RESUMO O cupim asiático Coptotermes gestroi é considerado praga em áreas urbanas, causando danos expressivos em casas, edifícios e árvores. Esta pesquisa avaliou a eficiência de Isaria javanica URM4993 e I. javanica URM4995 sobre operários de C. gestroi. Os insetos foram pulverizados nas concentrações de 104 a 108 conídios/mL e mantidos em incubadora a 25 ± 1º C e 80 ± 10% de umidade relativa. Determinou-se a Concentração Letal (CL50) e o Tempo Letal (TL50), bem como foi quantificada a produção de conídios sobre os insetos mortos. Os aspectos biológicos referentes à germinação e esporulação, antes e após a infecção em C. gestroi, foram avaliados. O fungo foi virulento ao cupim, causando infecção em todas as concentrações utilizadas, sendo que I. javanica URM4993 foi mais eficiente, por causar mortalidade de 100%, após o 6º dia de inoculação (CL50 de 4,86 conídios/mL e TL50 de 2,26 dias). A esporulação nos insetos mortos não diferiu entre as linhagens. Foi observado que o percentual de germinação foi maior nas linhagens reisoladas do que nas linhagens padrão. Contudo, I. javanica URM4993 apresentou maior potencial de esporulação. Esses resultados mostram o fungo como um candidato ao controle biológico desse cupim.

ABSTRACT The Asiatic termite Coptotermes gestroi is considered a pest in urban areas causing extensive damage to houses, buildings and trees. The present study evaluated the effectiveness of Isaria javanica URM4993 and URM4995 on workers of C. gestroi. Insects were sprayed with concentrations of 104 at 108 conidia/mL and kept in an incubator at 25 ± 1º C and 80 ± 10% relative humidity. Results were used to determine the lethal concentration (LC50) and lethal time (LT50). Conidia production on dead insects was assessed. Biological aspects related to germination and sporulation, before and after infection with C. gestroi were also assessed. The fungus was virulent to termites, causing infection at all tested concentrations, with I. javanica URM4993 being the most virulent, causing 100% mortality after six days of inoculation (LC50 of 4.86 x 10 conidia/mL and LT50 of 2.26 days). Sporulation on dead insects did not differ between strains. The percentage of germination was greater for reisolated strains than for standard strains. However, I. javanica URM4993 showed greater sporulation. These results show that the fungus is a candidate for the biological control of termites.

RESUMO Em Isoptera as características do tubo digestivo dos operários e pseudo-operários são normalmente utilizadas em sistemática e filogenia. Pesquisas têm confirmado o valor do modelo espiral e morfologia do tubo digestivo dos operários para a sistemática em cupins superiores, principalmente na família Termitidae. Assim, este trabalho objetivou descrever a histologia do canal alimentar de operários de Nasutitermes coxipoensis (Holmgren) por meio da microscopia de luz, visando obter informações que contribuam para a sistemática desse gênero. Operários de N. coxipoensis foram imobilizados a baixa temperatura (-4o C) para a retirada do canal alimentar, o qual foi fixado em Boüin aquoso por 24h, incluído em “paraplast”, e os cortes corados pela Hematoxilina-Eosina (H-E) e Tricrômico de Mallory. Em geral, as características histológicas encontradas para o canal alimentar de operários de N. coxipoensis foram consistentes com aquelas observadas em várias espécies de cupins validando o método usado. No entanto, foram evidenciadas diferenças na morfologia das células epiteliais e tipos de dobras do epitélio na região do estomodeu, na disposição e número dos ninhos, bem como a presença da membrana peritrófica na região do mesêntero. Portanto, essas características podem ser utilizadas como critérios auxiliares para a diferenciação de espécies entre cupins do gênero Nasutitermes.

ABSTRACT Histological characteristics of the alimentary canal of termite workers and pseudo-workers are generally used for systematics and phylogeny studies. Research has confirmed the value of the workers’ spiral digestive tract model and its morphology for the systematics of higher termites, mainly in Termitidae. Thus, the present study was carried out describing the alimentary canal of Nasutitermes coxipoensis workers through light microscopy. Workers of N. coxipoensis were immobilized at low temperature (-4º C) for the extraction the alimentary canal, which was fixed in Bouin liquid for 24h, embedded in “paraplast,” the slices being stained by hematoxilin-eosin (H-E) and Mallory’s trichrome stain. Overall, the histological characteristics found for the alimentary canal of N. coxipoensis were consistent with those described in several species of termites, endorsing the method applied. However, this study found differences in the morphology of epithelial cells and on the types of epithelial folds in the region of the stomodeum regarding the arrangement and number of nests, as well as the presence of peritrophic membrane in the mesenterum region. Therefore, these characteristics may be used as criteria for the differentiation of species among termites of the genus Nasutitermes.

RESUMO Pesquisas sobre patogenicidade necessitam de conhecimentos básicos em biologia e ecologia dos organismos envolvidos no estudo. O presente trabalho descreve uma técnica de manutenção do cupim Nasutitermes coxipoensis em condições de laboratório a fim de realização de testes com fungos entomopatogênicos. Os cupins foram mantidos em caixas plásticas contendo pedaço de ninho (20 g) e substratos alimentares diferentes: madeira em decomposição, madeira seca, colmo de cana-de-açúcar e papel madeira. Utilizou-se a função de sobrevivência S(t) com o objetivo de verificar a probabilidade de vida dos insetos até um tempo t (18 dias), a fim de mantê-los em condições de laboratório. Os resultados indicaram que o substrato que possibilitou maior tempo de sobrevivência foi cana-de-açúcar, seguido de papel madeira picado. Tais informações possibilitarão a realização de testes diversos com cupins, em condições de laboratório.

ABSTRACT Investigations concerning pathogenicity require basic knowledge in the biology and ecology of the target species involved in the study. The present work describes a technique to maintain the termite Nasutitermes coxipoensis under laboratory conditions to conduct tests with entomopathogenic fungi. The termites were maintained in plastic boxes with a piece of the original nest (20 g) and different food substrates: rotting wood, dry wood, sugarcane pulp, and wood paper. The survival function S(t) was applied to determine the best substrate for maintaining the termites under laboratory conditions, considering an ending time for the experiment of 18 days (t). The results indicated the sugarcane pulp, followed by wood paper as the best substrates for maintaining N. coxipoensis. This information will open opportunities for studies with termites under laboratory conditions.

RESUMO A pesquisa objetivou analisar, morfológica e quantitativamente, os tipos de hemócitos em lagartas do terceiro ínstar de Diatraea saccharalis F., desafiadas imunologicamente por Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., nas concentrações 103, 105 e 107 conídios mL-1, em comparação a lagartas não tratadas. Foram coletados 10 µL de hemolinfa de cinco lagartas por tratamento, nos intervalos de 24, 36, 48, e 60 horas pós-inoculação, sendo contadas 300 células em campos aleatórios da lâmina, utilizando-se a objetiva de imersão (100X). Os hemócitos mais freqüentes foram os esferulócitos (34,8%), plasmatócitos (29,7%) e granulócitos (22,2%), enquanto os menos freqüentes foram os prohemócitos (8,3%), adipohemócitos (2,6%) e oenocitóides (2,4%). B. bassiana promoveu interferência efetiva na população de granulócitos na concentração de 107 conídios mL-1 (24 e 36h) e plasmatócitos nas concentrações 103 conídios mL-1 (60h) e 107 conídios mL-1 (24 e 36h), onde ocorreu aumento do número de granulócitos e redução do número de plasmatócitos na maior concentração e, ainda, o aumento do número de plasmatócitos na concentração 103 conídios mL-1. M. anisopliae não interferiu quantitativamente nos granulócitos e plasmatócitos. No que se refere aos esferulócitos, verificou-se maior tendência de redução do número dessas células no intervalo de 36h para ambos os fungos, porém, diferença significativa só ocorreu na concentração de 105 conídios mL-1 no intervalo de 60h, apresentando a menor média. Conclui-se que B. bassiana tem ação mais efetiva sobre a dinâmica populacional dos granulócitos e plasmatócitos em lagartas de D. saccharalis em relação ao M. anisopliae.

ABSTRACT This study was aimed to morphologically and quantitatively analyze the types of hemocytes in Diatraea saccharalis F. thirdinstar caterpillar immunologicaly challenged by Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. in concentrations of 103, 105 and 107 conidia mL-1, compared to nontreated specimens. A 10µL-sample of hemolymphs from five caterpillars for each treatment, in the intervals of 24, 36, 48 and 60h; 300 cells were counted in random fields of the lamina, using the immersion objective (100X). The most frequent hemocytes were the spherulocytes (34.8%), plasmatocytes (29.7%) and granulocytes (22.2%), while the least frequent were the prohemocytes (8.3%), the adipohemocytes (2.6%) and the oenocytoids (2.4%). B. bassiana promoted effective interference in the population of granulocytes at the concentration of 107 conidia mL-1 (24 and 36h) and of plasmatocytes at the concentrations of 103 conidia mL-1 (60h) and 107 conidia mL-1 (24 and 36h); there occurred an increase of the number of the granulocytes and a decrease of the number of plasmotocytes at the highest concentration, and an increase in the number of plasmatocytes at the concentration of 103 conidia mL-1. M. anisopliae do not interfere quantitatively in the granulocytes and plasmatocytes. Regarding the spherulocytes, there was observed a higher tendency of reduction in the number of these cells in the interval of 24 and 36h for both fungi, but a meaningful difference only occurred at the concentration of 105 conidia mL-1 in the 60h interval, presenting the smallest average. It was possible to conclude that B. bassiana has a more effective action over the populational dynamics of the granulocytes and plasmatocytes of D. saccharalis caterpillars in association with M. anisopliae.

RESUMO Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (URM 3447) isolado de Castnia licus (Drury) e reisolado de ovos, larvas e adultos de Anthonomusgrandis (bicudo-do-algodoeiro), artificialmente infectado, foi avaliado sob condições (temperatura: 27 ± 2º C, UR: 60 ± 10% e fotofase: 14h). Estimou-se a viabilidade de B. bassiana (germinação, crescimento colonial e conidiogênese) em meio de cultura Batata-Dextrose-Ágar (BDA) e virulência ao inseto adulto. Conídios em suspensão aquosa com Tween 80 (0,05%), nas concentrações (0,62 x 106; 0,24 x 106 e 0,43 x 106 conídios/mL), constituíram os inóculos para os testes de viabilidade e virulência. Determinou-se a taxa de germinação para o fungo reisolado e não reisolado, 18h após a inoculação. Crescimento das colônias e conidiogênese foram estimados nos intervalos de 3, 6, 9, 12 e 15 dias. As suspensões de conídios nas concentrações aplicadas causaram mortalidade de 96,7, 83,4 e 91,1% em TL de 5,4, 5,9 e 5,3 dias, respectivamente. Verificou-se que B. bassiana (URM-3447), reisolado de ovos, larvas e adultos de A. grandis , apresentou elevada viabilidade de germinação, crescimento colonial e conidiogênese em meio BDA, podendo ser produzido e empregado como agente de controle do inseto.

ABSTRACT Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (URM 3447) isolated from Castnia licus (Drury) and reisolated from eggs, larvae and adults of Anthonomus grandis (boll weevil), infected artificially was evaluated under various conditions (temperature: 27 ± 2º C, HR: 60 ± 10% and photophase: 14h). Estimation was made of the viability of B. bassiana (germination, colonial growth and conidiogenesis) in Potato-Dextrose-Agar (PDA) culture medium and virulence on the adult insect. Conidia in watery suspension with Tween 80 (0.05%), at various concentrations (0.62 x 106; 0.24 x 106 and 0.43 x 106 conidia/mL) constituted the inoculum for the viability and virulence tests. Determination was made of the rate of germination to reisolated and no-reisolated fungus, 18h after the inoculation. Growth of the colonies and conidiogenesis were estimated in the intervals of 3, 6, 9, 12 and 15 days. Suspension of the conidia in concentrations caused mortality of 96.7, 83.4 and 91.1% in LT50 of 5.4, 5.9 and 5.3 days, respectively. The relative pathogen potency (RPP) indicated that the fungus was more aggressive after reisolation. It was verified that B. bassiana (URM-3447), reisolated from eggs, larvae and adults of the A. grandis, presented high viability of germination, colonial growth and conidiogenesis in PDA medium and high degree of virulence on the adult insect, being able to be used as an insect control agent.