RESUMO: O estudo teve como objetivo verificar a infecção por Leishmania em uma população de cães (n=92 animais) de uma área de turismo de pesca no município de Bonito e avaliar comparativamente os métodos sorológicos utilizados, ensaio imunoenzimático (ELISA), reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e teste rápido de plataforma dupla (DPP®). Testes parasitológicos também foram realizados, como o isolamento do parasita em meio de cultura Neal, Novy, Nicolle, técnica de Woo, esfregaços em lâminas coradas com Giemsa e identificação específica pela reação em cadeia da polimerase (PCR). A RIFI revelou sorologia positiva de 56/92, ELISA 8/92 e DPP®41/92. Quanto à concordância entre os testes sorológicos pelo índice Kappa, houve um ligeiro acordo entre ELISA/RIFI e ELISA/DPP®, e uma concordância razoável entre RIFI/DPP®. A cultura NNN foi positiva em três cães, e identificada por PCR como Leishmania infantum chagasi. Nenhuma amostra foi positiva pela técnica de Woo. Nossos resultados mostraram baixas concordâncias entre os testes sorológicos recomendados pelo Ministério da Saúde, sendo necessário associar a outras técnicas de diagnóstico, como testes parasitológicos e PCR, para aumentar a sensibilidade ao diagnóstico de leishmaniose visceral canina, principalmente, com relação aos cães assintomáticos em áreas endêmicas.

ABSTRACT: The study aimed to investigate Leishmania infection in a population of dogs (92 animals) in a fishing area of Bonito Municipality, and evaluate comparatively the serological methods used, immunoenzymatic assay (ELISA), indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and rapid Dual Path-Platform test (DPP®). Blood and aspirate of bone marrow samples were used and parasitological investigation was also performed, such as parasite isolation in Neal, Novy, Nicolle (NNN) medium culture, Woo technique, Giemsa stained smears and specific identification by polymerase chain reaction (PCR). IFAT revealed 56/92 seropositive, the ELISA 8/92 and the DPP®41/92. Regarding the agreement between the serological tests by the Kappa index, there was a slight agreement between ELISA/IFAT and ELISA/DPP®, and fair agreement in IFAT/DPP®. The NNN culture was positive in three out of 21 dogs, and identified by PCR as Leishmania infantum chagasi. No samples were positive by the Woo technique. Our results showed low agreements between the serological tests recommended by the Brazilian Ministry of Heath, and it is necessary to associate other diagnostic techniques, such as parasitological tests and PCR, to increase the sensitivity for canine visceral leishmaniosis diagnosis, mainly regarding asymptomatic dogs in endemic areas.

A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica grave, causada pelo parasito Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. Esclarecer as alterações provocadas pela doença é fundamental para que se adotem condutas clínicas e de tratamento adequadas. Com o objetivo de analisar a infecção experimental em hamsters da linhagem golden, Mesocricetus auratus, infectados com tecido de medula óssea de pacientes com LV no Estado de Mato Grosso do Sul, foram realizados estudos parasitológicos e de imunomarcação. Foi verificada a distribuição do parasitismo no baço, fígado, rim, pulmão, coração e encéfalo desses animais. Foram utilizados 18 hamsters experimentalmente inoculados via intra-peritoneal, e seis animais sadios como controles negativos. Os animais foram mantidos em biotério de experimentação e observados, em busca de alterações clínicas. Com fragmentos de cada órgão, procedeu-se a confecção de lâminas por aposição para pesquisa de amastigotas. Nos órgãos com resultado negativo na pesquisa direta do parasito, e em todas as amostras de encéfalo, foi realizada a técnica de imunohistoquímica. A pesquisa direta de amastigotas foi positiva no baço e fígado de todos os animais infectados; 33,3% apresentaram o parasito em rim e pulmão, e 16,7% no coração. Quando realizada a pesquisa em encéfalo, formas parasitárias foram observadas em 83,3% (15/18) dos animais. A imunomarcação confirmou os resultados da pesquisa direta, exceto em duas amostras de tecido pulmonar e nas amostras de encéfalo. Mais estudos são necessários, para esclarecer o real papel do parasito no sistema nervoso central.

Visceral leishmaniasis (VL) is a severe chronic disease caused by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. Better knowledge on the effects caused by this disease can help develop adequate clinical management and treatment. Parasitological and immunohistochemical studies were performed golden hamsters Mesocricetus auratus infected with bone marrow from individuals with VL in the State of Mato Grosso do Sul, central-west Brazil. The effects of parasitism in the spleen, liver, kidneys, lungs, heart and brain of the animals were examined. Eighteen hamsters were inoculated intraperitoneally, and six healthy animals were used as negative controls. The animals were kept in the animal house and checked for clinical signs. Specimens of each organ were examined for the presence of amastigotes. Immunohistochemical technique was performed in all brain specimens and organs negative on the direct examination of parasites. Direct examination of amastigotes was positive in the spleen and liver of all infected animals; 33.3% showed the parasite in the kidneys and lungs, and 16.7% in the heart. Parasitic forms were seen in 83.3% (15/18) of the brain examined. Immunohistochemistry confirmed the results of the direct examination, except in two specimens of lung tissue and in the brain specimens. Other studies are needed to further clarify the effect of the parasite in the central nervous system.

INTRODUÇÃO: O estudo foi realizado com o objetivo de estudar a fauna de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) e aspectos ligados à transmissão da leishmaniose tegumentar americana em uma área florestal com ocorrência de Leishmania (Leishmania) amazonensis, situada no município de Bela Vista, Estado do Mato Grosso do Sul, Brasil. MÉTODOS: As capturas de flebotomíneos foram realizadas utilizando-se armadilhas tipo Disney modificadas, com isca roedor, Mesocricetus auratus, no período de maio de 2004 a janeiro de 2006. RESULTADOS: As coletas resultaram na identificação de 10 espécies de Phlebotominae: Brumptomyia avellari, Brumptomyia brumpti, Bichromomyia flaviscutellata, Evandromyia bourrouli, Evandromyia lenti, Lutzomyia longipalpis, Psathyromyia campograndensis, Psathyromyia punctigeniculata, Psathyromyia shannoni e Sciopemyia sordellii. As duas espécies predominantes foram Ev bourrouli, com 57,3% dos espécimes coletados, e Bi. flaviscutellata, representada por 41,4% e que esteve presente em todos os locais amostrados. Dois hamsters sentinelas adquiriram a infecção natural, sendo os isolados identificados como Leishmania amazonensis. CONCLUSÕES: Os resultados mostram a eficiência das armadilhas Disney para captura de Bichromomyia flaviscutellata, e a presença simultânea de ambos, o vetor e a espécie de Leishmania por ele transmitida pode ser considerada um fator preditor da ocorrência de leishmaniose para a população humana que permanecer nesse local.

INTRODUCTION: The work was conducted to study phlebotomine fauna (Diptera: Psychodidae) and aspects of American cutaneous leishmaniasis transmission in a forested area where Leishmania (Leishmania) amazonensis occurs, situated in the municipality of Bela Vista, State of Mato Grosso do Sul, Brazil. METHODS: The captures were conducted with modified Disney traps, using hamster (Mesocricetus auratus) as bait, from May 2004 to January 2006. RESULTS: Ten species of phlebotomine sandflies were captured: Brumptomyia avellari, Brumptomyia brumpti, Bichromomyia flaviscutellata, Evandromyia bourrouli, Evandromyia lenti, Lutzomyia longipalpis, Psathyromyia campograndensis, Psathyromyia punctigeniculata, Psathyromyia shannoni and Sciopemyia sordellii. The two predominant species were Ev bourrouli (57.3%) and Bi flaviscutellata (41.4%), present at all sampling sites. Two of the 36 hamsters used as bait presented natural infection with Leishmania. The parasite was identified as Leishmania (Leishmania) amazonensis. CONCLUSIONS: Analysis of the results revealed the efficiency of Disney traps for capturing Bichromomyia flaviscutellata and the simultaneous presence of both vector and the Leishmania species transmitted by the same can be considered a predictive factor of the occurrence of leishmaniasis outbreaks for the human population that occupies the location.

An increase in morbidity associated with visceral leishmaniasis (VL) in human immunodeficiency virus (HIV)/AIDS patients has been described in Africa and the Mediterranean. Despite the high endemicity of VL and HIV-1/AIDS in Brazil, this association has not been thoroughly investigated. Our aim was to evaluate the epidemiologic and clinical characteristics of VL-HIV-1/AIDS cases from Central-west [Mato Grosso do Sul (MS)] Brazil. Medical records of 23 VL-HIV-1/AIDS patients were reviewed. Patients were predominantly adult males (87%) and 34.8% of the patients were intravenous drug users (IVDU). Leishmaniasis was the first opportunistic infection in 60% of the HIV-1 patients. Fever occurred in all patients, although splenomegaly and hepatomegaly were absent in 21.7% of the cases. CD4+ T-cell counts were below 200 cells/mm³ in 80% of the cases and the counts did not increase after clinical remission despite antiretroviral therapy. The first drug chosen to treat the cases was antimonial, but the therapeutic regimen was altered to amphotericin B in 12 of 17 cases due to side effects. Relapses were reported in 56.5% of the patients. IVDU may constitute an important risk factor for the transmission of both diseases in MS. VL-HIV-1/AIDS patients in MS share similar clinical characteristics as those from other endemic regions worldwide. Thus, these findings are critical for improving the surveillance of VL-HIV/AIDS patients.

The diagnosis of visceral leishmaniasis (VL) generally requires the use of invasive tests for the collection of infected tissue (aspirates of bone marrow, spleen, liver or lymph nodes). This difficulty has led to the search for safer and less painful techniques to confirm the occurrence of the disease in children. Polymerase chain reaction (PCR) is a method that is advantageous in that it allows the use of peripheral blood samples for diagnosis. This paper reports the utilisation of PCR on peripheral blood samples to diagnose VL in 45 children in Mato Grosso do Sul, Brazil. This technique is compared with methods carried out using tissue collected by invasive procedures, including direct microscopy, culture and detection of Leishmania DNA by PCR in bone marrow aspirates. The results show that PCR of peripheral blood provides great sensitivity (95.6%) that is similar to that from the PCR of bone marrow aspirates (91.1%) and higher than that achieved with microscopy (80%) or culture (26.7%) methods. PCR of peripheral blood proved to be a suitable tool for the diagnosis of VL in children because it is highly sensitive and safe, with tissue collection being less invasive than in traditional tests.

INTRODUÇÃO: A leishmaniose visceral é uma doença infecciosa sistêmica de ampla distribuição geográfica, caracterizada pelo alto potencial de letalidade. Visando contribuir com a redução da mortalidade, bem como auxiliar profissionais da saúde no manejo clínico dos pacientes portadores desse agravo, este trabalho teve como objetivo investigar as características clínicas e laboratoriais dos casos que evoluíram para o êxito letal em hospitais de Campo Grande, MS, nos anos de 2003 a 2008. MÉTODOS: Foram analisados 55 prontuários de pacientes que tiveram a leishmaniose visceral como causa de óbito. RESULTADOS: Dos 55 pacientes estudados, 37 eram procedentes do município de Campo Grande, sendo 41 (74,5%) do sexo masculino, com predominância da faixa etária acima dos 40 anos. Quanto ao quadro clínico, a febre esteve presente em 89,1% dos casos. A duração da doença desde o início dos sintomas até a hospitalização variou em média 78,2 dias. A leucopenia ocorreu em 85,5% dos pacientes. Comorbidades estiveram presentes em 39 (70,9%) pacientes, sendo a desnutrição e o etilismo as mais frequentes. A confirmação do diagnóstico ocorreu em média 6,7 dias após a internação. O antimoniato pentavalente foi a droga mais utilizada, com 87,5% dos pacientes apresentando algum tipo de reação adversa. Infecções bacterianas ocorreram em 36 pacientes e, em 27 (49%), foram uma das causas do óbito. CONCLUSÕES: Os dados indicam que a identificação precoce dessas características clínicas e laboratoriais no primeiro atendimento ao paciente é de fundamental importância para se reduzir a mortalidade por meio da instituição de medidas terapêuticas e profiláticas eficazes.

INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis is a systemic infectious disease of broad geographical distribution, characterized by high potential for lethality. With the purpose of contributing towards reducing mortality and helping healthcare professionals in clinical management of patients with this disease, this paper aimed to investigate the clinical and laboratory characteristics of cases with a fatal outcome in hospitals in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, between 2003 and 2008. METHODS: Fifty-five medical files on patients who died due to visceral leishmaniasis were analyzed. RESULTS: Among the 55 patients studied, 37 were from the municipality of Campo Grande; 41 (74.5%) were males; and age over 40 years predominated. The patients presented with fever in 89.1% of the cases. The duration of the illness from the onset of symptoms to hospitalization was 78.2 days on average. Leukopenia was seen in 85.5% of the patients. Comorbidities were present in 39 (70.9%) patients; malnutrition and alcoholism were the most frequent of these. Confirmation of the diagnosis occurred on average 6.7 days after admission. Pentavalent antimoniate was the drug most used, and 87.5% of the patients presented some type of adverse reaction. Bacterial infections occurred in 36 patients and were one of the causes of death in 27 (49%). CONCLUSIONS: The data showed that early identification of these clinical and laboratory characteristics, at the time when patients are first attended, is extremely important for reducing mortality through instituting efficient therapeutic and prophylactic measures.

O Município de Três Lagoas, Mato Grosso do Sul, Brasil, foi alvo de uma epidemia de leishmaniose visceral a partir de 2000. Em 2002, devido ao incremento de casos, estudou-se 46 famílias que apresentavam um caso de doença para verificar-se o percentual de positividade de infecção assintomática por leishmaniose visceral em contactantes. Encontrou-se 36,4% de positividade pelos testes sorológicos Reação de Imunofluorescência Indireta e/ou imunoenzimático ELISA, sem diferença estatisticamente significativa quanto ao sexo e faixa etária. A mediana de idade foi de 21 anos, sendo a faixa etária mais acometida de 10 a 19 anos (23%). Quanto às características familiares não observaram-se diferenças quanto ao nível de instrução e renda familiar; a moradia, em sua maioria, era própria (58,7%), em alvenaria (97,8%), com infra-estrutura adequada. Todas as famílias relataram a presença de provável flebotomíneo no peridomicílio. Conclui-se que a infecção assintomática por leishmaniose visceral é freqüente, ocorrendo em homens e mulheres, independente de faixa etária.

The Brazilian city of Três Lagoas, Mato Grosso do Sul State, has experienced an urban outbreak of visceral leishmaniasis since 2000. In 2002, due to the increase in the number of cases, 46 families with cases of visceral leishmaniasis were studied to verify the prevalence of asymptomatic infection in household contacts. Indirect immunofluorescence and ELISA showed a 36.4% positive infection rate. There were no cases of symptomatic disease among these contacts. There was no statistically significant difference in gender or age. Median age was 21 years, and the 10-19-year age bracket was the most heavily affected (23%). As for family characteristics, no differences were observed in schooling or family income; most families (58.7%) owned their homes, which were built of masonry (97.8%) and had adequate infrastructure. All the families reported what were probably phlebotomine sand flies in the peridomicile. In conclusion, asymptomatic visceral leishmaniasis infection is frequent and occurs in both males and females, regardless of age.

O Município de Três Lagoas, Mato Grosso do Sul, Brasil, foi alvo de uma epidemia de leishmaniose visceral a partir de 2000. Em 2002, devido ao incremento de casos, estudou-se 46 famílias que apresentavam um caso de doença para verificar-se o percentual de positividade de infecção assintomática por leishmaniose visceral em contactantes. Encontrou-se 36,4% de positividade pelos testes sorológicos Reação de Imunofluorescência Indireta e/ou imunoenzimático ELISA, sem diferença estatisticamente significativa quanto ao sexo e faixa etária. A mediana de idade foi de 21 anos, sendo a faixa etária mais acometida de 10 a 19 anos (23%). Quanto às características familiares não observaram-se diferenças quanto ao nível de instrução e renda familiar; a moradia, em sua maioria, era própria (58,7%), em alvenaria (97,8%), com infra-estrutura adequada. Todas as famílias relataram a presença de provável flebotomíneo no peridomicílio. Conclui-se que a infecção assintomática por leishmaniose visceral é freqüente, ocorrendo em homens e mulheres, independente de faixa etária.

The Brazilian city of Três Lagoas, Mato Grosso do Sul State, has experienced an urban outbreak of visceral leishmaniasis since 2000. In 2002, due to the increase in the number of cases, 46 families with cases of visceral leishmaniasis were studied to verify the prevalence of asymptomatic infection in household contacts. Indirect immunofluorescence and ELISA showed a 36.4% positive infection rate. There were no cases of symptomatic disease among these contacts. There was no statistically significant difference in gender or age. Median age was 21 years, and the 10-19-year age bracket was the most heavily affected (23%). As for family characteristics, no differences were observed in schooling or family income; most families (58.7%) owned their homes, which were built of masonry (97.8%) and had adequate infrastructure. All the families reported what were probably phlebotomine sand flies in the peridomicile. In conclusion, asymptomatic visceral leishmaniasis infection is frequent and occurs in both males and females, regardless of age.

The outspread and urbanization of visceral leishmaniasis (VL) in Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, lead us to undertake the present study over diversity and abundance of sand flies in the urban area to compare with previous search carried out during 1999/2000, before the identification of the disease in the human population.The captures were carried out with automatic light traps, weekly, from February 2004 to February 2005 on three sites including a forested area (Zé Pereira), two peridomicilies (shelters of domestic animals and cultivation areas), and intradomicilie. In the present study 110 collections were obtained during 13 months for 1320 h of collections, resulting in 5004 specimens, 3649 males and 1355 females belonging to the 20 following species: Brumptomyia avellari, Brumptomyia sp., Bichromomyia flaviscutellata, Evandromyia lenti, E. termitophila, E. cortelezzii, E. borrouli, Lutzomyia sp., L. longipalpis, Micropygomyia quinquefer, N. antunesi, N. whitmani, Pintomyia christenseni, Pi. damascenoi, Psathyromyia aragaoi, Ps. campograndensis, Ps. hermanlenti, Ps. shannoni, Pychodopygus claustrei, and Sciopemyia sordellii. L. longipalpis was the most abundant species in the anthropic environment with 92.22% of the captures. This shows an increase of sixty times in the density of L. longipalpis compared to the last sand fly evaluation in 1999/2000. The high density of L. longipalpis in Campo Grande is the main factor of risk in transmission of the disease to human in the urban area. The capture of N. antunesi, typical specie from Amazonian region, in Mato Grosso do Sul is reported for the first time.

Este trabalho, realizado a partir de outubro de 2000 até janeiro de 2003, descreve as características clínico-epidemiológicas da leishmaniose visceral em Três Lagoas, Mato Grosso do Sul. Foram confirmados 149 casos da doença, com predominância do sexo masculino (71,1%). A faixa etária mais acometida foi de 0 a 4 anos (42%). Quanto ao quadro clínico, estiveram presente febre (97,3%), esplenomegalia (85,9%) e anemia (75,8%). Em 32 (21,5%) pacientes ocorreu infecção associada, predominando a pneumonia. Sobre as alterações laboratoriais observou-se mediana de hemoglobina de 8mg/dl e de leucócitos de 3.100 cel/mm³. O esfregaço de medula foi positivo em 90,6%. Dos 97,9% de pacientes tratados, 78,2% utilizaram antimoniato pentavalente. Ocorreram 8% de óbitos, metade deles portadores de infecção associada. O conjunto destes dados sugere mudanças no padrão fisiográfico de ocorrência da leishmaniose visceral na localidade, com expansão e urbanização da doença, necessitando atenção para o diagnóstico e tratamento precoces.

This study, realized from October 2000 to January 2003 describes the clinical epidemiological characteristics of visceral leishmaniasis in Três Lagoas, Mato Grosso do Sul State, Brazil. A total of 149 cases were confirmed, with a predominance of the male gender (71.1%). The principal age group was aged 0 to 4 years old (42%). The clinical picture included fever (97.3%), esplenomegaly (85.9%) and anemia (75.8%). Associated infections were seen in 32 patients (21.5%), pneumonia being most common. Changes registered in the laboratory included a median hemoglobin level of 8mg/dl and 3,100 leucocytes/mm³. Bone marrow smears were positive in 90.6% of patients. Of the 97.9% patients treated, 78.2% used pentavalent antimony. Mortalities occurred in 8% of cases, half of these with associated infection. Taken together, these data suggest changes in the physiographical occurrence of visceral leishmaniasis in this locality, with expansion and urbanization of the disease, requiring greater attention for early diagnosis and treatment.

O presente estudo visou estabelecer a prevalência de Cryptosporidium parvum em crianças abaixo de 5 anos, residentes na zona urbana de Campo Grande, MS, 1996/97, através de exames coprológicos e avaliar epidemiologicamente os casos diagnosticados. Tratou-se de um estudo transversal com inquérito domiciliar, onde foram examinadas 1051 amostras fecais, processadas segundo a técnica de Blagg, utilizando-se a coloração de Ziehl-Neelsen modificada para a pesquisa de oocistos de C. parvum. Concluiu-se que: a prevalência de C. parvum (1,1%) observada não foi estatisticamente significativa; foi relatado diarréia em 58,3% das crianças com diagnóstico positivo, supondo-se associação entre diarréia e a presença do parasita; o C. parvum foi mais freqüente em crianças com idade de 25 a 36 meses (50%), porém sem diferença estatisticamente significativa; o sexo não teve papel diferencial em relação ao parasitismo por C. parvum; entre as 12 crianças com criptosporidiose, 83,3% tiveram contato com animais domésticos (cão e ou gato).

The purpose of this study was to establish the prevalence of Cryptosporidium parvum among infants of less than 5 years of age, resident in the urban area of Campo Grande, Mato Grosso do Sul State, Brazil, 1996/97, through parasitological examinations and epidemiological analysis of the diagnosed cases. It was a transverse study with domiciliary inquiry and we evaluated 1051 fecal samples processed by the Blagg method, and a modified Ziehl-Neelsen staining was used for research of oocysts of C. parvum. We can concluded that the prevalence of C. parvum (1.1%) was not statistically significant; 58.3% of the children with positive diagnosis presented diarrhea, suggesting an association between this sign and the presence of the parasites; C. parvum was more frequent among children aged between 25 to 36 months (50%), but this was not statistically significant; sex did not have a differential role in relation to the cryptosporidiosis; out of the 12 children with cryptosporidiosis, 10 had contact with domestic animals (dogs and or cats).