RESUMO Os métodos moleculares de detecção rápida e eficaz de lotes de aves infectados por bactérias como Salmonella sp. Campylobacter sp. e Listeria monocytogenes são importantes para reduzir a frequência da transmissão destes patógenos entre os lotes de aves e aos consumidores de produtos de origem animal. Recentemente, as técnicas de biologia molecular, em especial a reação em cadeia polimerase, que permite a amplificação específica de segmentos de DNA, têm possibilitado novos rumos na identificação de bactérias supracitadas, reduzindo o tempo de cultivo e ampliando a confiabilidade das provas diagnósticas. A utilização da biologia molecular por laboratórios de diagnóstico humano e animal, assim como em programas de controle de qualidade de alimentos e produtos de origem animal, já é realidade e tende a se expandir rapidamente. O objetivo deste artigo é fazer uma breve revisão dos testes diagnósticos convencionais e moleculares para identificar Campylobacter sp., Salmonella sp. e Listeria monocytogenes. Concluindo, o diagnóstico molecular é um campo em avanço científico e tecnológico, no qual novas técnicas moleculares estão em desenvolvimento para o diagnóstico de bactérias em alimentos.

ABSTRACT The molecular methods for quick and efficient detection of chicken lots infected by bacteria such as Salmonella sp. Campylobacter sp. and Listeria monoytogenes is basic for the effort to reduce the frequency of the transmission between chicken lots and to the consumers of poultry products. Recently, the development of techniques involving molecular biology, especially polymerase chain reaction, which allows the specific enlargement of segments of DNA, has been making new procedures possible for the identification of the abovementioned bacteria, reducing the time necessary for the tests and enhancing the reliability of the resulting diagnoses. The use of molecular biology in laboratories for human and animal diagnosis, as well as in quality control programs for foods and products of animal origin is already a reality and has tended to expand quickly. The objective of this article is to present a brief review of the conventional diagnostic and molecular tests for the identification of Campylobacter sp., Salmonella sp. and Listeria monocytogenes. In conclusion, molecular diagnosis is a field undergoing scientific and technological advancement, in which new molecular techniques are under development for the diagnosis of bacteria in foods.

A colonização do colo e reto por espiroquetas intestinais foi detectada pela primeira vez no Brasil em 4 de 282 (1,41%) pacientes submetidos a sigmoidoscopia e/ou colonoscopia com o diagnóstico histopatológico de colite crônica inespecífica. A frequência é provavelmente menor que a real, urna vez que espécimens cirúrgicos não foram considerados no presente estudo. O diagnóstico histopatológico foi feito através de colorações de rotina, tais como a hematoxilina-eosina, que mostraram franja basofílica de 3µ de espessura sobre a borda em escova do epitélio e por impregnações pela prata como o método de Whartin-Starry. Métodos imunohistoquímicos, usando dois soros primários policlonais, um contra o Treponema pallidum e o outro contra Leptospira interrogans, serovar copenhageni serogrupo Icterohaemorrhagiae revelaram reatividade cruzada com os antígeno/s dos espiroquetas produzindo um contraste acentuado da franja sobre o epitélio colônico e preservando a morfologia espiralada do parasita. Em um paciente, com acentuada diarréia, a imunohistoquímica detectou antígenos de espiroqueta no citoplasma de uma célula da cripta intestinal, demonstrando que a infecção estava mais disseminada do que parecia pelas colorações comuns. Portanto, os métodos imunohistoquímicos facilitam o diagnóstico histológico da espiroquetose intestinal e podem , também, contribuir para a melhor compreensão da patogenia da doença. A microscopia eletrônica de transmissão e a microscopia de varredura, realizadas em um paciente, demonstraram que os espiroquetas lembram a espécie designada como Brachyspira aalborgi.

Colonization of the colon and rectum by intestinal spirochetes is detected for the first time in Brazil in 4 of 282 (1.41%) patients who had undergone sigmoidoscopy and/or colonoscopy with a histopathological diagnosis of chronic non specific-colitis. This frequency is probably understimated, since surgically obtained specimens were not considered in the present study. Histopathological diagnosis was performed using routine stains like hematoxylin-eosin which showed the typical, of 3-µm thick hematoxyphilic fringe on the brush border of the surface epithelium, and by silver stains like the Warthin-Starry stain. Immunohistochemical procedures using two, polyclonal, primary antibodies, one against Treponema pallidum and the other against Leptospira interrogans serovar copenhageni serogroup Icterohaemorrhagiae cross-reacted with spirochetal antigen/s producing a marked contrast of the fringe over the colonic epithelium, preserving the spiral-shaped morphology of the parasite. In one case with marked diarrhea, immunohistochemistry detected spirochetal antigen/s within a cell in an intestinal crypt, thus demonstrating that the infection can be more widely disseminated than suspected using routine stains. Immunohistochemical procedures, thus, greatly facilitate the histological diagnosis of intestinal spirochetosis and may contribute to a better understanding of the pathogenesis of the disease. Transmission and scanning electron microscopy performed in one case showed that the spirochete closely resembled the species designated as Brachyspira aalborgi.

Numa tentativa de estar o mais próximo possível a pacientes infectados e tratados nas áreas endêmicas de esquistosomose (S. mansoni) e também para obter um período mais longo de seguimento, camundongos foram repetidamente infectados com um número baixo de cercarias. Dados de sobrevivência e variáveis histológicas tais como granuloma esquistosomótico, alterações portais, necrose hepatocelular, regeneração hepática, pigmento esquistosomótico, fi-brose periductal e principalmente, alterações dos ductos biliares foram analisados nos animais infectados tratados e não tratados. A terapêutica por oxamniquina nos animais repetidamente infectados prolonga a sobrevivência de maneira significante (Chi-quadrado 9,24, p = 0,0024), portanto confirmando resultados anteriores com um modelo semelhante mas com um período mais curto de seguimento. Ainda, a mortalidade decresce rapidamente depois do tratamento, sugerindo uma abrupta redução na gravidade das lesões hepáticas. O fígado foi ainda estudado sob o ponto de vista morfológico e imunohistoquímico. Fibrose portal, com um quadro que lembra a fibrose humana do tipo Symmers está presente na fase tardia da infecção. As alterações de ductos biliares são muito próximas daquelas descritas na esquistosomose mansônica humana. Antígeno esquistosomótico foi observado em uma célula isolada do revestimento alterado de duetos biliares. A patogênese das alterações ductais e sua possível relação com a infecção parasitária e/ou seus antígenos foi discutida.

In an attempt to be as close as possible to the infected and treated patients of the endemic areas of schistosomiasis (S. mansoni) and in order to achieve a long period of follow-up, mice were repeatedly infected with a low number of cercariae. Survival data and histological variables such as schistosomal granuloma, portal changes, hepatocellular necrosis, hepatocellular regeneration, schistosomotic pigment, periductal fibrosis and chiefly bile ducts changes were analysed in the infected treated and non treated mice. Oxamniquine chemotherapy in repeatedly infected mice prolonged survival significantly when compared to non-treated animals (chi-square 9.24, p = 0.0024), thus confirming previous results with a similar experimental model but with a shorter term follow-up. Furthermore, mortality decreased rapidly after treatment suggesting an abrupt reduction in the severity of hepatic lesions. A morphological and immunohistochemical study of the liver was carried out. Portal fibrosis, with a pattern resembling human Symmers fibrosis was present at a late phase in the infected animals. Bile duct lesions were quite close to those described in human Mansonian schistosomiasis. Schistosomal antigen was observed in one isolated altered bile duct cell. The pathogenesis of the bile duct changes and its relation to the parasite infection and/or their antigens are discussed.