RESUMO O estudo foi planejado para correlacionar exames ultrassonográficos e sorológicos realizados para o diagnóstico precoce (20 a 30d) de gestação. Cento e vinte (n= 120) receptoras bovinas foram sincronizadas (estro=D0), e embriões frescos produzidos in vitro foram transferidos em tempo fixo (TETF, D7). No experimento 1 (n= 46), o diagnóstico de gestação foi realizado no D20, pela detecção do fluxo sanguíneo do CL e pela sorologia de glicoproteínas associadas à gestação (PAGs). No experimento 2 (n= 30), a detecção da gestação foi realizada por meio da visualização do conteúdo do útero e também pela sorologia para PAGs. No experimento 3, a sorologia para PAGs foi realizada no D30. Em todos os experimentos, a visualização ultrassonográfica da vesícula e da viabilidade embrionária, realizada no D30, foi considerada padrão-ouro. O procedimento PROC FREQ testou o nível de concordância dos métodos diagnósticos. No D20, o diagnóstico baseado na vascularização do CL mostrou alta sensibilidade (100%) e apenas moderada especificidade (53,3%). Nesse mesmo dia, o diagnóstico sorológico não apresentou concordância (k=-0,08, P<0,46) com o padrão-ouro, além de baixa sensibilidade (6,3%). No entanto, a sensibilidade do exame sorológico aumentou drasticamente (6,3 para 100%) do D20 para o D25, contribuindo para detectar falsos negativos diagnosticados pela ultrassonografia, melhorando a acurácia (90 para 96,7%).

ABSTRACT The study evaluated sonographic and serologic exams performed for early (20 to 30d) diagnosis of pregnancy. One hundred-twenty (n= 120) bovine recipients were synchronized (estrous=D0) and timed embryo transferred (TET, D7) with fresh in vitro produced embryos. In the first trial (n= 46), diagnosis of pregnancy was performed on day 20 (D20) by detecting CL blood flow (BF) and by Pregnancy-Associated Glycoproteins (PAGs) serology. In the second trial (n= 30), pregnancy diagnosis was performed on D25 by ultrasound visualization of uterine contents and by PAGs serology. In the last trial, PAG’s serology was performed on D30. Ultrasonographic detection of the uterine contents and embryo viability performed on D30 (DG30) was considered the gold standard. The PROC FREQ procedure was used to test the agreement between diagnostic methods. On D20, the Doppler ultrasonography of the CL had showed high sensitivity (100%), but only moderate specificity (53.3%). On the same day, serologic diagnostic had no agreement (k= -0.08, P< 0.46) with the gold standard, with very low sensitivity (6.3%). However, the sensitivity of the serologic exam increased dramatically (from 6.3 to 100%) from D20 to D25, and it contributed to detect false negatives from the ultrasound diagnosis, improving the overall accuracy from 90% to 96.7%.

O dispositivo de liberação de progesterona (DLP) é muito importante em protocolos de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Representa cerca de 43% dos custos e é objeto de estudos sobre a eficiência da sua reutilização. No entanto, perfis de liberação de progesterona (P4) em animais com diferentes concentrações endógenas desse esteroide não são claramente descritos. Este estudo teve como objetivo avaliar a concentração sérica de P4 em fêmeas com diferentes situações de atividade luteal, tratadas com DLP novo (1g de P4) por 8 dias. Trinta novilhas mestiças cíclicas foram divididas em três grupos: em G1 e G2, o DLP foi inserido (D0) sete dias após a ovulação induzida. Adicionalmente, 0,15mg de D-cloprostenol foi administrado três dias depois para promover a luteólise em G2. Para G3, o corpo lúteo foi lisado antes da inserção do DLP para que a P4 exógena fosse a única fonte desse hormônio. O sangue foi coletado no D0, D3, D5 e D8, e a P4 avaliada por RIA. Médias de P4 foram comparadas entre os grupos em cada dia e dentro do grupo, entre os dias, utilizando o teste Tukey. Antes da inserção do implante (D0), os níveis de P4 foram, nos grupos, semelhantes em G1 e G2, e superiores a G3 (5,3±3,1a e 5,3±1,4avs 0,6±0.3bng/mL, respectivamente-P<0,05). No D3, ocorreu o mesmo perfil (5,7±2,6a e 5,4±2,0a e 3,6±0.8bng/mL, respectivamente para G1 e G2 vs G3, P<0,05). Trinta e seis horas (D5) após a PGF, a P4 no G2 caiu para níveis semelhantes aos do grupo G3 e ambos diferiram (P<0,05) de G1 (3,3±1,6b vs 2,4±0,9b e 2,1±0.7bng/mL). Essa diferença se manteve (P<0,05) em D8 (3,1±1,3a, 1,8±0,8b e 1,6±0.6b ng/mL). O aumento da P4 após a inserção (D3 - D0) foi maior (P<0,05) em G3 que em G1 e G2 (2,8±0,9a vs 0,4±1,8b e 0,2±1.4bng/mL). Os animais com maior P4 endógena levam a menor liberação de P4 exógena a partir do DLP. Portanto, os níveis remanescentes de P4 no DLP após o uso dependem da concentração endógena de P4 do animal e possíveis alterações durante a permanência.

The progesterone (P4) device is a very important step in the ovulation control in Timed Artificial Insemination (TAI) protocols. It represents about 43% of the hormone costs, thus it has been the subject of several studies on efficiency of the reused device as an alternative to reduce TAI costs. However, to our knowledge, profiles for P4 release in animals with different endogenous concentrations of P4 are not clearly described. This study aimed to evaluate serum concentration of P4 in females with different ovarian conditions - related to luteal activity - and treated with a new intravaginal device (1g of P4) for 8 days. Thirty normally cyclic crossbred heifers were divided into three groups: for G1 and G2, P4 device was inserted (D0) seven days after ovulation (7 day old CL). Additional PGF (0.15 mg of D-cloprostenol) was given three days later to promote luteolysis in the G2 group. For G3, CL was killed before P4 insertion and the exogenous progesterone was the only source of this hormone. Blood samples were collected on D0, D3, D5 and D8 and P4 concentration was measured by radioimmunoassay (RIA). Means for P4 concentration were compared among groups in each day and within the group among days using the Tukey test. Before P4 device insertion (D0), P4 levels were higher (P<0.05) in G1 and G2 when compared to G3 (5.3±3.1 and 5.3±1.4 vs. 0.6±0.3ng/mL, respectively). Three days later (D3), the same pattern was observed (5.7±2.6 and 5.4±2.0 and 3.6±0.8ng/mL, respectively for G1 and G2 vs. G3, P<0.05). Thirty-six hours (D5) after PGF injection (G2), P4 in G2 dropped to levels similar to the G3 group and both differed (P<0.05) from G1 (3.3±1.6 vs. 2.4±0.9 and 2.1±0.7ng/mL, G1 vs. G2 and G3, respectively). There were no differences (P>0.05) among groups on D8 (3.1±1.3, 1.8±0.8 and 1.6±0.6ng/mL, respectively, for G1, G2 and G3). Progesterone increase after P4 insertion (D3 - D0) was higher (P<0.05) in G3 compared to G1 and G2 (2.8±0.9 vs. 0.4±1.8 and 0.2±1.4ng/mL, respectively). The interpretation was that animals with higher endogenous P4 promote less release of the exogenous P4 from the device.Therefore, the remaining P4 levels from used progesterone devices depend on the physiological condition of the animal at the time of insertion and possible changes during the treatment.

Objetivou-se avaliar a superovulação (SOV) de vacas zebuínas, utilizando protocolo convencional ou protocolo com número menor de aplicações e similar dosagem (dose split). Utilizaram-se 16 fêmeas (total 32 SOV), com idade entre 17-42 meses e escore de condição corporal 2,5-4 (escala de 1-5), em delineamento tipo cross-over. No início do tratamento (D0), os animais receberam um dispositivo de progesterona e 2mg de benzoato de estradiol. As fêmeas do grupo convencional receberam 250UI de FSH/LH divididas em oito doses decrescentes administradas em intervalos de 12h (FSH/LH no D4, D5, D6 e D7 no período da manhã e tarde, nas respectivas dosagens: 50,0 UI; 37,5 UI; 25,0 UI; 12,5 UI). No D7 pela manhã, as fêmeas foram tratadas com 150μg de D+cloprostenol, e a remoção da progesterona foi realizada no D7 à tarde. As fêmeas do grupo split também receberam 250 UI de FSH/LH. No D4 de manhã, administraram-se 62,5 UI de FSH/LH via IM e 125 UI por via SC. Quarenta e oito horas após (D6) administraram-se 62,5 UI via SC e na manhã do D7 foi removida a progesterona e aplicaram-se 150μg de D+cloprostenol. As fêmeas de ambos os grupos receberam 50μg de análogo de GnRH no D8 pela manhã e foram inseminadas 12 e 24 horas após. No D15 realizou-se a colheita dos embriões em ambos os tratamentos. Avaliou-se a resposta superovulatória pela contagem do número de folículos e CLs de cada ovário, com auxílio de ultrassom. Todas as variáveis foram submetidas ao teste T de Student para amostras pareadas. Houve diferença (P<0,05) na quantidade de folículos acima de 8mm no D8 (9,06±4,54 e 5,50±4,59); número de CLs no dia da colheita (8,12± 3,26 e 4,69±3,46), número de embriões totais (6,69±3,05 e 3,37±2,50) e de embriões viáveis (5,25±2,29 e 2,37±1,78) nas vacas do grupo convencional em relação às do split, respectivamente. Conclui-se que o protocolo split tem pior resposta superovulatória e de produção in vivo de embriões, em vacas zebuínas, quando comparado ao protocolo convencional.

The aim of this study was to evaluate the superovulation (SOV) response of zebu cows, using conventional protocol or other protocol with similar dose but smaller number of applications (split dose). 16 females (32 SOV), aged 17-42 months, and body condition score of 2.5-4 (1-5 scale) were used in randomized cross-over. At the start of treatment (D0), the animals received progesterone device and 2mg of estradiol benzoate. The females from the conventional group received 250 IU of FSH/LH divided into eight decreasing doses administered at intervals of 12 hours (FSH/LH in D4, D5, D6 and D7, with their respective strengths: 50.0 IU, 37.5 IU, 25.0 IU, 12.5 IU). In D7, the females were treated with 150μg of D+cloprostenol, and the removal of progesterone device was held in the afternoon. The females from the split group also received 250 IU of FSH/LH. In the morning D4 was administered in 62.5 IU FSH/LH IM and 125 IU subcutaneously. Forty eight hours later (D6) 62.5 IU was administered subcutaneously in the morning and on D7, the progesterone device was removed and 150 μg of D+cloprostenol was applied. The females in both groups were given 50 μg of GnRH in the morning and on D8 were inseminated after 12 and 24 hours. On D15 the embryo collection was performed in both treatments. The evaluation of superovulatory response was done by counting the number of follicles and corpus luteum (CL) in each ovary, with the aid of ultrasound. The variables were assessed by Student's t test for paired samples. There were differences (P<0.05) in the number of follicles over 8mm in D8 (9.06±4.54 and 5.50±4.59); in the amount of CL at the time of collection (8.12±3.26 and 4.69±3.46), total number of embryos (6.69±3.05 and 3.37±2.50) and viable embryos (5.25±2.29 and 2.37±1.78) for cows in the conventional group compared to the split group, respectively. It is concluded that the split protocol has worse superovulatory response and in vivo production of embryos in zebu cows compared with the conventional protocol.

The aim of this study was to compare the reproductive efficiency in dairy cows with retained placenta (RP), treated with Florfenicol associated or not with Cloprostenol. One hundred and eight cows with RP from dairy herds in southern Minas Gerais state and northern São Paulo state, were included for this purpose. The experiment was designed in factorial 2X2 . The four treatments encompassed two levels of each factor : 1 ) Florfenicol - 4 0mg/kg ( IM) divided in two injections or 40mg / kg ( SC) in one injection after calving; 2) Cloprostenol (0.530mg) - two injections associated with florfenicol treatment or without cloprostenol. The analysis of discrete variables used the Kruskal - Wallis (fou r groups) or Wilcoxon (two groups) statistic to compare groups. The Student "T" test was used to compare means of continuous variables. The overall occurrence of RP was 20.7%. The florfenicol groups had no effects on postpartum uterine health or subsequent reproductive efficiency of the cows. The cloprostenol injections of RP hastened the uterine involution and decreased the occurrence of uterine infection, and increased the percentage of animals with corpus luteum between 25 and 40 days after parturition. The intervals from parturition to first artificial insemination (AI) and to conception, as well as the number of AI per conception were reduced in the cloprostenol treatment.

Avaliou-se a eficiência de um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF), para melhorar o desempenho reprodutivo de vacas Nelore primíparas, lactantes e acíclicas. Utilizaram-se 350 vacas com escore de condição corporal médio de 2,65±0,01 e média de dias pós-parto de 67,35±1,0 dias. A estação de monta (EM) foi de 180 dias. Os animais foram distribuídos em: G1(n=61) e G3(n=116) - vacas com presença de folículos ovarianos ≤8mm de diâmetro e sem corpo lúteo (CL); G2(n=57) e G4(n=116) - vacas com folículos ≥8mm e sem CL. As vacas do G1 e do G2 permaneceram em monta natural (MN) a partir do dia zero da EM. G3 e G4 foram tratados (dia zero) com 2mg de benzoato de estradiol (BE), IM, e dispositivo com 1,0g de P4 por oito dias. Retirou-se a P4, administraram-se 400UI de eCG e 75µg de cloprostenol, IM, 24h após, e 1mg BE, IM. A IATF foi realizada 51-54h após retirar P4. Aos cinco dias após término da IATF, as vacas do G3 e do G4 também foram mantidas em MN. Avaliou-se, por ultrassonografia, a presença de CL e realizou-se o diagnóstico de gestação, aos 45 e 210 dias após início da EM. Aos 45 dias, mais animais do G3, 42,2%, e do G4, 51,7%, estavam gestantes (P<0,05), em relação aos do G1, 0%, e do G2, 3,5%. A porcentagem de CL foi de 6,6%; 28,1%; 50,9%; 62,9% em G1, G2, G3 e G4, respectivamente. Aos 210 dias, 22,9% do G1; 45,6% do G2; 40,5% do G3 e 65,5% do G4 estavam gestantes. Os períodos de serviço foram: em G1, 134,00±11,70 dias; em G2, 119,65±8,27 dias; em G3, 79,91±5,38 dias; e em G4, 81,40±4,59 dias. A IATF foi eficiente para melhorar o desempenho reprodutivo de vacas Nelore primíparas lactantes acíclicas em relação ao manejo apenas da MN.

The aim of this experiment was to evaluate the efficiency of a fixed-time artificial insemination protocol to improve the reproductive performance of lactating primiparous acyclic Nelore cows. A total of 350 cows with average body condition score of 2.65±0.01 and average postpartum days of 67.35±1.0 were used. The breeding season (MS) was 180 days. The animals were distributed into G1 (n = 61) and G3 (n = 116) - cows with ovarian follicles ≤8mm in diameter and without corpus luteum (CL). G2 (n = 57) and G4 (n = 116) groups - cows with follicles ≥8mm and without CL. Cows in G1 and G2 remained in natural mating (NM) from day 0 of MS. G3 and G4 were treated (Day 0) with 2mg of oestradiol benzoate (EB), IM, and 1.0g P4 device for eight days. The withdrawal of P4 was administered with 400IU of eCG and cloprostenol 75μg, IM, after 24h, and 1mg BE, IM. The artificial insemination was performed at 51-54h after removing the P4 device. Five days after the end of the artificial insemination, cows from G3 and G4 were also held in MN. Ultrasonography was performed to evaluate the presence of CL and the pregnancy diagnosis at days 45 and 210 after the onset of MS. At 45 days more animals in G3, 42.2% and G4, 51.7% were pregnant (P <0.05) than in G1, 0% and G2, 3.5%. The CL percentage was 6.6%, 28.1%, 50.9%, 62.9% in G1, G2, G3 and G4, respectively. At 210 days 22.9% in G1, 45.6% in G2, 40.5% in G3 and 65.5% in G4 were pregnant. The service periods were: G1, 134.00±11.70 days; G2, 119.65±8.27 days, in G3, 79.91±5.38 days, and G4, 81.40±4.59 days. The fixed-time artificial insemination was efficient to improve the reproductive performance of primiparous lactating Nelore acyclic cows compared to animals that remained only with natural mating.

Avaliaram-se os efeitos da pré-estimulação ovariana com FSH e da imunização ativa contra inibina suína sobre o número e classificação morfológica de oócitos recuperados por punção folicular. Catorze vacas da raça Gir, pluríparas e não-lactantes, foram distribuídas em: TI - submetidas a pré-estimulação com 250 UI de FSH (n=4), TII - submetidas a imunização ativa contra inibina suína (n=4) e TIII - não tratadas (n=6; controle). Todos os animais tiveram seus folículos com diâmetro superior a três milímetros aspirados uma vez por semana, durante 10 semanas consecutivas. O TI apresentou aumento na população folicular total (P<0,05) e no número de folículos puncionados (P<0,001), porém a taxa de recuperação foi inferior à dos tratamentos II e III (68,8% vs. 78,4% e 76,3%, respectivamente; P<0,01). O TII não afetou as principais características ovarianas, exceto pelo aumento no número de folículos de tamanho médio (P<0,01). O TI produziu maior percentual de oócitos viáveis (77,2% vs. 69,8%; P<0,05) e de oócitos de Grau I (19,8% vs. 11,6%; P<0,001) do que o TIII. Os tratamentos I e II reduziram o percentual de oócitos degenerados (16,4% e 16,8% vs. 22,3%; P<0,05). A pré-estimulação ovariana com FSH demonstrou ser a alternativa mais consistente para aumentar a qualidade dos oócitos recuperados de vacas zebuínas.

The aim of this study was to evaluate the effects of ovarian pre-stimulation with FSH and active immunization against swine inhibin on the number and quality of oocytes recovered by follicular puncture. Pluriparous, non-lactating Gir cows (n=14) were distributed as: TI - pre-treatment with 250 IU of FSH (n=4), TII - active immunization against swine inhibin (n=4) and TIII - not treated (n=6; control group). All animals had their ovarian follicles above three millimeters in diameter aspirated once a week during 10 consecutive weeks. The TI presented an increase in total follicular population (P<0.05) and in the number of punctured follicles (P<0.001), but reduced recovery rate when compared to treatments II and III (68.8% vs. 78.4% and 76.3%, respectively; P<0.01). The TII did not affect the main ovarian characteristics, except for an increase in the number of medium follicles (P<0.01). Treatment I yielded a higher percentage of viable oocytes (77.2% vs. 69.8%; P<0.05) and oocytes Grade I (19.8% vs. 11.6%; P<0.001) than TIII. Both treatments I and II resulted in reduction of the percentage of degenerated oocytes (16.4% and 16.8% vs. 22.3%; P<0.05). Ovarian pre-stimulation with FSH was the most consistent treatment for increasing quality of oocytes recovered from Zebu cattle.

O presente estudo objetivou avaliar os efeitos da imunização ativa contra proteínas do líquido folicular suíno sobre a taxa de ovulação, duração do ciclo estral e concentração plasmática de progesterona em vacas e novilhas da raça Limousin. Realizaram-se duas imunizações com 15 dias de intervalo, aplicando-se um imunógeno composto do conteúdo protéico de 25ml de fluido folicular suíno adicionados de 1ml de gel de hidróxido de alumínio, via subcutânea. O número de ovulações foi mensurado por palpação retal e ultra-sonografia sete a nove dias após cada período de estro. Após a última imunização, os animais apresentaram maior incidência de ovulações duplas (41,7%). As médias de ovulações pré e pós-imunização foram 1,00+0,00 e 1,40+0,31 ovulações/ciclo, respectivamente (P<0,01;chi2). A imunização foi efetiva em aumentar o número de ovulações. Não foram observadas diferenças na duração do ciclo estral e na concentração de progesterona nos diferentes dias do ciclo. A manipulação das ações fisiológicas da inibina pode ser utilizada como alternativa para indução de ovulações múltiplas em bovinos.

This study aimed to evaluate the effects of active immunization against swine follicular liquid in Limousin cows and heifers, based on progesterone plasma levels, estrous cycle length and ovulation rate. Two immunization procedures were performed with 15 days interval, administering an immunogenic substance containing the proteic content of 25ml of swine follicular fluid, plus 1ml aluminum hydroxide gel, subcutaneous. The ovulation was measured by rectal palpation and ultra-sonographic evaluation, seven to nine days after each estrus period. Results show that after the last immunization, the animals presented higher double ovulation incidence (41.7%). The average ovulation before and after immunization were 1.00±0.00 and 1.40±0.31 ovulations/cycle, respectively (P<0.01; chi2). The immunization method used was effective to stimulate a higher ovulation number. No differences on mean estrous cycle length and progesterone levels were observed. Physiological inhibin action may be an alternative method to induce multiple ovulations of bovines.

O efeito da interrupção da gestação sobre a fertilidade foi avaliada em 50 novilhas da raça Holandesa, gestantes de fetos do sexo masculino entre 55 e 90 dias de idade. O aborto foi induzido pela administração de cloprostenol sódico, após o diagnóstico do sexo fetal. Os animais foram inseminados no segundo estro normal após o aborto. A interrupção da gestação ocorreu em 86% dos animais tratados e a via de administração, intramuscular ou intravulvar, não afetou a taxa de aborto. Os intervalos do aborto à primeira inseminação e do aborto à concepção foram de 38,94± 4,96 e 47,32± 15,89 dias, respectivamente. Não houve diferença no número médio de serviços por concepção pré e pós-interrupção da gestação (1,22 vs. 1,34; P>0,05). Conclui-se que a indução do aborto no terço inicial da gestação em novilhas não compromete a fertilidade dos animais.

The effect of interruption of pregnancy on fertility was evaluated in 50 Holstein heifers, carrying male fetuses ranging from 55 to 90 days post conception. Abortion was induced by administration of sodic cloprostenol after fetal gender diagnosis. Heifers were inseminated on the second normal estrus after abortion. The interruption of gestation was 86% in treated animals, and route of administration, IM ou IV (intra-vulvar), did not affect the rate of abortion. The abortion to first insemination and abortion to conception intervals were 38.94± 4.96 and 47.32± 15.89 days, respectively. No difference on the number of inseminations per conception before or after the interruption of pregnancy (1.22 vs. 1.34; P>0.05) was observed. It was conclude that abortion induction in the first third of pregnancy did not affect heifer fertility.

O presente trabalho foi conduzido no sentido de classificar, quanto a facilidade, inovulações não cirúrgicas, e correlacionar os níveis de classificação com a taxa de gestação das receptoras. Foram usadas 23 vacas e novilhas da raça Limousin como doadoras e 172 novilhas mestiças como receptoras. A classificação foi feita em três níveis, considerando-se a duração, a facilidade de transposição cervical e a manipulação uterina e o local de deposição do embrião. Os resultados mostram que as receptoras que tiveram as inovulações classificadas como "boas" apresentaram melhor taxa de gestação (59%) que aquelas que tiveram seu procedimento classificado como "ruim" (31%). Conclui-se que a dificuldade em se transferir o embrião pelo método não cirúrgico pode afetar a taxa de gestação das receptoras.

This work was developed to classify the feasibility of non-surgical inovulations and to establish the relationship between that classification and the gestation rate of the recipients. Twenty three heifers and cows of Limousin breed were used as donors and 172 crossbreed heifers were used as recipients. Three classification levels were determined, according to the time of procedure, ease of cervix transposition and uterine manipulation facility and the site of embryo deposition. The recipients that have their inovulations classified as "good" showed better gestation rate (59%) than the ones classified as "poor" (31%). It is concluded that the difficulty on embryo inovulation by non-surgical method can decrease the pregnancy rate of recipients.