Resumo Excistação in vitro de cistos de Chilomastix mesnili e Retortamonas sp. identificados microscopicamente, isolados de macacos japoneses e Retortamonas sp. isolados de um pequeno mangusto indiano podem ser induzidos usando um protocolo estabelecido para Giardia intestinalis e, subsequentemente por cultura com meio de Robinson rico em H2S suplementado com Desulfovibrio desulfuricans. A excistação geralmente começou 2 h após a incubação em meio de Robinson. O DNA foi isolado de flagelados excistados após 4 h de incubação ou de flagelados excistados cultivados. A análise filogenética baseada em seus genes 18S rRNA revelou que dois isolados de C. mesnili de macacos japoneses pertenciam ao mesmo grupo que um isolado de C. mesnili de um humano, enquanto um isolado de Retortamonas sp. de um mamífero, o pequeno mangusto indiano, pertencia ao mesmo agrupamento do isolado de Retortamonas spp. do anfíbio, ’sapo ponta-de-flecha’ [identidade sequencial para AF439347 (94,9%)]. Esses resultados sugeriram que a homologia sequencial do gene 18S rRNA dos dois isolados de C. mesnili de macacos japoneses era semelhante a de um humano, além da semelhança morfológica, e a infecção de Retortamonas sp. do tipo anfíbio ao pequeno mangusto indiano destacou a possibilidade de ser afetado pelo habitat alimentar de seu hospedeiro. sp microscopicamente HS H S desulfuricans cultivados C humano mamífero spp sapo pontadeflecha ponta flecha ponta-de-flecha identidade AF AF43934 94,9%. 949 94,9% . 94 9 (94,9%)] morfológica hospedeiro AF4393 94,9 (94,9%) AF439 94, (94,9% AF43 (94,9 AF4 (94, (94 (9 (

Abstract In vitro excystation of cysts of microscopically identified Chilomastix mesnili and Retortamonas sp. isolated from Japanese macaques and Retortamonas sp. isolated from small Indian mongooses could be induced using an established protocol for Giardia intestinalis and subsequently by culturing with H2S-rich Robinson’s medium supplemented with Desulfovibrio desulfuricans. Excystation usually began 2 h after incubation in Robinson’s medium. DNA was isolated from excysted flagellates after 4 h of incubation or from cultured excysted flagellates. Phylogenetic analysis based on their 18S rRNA genes revealed that two isolates of C. mesnili from Japanese macaques belonged to the same cluster as a C. mesnili isolate from humans, whereas a mammalian Retortamonas sp. isolate from a small Indian mongoose belonged to the same cluster as that of an amphibian Retortamonas spp. isolate from a ‘poison arrow frog’ [sequence identity to AF439347 (94.9%)]. These results suggest that the sequence homology of the 18S rRNA gene of the two C. mesnili isolates from Japanese macaques was similar to that of humans, in addition to the morphological similarity, and Retortamonas sp. infection of the amphibian type in the small Indian mongoose highlighted the possibility of the effect of host feeding habitats. sp H2Srich HSrich H2S rich H S Robinsons Robinson s desulfuricans C humans spp poison frog AF AF43934 94.9%. 949 94.9% . 94 9 (94.9%)] similarity habitats Srich HS AF4393 94.9 (94.9%) AF439 94. (94.9% AF43 (94.9 AF4 (94. (94 (9 (

ABSTRACT Purpose: As clinical liver perfusion systems use portal vein and artery flow, dual perfusion techniques are required even in small animal models in order to reproduce clinical setting. The aim of this study was to construct a new dual-flow perfusion system in rat model and optimized the oxygen supply to ensure the aerobic metabolization. Methods: The dual-flow circuit was fabricated using rat liver and whole blood samples as perfusates. The oxygen supply was controlled according to the amount of dissolved oxygen in the perfusate. Perfusate parameters and adenosine triphosphate (ATP) levels were analyzed to evaluate organ function and metabolic energy state. Stored whole blood also tested the suitability as perfusate. Results: Stored blood showed decrease oxygen delivery and liver function compared to fresh blood. Using fresh blood as perfusate with air only, the dissolved oxygen levels remained low and anaerobic metabolism increased. In contrast, with oxygen control at living body level, anaerobic metabolism was well suppressed, and tissue ATP content was increased. Conclusions: We developed a new dual-flow system that enable to reproduce the clinical settings. The perfusion system showed the possibility to improve the energy metabolic state of the perfused organ under appropriate partial pressure of oxygen. Purpose flow setting dualflow metabolization Methods perfusates (ATP Results only increased contrast level suppressed Conclusions settings

Foi feito levantamento sobre a prevalência da infecção por Strongyloides stercoralis em três áreas do Brasil, através do desenvolvimento de método de cultura de fezes (cultura em placa de ágar). A infecção por Strongyloides foi confirmada em 11,3% de 432 pacientes examinados. A eficácia do diagnóstico pela cultura em placa de ágar foi de 93,9% comparado com apenas 28,5% e 26,5% pelo método de Harada-Mori de cultura em papel de filtro e método de concentração de fezes, quando amostras de fezes foram examinadas simultaneamente por estes três métodos. Entre as 49 amostras positivas, aproximadamente 60% foram confirmadas como positivas somente pela cultura em placa de ágar. Estes resultados indicam que a cultura em placa de ágar é um novo método sensível para o diagnóstico correto da infecção crônica pelo Strongyloides.

Prevalence of Strongyloides stercoralis infection in three areas of Brazil was surveyed by a recently developed faecal culture method (an agar plate culture). The Strongyloides infection was confirmed in 11.3% of 432 subjects examined. The diagnostic efficacy of the agar plate culture was as high as 93.9% compared to only 28.5% and 26.5% by the Harada-Mori filter paper culture and faecal concentration methods, when faecal samples were examined simultaneously by these three methods. Among the 49 positive samples, about 60% were confirmed to be positive only by the agar plate culture. These results indicate that the agar plate culture is a sensitive new tool for the correct diagnosis of chronic Strongyloides infection.

Uma pesquisa coproparasitológica foi realizada em 222 habitantes de cinco fazendas de Holambra, localizada a 30 km ao norte de Campinas, SP, Brasil, em outubro de 1992. Aproximadamente 70% dos habitantes apresentaram pelo menos um tipo de parasitose intestinal. O índice de positividade das 6 espécies de helmintos e de 7 protozoários na população foi o seguinte: Ascaris lumbricoides (5,4%); Trichuris trichiura (8,6%); Necator americanus (19,8%); Strongyloides stercoralis (10,4%); Enterobius vermiculares (1,4%); Hymenolepis nana (0,9%); Entamoeba histolytica (3,2%); E. hartmanni (2,7%); E. coli (9,9%); Endolimax nana (14,0%); Iodamoeba butschlii (2,3%); Giardia lamblia (10,4%); Blastocystis hominis (37,4%). O índice de positividade para infecção por helmitos foi aparentemente maior na população mais jovem (menores de 16 anos) do que no grupo de população com idades acima de 16 anos, ao contrário do índice de infecção pelos protozoários que foi mais elevado na população adulta. Utilizando um novo e sensível método através de cultura em ágar, encontrou-se um índice de infecção de 10.4% para Strongyloides sp.

A parasitological survey was carried out on 222 inhabitants of five farms in Holambra, located 30 km north of Campinas, São Paulo, Brazil, on October 1992. Approximately 70% of the inhabitants were found to be infected with at least one species of intestinal parasite. The positive rates of 6 helminths and 7 protozoan species detected are as follows: 5.4% Ascaris lumbricoides; 8.6% Trichuris trichiura; 19.8% Necator americanus; 10.4% Strongyloides stercoralis; 14% Enterobius vermicularis; 0.9% Hymenolepis nana; 3.2% Entamoeba histolytica; 2.7% E. hartmanni; 9.9% E. coli; 14.0% Endolimax nana; 2.3% Iodamoeba butschlii; 10.4% Giardia lamblia; 37.8% Blastocystis hominis. The positive rates of helminth infection were generaly higher in the younger-group under 16 years-old than those in the elder group aged 16 or more, whereas the infection rates of protozoan species were higher in the elder group. The infection rate of Strongyloides was found to be 10.4% by a newly developed sensitive method (an agarplate culture methods).

O diagnóstico parasitológico baseado no exame de fezes é muitas vezes difícil, principalmente nos casos de infecções crônicas ou leves pelo S. stercoralis. Mesmo utilizando o mais novo e sensível método (cultura em placas de ágar) é essencial examinar repetidamente as amostras fecais, para um diagnóstico correto. É importante ressaltar também que o resultado negativo não indica de modo inequívoco a ausência da infecção. Por outro lado, vários testes sorológicos recentemente desenvolvidos para estrongiloidíase tem provado a sua eficácia quando usados para complementar exames parasitológicos. Para demonstrar infecção por Strongyloides desenvolvemos dois tipos de testes sorológicos - ELISA e GPAT - e, com base em nossos recentes estudos, apresentamos uma opinião sobre sua possível aplicação para screening em massa, estudos epidemiológicos e avaliação pós-tratamento de estrongiloidíases.

Parasitological diagnosis based on the faecal examination is frequently difficult in cases of chronic, low-level S. stercoralis infection. Even when a newly developed sensitive method (an agar plate culture) is applied, it is essential to examine faecal samples repeatedly to achieve a correct diagnosis. Additionally, it is important to note that a negative result does not necessarily indicate the unequivocal absence of the infection. On the other hand, several serological tests which have recently been developed for strongyloidiasis have proven reliable when used to complement parasitological examination. We have developed two serological tests, ELISA and GPAT, to demonstrate Strongyloides infection and possible applications of the serological tests for diagnosis, mass-screening, epidemiological study and postchemotherapy evaluation of strongyloidiasis were reviewed based on our recent studies.

Um novo teste sorológico, o teste de aglutinação com partículas de gelatina (TAPG), foi utilizado para o diagnóstico sorológico de esquistossomose mansônica. Esta técnica mostra que a sensibilidade (90.6%) e especificidade (97.8%) chegam próximas do teste de enzima imunoensaio. O TAPG pode ser fácil e rapidamente realizado sem equipamentos especializados usando partículas liofilizadas sensibilizadas com o antígeno. O teste mostrou ser também útil em condições de campo para triagem em massa da infecção pelo Schistosoma mansoni

A new serological test, the gelatin particle agglutination test (GPAT), was used for the serodiagnosis of schistosomiasis mansoni. This technique showed the sensitivity (90.6%) and specificity (97.8%) close to those of enzyme-linked immunosorbent assay. The GPAT can be easily and rapidly performed without specialized equipment, by using lyophilized antigen-coated gelatin particles. The test also seems to be useful for mass screening of Schistosoma infection in field conditions.