Desenvolveu-se um método para análise de timol e carvacrol em plasma e leite de bovinos usando microextração em fase sólida no modo headspace (HS-SPME) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). Os limites de quantificação obtidos foram de 0,5 e 2,0 ng mL-1 para ambos analitos no plasma e no leite, respectivamente, com precisão e exatidão adequadas. Para a quantificação do timol, os resultados obtidos no presente trabalho foram superiores em comparação com a literatura existente, obtendo-se menor limite de quantificação. Em relação ao carvacrol, o método é o primeiro descrito na literatura para análise deste analito em plasma e leite de bovinos. O método analítico tem aplicação na identificação e quantificação do timol e carvacrol em plasma e leite de bovinos após a administração de uma formulação intramamária veterinária contendo óleos essenciais de plantas medicinais ricas em timol e carvacrol.

A method for determination of thymol and carvacrol in milk and plasma of dairy cows was developed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) and headspace solid-phase microextraction (HS-SPME). The limits of quantification were set at 0.5 and 2.0 ng mL-1 for both analytes in plasma and milk, respectively, with appropriate precision and accuracy. For quantification of thymol, the results obtained with the established methodology were superior compared with others reported in the literature, achieving lower limit of quantification. Concerning to carvacrol, this is the first methodology described in the literature for the analysis of this compound in plasma and milk of cows. The analytical methodology enabled the identification and quantification of thymol and carvacrol in the plasma and milk of cows after administration of an intra-mammary phytoformulation of veterinary use containing plant essential oils rich in thymol and carvacrol.

Este estudo determinou a liberação de glutaraldeído de resinas acrílicas termopolimerizáveis submetidas a polimento químico e mecânico e desinfetadas. Noventa corpos-de-prova circulares (15 x 4 mm), 30 de cada tipo de resina (Lucitone, QC-20 e Clássico), foram confeccionados e divididos em 2 grupos referentes ao tipo de polimento. Um dos lados de cada corpo-de-prova não foi polido e o outro foi polido mecanicamente (n=45) ou quimicamente (n=45), e imersos em água aquecida a 50°C por 1 h para liberação de substâncias intrínsecas e mantidos em água destilada por 7 dias. A seguir era realizada a desinfecção por imersão em solução de glutaraldeído a 2% por 10 min. Decorrido este período, três corpos-de-prova de cada grupo eram imersos em água por 15, 30, 60, 120 e 240 min. Nos períodos de 15, 30 e 60 min foram realizadas até 4 trocas de água após cada período. As amostras eram analisadas por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) após cada período. Os dados foram analisados estatisticamente pela Análise de Variância e testes complementares de Tukey e Scheffé (α=0,05). Os corpos-de-prova com polimento químico, de todas as marcas comerciais de resina, não liberaram glutaraldeído em qualquer um dos períodos de imersão em água, enquanto os com polimento mecânico liberaram. Nos grupos com trocas de água, a resina Lucitone liberou maior quantidade de desinfetante nas trocas de 15 min (0,040 μg/mL), a resina Clássico nas de 30 (0,021 μg/mL) e 60 min (0,018 μg/mL) e a QC-20 liberou a mesma quantidade (-1,760 μg/mL), em todos os períodos de imersão em água. Nos grupos sem trocas de água, a resina Lucitone liberou maior quantidade de desinfetante (-1,370 μg/mL), sendo diferente estatisticamente das resinas QC-20 (0,022 μg/mL) e Clássico (0,019 μg/mL), que são similares. Pelos resultados conclui-se que corpos-de-prova polidos quimicamente, das três marcas comerciais de resina, não liberaram glutaraldeído após os diferentes períodos de imersão. Contudo, nos corpos-de-prova polidos mecanicamente houve liberação do desinfetante, com Lucitone liberando maior quantidade em relação às demais resinas estudadas.

This study evaluated the release of glutaraldehyde from heat-polymerized acrylic resins subjected to disinfection followed by chemical and mechanical polishing. Ninety disc-shaped specimens (15 x 4 mm), 30 per resin (Lucitone 550, QC-20 and Classico), were made and assigned to 2 groups according to the type of polishing. One side of each specimen was not polished and the other was either mechanically (n=45) or chemically (n=45) polished, and immersed in water at 50°C for 1 h to allow the release of intrinsic substances and then kept in distilled water for 7 days. The specimens were disinfected by immersion in 2% glutaraldehyde for 10 min. After this period, 3 specimens from each group were immersed in water for 15, 30, 60, 120 and 240 min. For the 15-, 30-, 60-min immersions, 4 water exchanges were done at the end of period. High performance liquid chromatography (HPLC) was used to detect and quantify the glutaraldehyde released after each period. Data were analyzed statistically by two-way ANOVA and multiple comparisons were done by Tukey’s and Scheffé’s tests (α=0.05). No glutaraldehyde release was observed from the specimens with chemical polishing at any of the immersion periods, while the mechanically polished specimens released glutaraldehyde. In the groups with water exchanges, Lucitone released more disinfectant in the 15-min period (0.040 μg/mL), Classico in the 30-min (0.021 μg/mL) and 60-min (0.018 μg/mL) periods, and QC-20 the same amount (-1.760 μg/mL) in all periods. In the groups without water exchanges, Lucitone released the highest amount of disinfectant (-1.370 μg/mL), differing significantly from QC-20 (0022 g/mL) and Classico (0019 g/mL), which were similar. The findings of this showed that chemically polished specimens from the 3 resin brands did not release glutaraldehyde after different periods of immersion, while glutaraldehyde release was observed from the mechanically polished specimens, especially from those made of Lucitone resin.

The enantioselective biotransformation of propranolol (Prop) by the endophytic fungi Phomopsis sp., Glomerella cingulata, Penicillium crustosum, Chaetomium globosum and Aspergillus fumigatus was investigated by studying the kinetics of the aromatic hydroxylation reaction with the formation of 4-hydroxypropranolol (4-OH-Prop). Both Prop enantiomers were consumed by the fungi in the biotransformation process, but the 4-hydroxylation reaction yielded preferentially (-)-(S)-4-OH-Prop. The quantity of metabolites biosynthesized varied slightly among the evaluated endophytic fungi. These results show that all investigated endophytic fungi could be used as biosynthetic tools in biotransformation processes to obtain the enantiomers of 4-OH-Prop.

A hidroxicloroquina (HCQ) é um importante fármaco quiral usado, principalmente, no tratamento de artrite reumatóide, lupus eritematoso sistêmico e malária e cujas propriedades farmacocinéticas e farmacodinâmicas parecem ser estereosseletivas. Em relação às propriedades farmacocinéticas, alguns estudos prévios indicam que a estereosseletividade pode se expressar nos processos de metabolismo, distribuição e excreção e que o metabolismo estereosseletivo parece ser função da espécie estudada. Sendo assim, o metabolismo in vitro da HCQ foi investigado usando microssomas de fígado de ratos e de camundongos. A fração microssômica de fígados de ratos Wistar e de camundongos Balb-C foi isolada por ultracentrifugação e 500 μL foram incubados por 180 minutos com 10 μL de HCQ racêmica 1000 μg mL-1. Dois métodos analíticos estereoespecíficos, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese capilar (CE), foram usados para separar e quantificar os metabólitos formados. Verificou-se que o principal metabólito formado é o (-)-(R)-desetilidroxicloroquina para ambas as espécies de animais.

Hydroxychloroquine (HCQ) is an important chiral drug used, mainly, in the treatment of rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus and malaria, and whose pharmacokinetic and pharmacodynamic properties look to be stereoselective. Respecting the pharmacokinetic properties, some previous studies indicate that the stereoselectivity could express itself in the processes of metabolism, distribution and excretion and that the stereoselective metabolism looks to be a function of the studied species. So, the in vitro metabolism of HCQ was investigated using hepatic microsomes of rats and mice. The microsomal fraction of livers of Wistar rats and Balb-C mice was separated by ultracentrifugation and 500 μL were incubated for 180 minutes with 10 μL of racemic HCQ 1000 μg mL-1. Two stereospecific analytical methods, high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary electrophoresis (CE), were used to separate and quantify the formed metabolites. It was verified that the main formed metabolite is the (-)-(R)-desethyl hydroxychloroquine for both animal species.

The analysis of drugs and metabolites in biological fluids usually requires extraction procedures to achieve sample clean-up and analyte preconcentration. Commonly, extraction procedures are performed using liquid-liquid extraction or solid-phase extraction. Nevertheless, these extraction techniques are considered to be time-consuming and require a large amount of organic solvents. On this basis, microextraction techniques have been developed. Among them, liquid-phase microextraction has been standing out. This review describes the liquid-phase microextraction technique based on hollow fibers as a novel and promising alternative in sample preparation prior to chromatographic or electrophoretic analysis. The basic concepts related to this technique and its applicability in extraction of drugs are discussed.

Para avaliação das propriedades farmacocinéticas e monitorização terapêutica da mirtazapina, antidepressivo recentemente introduzido no mercado e que vem sendo bastante utilizado, são necessários métodos de análise simples, sensíveis e seletivos. Sendo assim, a cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por fluorescência foi empregada para o desenvolvimento de um método para análise simultânea da mirtazapina e de seu metabólito, N-desmetilmirtazapina, em plasma. Após extração líquido-líquido utilizando tolueno como solvente extrator, o fármaco, metabólito e padrão interno (metoprolol) foram separados em coluna LiChrospher 100 RP-8 capeada, utilizando fase móvel composta por tampão fosfato de sódio, 0,1 mol/L, pH 3,5-acetonitrila (82:18, v/v). O método apresentou linearidade no intervalo de 2,5 a 500 ng/mL para ambos os compostos, com recuperações médias de 77 e 66% para a mirtazapina e demetilmirtazapina, respectivamente. Os limites de quantificação (2,5 ng/mL), precisão (CV < 15%) e exatidão (erros relativos < 15%) do método asseguram a sua aplicabilidade em estudos de disposição cinética e para o controle terapêutico da mirtazapina.

The demand for analytical methods suitable for accurate and reproducible determination of drug enantiomers has increased significantly in the last years. High-performance liquid chromatography (HPLC) using chiral stationary phases and capillary electrophoresis (CE) are the most important techniques used for this purpose. In this paper, the fundamental aspects of chiral separations using both techniques are presented. Some important aspects for the development of enantioselective methods, particularly for the analysis of drugs and metabolites in biological samples, are also discussed.