantes de IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> foram detectados em 13 dos 15 pacientes (mediana = 60 pg/ml; de IL-10 em 14 dos 15 pacientes (mediana = 141,4 pg/ml); e de TNF em 13 de 14 pacientes (mediana = 38,9 pg/ml) antes do início da terapêutica. Com a instituição da terapêutica e melhora clínica dos pacientes, os níveis circulantes de IL-10 declinaram exponencialmente (y = 82,34 e –0,10367x, r = –0,659; p < 0,001) e, IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> não foi mais detectado após 7/14 dias de terapêutica. Por outro lado, os níveis de TNF-<FONT FACE="Symbol">a</font> apresentaram queda menos acentuada, permanecendo detectável na maioria dos pacientes durante os primeiros dias de terapêutica (y = 36,99-0,933x, r = -0,31; p = 0,05). Parte da expressão de uma resposta terapêutica favorável pode, portanto, incluir redução da produção de citocinas tanto inflamatórias como supressoras. Como IL-10 e IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> foram ambos detectados antes da terapia, a depressão imune celular presente em pacientes com LV pode ser devida à predominância de atividade biológica da IL-10 (citocina do tipo 2) e não à ausência de produção de IFN-<FONT FACE="Symbol">g</font> (citocina do tipo 1).

Evaluation of TNF-alpha in patients with Kala-azar has drawn increasing interest due to its regulatory role on the immune system, in addition to its cachetizing activity. The objective of this study was to examine the association between plasma levels of TNF-alpha, measured by immunore-activity (ELISA) and bioactivity (cytotoxicity assay with L-929 cells), and clinical manifestations of visceral leishmaniasis. Plasma samples from 19 patients with Kala-azar were obtained before, during and at the end of antimonial therapy. TNF-alpha determinations was done by using the cytotoxicity assay (all patients) and the enzyme-linked immunoassay (ELISA - 14 patients). A discrepancy between results obtained by ELISA and cytotoxicity assay was observed. Levels of circulating TNF-alpha, assessed by ELISA, were higher in patients than in healthy controls, and declined significantly with improvement in clinical and laboratory parameters. Plasma levels before treatment were 124.7 ± 93.3 pg/ml (mean ± SD) and were higher than at the end of therapy 13.9 ± 25.1 pg/ml (mean ± SD) (p = 0.001). In contrast, plasma levels of TNF-alpha evaluated by cytotoxicity assay did not follow a predicted course during follow-up. Lysis, in this case, might be not totally attributed to TNF-alpha. The discrepancy might be attributed to the presence of factor(s) known to influence the release and activity of TNF-alpha.

Avaliação de TNF-alfa em pacientes com calazar tem despertado grande interesse devido ao seu papel no sistema imunológico e à sua atividade caquetizante. O objetivo deste estudo foi examinar a associação entre os níveis plasmáticos de TNF-alfa, medidos através de sua imunorreatividade (ELISA) e bioatividade (ensaio citotóxico sobre as células L-929), e as manifestações clínicas da leishmaniose visceral. Amostras de 19 pacientes foram obtidas para determinação do TNF-alfa antes, durante e após a terapia antimonial, utilizando o ensaio de citotoxicidade (todos os pacientes) e o ELISA (14 pacientes). Resultados discrepantes entre os ensaios de citotoxicidade e o ELISA foram observados. Níveis circulantes de TNF-alfa, medidos pelo ELISA, foram mais altos nos pacientes que nos controles e declinaram significantemente com a melhora clínica e laboratorial. Níveis plasmáticos antes do tratamento (média = 124,7 pg/ml; DP = 93,3) foram mais elevados que ao final da terapêutica (13,9 pg/ml; DP = 25,1; p = 0,001). Por outro lado, níveis plasmáticos de TNF-alfa, avaliados pela citotoxicidade, não seguiram um curso previsível durante a evolução. Esta discrepância pode ser devida à presença de fatores no plasma que podem influenciar a liberação e atividade do TNF-alfa. Ainda, a lise observada pode não ser totalmente atribuída ao TNF-alfa.