Os linfomas extralinfonodais representam aproximadamente 1/3 de todos os linfomas não Hodgkin (LNH) e, embora possam ter início em qualquer tecido, mais frequentemente acometem o trato gastrointestinal, sendo o estômago o órgão responsável pela grande maioria dos casos. Os linfomas primários gástricos são comumente LNH, sendo representados em mais de 95% dos casos pelo linfoma difuso de grandes células B e pelo linfoma MALT (mucosa associated lymphoid tissue). De evolução indolente, o linfoma MALT destaca-se por ser um modelo de câncer secundário à estimulação antigênica crônica exercida por uma bactéria denominada Helicobacter pylori (HP). No outro polo, situa-se o linfoma difuso de células B (LDGCB), que, de patogênese duvidosa, pode tratar-se de uma transformação de LNH MALT ou ainda se caracterizar por um linfoma "de novo". Neste estudo, revisamos a literatura, enfatizando aspectos importantes à prática clínica destes linfomas.

Extranodal lymphomas account for about 30% of all non-Hodgkin lymphomas (NHL), and although they can originate in any tissue, the gastrointestinal tract is the most commonly affected structure with the stomach being the most common subtype. Diffuse Large B cell lymphoma (DLBCL) and MALT (mucosa associated lymphoid tissue) lymphoma account for more than 95% of the cases of gastric lymphoma. The indolent development of MALT lymphoma stands out as it is a type of cancer subject to chronic antigen stimulation by the Helicobacter pylori bacteria. Conversely, diffuse large B cell lymphomas, whose pathogenesis is uncertain, can be a transformation from MALT NHL or perhaps a new type of lymphoma. In this study we carried out a review of the literature, stressing the key aspects of these lymphomas in the clinical practice.

Pacientes idosos com linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) são frequentemente excluídos de estudos clínicos. A utilização de terapias curativas muitas vezes é impossibilitada em virtude das comorbidades apresentadas por esta população ao diagnóstico. Nós adotamos um protocolo alternativo de quimioterapia oral combinando um inibidor da topoisomerase II e dexametasona. Apresentamos os resultados parciais com este protocolo em três pacientes portadores de LDGCB com idade superior a 80 anos e comorbidades severas. Todos alcançaram remissão completa com baixa toxicidade. Esses resultados demonstram que protocolos curativos alternativos devem ser testados em pacientes idosos portadores LDGCB a despeito da presença de comorbidades severas.

A medicina transfusional tem como objetivo garantir a qualidade e quantidade do sangue, componentes e serviços oferecidos à comunidade, e, dentro desse contexto, a análise dos reagentes imuno-hematológicos é crítica para a realização dos testes pré-transfusionais e, consequentemente, uma transfusão segura. É responsabilidade do controle de qualidade o constante aperfeiçoamento de testes que analisam a qualidade dos reagentes e equipamentos utilizados. Esse trabalho tem por objetivo apresentar os resultados alcançados em dez anos de experiência do Departamento de Controle de Qualidade em Imuno-hematologia da Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. No período de janeiro de 1997 a dezembro de 2007 foram realizadas análises em 3.417 reagentes imuno-hematológicos por ocasião da aquisição do reagente e por solicitação de reavaliação (durante o uso). As análises incluíram desde a inspeção visual no recebimento a testes laboratoriais específicos para cada tipo de reagente. Dos 3.417 lotes analisados (média=310/ano, mediana=252/ano), 94 (2,7%) foram reprovados (média=8,54/ano, mediana=7,00 ± 7,79/ano). Uma vez aprovado pelo controle de qualidade à aquisição, nenhum reagente imunohematológico foi reprovado durante o uso desde 2004. Podemos concluir que, para implementação de um sistema de controle de qualidade de reagentes imuno-hematológicos, não é necessário uso de reagentes ou equipamentos altamente especializados, pois os mesmos são utilizados na rotina laboratorial, como também não envolvem alta complexidade na execução das análises. Podemos enfim considerar que a implementação do controle de qualidade em Imuno-hematologia contribui para o aumento da segurança transfusional e é factível de realização nos mais diferentes níveis de complexidade dos serviços hemoterápicos.

Transfusion medicine has the purpose of guaranteeing the quality and quantity of blood, blood derivatives and services offered to the community. Thus, the analysis of serological reagents is critical in pre-transfusion testing and, consequently, reliable transfusions. A constant improvement in the tests that analyze the quality of reagents and equipment utilized is the responsibility of quality control. This paper aims at presenting the results and experience achieved over 10 years in the Department of Quality Control in Immunohematology at Fundação Pró-Sangue / Hemocentro de São Paulo. In the period of January 1997 to December 2007 we carried out analyses of 3,417 serological reagents at acquisition and/or during their use. The analyses included from visual inspection to specific laboratory tests for each kind of reagent. Of the 3,417 lots analyzed (mean = 310/year, median = 252/year), 94 (2.7% - median=8.54/year) failed the tests. From 2004 to date, once the reagents were approved, none failed during use. The implementation of a quality control system with standardized techniques is important for the adequate utilization of serological reagents. This system accomplished by retroactive control of the reagents, contributed to the safety and reliability of results in immunohematology testing.

Vinte e dois pacientes consecutivos portadores de leucemia mielóide aguda (LMA) em primeira remissão completa (1ªRC) submetidos a transplante de células-tronco hematopoéticas autogênico (TCTH Auto) condicionados com bussulfano e melfalano (Bu/Mel) foram selecionados entre 1993 e 2006. A probabilidade de sobrevida global (SG) pelo método de Kaplan-Meier foi de 57,5% após 36 meses, com "plateau" aos 20 meses após o transplante. Fatores como sexo, classificação Franco-Americana-Britânica (FAB) da LMA, tratamento de indução, consolidação intensiva, remissão após o primeiro ciclo de indução e fonte de células não tiveram impacto na sobrevida. Pela análise citogenética, um paciente de mau prognóstico submetido ao procedimento, foi a óbito um ano após o transplante. Nove pacientes foram a óbito, oito por recidiva e um por hemorragia. Morte antes dos 100 dias ocorreu em dois pacientes, um por recidiva e outro por hemorragia decorrente da plaquetopenia refratária, relacionada ao procedimento. Concluímos que o regime de condicionamento Bu/Mel é opção válida ao uso de outros regimes de condicionamento, apresentando excelente taxa da sobrevida.

Twenty-two consecutive patients with acute myeloid leukemia in first complete remission submitted to autologous hematopoietic stem cells transplantation conditioned with busulfan and melphalan were evaluated between 1993 and 2006. The overall survival, according to the Kaplan-Meier curve, was 57.5% at 36 months, with a "plateau" at 20 months after transplant. Factors such as gender, French-American-British (FAB) classification of acute myeloid leukemia, induction therapy, intensive consolidation, remission after the first cycle of induction and source of cells had no impact on survival. One patient with poor prognosis before the procedure died a year after transplantation. Nine patients died, eight by relapse and one because of bleeding. Death before 100 days occurred for two patients, one due to relapse and the other bleeding caused by refractory thrombocytopenia related to the procedure. In conclusion, the conditioning regiment with busulfan and melphalan is a valid option compared to the other conditioning regimens, with an excellent overall survival.

A neoformação vascular constitui evento essencial para que ocorra o desenvolvimento humano. Nesta fase, o sistema vascular sofre expansão. Células endoteliais maduras (ECs) irão compor a parede dos vasos, enquanto células endoteliais oriundas da medula óssea (MO) migram para locais de neoformação vascular com subseqüente diferenciação em células endoteliais maduras. Processos fisiológicos e patológicos como câncer têm a angiogênese como importante componente. Estudos correlacionam a angiogênese com a agressividade tumoral em alguns tipos de tumores incluindo hematológicos, o que ressalta a importância da terapia antiangiogênica como alvo de pesquisas cada vez mais profundas. Neste artigo de revisão enfocamos o papel da angiogênese nas neoplasias hematológicas com ênfase em possíveis alvos terapêuticos.

Vascular neoformation is an essential event in the development of the human body. In this phase vascular networks undergo expansion. Mature endothelial cells constitute the structure of vessel walls so endothelial cells from bone marrow migrate to sites of vascular neoformation with subsequent differentiation as mature endothelial cells (endothelial progenitor cells). Physiopathological and pathological processes such as cancer use angiogenesis as an important component for growth. Studies correlate angiogenesis with aggressive tumors for some types of tumors, including hematological malignancies, thereby highlighting the importance of anti-angiogenic therapy.

A pesquisa de antígenos intracelulares por citometria de fluxo é essencial para o estudo imunofenotípico das doenças onco-hematológicas. A utilização de saponina para permeabilização celular tem se mostrado eficaz e de menor custo. Com suas propriedades detergentes, permeabiliza a membrana citoplasmática sem danificá-la ou alterar a expressão dos antígenos de membrana, permitindo a detecção simultânea de antígenos intracelulares e de superfície. O objetivo deste trabalho foi analisar a eficácia da técnica de permeabilização celular com a utilização de saponina como agente permeabilizante. Foram avaliadas 36 amostras de sangue periférico e de medula óssea enviadas ao Laboratório de Imunopatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para estudo imunofenotípico. Realizamos a técnica de imunofluorescência direta e utilizamos o programa CellQuest (Becton Dickinson, San Jose, CA) do citômetro de fluxo FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA) para aquisição e análise dos dados. Observamos excesso de perda celular quando utilizamos o tampão de lavagem estocado por período superior a sete dias, à temperatura de 2ºC a 8ºC, e perda mínima com tampão de lavagem recém-preparado ou congelado no momento do preparo e descongelado apenas no momento do uso. Para eliminar o excesso de perda celular realizamos análise sistemática das etapas da técnica, o que nos permitiu adequá-la e utilizá-la na rotina de nosso laboratório. Em país de recursos escassos padronizamos uma técnica viável para pesquisar antígenos intracelulares por citometria de fluxo, mais rápida, eficaz e com redução dos custos financeiros em 35%.

Intracellular antigen investigations by means of flow cytometry are essential for immune phenotypical studies of oncohematological diseases. The use of Saponin for cellular permeabilization has proved to be cost-effective. Due to its detergent properties, Saponin permeabilizes the cytoplasmatic membrane without harming it or altering membrane antigen expressions, thus allowing simultaneous detection of intracellular and surface antigens. The objective was to analyze the efficiency of the cell permeabilization technique using Saponin as a permeabilizing agent. Thirty-six samples of peripheral blood and bone marrow underwent an immune phenotypical study at the Immune Pathology Laboratory of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo. Direct immunofluorescence was accomplished using the CellQuest program (Becton Dickinson, San Jose, CA) of the FACSCalibur flow cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA) to acquire and analyze the data. Excessive cell loss was observed when using rinsing buffers stored for more than seven days at temperatures ranging from 2ºC to 8ºC. Minimal cell loss was found when rinsing buffers were used immediately after preparation or frozen at the time of preparation and thawed just before use. In order to eliminate excessive cell loss, a systematic analysis of the technique stages was carried out, allowing us to restructure the technique to our purposes and its use in our laboratory. In a country with scarce resources, a viable, faster, more cost-effective technique (35% reduction in cost) aimed at investigating intracellular antigens by flow cytometry has been standardized.

O linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) é uma entidade clínico-patológica heterogênea que corresponde de 30% a 35% dos casos de linfoma não-Hodgkin (LNH). É considerado como agressivo porque a sobrevida é curta na ausência de tratamento adequado. Desde 1993 o tratamento deste linfoma passou a ser direcionado pelo índice internacional de prognóstico (IPI) validado em vários estudos. Entretanto, diante das diferentes respostas à mesma terapêutica para pacientes de mesmo IPI houve necessidade de se instituírem novos marcadores de prognóstico para pacientes com LDGCB. Com os avanços do conhecimento biológico destes linfomas, outras variáveis começam a ser utilizadas na estratificação de risco destes linfomas. Nesta revisão abordamos os principais marcadores biológicos utilizados como fatores de prognóstico para o tratamento de pacientes com LDGCB.

Diffuse large B-cell lymphoma is a heterogeneous clinical pathological entity which accounts for about 30% to 35% of all non-Hodgkin's lymphoma cases. It is considered to be aggressive due to the patient's short survival time when incorrect treatment is provided. Since 1993, treatment has been carried out according to IPI, which has been validated in several studies. However, since there are different responses from patients with the same IPI submitted to similar therapies, new prognostic markers are needed for these patients. As the biological nature of such lymphomas is becoming better known, other variables are starting to be used in order to stratify risk. In this review we will approach the key biological markers used as prognostic factors to treat diffuse Large B-Cell Lymphoma patients.

O linfoma difuso de grandes células B (LDGCB) corresponde a 50% dos casos de linfoma não-Hodgkin (LNH). A partir de 1993, o tratamento destes pacientes passou a ser direcionado pelo Índice Internacional de Prognóstico (IPI) validado em vários estudos. Entretanto a aplicação do IPI ainda não foi avaliada em nossa população e em nossas condições socioeconômicas. Neste estudo avaliamos o impacto do IPI ajustado para a idade (IPIa) na remissão completa (RC), sobrevida global (SG) e sobrevida livre de doença (SLD) dos portadores de LDGCB com idade inferior a 60 anos, tratados no Serviço de Hematologia do HCFMUSP. Dos 111 pacientes avaliados, 60 foram classificados com IPIa de risco baixo e intermediário e 51 IPIa de risco intermediário alto e alto. Os pacientes de risco baixo e intermediário foram analisados em conjunto no grupo de baixo risco adaptado e os de risco intermediário alto e alto no grupo de alto risco adaptado. Verificamos que a SG e a SLD foram influenciadas pelo estádio clínico, DHL e o estado funcional dos pacientes. Recomendamos o uso sistemático do IPI no tratamento dos nossos pacientes com LDGCB em nossa instituição.

Diffuse Large B-Cell Lymphomas (DLBCL) correspond to 50% of non-Hodgkin's lymphomas. Since 1993 the treatment of these patients has been directed by the International Prognostic Index (IPI), validated in several studies. However, the use of the IPI has not been evaluated in our population and social-economical conditions. In this study, we evaluate the impact of the age-adapted IPI (aIPI) in the complete response, overall survival and disease-free survival in under 60-year-old DLBCL sufferers treated in the Hematology Service of HCFMUSP. Of the 111 evaluated patients, 60 were classified as aIPI low and intermediate risk and 51 as aIPI intermediate-high and high risk. The patients with low and intermediate risk were analyzed as a whole with adapted low risk and patients with intermediate-high and high risk with the adapted high risk. We verified that the overall survival and disease-free survival were influenced by the clinic stage, LDH value and patients performance status. We recommend the regular use of IPI in the treatment of the patients with DLBCL in our institution.

Entre outubro de 1997 e julho de 1999 pesquisou-se a refratariedade plaquetária em 15 pacientes na fase precoce do TMO alogênico e autoplástico, com idade variando de 1 a 66 anos no Hospital São Camilo. Para esta avaliação, foram utilizados os seguintes parâmetros: evolução clínica, cálculo corrigido do incremento plaquetário (CCI), teste de microlinfocitotoxicidade dependente de complemento (CDC) e ensaios plaquetários por aderência de células vermelhas em fase sólida (SPRCA). A refratariedade plaquetária foi definida como falha de resposta a uma transfusão de dois concentrados de plaquetas ABO compatíveis, quando o cálculo corrigido do incremento plaquetário (CCI) de uma hora pós-transfusional era inferior a 7,5 ou de 24 horas < 4,5. Apenas a análise do CCI de 24 horas mostrou significância estatística. A refratariedade plaquetária foi detectada em 80,0 % dos casos, tendo como causa principal os fatores não imunológicos, como: anfotericina 66,66%, doença veno-oclusiva hepática 53,33%, febre de origem indeterminada 40,0%, esplenomegalia epistaxe leve, febre, melena grave, hematêmese grave e infecção bacteriana 20,0%. Melena leve, enterorragia grave, epistaxe moderada e grave 13,33%, enquanto CIVD, enterorragia moderada e grave 6,66%. Os fatores imunológicos foram representados pela presença da reação aguda do enxerto contra hospedeiro (aGVHD) em 33,0% e infecção por citomegalovírus (CMV) em 13,33%, embora a detecção de auto-anticorpos tenha sido negativa. Conclui-se que a análise do CCI pós-transfusional de 24 horas mostrou ser um método de escolha para detecção da refratariedade e de útil aplicabilidade em pacientes trombocitopênicos refratários, em particular naqueles submetidos ao TMO.

From October 1997 to July 1999, platelet refractoriness was studied in 15 patients, aged from 1 to 66 years old, in the early stage of allogeneic and autologous BMT, carried out at the São Camilo Hospital. The following parameters were used for this analysis: daily clinical progress, 1- and 24 hour-post-transfusion platelet corrected count increment (CCI),complement-dependent microlymphocytotoxicity test (CDC) sensitized by human antiglobulin (AGH) and solid phase red blood cell adherence (SPRCA) platelet analysis. Platelet concentrated products were obtained from automated cell separator machines, filtered through retention filters of pre-storage leukocyte reduction and, subsequently, stored at room temperature for a maximum of 96 hours. Each platelet unit featured on average 0.51 x 10(4) leukocytes, with platelet cell counts of 3.58 x 10(11). The mean pH of each thrombocytapherese concentrate was 6.34 and was storage for 32 hours and 21 minutes. Platelets concentrates were transfused on a prophylactic basis, when the platelet counts were below 20 x 10(9) /L or above these values in cases of therapeutic intervention or bleeding. The platelet refractory potential was defined as the lack of response to a transfusion of two compatible ABO platelet concentrate products confirmed by the reduction in platelet CCI 1 hour after transfusion was less than 7.5 or 24 hours after transfusion was less than 4.5. Only the 24-hour CCI analysis showed statistically significance with the platelets refractoriness occurring in 80.0% of the cases, as a consequence of non-immune factors, such as, amphotericin 66.66%, veno-occlusive disease 53.33 %, undetermined fever 40.0%, splenomegaly, slight nose bleeds, fever, severe melene, severe hematemesis and bacterial infection, 20.0%. Slight melene, severe enterorrhagia and moderate and severe nose bleeds 13.33%, whereas CIVD, moderate and severe enterorrhagia were 6.66%. The presence of immune factors was detected by GVHD and CMV infections that were identified in 33.33% and 13.33% of the cases, respectively, although the detection of autoantibodies was negative. The conclusion is that the 24-hour post-transfusion CCI analysis has proven to be a predictor of platelet refractoriness and a useful test in refractory thrombocytopenic patients, mainly those undergoing BMT.

Oitenta pacientes consecutivos portadores de Leucemia Mielóide Aguda (LMA) submetidos a transplante de medula óssea alogênico (TMO alo) e autogênico (TMO auto), foram selecionados entre 1989 e 2001. Quarenta por cento dos mesmos estavam vivos ao final do estudo; no TMO alo 37,9% e no TMO auto 45,4%. Fatores como sexo, classificação Franco-Americano-Britânica de LMA, tratamento de indução, número de células infundidas e regime de condicionamentos não tiveram significância estatística na sobrevida. Pacientes portadores de LMA M1 a M4 e que foram submetidos à consolidação com altas doses de arabinosídeo tiveram melhor sobrevida (p= 0,0148). Pacientes em 1º remissão completa se beneficiaram com TMO alo e auto, com uma sobrevida de 52,6% e 69,2% respectivamente. A presença de doença enxerto contra o hospedeiro (DECH) aguda teve impacto na sobrevida dos pacientes quando se comparou ausência de DECH aguda, grau I/II com III/IV (p= 0,0285). Infecção foi a causa de óbito mais freqüente no TMO alo. No TMO auto, a recidiva foi a principal causa de óbito. Morte por toxicidade relacionada ao procedimento ocorreu em 38,9% dos pacientes que morreram no TMO alo e em 16,7% no TMO auto. Na análise univariada de Cox para fatores prognósticos, tiveram significância a fase da doença e a DECH aguda, que perderam significância na análise multivariada (p=0,069).

The patients records of eighty consecutive patients with acute myeloid leukemia (AML) submitted to allogeneic (allo BMT) and autologous (auto BMT) bone marrow transplantation (BMT) between 1989 and 2001 were assessed. Forty percent were alive in the end of the study; 37.9% of allogeneic patients and 45.4% of autologous. Factors such as gender, the French-American-British AML classification, induction treatment, number of infused cells and the conditioning regiment did not have any impact in survival. Patients with AML from M1 to M4, and who were consolidated with high doses of arabinoside had better a survival rate (p=0.0148). Patients in their first complete remission also had better survival both with allogeneic and autologous BMT, with respective survival rates of 52.6% and 69.2%. Acute graft-versus-host disease (GvHD) had an impact when it was compared the absence, grade I/II with III/IV giving a p-value of 0.0285. Infection was the most frequent cause of death in allogeneic BMT. In autologous BMT relapse was the principal cause of death. Toxicity related to the procedure occurred in 38.9% of patients who died in allogeneic BMT and 16.7% in autologous BMT. In univariant Cox analyses for prognostic factors, the disease status and acute GvHD were significant, but this significance was lost in the multiple variant analyses (p-value = 0.069).

Linfoma não-Hodgkin é uma das complicações oncológicas mais freqüentes em portadores da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS). Em outros países, após a introdução da terapia anti-retroviral de alta atividade (HAART), a queda na incidência dos linfomas agressivos sistêmicos ficou aquém das expectativas, embora a sobrevida destes pacientes tenha triplicado. No Brasil, pouco se conhece a respeito do comportamento clínico e da sobrevida dos pacientes com linfoma e AIDS na era pós-HAART. O objetivo deste estudo foi avaliar retrospectivamente 25 pacientes com linfoma e AIDS, tratados com a associação de quimioterapia e HAART. Em concordância com a literatura, a maior parte dos pacientes era do sexo masculino - 20 (80%), com mediana de idade de 39 anos. Houve predomínio do subtipo histológico Difuso de Grandes Células B - 13 (52%), de pacientes em estádios avançados - 15 (60%), com envolvimento extranodal - 22 (88%) e com sintomas B - 18 (72%). O diagnóstico prévio de AIDS observado em 14 (56%) foi superior em nossa casuística em relação ao descrito por outros autores. Cinqüenta e dois por cento dos pacientes obtiveram RC, com SLD e SG em três anos de 54% e 42%, respectivamente e mediana de SG de 15 meses. Toxicidade hematológica e infecções foram freqüentes, porém nenhum óbito foi relacionado à sua ocorrência. Concluímos que o tratamento combinado com quimioterapia e HAART é factível em pacientes brasileiros, podendo propiciar uma sobrevida global similar à descrita por alguns grupos internacionais, com um perfil aceitável de toxicidade.

Non-Hodgkin lymphoma is one of the most frequent oncological complications in patients with the Acquired Immune-Deficiency Syndrome (AIDS). In other countries, after the introduction of the Highly Active Antiretroviral Therapy (HAART), the drop in the incidence of systemic aggressive lymphomas was below expectations, although the survival of these patients rose. In Brazil, little is known about the clinical behavior and survival of the patients with lymphoma and AIDS in the post-HAART era. The aim of this study was to retrospectively evaluate 25 patients with lymphomas and AIDS, treated with the combination of chemotherapy and HAART. In agreement with the literature most of the patients were male (20 patients - 80%) with a median age of 39 years. We observed a predominance of the Diffuse Large B Cell Lymphoma subtype (13 patients - 52%), advanced stage (15 patients - 60%), with extra-nodal disease (22 patients - 88%) and B symptoms (18 patients - 72%). Previous AIDS diagnosis was present in 14 patients (56%), higher than that reported in other series. Fifty-two percent achieved CR, the estimated probability of overall survival and disease-free survival at 3 years were 54% e 42%, respectively. The median overall survival time was 15 months. Hematological toxicity and infections were frequently observed, but no toxicity-related deaths were seen. Therefore we conclude that the combined chemotherapy-HAART treatment is feasible in Brazilian patients and can provide similar overall survival than that described for some international groups, with an acceptable toxicity profile.

Dentre os métodos para a obtenção de hemocomponentes destaca-se o método do plasma rico em plaquetas (PRP) e o método da extração da camada leucoplaquetária (ECLP). Este estudo tem por objetivo comparar os métodos do PRP e da ECLP na produção de hemocomponentes. Foram processadas 88 bolsas de sangue total (ST) pelo método do PRP, 130 bolsas triplas pelo método da ECLP (ECLPT) e 215 bolsas coletadas em bolsas quádruplas pelo método da ECLP (ECLPQ) com o uso de extrator automático. Encontramos diferença estatisticamente significante na quantidade de Hb total /unidade entre ECLPT e ECLPQ (p=0,005) e entre ECLPT e PRP (p=0,007) no ST. Houve diferença estatisticamente entre ECLPT e ECLPQ (p<0,001) e entre ECLPQ e PRP (p<0,001) para a quantidade de leucócitos. No CH, encontramos diferença estatisticamente significante entre o método do PRP e ECLPT e ECLPQ hematócrito (p<0,001), recuperação de Hb (p<0,001), Hb total (p<0,001), leucócitos (p<0,001), depleção de leucócitos (p<0,001), quantidade de plaquetas (p<0,001) e depleção de plaquetas (p<0,001). Para o concentrado de plaquetas houve diferença estatisticamente significante entre PRP, ECLPT e ECLPQ para o volume, recuperação de plaquetas e depleção de leucócitos (p<0,001). A utilização do método da ECLP é vantajosa qualitativamente, pois os hemocomponentes obtidos apresentam menor quantidade de leucócitos e plasma. O método da ECLP com a utilização de bolsas quádruplas e a produção de CP a partir de uma unidade de CLP é de implantação viável e de fácil padronização, permitindo boa reprodutibilidade, bem como melhor aproveitamento de plasma e plaquetas.

The most commonly used methods for blood component processing are the "plasma rich in platelets method" (PRP), and the Buffy-coat extraction method (BC).The purpose of this study was to compare these two methods in the processing of blood components. Eighty-eight whole blood units (WB) were processed by the PRP method, 130 blood units were processed by the BC triple blood bag method (BCT) and 215 blood units were collected in quadruple blood bags by the BC method (BCQ) using an automatic extractor. A statistically significant difference was observed in the number in the total Hb per unit of WB between the BCT and BCQ methods (p=0.005) and between the BCT and PRP methods (p=0.007). There were also statistically significant differences between the BCT and BCQ methods (p<0.001) and between BCQ and PRP methods (p<0.001) in relation to leukocytes/mL. In the RBC concentrates, we found statistically significant differences between the PRP method and both the BCT and BCQ methods in respect to hematocrit levels, Hb recovery, total Hb, leukocytes, leukocyte depletion, platelets and platelet depletion (p<0.001 in all cases). We also found statistically significant differences between the PRP, BCT and BCQ methods for the volume, platelet recovery, and leukocyte depletion (p<0.001) in platelet concentrates. The use of the BC method is qualitatively advantageous as the blood components obtained present a lower quantity of leukocytes and plasma. The BC method with the use of quadruple blood bags for the production of PC from one BC unit is reliable, easy to standardize, allows good reproducibility, as well as better utilization of plasma and platelets.

Há na literatura vários estudos filogenéticos e de distribuição de genótipos do chamado "Vírus GB-C" ou da "Hepatite G", mais conhecido pela dupla sigla "GBV-C/HGV". Ocorre que, em sua grande maioria, estas pesquisas foram realizadas com amostras de grupos ligados epidemiologicamente e não com indivíduos representativos da população geral. O presente estudo é uma continuação do primeiro trabalho no Brasil feito com este tipo de amostragem. Trata-se de análise filogenética e distribuição genotípica do GBV-C/HGV a partir de amostras isoladas dentre mais de 1.000 indivíduos da cidade de São Paulo. Para tanto, um fragmento de 728 pares de base da região 5' não-codificadora (5´NCR) do genoma viral, de 24 amostras, foi sequenciado e submetido à analise filogenética. Foram identificados os genótipos 1, 2a e 2b nas respectivas freqüências: 8,3% (2/24), 50% (12/24) e 41,7% (10/24). Concluindo, São Paulo apresenta uma distribuição de genótipos semelhante à publicada para outros estados e regiões do Brasil, endossando a idéia de que os tipos 1 e 2 teriam vindo com os africanos e europeus, respectivamente, e portanto estariam na população do país desde a sua formação.

There has been several studies worldwide on phylogenetics and genotype distribution of the GB-virus C / Hepatitis G virus (GBV-C/HGV). However, in their great majority, those investigations were based on some epidemiologically linked group, rather than on a representative sampling of the general population. The present is a continuation of the first study in Brazil with such a population; it addresses the GBV-C/HGV phylogenetics and genotype distribution based on samples identified among more than 1,000 individuals of the city of São Paulo. For this purpose, a 728 bp fragment of the 5´non-coding region (5´NCR) of the viral genome, from 24 isolates, was sequenced and subjected to phylogenetic analysis. Genotypes 1, 2a and 2b were found at 8.3% (2/24), 50% (12/24) and 41.7% (10/24), respectively. In conclusion São Paulo displays a genotype distribution similar to the published data for other States and Regions of Brazil, endorsing the notion that types 1 and 2 would have entered the country with African and European people, respectively, since its earliest formation.

OBJECTIVE: In 1998, the Brazilian Ministry of Health made it mandatory for all blood banks in the country to screen donated blood for human immunodeficiency virus (HIV) concomitantly using two different enzyme immunoassay (EIA) tests. Concerned with the best use of available resources, our objective with this study was to evaluate the usefulness of conducting two EIA screening tests instead of just one. METHODS: We analyzed data from 1999 through 2001 obtained by testing 698 191 units of donated blood using two EIA HIV screening tests concomitantly at the Pro-Blood Foundation/Blood Center of São Paulo (Fundação Pró-Sangue/Hemocentro de São Paulo), which is a major blood center in the city of São Paulo, Brazil. All samples reactive in at least one of the two EIA tests were submitted for confirmation by a Western blot (WB) test, and the persons who had donated those samples were also asked to return and provide a follow-up sample. RESULTS: Out of the 698 191 blood units that were donated, 2 718 of them (0.4%) had to be discarded because they were reactive to at least one of the EIA tests. There were two WB-positive donation samples that were reactive in only one HIV EIA screening test. On their follow-up samples, both donors tested WB-negative. These cases were considered false positive results at screening. Of the 2 718 donors who were asked to return and provide a follow-up sample, 1 576 of them (58%) did so. From these 1 576 persons, we found that there were two individuals who had been reactive to only one of the two EIA screening tests and who had also been negative on the WB at screening but who were fully seroconverted on the follow-up sample. We thus estimated that, in comparison to the use of a single EIA screening test, the use of two EIA screening tests would detect only one extra sample out of 410 700 units of blood. CONCLUSIONS: Our data do not support the use of two different, concomitant EIA screening tests for HIV. The great majority of HIV-positive donors have already seroconverted and will be detected using only a single EIA screening test. Only persons who are going through the process of seroconversion may be missed by using a single EIA test and detected using two EIAs for screening. To screen out these individuals and decrease the residual risk of HIV transmission from the blood donated in our center, the use of other techniques, such as nucleic acid testing (NAT) or a p24 antigen assay, would be more effective.

OBJETIVO: En 1998, el Ministerio de Salud de Brasil decretó que todos los bancos de sangre en el país debían someter toda la sangre donada a un tamizaje para la detección del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) usando concomitantemente dos inmunoensayos enzimáticos (IEE) diferentes. Nuestro objetivo al realizar el presente estudio, resultado de un afán por sacar el máximo provecho a los recursos disponibles, ha sido evaluar la utilidad de hacer un tamizaje con dos IEE en lugar de uno solo. MÉTODOS: Analizamos datos de 1999-2001 obtenidos como resultado del tamizaje de 698 191 unidades de sangre donada mediante dos IEE aplicados concomitantemente en la Fundación Pro-Sangre del Centro de Sangre de São Paulo (Fundação Pró-Sangue/ Hemocentro de São Paulo), que es un centro hematológico importante en la ciudad de São Paulo, Brasil. Toda muestra que fue reactiva en por lo menos uno de los dos IEE fue sometida a un inmunoblot de Western (WB) a manera de confirmación, y a las personas que habían donado la sangre positiva también se les pidió que regresaran para proporcionar una muestra de seguimiento. RESULTADOS: De las 698 191 unidades de sangre que fueron donadas, hubo que descartar 2 718 (0,4%) porque mostraron reactividad a uno de los IEE o ambos. Dos de las muestras donadas que mostraron positividad en el WB fueron reactivas en solamente uno de los IEE de tamizaje. En lo que respecta a las muestras de seguimiento, ambos donantes tuvieron resultados negativos en el WB. Estos resultados se consideraron positivos falsos para fines del tamizaje. De los 2 718 donantes a quienes se les pidió que regresaran para proporcionar una muestra de seguimiento, 1 576 (58%) cumplieron. De estas 1 576 personas, dos habían mostrado reactividad a solamente uno de los IEE de tamizaje, con resultados negativos en el WB, pero habían mostrado una seroconversión completa en la muestra de seguimiento. Por consiguiente, nuestra conclusión es que el tamizaje con dos IEE, en comparación con uno solo, permitiría detectar solamente una muestra adicional de un total de 410 700 unidades de sangre. CONCLUSIONES: Nuestros datos no respaldan la conveniencia de usar concomitantemente dos IEE diferentes para el tamizaje del VIH. La gran mayoría de los donantes con positividad a VIH ya habrán tenido una seroconversión y se pueden detectar con un solo IEE. Solamente aquellas personas que están aún en proceso de seroconversión podrían no ser detectadas mediante un solo IEE, pero sí con dos. Para identificar a estas personas y reducir cualquier riesgo residual de transmitir el VIH por medio de la sangre donada en nuestro centro, sería más eficaz el uso de otras técnicas, tales como las pruebas a base de ácidos nucleicos o un ensayo a base de Agp24.