RESUMO: Duponchelia fovealis (ZELLER, 1847) é uma nova praga do morangueiro em todo o mundo. Visando desenvolver alternativas para seu manejo, objetivou-se avaliar a toxicidade letal e a ação inibidora do desenvolvimento de formulações preparadas a partir de extratos etanólicos de sementes de espécies pré-selecionadas de Annona (Annona mucosa Jacq., Annona muricata L. e Annona sylvatica A. St.-Hil.), ricos em acetogeninas, em comparação com um bioinseticida à base de limonoides [Azamax® 1,2 EC (azadiractina + 3-tigloil-azadiractol), controle positivo] sobre lagartas de D. fovealis. Emulsões aquosas preparadas a partir de extratos etanólicos de sementes de A. mucosa e de A. sylvatica e um bioinseticida à base de limonóide apresentaram baixa toxicidade letal para larvas de D. fovealis; no entanto, eles causaram uma inibição pronunciada de seu desenvolvimento larval. Assim, os efeitos combinados de toxicidade letal e subletal de formulações ricas em acetogeninas e do bioinseticida comercial à base de limonoides podem oferecer um caminho para novas estratégias de controle de D. fovealis em cultivos de morango, especialmente em sistemas de produção de base orgânica.

ABSTRACT: Duponchelia fovealis (Zeller, 1847) is a new pest of strawberry crops worldwide. To develop alternative strategies for its management, we assessed the lethal toxicity and growth inhibitory action of formulations prepared from ethanolic seed extracts of pre-selected species of Annona (Annona mucosa Jacq., Annona muricata L., and Annona sylvatica A. St.-Hil.), which were previously characterized by their high content of annonaceous acetogenins. In addition, the extracts were compared to a limonoid-based bioinsecticide [Azamax® 1.2 EC (azadirachtin + 3-tigloil-azadiractol), positive control] on D. fovealis larvae. Aqueous emulsions prepared from ethanolic seed extracts of A. mucosa and A. sylvatica and a limonoid-based bioinsecticide had low lethal toxicity to D. fovealis larvae; nevertheless, they caused a pronounced inhibition of their larval development. Thus, the combined effects of lethal and sublethal toxicity of acetogenin-rich formulations and the limonoid-based commercial bioinsecticide may offer a route to new control strategies of D. fovealis in strawberry crops, especially in organic-based production systems.

RESUMO O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito in vitro de antissépticos e desinfetantes contra a Corynebacterium pseudotuberculosis e descrever a curva de crescimento deste micro-organismo em caldo de infusão de cérebro e coração adicionado de 0,1% de Tween 80 (BHI + T), ao longo de 48 horas. Foram avaliados tintura de iodo a 10%, hipoclorito de sódio a 2,5%, permanganato de potássio a 5%, sabonete líquido antisséptico Aseptol® e álcool etílico absoluto (99,8%), por meio da metodologia da disco-difusão. Um swab estéril foi imerso na suspensão bacteriana produzida e semeado em placa de ágar Mueller-Hinton. Discos estéreis foram embebidos em cada solução a ser testada e distribuídos na superfície do ágar. Os resultados foram obtidos de acordo com o diâmetro do halo produzido ao redor dos discos. Para obtenção da curva de crescimento, colônias isoladas do micro-organismo foram inoculadas em frasco contendo BHI + T. A cada quatro horas, 2 mL eram retirados para medição da massa celular em espectrofotômetro e 1 mL para realização das diluições seriadas, plaqueamento em ágar sangue e contagem de células viáveis. Observou-se que, para a obtenção de uma concentração máxima de C. pseudotuberculosis, próxima a 1.200 x 105 células viáveis/mL, deve-se manter o inóculo sob incubação adequada por um período de 28 a 40 horas. Quanto à prova de sensibilidade, verificou-se que a tintura de iodo a 10%, seguida pelo hipoclorito de sódio a 2,5% e permanganato de potássio a 5%, foram os antissépticos e desinfetantes com maior poder bactericida in vitro contra a C. pseudotuberculosis.

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the in vitro effect of antiseptics and disinfectants against Corynebacterium pseudotuberculosis, and to define the growth curve of this microrganism inoculated in brain heart infusion broth plus 0.1% of Tween 80 (BHI + T), for 48 hours incubation. For the susceptibility test, evaluations were made using 10% iodine, 2.5% sodium hypochlorite, 5% potassium permanganate, Aseptol® liquid soap, and absolute ethyl alcohol (99.8%), by way of the disc-diffusion method. A sterile swab was immersed in a bacterial suspension and plated in Mueller-Hinton agar. Sterile discs were immersed in each solution to be tested and distributed on the agar surface. The results were obtained according to the inhibition circle diameter formed around the disc. For the growth curve determination, colonies were inoculated in a bottle containing BHI + T. Every 4 hours, 2 mL was withdrawn to evaluate the cell mass in a spectrophotometer, and 1 mL was taken to perform serial dilutions, blood agar base plating and counting of viable cells. It was observed that in order to reach the maximum concentration of C. pseudotuberculosis, close to 1,200 x 105 viable cells/mL, the inoculum must be maintained at appropriate incubation for a period of 28-40 hours. The sensibility test indicated

O presente trabalho objetivou estudar os fungos endofíticos em acículas de árvores jovens de Pinus taeda L. e avaliar o efeito da posição de coleta na árvore. As amostras foram coletadas em duas alturas (30-50 cm e 100-130 cm acima do solo) e nas quatro posições cardeais (norte, sul, leste e oeste), em plantas com 18 meses de idade, localizadas em Colombo, PR, Brasil. As acículas foram submetidas a assepsia e fragmentos com 10 mm de comprimento foram plaqueados em meio BDA e incubados a 28 °C, sob fotofase de 12 h, por 15 dias. Para a identificação, as estruturas reprodutivas dos fungos foram produzidas pelo método do microcultivo. Foram isolados e identificados dezessete gêneros: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Colletotrichum, Coniothyrium, Diplodia, Drechslera, Hansfordia, Monocillium, Nodulisporium, Panidio, Papulaspora, Pestalotiopsis, Phialophora, Pithomyces, Rhizoctonia e Xylaria Alguns morfotipos sem identificação foram Mycelia sterilia e fungos demaciáceos. O número de isolados da altura 30-50 cm foi significativamente maior que na outra altura. Não foi observada diferença significativa no número de isolados entre as posições cardeais de uma mesma altura. Diferenças significativas foram observadas entre os gêneros isolados e Xylaria foi o gênero mais frequente.

The present work aimed to study the endophytic fungi in Pinus taeda needles and to evaluate the effect of sample points in the tree. Samples were collectd in two different heights (30-50 cm and 100-130 cm over ground) and cardinal positions (North, South, East and West) in plants with 18 months old, located at Colombo, PR, Brazil. The needles were sucessively washed in sterile destilled water, 70 % ethanol, NaHClO 3 %, 70 % ethanol and sterile destilled water. Needle fragments of 10 mm of lenth were plated in PDA medium, incubated at 28 °C, fotophase 12h to 15 days. The reproductive structures of fungi were produced by microculture technique. Seventeen genera were identified: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Colletotrichum, Coniothyrium, Diplodia, Drechslera, Hansfordia, Monocillium, Nodulisporium, Panidio, Papulaspora, Pestalotiopsis, Phialophora, Pithomyces, Rhizoctonia and Xylaria. Some non identified morphotypes were Mycelia sterilia and dematiaceous fungi. The number of isolates from the 30-50 cm height was significantly higher than the other. No differences were observed on number of isolates among cardinal positions at the same height. It was observed significant differences were observed among the isolated genera and Xylaria was the most frequent genus.

Descreve-se um procedimento rápido para extração de DNA genômico de isolados de Staphylococcus aureus capaz de produzir DNA estafilocócico em qualidade e quantidade suficiente para a amplificação de genes que codificam enterotoxinas estafilocócicas (A - E) e para TSST-1 e restrição enzimática (HaeIII) de isolados ambientais. O método proposto foi capaz de detectar esses genes em um produto de extração contendo tanto quanto 10(5) células, e reações positivas de PCR foram obtidas de aproximadamente 10pg de DNA.

This study describes a rapid procedure for the isolation of genomic DNA from Staphylococcus aureus that yielded a good amount of high quality DNA for the amplification of staphylococcal enterotoxins genes (A, B, C, D, and E) and the TSST-1 gene as well as enzymatic restriction (HaeIII) from environmental isolates. With this method, it was possible to detect these genes in a sample containing as little as 10(5) cells with positive PCR reactions obtained from approximately 10pg of DNA in a final reaction volume of 25µl.

RESUMO Durante um período de 2 anos (20032004), 132 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de leite cru foram coletadas de diferentes regiões de Piracicaba, no Estado de São Paulo. Foi investigada a presença dos genes de enterotoxinas (ent) e genes da Toxina-1 da Síndrome do Choque Tóxico (tst). A reação da polimerase em cadeia (PCR) foi executada usando 6 pares de oligonucleotídeos específicos para cada gene em questão. Noventa e quatro isolados (68,18%) se mostraram positivos para a presença de um (47 isolados) ou mais genes (43 isolados). A combinação da presença de entA e tst mostrou alta prevalência (33 isolados). Houve boa correlação entre a presença do gene e a produção/detecção da toxina, feita pelo teste da sensibilidade ótima em placas (OSP), que foi observada quando 44,44% dos isolados mostraramse positivos para a produção de toxina.

ABSTRACT During a 2-year period (2003-2004), 132 strains of Staphylococcusaureus isolated from crude milk (without thermal treatment) collected in different places in Piracicaba, São Paulo State, Brazil, were investigated for the presence of genes for enterotoxins (ent) and toxic shock syndrome toxin-1 (tst). Polymerase-chain reaction (PCR) was performed by using 6 pairs of relevant oligonucleotide primers. Ninety isolates (68.18%) were positive for (47 strains) or 2 (43 strains) toxin genes. The combination of entA and tst showed the highest prevalence (33 strains).The good correlation between PCR results and toxin protein detection and identification by optimum-sensitivity-plate (OSP) test was observed when 44.45% of strains showed positive for toxin production.