RESUMO: Os vírus da gripe aviária (VGA), vírus da doença de Newcastle (VDN), vírus do Nilo Ocidental (VNO), adenovírus (AV) e herpesvírus (HV) desempenham um papel importante na saúde das populações humana e animal. No entanto, o conhecimento da prevalência desses vírus em aves selvagens é restrito a alguns grupos (por exemplo, aves limícolas) ou regiões em todo o mundo. As informações sobre as aves campestres da América do Sul, essenciais para a sua conservação, são escassas. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a ocorrência de VGA, VDN, VNO, AV e HV pela primeira vez em uma comunidade de aves de uma área única protegida no Sul do Brasil, que abriga o cardeal-amarelo (Gubernatrix cristata) criticamente ameaçado de extinção e em cardeais-amarelos de cativeiro dos mantenedores de fauna do Programa Brasileiro de Cativeiro do Cardeal-amarelo. Espécies de passeriformes silvestres foram capturadas, identificadas e amostras (swabs) foram coletadas da orofaringe e cloaca de 64 passeriformes de 26 espécies (incluindo 3 cardeais-amarelos) e 30 cardeais-amarelos de cativeiro, para diagnóstico molecular. As amostras foram submetidas à extração de RNA e DNA e à reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) para VGA, VDN e VNO e nested PCR para AV e HV. Um cardeal-amarelo de cativeiro apresentou resultado positivo para AV, este resultado é importante para o planejamento, manejo dos atributos naturais e tomada de decisões em relação à conservação integrada de espécies ameaçadas. Este é o primeiro relato de AV em cardeal-amarelo e de investigação epidemiológica de vírus em passeriformes silvestres do bioma Pampa, no Rio Grande do Sul, Brasil.

ABSTRACT: Avian influenza viruses (AIVs), Newcastle disease virus (NDV), West Nile virus (WNV), adenovirus (AV) and herpesvirus (HV) play an important role in the health of human and animal populations. However, knowledge of the prevalence of these viruses in wild birds is restricted to some groups (e.g. shorebirds) or regions worldwide. Information on grassland birds of South America, which is essential for their conservation, is scarce. The objectives of the present study were to evaluate occurrences of AIV, NDV, WNV, AV and HV for the first time in a bird community of a unique protected area in southern Brazil, which is home for the critically endangered yellow cardinal (Gubernatrix cristata), and captive yellow cardinals from fauna maintainers of the Brazilian Captive Program of the Yellow Cardinal. Passerine species of wild life were caught, identified and samples (swabs) were collected from the oropharynx and cloaca of 64 passerines of 26 species (including 3 yellow cardinals) and 30 yellow cardinals of captive, for molecular diagnosis. The samples were subjected to RNA and DNA extraction and the real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) for AIV, NDV and WNV and nested PCR for AV and HV. One yellow cardinal of captive presented a positive result for AV, this result is important for planning, managing natural attributes and making decisions in relation to integrated conservation of threatened species. This is the first report of AV in yellow cardinal and epidemiological investigation of viruses in wild passerines of the Pampa biome, in Rio Grande do Sul, Brazil.

Resumo Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.

Abstract Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.

Resumo O presente estudo objetivou contribuir com a identificação e o registro das espécies de carrapatos que parasitam cães de áreas rurais e urbanas de três mesorregiões do Paraná, Sul do Brasil, e estimar a taxa de ocorrência de cada espécie. Cinquenta e seis cães com carrapatos, provenientes das mesorregiões: Metropolitana de Curitiba (MC), Centro Oriental (COP) e Centro Sul Paranaense (CSP) foram utilizados no estudo. Dos 56 cães, foram coletados 253 carrapatos que foram identificados e caracterizados morfologicamente de acordo com a espécie. Do total de carrapatos, 69,6% foram identificadas como pertencentes à espécie Rhipicephalus sanguineus s. l.; 28,1% como Amblyomma aureolatum e 2,4% como Amblyomma ovale. Dentre os animais avaliados, provenientes da MC, 57,7% estavam parasitados por R. sanguineus s. l., 38,5% por A. aureolatum e 3,8% por A. ovale; enquanto na COP 72,4% dos cães foram parasitados por A. aureolatum e 27,6% por R. sanguineus s. l.. Na CSP foi obtido um carrapato, identificado como A. aureolatum.

Abstract The present study aimed to contribute towards identification and registration of tick species that parasitize dogs in rural and urban areas of three mesoregions of Paraná, southern Brazil, and to estimate the rate of occurrence of each species. Fifty-six dogs with ticks living in three mesoregions: Metropolitana de Curitiba (MC), Centro Oriental (COP) and Centro Sul Paranaense (CSP), were used in the study. From these 56 dogs, 253 ticks were collected and were identified and morphologically characterized according to the species. Among all the ticks, 69.6% were identified as belonging to the species Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l.); 28.1% as Amblyomma aureolatum and 2.4% as Amblyomma ovale. Among the dogs in MC that were evaluated, 57.7% were parasitized by R. sanguineus s. l., 38.5% by A. aureolatum and 3.8% by A. ovale; while in COP, 72.4% of the dogs were parasitized by A. aureolatum and 27.6% by R. sanguineus s. l.. In CSP, one tick was obtained, which was identified as A. aureolatum.

RESUMOA laminite em cavalos está frequentemente associada a distúrbios endócrinos, como a disfunção da pars intermedia da pituitária (PPID) em animais mais velhos. Exames morfológicos do tecido laminar do casco foram realizados em dois cavalos com suspeita de PPID após o óbito, os quais não apresentaram sinais clínicos de laminite. Alterações compatíveis com a laminite de origem endócrina foram observadas, como arredondamento da núcleo das células basais, alongamento e afilamento das lâminas epidérmicas secundárias e proliferação tecidual. Cavalos com PPID sem sinais clínicos de laminite podem estar acometidos por lesões do tecido laminar do casco que comprometam a integridade das interdigitações dérmico-epidérmicas e podem desenvolver a sintomatologia clínica da doença. Sugere-se que o período de desenvolvimento da laminite endócrina seja mais longo, porém estudos adicionais devem ser realizados para confirmar essa hipótese.

ABSTRACTLaminitis in horses is often associated with endocrine disorders, especially the pituitary pars intermedia dysfunction (PPID) in older animals. Morphologic exams of the laminar tissue of the hoof were performed in two horses with suspected PPID, with no clinical signs of laminitis. Changes compatible with laminitis of endocrine origin were observed, such as rounding of the nuclei of the basal cells, thinning and stretching of the secondary epidermal laminae and tissue proliferation. PPID horses with no clinical signs of laminitis may be affected by lesions of the laminar tissue of the hoof that compromise the integrity of the dermal-epidermal junction and may develop clinical symptoms of the disease. It has been suggested that the development stage of endocrine laminitis is longer, but further studies should be conducted to confirm it.

Resumo: Pinguins-de-magalhães (Spheniscus magellanicus) geralmente chegam debilitados às praias do Brasil durante o inverno. A hematologia fornece informações valiosas sobre estado clínico e imunidade dos animais. Os objetivos do presente estudo foram determinar o perfil hematológico, de proteína plasmática total (PPT) e fibrinogênio de pinguins-de-magalhães jovens e adultos no PROAMAR e no CETAS-SC, relacionando esses resultados com o estado de saúde e possibilidade de sobrevivência dos animais. Foram avaliados no Paraná 14 animais na pré e oito na pós-reabilitação e 29 animais em Santa Catarina após a reabilitação. Antes da reabilitação, todos os animais apresentavam debilidade. Nos exames hematológicos desses animais, observou-se que a anemia estava presente em 83% dos pinguins que foram a óbito e em 50% dos que sobreviveram. A relação heterófilos/linfócitos (H/L) foi de 3,87±0,57 nos animais que foram a óbito, significativamente maior que a média de 2,20±0,30 dos animais que sobreviveram. Esses dois parâmetros são úteis na avaliação da possibilidade de sobrevivência dos animais à reabilitação. O escore corporal apresentou correlação positiva com hematócrito e PPT, e correlação negativa com relação H/L. Após a reabilitação os valores foram semelhantes aos de outros animais da família Spheniscidae, com médias variando de 1,64 a 1,90 x106 eritrócitos/μL; 43,38 a 48,80% de hematócrito; 12,45 a 13,52g/dL de hemoglobina; 8.684 a 14.011 leucócitos/μL; 4.767 a 8.041 heterófilos/μL; 3.215 a 4.951 linfócitos/μL; 95 a 655 eosinófilos/μL; 179,8 a 277,9 monócitos/μL; 141 a 184,9 basófilos/μL; e 1,26 a 1,74 de relação H/L. Esses parâmetros, portanto, podem ser utilizados como valores de referência e parâmetros para soltura para pinguins-de-magalhães jovens e adultos em cativeiro nos centros de reabilitação.

Abstract: Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) usually arrive in poor body conditions at Brazilian beaches during the winter. Hematology provides valuable information about clinical and immunity status of the animals. The aims of this study were to determine the hematologic, total plasma protein (TPP) and fibrinogen profiles of young and adult magellanic penguins in PROAMAR and CETAS-SC, relating these results with the state of health and survival possibility of the animals. In Paraná 14 animals were evaluated in pre and eight in post-rehabilitation and 29 animals were evaluated in Santa Catarina after rehabilitation. Before rehabilitation, all animals showed weakness. In hematological exams of these animals, we found that anemia was present in 83% of the penguins that died and 50% of those which survived. The heterophils/lymphocytes (H/L) ratio was 3.87±0.57 in animals that died, significantly higher than the average of 2.20±0.30 for animals that survived. These two parameters are useful to assess the survival possibility of animals to rehabilitation. The body condition score was positively correlated with hematocrit and TPP, and negatively correlated with H/L ratio. After rehabilitation, the values were similar to other animals of the family Spheniscidae, with averages ranging from 1.64 to 1.90x106 erythrocytes/μL; 43.38 to 48.80% of hematocrit; 12.45 to 13.52g/dL of hemoglobin; 8,684 to 14,011 leukocytes/μL; 4,767 to 8,041 heterophils/μL; 3,215 to 4,951 lymphocytes/μL; 95 to 655 eosinophils/μl; 179.8 to 277.9 monocytes/μL; 141 to 184.9 basophils/μL; and 1.26 to 1.74 of H/L ratio. These parameters can therefore be used as reference values and release parameters for young and adult Magellanic penguins in captivity on the rehabilitation centers.

As células-tronco mesenquimais (CTMs) diferenciam-se em várias linhagens e têm potencial de utilização na medicina regenerativa. As CTMs podem ser isoladas de vários tecidos de animais adultos. O objetivo deste estudo foi o isolamento das CTMs do tecido adiposo de cães, seu cultivo e diferenciação. Foram coletadas amostras de tecido adiposo subcutâneo de cinco cães. As CTMs foram isoladas, obtendo-se 146.803 (±49.533) células/g, cultivadas e diferenciadas em osteoblastos, adipócitos e condrócitos. Avaliaram-se a cinética do crescimento, a morfologia e a viabilidade celular. A caracterização citoquímica comprovou a natureza mesenquimal das células isoladas. O cultivo foi iniciado com 20.000 células/mL, verificando-se crescimento rápido até 72 horas (220.000 células/mL), fase exponencial entre 72 e 192 horas (455.000 células/mL), seguida de platô por saturação da densidade com 240 horas (355.000 células/mL). A viabilidade celular variou entre 96 e 100%. As CTMs em cultivo são fibroblásticas, fusiformes, com citoplasma basofílico e núcleo esférico. O comprimento médio das células variou entre 80,85 e 98,36µm, a largura média entre 17,40 e 28,79µm e o diâmetro médio do núcleo entre 15,46 e 17,74µm.

The applications of mesenchymal stem cells (MSCs) are becoming increasingly more promising for regenerative medicine and tissue engineering fields. MSCs can be isolated from adult animals from a variety of tissues, such as the adipose. This study focused on the isolation, culture and differentiation of MSCs from canine adipose tissue. Samples of subcutaneous adipose tissue from five dogs were collected. These cells were isolated, cultured and differentiated into osteoblasts, adipocytes and chondrocytes. We obtained 146,803 (±49,533) cells/g. Growth kinetics and viability studies were conducted during cell culture and the evaluation of cell differentiation was successfully performed by cytochemistry. The cell cultures were initiated with 20,000 MSCs/ml. Rapid growth was observed at 72 hours (220,000 cells/ml), the exponential phase between 72 and 192 hours (455,000 cells/ml) and saturation at 240 hours (355,000 cells/ml). The cellular viability ranged from 96 to 100%. MSCs in culture are fibroblastic cells, fusiform with basophilic cytoplasm and spherical nucleus. The length and width means of the cells and nuclear diameter ranged from 80.85-98.36µm, 17.40-28.79µm and 15.46-17.74µm respectively.

O objetivo do presente estudo foi realizar a comparação entre dois sítios de coleta sanguínea em 24 exemplares de tigre-d'água-americano (Trachemys scripta elegans) oriundos de um criadouro comercial, localizado no município de Antonina, litoral do Paraná, Brasil. Os animais foram submetidos a contenção física e as venopunções foram realizadas no seio supraocciptal e na veia coccígea dorsal. As amostras heparinizadas foram identificadas e refrigeradas para posterior análise laboratorial. A contagem total de eritrócitos e leucócitos foi realizada pela técnica de hemocitometria. O hematócrito (Ht) e a hemoglobina (Hb) foram determinados pelo método de microhematócrito e cianometahemoglobina, respectivamente. A proteína plasmática total (PPT) foi determinada por refratometria e a contagem diferencial de leucócitos foi realizada através da técnica de Shilling. Houve diferença significativa no número de leucócitos e no valor da proteína plasmática total, e em ambos os casos os valores encontrados nas amostras provenientes da veia coccígea dorsal foram inferiores. A diferença encontrada no número de leucócitos provavelmente foi devido à contaminação por linfa, que também justifica o menor valor na concentração da proteína plasmática total. Conclui-se que é mais indicada a venopunção no seio supraocciptal quando comparado a veia coccígea dorsal.

The aim of the present study was to compare two different blood collection sites of 24 red-eared sliders (Trachemys scripta elegans) from a commercial breeder, situated in Antonina, Paraná, Brasil. The animals were physically restrained and paired blood samples were collected from the dorsal coccygeal vein and the occipital sinus. The samples were collected in syringes containing heparin. After collection the samples were identified and refrigerated to posterior hematological analysis. Red blood cell and white blood count were performed using a hemocytometer. The packed cell volume and hemoglobin were determined by the microhematocrit method and cyanmethemoglobin method, respectively. Total plasma protein was determined by refractometry and differential leukocyte count was performed by the Shilling technique. There was a significant difference in the total white blood cell count and on the total plasma protein value, and on both cases the results found on the samples from the dorsal coccygeal vein were lower. The difference found on the white blood cell count was probably due to the lymph contamination of the samples, which also justifies the lower values of total plasma protein. In conclusion, the occipital sinus is more recommended blood collection site than the dorsal coccygeal vein.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o bem-estar de codornas (Coturnix coturnix japonica) em dois sistemas de manutenção: gaiolas industriais em baterias (BC) e aviários enriquecidos (EA) com cama de serragem, caixa de areia e ninhos. O procedimento experimental envolveu oito animais por área experimental equatrorepetiçõesportratamento, totalizando64codornas. O bem-estar animal foi avaliado por meio da liberdade comportamental e da liberdade sanitária -condição das penas e ferimentos -, análises de sangue e mensuração de glicocorticoides nas fezes. Atividade de beber água e comportamento agonístico foram diferentes entre os tratamentos (P<0,05). A condição das penas foi adequada em ambos os tratamentos, exceto para a condição das cabeças em codornas do tratamento BC. Os dados do sangue foram diferentes para eritrócitos, hematócrito, hemoglobina, proteínas sanguíneas, eosinófilos, heterófilos e linfócitos e para a relação heterófilo:linfócito. Os níveis de metabólitos glicocorticoides foram significativamente diferentes entre os sistemas de manutenção. Os indicadores comportamentais e fisiológicos de bem-estar mostraramalto grau de bem-estar para as codornas no EA em relação às no BC.

The intensification of animal production systems presents a potential impact on the welfare of animals. The objective of this work was to assess the welfare of quail Coturnixcoturnix japonicain two maintenance systems: battery cages (BC),and enriched aviary (EA),with saw-dust bedding, sand-bathing area and nests. The experiment procedure involved eight animals per holding area and four repetitions per treatment, an overall of 64 quails. Welfare was assessed through behavioral freedom, sanitary freedom (feather condition and injuries), blood analyses and glicocorticoid metabolites measurement in droppings. Results are presented in the BC order, followed by EA. Water drinking behavior and agonistic behavior were different between treatments (P<0.05). Feather condition was adequate in both treatments, except for the head in BC quails. Blood data were statistically different forred blood cells, hematocrit, hemoglobin, blood proteins, eosinophils, heterophils, lymphocytes and heterophil: lymphocyte ratio. Glicocorticoid metabolites levels were significantly different between maintenance systems. The behavioral and physiological welfare indicators showed higher welfare degree for quails in enriched aviary as compared to battery cages system.

Com o objetivo de avaliar a ocorrência da infecção por Toxoplasma gondii, em ovinos das regiões periurbana e urbana do município de Curitiba, Paraná, Região Sul do Brasil, foram coletadas amostras de sangue de 167 ovinos, de três rebanhos. O teste de ELISA foi utilizado para detectar anticorpos anti-Toxoplasma gondii. Dos 167 soros ovinos, 43 (25,75%) apresentaram anticorpos anti-T. gondii. O parasito está difundido entre os ovinos das duas regiões estudadas.

This study evaluated occurrence of the Toxoplasma gondii infection in ovine from urban and periurban areas of Curitiba, State of Paraná, Southern of Brazil. Blood samples from 167 sheep from three farms were collected. ELISA assay was used to detect IgG anti-Toxoplasma gondii antibodies. Of 167 ovine samples, 43 (25.75%) were positive. The parasite is widespread among sheep from urban and periurban areas of Curitiba.

Anticorpos anti-Neospora caninum foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), em cães errantes e domiciliados das áreas urbana, periurbana e rurais de Curitiba, estado do Paraná, Brasil. Do total de 556 cães, 18,17% (101) foram soropositivos para N. caninum (título de 1:50). A frequência de anticorpos foi de 12,71% nos cães urbanos, de 15,73% nos periurbanos e de 25,38% nos cães rurais. Nos cães rurais a frequência de anticorpos foi maior do que nos cães urbanos (P<0.05). Não houve diferença significativa entre as frequências de anticorpos dos cães urbanos e periurbanos (P>0,05), e dos periurbanos e rurais (P>0,05). Os anticorpos anti N. caninum foram detectados em 34 de 233 cães domiciliados (14,59%) e em 17 de 126 cães errantes (13,49%). Não houve diferença estatística significativa entre o tipo de criação e a origem (P>0,05). Neospora caninum está presente nos cães urbanos e periurbanos de Curitiba e nas áreas rurais do Estado do Paraná.

Antibodies to Neospora caninum were analyzed by an indirect fluorescent antibody test (IFAT), in stray and domiciled dogs from urban, periurban and rural areas from Curitiba, Paraná State, Brazil. Of the total of 556 dogs, 18.17% (101) were positive for N. caninum (titer 50). Frequency of antibody was 12.71 in urban, 15.73 in periurban, and 25.38% in rural dogs. Rural dogs had a significantly higher frequency of antibodies than urban dogs (P< 0.05). There were no significant differences between the frequencies of antibodies in urban and periurban dogs (P>0.05), and between dogs from periurban and rural areas (P>0.05). Antibodies to N. caninum were detected in 34 of 233 domiciled dogs (14.59%) and in 17 of 126 stray dogs (13.49%). No statistical differences were observed considering life-style and geographic location of origin (P>0.05). Neospora caninum is widespread among dogs from urban, periurban and rural areas of the municipal district of Curitiba, Paraná, Brazil.