The objective of this study was to determine the ecological relationships between bacterial species that colonize infected root canals. Root canal bacteria recovered from one patient with pulp canal necrosis were evaluated in vitro for synergistic and antagonistic activities determined by mono and co-culture growth kinetics and the production of bacteriocin-like substances using the double layer diffusion method. Peptostreptococcus prevotii triggered a significant increase of Fusobacterium nucleatum growth, while the former bacteria did not affect the growth of P. prevotii. The bacterial species did not produce antagonism activity against itself or against any of the other two species. Despite many studies have demonstrated the capability of root canal microorganisms to produce antagonistic substances, these in vitro experimental tests show the synergistic effect of P. prevotii on the growth of F. nucleatum.

Despite the importance of gastrointestinal diseases and their global distribution, affecting millions of individuals around the world, the role and antimicrobial susceptibility patterns of anaerobic bacteria such as those in the Bacteroides fragilis group (BFG) are still unclear in young children. This study investigated the occurrence and distribution of species in the BFG and enterotoxigenic strains in the fecal microbiota of children and their antimicrobial susceptibility patterns. Diarrheic (n=110) and non-diarrheic (n=65) fecal samples from children aged 0-5 years old were evaluated. BFG strains were isolated and identified by conventional biochemical, physiological and molecular approaches. Alternatively, bacteria and enterotoxigenic strains were detected directly from feces by molecular biology. Antimicrobial drug susceptibility patterns were determined by the agar dilution method according to the guidelines for isolated bacteria. BFG was detected in 64.3% of the fecal samples (55% diarrheic and 80.4% non-diarrheic), and 4.6% were enterotoxigenic. Antimicrobial resistance was observed against ampicillin, ampicillin/sulbactam, piperacillin/tazobactam, meropenem, ceftriaxone, clindamycin and chloramphenicol. The data show that these bacteria are prevalent in fecal microbiota at higher levels in healthy children. The molecular methodology was more effective in identifying the B. fragilis group when compared to the biochemical and physiological techniques. The observation of high resistance levels stimulates thoughts about the indiscriminate use of antimicrobial drugs in early infancy. Further quantitative studies are needed to gain a better understanding of the role of these bacteria in acute diarrhea in children.

A produção de substâncias antagonistas por espécies bacterianas presentes em sistema de canais radiculares (SCR) infectados, tem um papel importante na colonização deste sítio. O objetivo deste estudo foi caracterizar parcialmente a substância antagonista produzida por amostra de Clostridium butyricum isolado de SCR infectados.A produção de substância antagonista foi avaliada pela técnica de difusão em ágar utilizando como bactérias indicadoras Fusobacterium nucleatum e Bifidobacterium adolescentis. Os parâmetros físico-químicos utilizados durante a caracterização parcial foram: pH, estabilidade térmica, susceptibilidade à ação das enzimas tripsina, a-quimiotripsina e papaína. Foi observada zona de inibição contra as duas amostras indicadoras e ainda foi demonstrado que ácidos e bacteriófagos não eram responsáveis por este fenômeno. A atividade inibitória mostrou-se diminuída em uma faixa de pH de 3.5 a 6.5 e estável em temperaturas de 60º, 70º e 100ºC, sendo completamente inativada quando exposta a 121ºC. A atividade antagonista foi resistente à ação das enzimas proteolíticas: tripsina, a-quimiotripsina e papaína. A substância antagonista produzida por C. butyricum é termoresistente e provavelmente de natureza não protéica.

The production of antagonistic substance by bacterium present in the infected root canal system (RCS) probably is an important ecological factor for its successful colonization of the local. The objective of this study was to partially characterize an antagonistic substance produced by a Clostridium butyricum isolated from infected RCS.Production of inhibitory compound was evaluated by the agar double layer diffusion technique using Fusobacterium nucleatum and Bifidobacterium adolescentis as indicator bacteria. The physicochemical and biochemical factors tested for the partial characterization were influence of pH and temperature and susceptibility to the action of some proteolytic enzymes. An inhibition zone was observed against the two indicator strains and acidity and bacteriophage were rejected as responsible for this phenomenon. The inhibitory activity showed to be decreasing in a pH range from 3.5 to 6.5 and being stable at temperatures of 60º, 70º and 100ºC, but completely inactivated when exposed at 121ºC. The antagonistic activity was resistant to the proteolytic action of trypsin, a-chymotrypsin and papain. An antagonistic substance was produced by C. butyricum, which was thermo-resistant and probably of non-protein nature.

A microbiota indígena gengival de cães não está totalmente descrita, sendo sua identificação uma etapa importante no estabelecimento da etiopatogenia e terapia da doença periodontal. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar a microbiota periodontal de cães da raça Pastor Alemão, considerando sítios saudáveis e com doença periodontal. Foram utilizados 29 cães, com idade variando de três a seis anos, sendo analisados espécimes clínicos de sítios periodontais saudáveis de 12 cães e sítios com periodontite de outros 17. Foram isoladas 672 amostras microbianas, com predomínio dos gêneros Pasteurella, Staphylococcus, Porphyromonas e Fusobacterium. A microbiota dos sítios saudáveis equiparou-se à dos sítios doentes, tratando-se de uma microbiota indígena. A microbiota dos sítios doentes apresentou-se aumentada em relação a dos sítios saudáveis, indicando mudança do ambiente do sítio periodontal.

The indigenous gingival microbiota of dogs is not totally described, although such identification is an important step to establish the etiopathogenesis and adequate therapy for the periodontal disease. The aims of this study were to isolate and identify the periodontal microbiota of German Shepherd dogs from healthy and with periodontal desease sites. Twenty nine German Shepherd dogs from three to six years of age were used in this study. Clinical specimens were analysed from healthy periodontal sites of 12 dogs and sites presenting gingivitis of 17 dogs. A total amount of 672 microbial samples, were isolated where the predominant genera were Pasteurella spp., Staphylococcus spp., Porphyromonas spp. and Fusobacterium spp. The microbiological population of the affected sites was similar to the healthy sites, consisting on an indigenous microbiota. The microbiota on the affecteded sites was higher in number than on the healthy sites, showing change in the environment of the periodontal sites.

Actinobacillus actinomycetemcomitans é um cocobacilo Gram negativo, periodontopatógeno clinicamente importante, que produz uma leucotoxina pertencente à família das citolisinas RTX. Neste estudo, avaliou-se a atividade leucotóxica de amostras de A. actinomycetemcomitans isoladas de seres humanos e de calitriquídeos pelos métodos de exclusão de azul de Tripan e quimioluminescência. Duas (P2.17 e P8.12) entre oito amostras de A. actinomycetemcomitans isoladas de seres humanos, e uma (M22.11) entre 8 amostras isoladas de sagüis se apresentaram como altamente produtoras de leucotoxina, como determinado pelo teste de exclusão de azul de Tripan. As amostras de referências de A. actinomycetemcomitans ATCC 29523 e FDC Y4 se comportaram como média e baixa produtoras de leucotoxina, respectivamente. O teste de quimioluminescência foi usado para avaliar a atividade leucotóxica das amostras M22.11 e P2.17 submetidas a diferentes condições de crescimento. A atividade leucotóxica foi detectada em células durante a fase logarítmica e foi similar sob crescimento em anaerobiose e microaerofilia. A atividade leucotóxica foi muito reduzida quando as células foram crescidas em concentrações de glicose mais baixa e mais alta que 0,75% (0,25% e 1,5%), em meio tioglicolato. A produção de leucotoxina, especialmente pela amostra M22.11, foi mais baixa em caldo BHI, enquanto em meio TSB a produção foi em nível similar a aquele em meio tioglicolato. Bicarbonato de sódio 10mM não afetou a produção de leucotoxina.

Actinobacillus actinomycetemcomitans is a clinically relevant periodontopathogenic Gram-negative coccobacillus that produces a leukotoxin of the RTX cytolysin family. In this study, we evaluated the leukotoxic activity of A. actinomycetemcomitans strains isolated from human and marmosets by Trypan blue exclusion and by the chemiluminescence assays. Among eight A. actinomycetemcomitans human strains studied, two (P2.17 and P8.12) were classified as high leukotoxin producers and among eight marmoset strains, one (M22.11) showed high leukotoxin production, as determined by Trypan blue exclusion assay. The reference strains ATCC 29523 and FDC Y4 respectively behaved like moderate and low producers. The chemiluminescence assay was used to evaluate the leukotoxic activity of M22.11 and P2.17 strains submitted to different growth conditions. Leukotoxic activity was detected on cells at the logarithmic phase and was similar under anaerobic and microaerophilic growth conditions. It was greatly reduced when cells were grown at glucose concentrations lower or higher than 0.75% (0.25% and 1.5%) in thioglycolate medium. Leukotoxin production mainly by the M22.11 strain was low in BHI broth, whereas production in TSB medium showed a similar level as in thioglycolate broth medium. Sodium bicarbonate at 10 mM did not affect leukotoxin production.

Cepas resistentes de bactérias do grupo Bacteroides fragilis (2 isoladas de humano e de sagui Callithrix penicillata e 2 de referência) foram obtidas pela técnica da placa gradiente para clindamicina, penicilina G, metronidazol e bicloreto de mercúrio. Todas as quatro cepas testadas foram originalmente sensíveis às quatro drogas antimicrobianas em relação ao ponto crítico usado neste estudo. A determinação das CIMs para as quatro cepas testadas mostrou valores constantes para cada antimicrobiano nas diversas concentrações usadas nas placas gradientes. A cepa B. fragilis de origem humana apresentou três bandas de ADN que devem corresponder a apenas dois plasmídios circulares covalentemente fechados (CCC), com pesos moleculares de aproximadamente 25 e 2.5 Md. Não se detectou a produção de ß-lactamase em nenhuma das cepas nos dois métodos usados. Os resultados não permitem uma associação entre a presença de plasmídios na cepa humana com a susceptibilidade às drogas estudadas. As quatro cepas mostraram-se B-lactamase negativas nos dois métodos usados, não se demonstrando qualquer marcador genético de resistência cromossômica. A resistência observada (CIM), após contato com a penicilina G e bicloreto de mercúrio, foi duas vezes maior nas quatro cepas testadas

Resistant populations of the Bacteroides fragilis group bacteria (two reference ones and two isolated from human and Callithrix penicillata marmoset) were obtained by the gradient plate technique, to clindamycin, penicillin G, metronidazole and mercuric chloride. All the four tested strains were originaly susceptible to the four antimicrobial drugs at the breakpoint used in this study. MICs determination for the four cultures gave constant values for each antimicrobial, on the several steps by the gradient plate technique. The intestinal human B. fragilis strains showed three DNA bands, that could be representative of only two plasmids in the closed covalently circular (CCC) form with molecular weights of approximately 25 and 2.5 Md. The results do not permit an association between the presence of plasmid in the human strain with the susceptibility to the studied drugs. The four strains were ß-lactamase negative in the two methods used, and no particular chromosomal genetic resistance marker was demonstred. The resistance (MIC) observed, after contact with penicillin G and mercuric chloride, were two-fold in the four tested strains

No período de maio a dezembro de 1988, foram avaliados bacteriologicamente 21 pacientes da Unidade de Queimados do Hospital João XXIII pertencente à Fundação Hospitalar do Estado de Minas Gerais, em Belo Horizonte, Brasil. A avaliação qualitativa e quantitativa de bactérias aeróbicas e facultativas de queimaduras foi realizada através da técnica do disco de papel de filtro padronizado, incluindo a susceptibilidade a antimicrobianos. Ao mesmo tempo, foi realizada uma avaliação das bactérias isoladas do ambiente da Unidade. Os microrganismos mais frequentemente recuperados das feridas dos pacientes foram: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis. A espécie P. pseudomallei foi a mais frequente nos espécimes ambientais. Em quase todos os espécimes de pacientes dos quais P. aeruginosa (16 pacientes) foi isolada, a taxa CFU/cm² de pele estava acima de 10². Em nove destes, alcançou 10(5), o que equivale a 10(7) CFU/g de tecido queimado.

During the period between May and December 1988, 21 patients were studied bacteriologically at Hospital João XXIII's burn's unit which belongs to "Fundação Hospitalar do Estado de Minas Gerais" in Belo Horizonte, Brazil. A qualitative and quantitative evaluation of aerobic and facultative bacteria from burn wounds was carried out by the standard filter paper disc technique, including antibiotic susceptibility. At the same time an evaluation of those bacteria isolated from the environmental unit was performed. The most common organisms recovered from wounds of patients were: Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, and Staphylococcus epidermidis. P. pseudomallei was the most frequent strain recovered from environmental specimens. In nearly all patients specimens (16 in total) from whom P. aeruginosa was isolated, the rate of CFU/cm² of skin was above 10². In nine of these, it reached 10(5), wich is equivalent to 10(7) CFU/g of burned tissue.