O isolamento e a manutenção de fungos basidiomicetos simbiontes de formigas da tribo Attini tem sido dificultado pela baixa velocidade de crescimento desses fungos, bem como pela presença de muitos microrganismos que vivem na superfície do material que as formigas mantêm no interior nos ninhos como substrato para o crescimento dos seus fungos simbiontes. No presente trabalho nós descrevemos um método que aumenta em mais de sete vezes a eficiência de isolamento desses fungos, quando comparada àquela obtida por procedimentos tradicionais. Ninhos subterrâneos de formigas atíneas dos gêneros Atta, Acromyrmex, Trachymyrmex e Mycetarotes foram localizados e deles foram coletadas amostras contendo fungos simbiontes e formigas, que foram transportadas para o laboratório, onde as formigas foram capazes de limpar a cultura do fungo e estimular o seu crescimento. Em seguida, porções dos micélios foram assepticamente coletadas e transferidas para meio Yeast Nitrogen Base contendo glicose e cloranfenicol. Para facilitar a manutenção dos isolados em culturas de laboratório, diferentes nutrientes foram analisados para a elaboração de um meio de cultivo complexo, que possibilitou aumentar a velocidade de crescimento dos fungos e estocá-los por longos períodos. O método foi aplicado com sucesso para os fungos simbiontes de todos os gêneros de formigas estudados, gerando, assim, um procedimento extremamente útil para a formação e manutenção de uma coleção representativa de diferentes fungos simbiontes de formigas da tribo Attini.

The isolation and maintenance of symbiotic basidiomycete fungi living in association with ants of the tribe Attini has been hindered by the slow growth rate of these fungi and the presence of other microorganisms on the surface of the material which the ants maintain inside their nests to provide a growth substrate for their symbiont. In this paper we describe a method which increases the efficiency of isolation of these fungal symbionts by over seven fold as compared to traditional isolation procedures. Underground nests of attine ants of the genera Atta, Acromyrmex, Trachymyrmex and Mycetarotes were located, from which samples containing the fungal symbiont and ants were collected and transported to the laboratory where the ants were able to clean the fungal culture and stimulate its growth. As the symbiotic fungus grew, portions of its mycelium were collected and transferred to solid Yeast Nitrogen Base culture medium containing glucose and chloramphenicol. To facilitate the maintenance of the isolates in laboratory cultures, several nutrients were tested to formulate a complex culture medium for fast fungal growth and long-term storage. We successfully applied this methodology to the fungal symbionts of all the ant genera studied, thus producing a useful tool for the creation and maintenance of a comprehensive collection of fungi symbiotic of ants in the tribe Attini.

Foi observada, pela primeira vez no Brasil, a produção de centenas de formas aladas em formigueiros de Atta sexdens rubropilosa Forel, mantidos em laboratório. Larvas de último instar de machos foram encontradas em 5 de agosto de 2000 em um formigueiro com quase seis anos de fundação, contendo aproximadamente 110 L de esponja de fungo distribuída em 21 panelas. Entre 30 e 40 dias mais tarde apareceram larvas de fêmeas aladas. Os adultos sexuados apresentaram tamanhos compatíveis com os encontrados em formigueiros de campo. Foram observadas duas aparentes tentativas frustradas de revoada na última semana de outubro, após o que começaram a aparecer machos e fêmeas mortos no lixo do formigueiro.

The production of hundreds of reproductive forms of Atta sexdens rubropilosa Forel in nests maintained in laboratory was observed for the first time in Brazil. Last instar male larvae were found on August 5, 2000 in a six-year-old colony with approximately 110 L of fungus garden distributed in 21 pots. Thirty to forty days later, queen larvae started to be seen. The adult sexual forms were comparable in size with those found in the field. Two apparent failed attempts of a nuptial flight were observed during the last week of October, followed by the appearance of dead males and females in the garbage piles of the colony.

Avaliou-se dietas artificiais, para operárias médias de Atta sexdens rubropilosa Forel isoladas de formigueiros de laboratório e de campo. Os bioensaios foram realizados com 6 formigas/placa de Petri, sendo 10 placas/tratamento, em câmara ambiental a 24 ± 1 °C e UR > 70%. Não houve diferença na sobrevivência entre as operárias de laboratório e de campo, quando tratadas com dieta artificial líquida. Ao se comparar as dietas artificiais líquida e sólida, pode-se constatar que não houve diferença na sobreviência das operárias de laboratório tratadas com as diferentes dietas. A dieta artificial sólida com troca a cada 48 h, até 25 dias, representa uma alternativa para se trabalhar com operárias médias de A. sexdens rubropilosa, isoladas do formigueiro, em bioensaios de laboratório.

Artificial diets, were studied for medium sized workers of Atta sexdens rubropilosa Forel isolated from laboratory and natural ant-nests. The bioassays were undertaken with 6 ants/Petri dish, 10 dishes/test, in an environmental chamber at 24 ± 1 °C and 70% RH. The number of dead ants/dish was observed daily. Results showed that there was no difference among the laboratory and field workers when treated with the liquid artificial diet. The same was demonstrated when we compared the liquid diet to the solid one. Results demonstrated that the artificial solid diet, changed every 48 hours up to 25 days, was a suitable alternative to work medium sized workers of A. sexdens rubropilosa, isolated from the ant-nest in laboratory bioassays.