This study aimed to evaluate β-galactosidase immobilization. For this purpose, the ionic strength of the buffer, reaction time, amount of the immobilization support, and pH were evaluated by a central composite design. Assay 8, which consisted of 1.5 mol L-1 phosphate buffer (pH 7.5) and a reaction time of 2 h, produced the maximum yield. Eupergit® C (400 mg) was subsequently used as an immobilization support. Immobilization kinetics wereinvestigated, and a significant increase in the yield was obtained after immobilization compared with that obtained from assay 8 (22.0 U mL-1 vs. 15.6 U mL-1). The enzyme efficiency of actuation was evaluated using o-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside and lactose, with lactose providing better results. The reuse of β-galactosidase was evaluated, and more than 50% of the initial enzyme activity was maintained after five cycles of use. Enzyme characterization revealed that immobilization improved some aspects of the thermostability of β-galactosidase.

Lipozyme TL IM foi usada para catalisar a esterificação de álcool isoamílico e ácido butírico. Um planejamento fatorial fracionário foi utilizado para avaliar os efeitos da temperatura (30, 40, 50 ºC), razão molar álcool:ácido (1:1, 2:1, 3:1), concentração de enzima (0,003, 0,0115, 0,020 g mL-1), concentração de ácido butírico (0,1, 0,3, 0,5 mol L-1) e agitação (50, 115, 180 rpm) na produção de éster. Com esses resultados, os níveis foram redefinidos para um planejamento fatorial 2³. A máxima produção de éster foi obtida a 30 ºC, 180 rpm, razão molar álcool:ácido de 1:1, concentração de enzima 0,021 g mL-1 e concentração de ácido butírico de 0,5 mol L-1. Sob essas condições ótimas foi obtido 92% de esterificação e concentração de éster de 0,9 mol L-1. Álcool isoamílico obtido a partir de óleo fúsel foi utilizado nas mesmas condições resultando em 93% de esterificação e concentração de éster de 1,0 mol L-1.

Lipozyme TL IM was used to catalyse the esterification of isoamyl alcohol and butyric acid. A fractional factorial design was employed to evaluate the effects of temperature (30, 40, 50 °C), alcohol:acid molar ratio (1:1, 2:1, 3:1), enzyme concentration (0.003, 0.0115, 0.020 g mL-1), butyric acid concentration (0.1, 0.3, 0.5 mol L-1) and shaking rate (50, 115, 180 rpm) on the ester yield. With these results, the levels were redefined to a 2³ factorial design. The maximum yield of ester was obtained at 30 ºC, 180 rpm, alcohol:acid molar ratio of 1:1, enzyme concentration of 0.021 g mL-1 and butyric acid concentration of 0.5 mol L-1. Under the optimal conditions, 92% esterification was attained with an ester concentration of 0.9 mol L-1. Isoamyl alcohol from fusel oil was used under the same conditions and resulted in 93% esterification and an ester concentration of 1.0 mol L-1.

Extrato aquoso de C-ficocianina de Spirulina platensis, com e sem resíduos celulares, foi purificado em sistema aquoso bifásico (SAB) polietilenoglicol (PEG)/fosfato de potássio variando-se a massa molar do PEG, a pH 6, mais promissor do que a pH 7. Para os ensaios realizados com cada massa molar, com diferentes percentuais de PEG e sal, as concentrações (mg mL-1), as purezas (OD 620/OD 280) e os coeficientes de partição da C-ficocianina de cada sistema foram determinados e comparados. O processo para a purificação primária de C-ficocianina intracelular com resíduos celulares (integrado), composto por 15% de PEG 1500 e 13% de fosfato de potássio de 5% de PEG 4000 e 18% de sal, alcançaram concentrações de C-ficocianina de, respectivamente, 1,60 e 2,67 mg mL-1 na fase de topo. As purezas foram de 0,73 e 0,79, respectivamente, valores superiores aos obtidos nos sistemas sem resíduos celulares.

Crude C-phycocyanin extracts from Spirulina platensis, with and without cell debris, were purified in aqueous two-phase systems ( ATPS) varying the molar mass of the PEG, at pH 6, more promising than at pH 7 . For the assays carried out with each molar mass, with distinct percentages of PEG and salt, the concentrations (mg mL-1), purities (OD 620/OD 280) and C-phycocyanin partition coefficients of each system were determined and compared. The process for the primary purification of intracellular C-phycocyanin with cell debris (integrated), composed of 15% of PEG 1500 and 13% of potassium phosphate and 5% of PEG 4000 and 18% of salt, produced C-phycocyanin concentrations of, respectively, 1.60 and 2.67 mg mL-1 in the top phase. The purities were of 0.73 and 0.79 respectively, values higher than those obtained in the systems without cells.

C-ficocianina é um pigmento natural azul que pode ser utilizado como aditivo alimentar e na indústria farmacêutica. Esse trabalho visou obter C-ficocianina com aumento na pureza e sem perdas na recuperação, empregando a técnica da precipitação. O extrato bruto de C-ficocianina foi utilizado nos ensaios. A otimização da purificação foi feita através de um planejamento experimental, no qual avaliou-se a concentração de sulfato de amônio, o volume e o pH de tampão de re-suspensão. Subseqüentemente, um estudo da purificação utilizando o fracionamento com sulfato de amônio foi realizado nas melhores condições encontradas no planejamento experimental. As condições mais favoráveis para a purificação foram obtidas quando foi utilizado fracionamento com sulfato de amônio na faixa 0-20%/20-50%, relação volume de re-suspensão/volume inicial de 0,52 e tampão pH 7,0. Nessas condições, em um único passo de purificação, a pureza aumentou 70% comparado ao extrato inicial e a recuperação foi de 83,8%.

C-phycocyanin is a natural blue dye that has been used as an additive in food and can be used to produce medications. The major goal of the present study was to obtain C-phycocyanin under the best operational conditions for high C-phycocyanin recovery and purity using the precipitation technique. Crude C-phycocyanin from Spirulina platensis was used. Optimization of the purification was carried out using experimental design. The effect of ammonium sulfate concentration, volume and of pH for resuspension were evaluated. Subsequently an ammonium sulfate fractionation study was carried out using the most suitable conditions found in the experimental design. The best purification condition was ammonium sulfate fractionation at 0-20%/20-50%, in relation to a resuspension volume/initial volume of 0.52 in a 7.0 pH buffer. Under these conditions, in an one-step purification only, the purity increased 70% compared to the initial extract, with an 83.8% recovery.