Resumen Contextualizar los laboratorios de química, relacionándolos con situaciones de la vida diaria y contenidos disciplinares, motiva a despertar vocaciones científicas. El objetivo del trabajo fue fomentar el interés por las ciencias exactas y el cuidado medioambiental, a través de la participación activa de los estudiantes en la reutilización del aceite vegetal como modelo de laboratorio en contexto. Durante los talleres se estudió el origen de los aceites vegetales, las implicancias sobre la salud de la reiterada reutilización del aceite vegetal, las posibles formas de transformación en nuevos productos, la transesterificación, y la manipulación de reactivos químicos. Los destinatarios fueron estudiantes del nivel medio de 6 instituciones diferentes de la provincia de Misiones (Argentina), ascendiendo a un total de 45 estudiantes de entre 17 a 21 años. Los talleres estuvieron a cargo de estudiantes, graduados y las directoras del proyecto. La metodología de la actividad consistió en una experiencia práctica y evaluación de la intervención. El empleo de un contexto socioambiental para la enseñanza de la química, generó concientización acerca de los cuidados del medioambiente; y nuevo conocimiento en relación con la química, al hacer uso de la reacción de transesterificación para la obtención de biodiesel.

Abstract Contextualizing chemistry laboratories, relating them to daily life situations and disciplinary contents, motivates to awaken scientific vocations. The objective of the work was to promote interest in exact sciences and environmental care, through the active participation of students in the reuse of vegetable oil as a laboratory model in context. The origin of vegetable oils, the health implications of the repeated reuse of vegetable oil, the possible forms of transformation into new products, transesterification, and the manipulation of chemical reagents were studied during the workshops. Recipients were high school students from 6 different institutions in the province of Misiones (Argentina), reaching a total of 45 students between 17 and 21 years old. Workshops were led by students, graduates and the directors of the project. The methodology of the activity consisted of a practical experience and evaluation of the intervention. The use of a socio-environmental context for the teaching of chemistry, generated awareness about environmental care; and new knowledge in relation to chemistry, by making use of the transesterification reaction to obtain biodiesel.

Resumen La patogenia del cáncer ha sido asociada con alteraciones genéticas y epigenéticas que pueden llevar a la inactivación o subexpresión de genes supresores de tumores, como el gen PTEN. Las alteraciones en las vías de señalización de PI3K/PTEN están relacionadas con anomalías asociadas a diabetes, síndrome metabólico, obesidad y enfermedades cardiovasculares. El objetivo del estudio fue evaluar, si la expresión alterada (subexpresión/sobreexpresión) del gen PTEN, la deleción de 32 pb y la metilación del promotor, se asocian con diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) y el desarrollo de cáncer. Las muestras de sangre periféricas se obtuvieron de un total de 70 pacientes de ambos sexos: 40 pacientes con DMT2 y 30 pacientes con DMT2 y cáncer (DMT2+C). En este trabajo novedoso, se reporta la sobreexpresión de PTEN en DMT2. Observamos que la expresión de PTEN es más alta en pacientes con DMT2 que en individuos sanos y marcadamente menor en pacientes con DMT2+C, en comparación con los pacientes diabéticos sin neoplasias. La hipermetilación del promotor de PTEN es más frecuente en pacientes con DMT2 y cancer. Las alteraciones genéticas y epigenéticas en el gen PTEN podría ser clave en la relación existente entre diabetes y el desarrollo de cancer. La expresión de PTEN puede ser un potencial biomarcador en el desarrollo cancer en pacientes con DMT2.

Abstract Cancer pathogenesis has been associated with genetic and epigenetic alterations that may lead to the inactivation or decrease of tumor-suppressor genes, such as the PTEN gene. In particular, alterations in the PI3K/PTEN signaling pathways are related to abnormalities associated with diabetes, metabolic syndrome, obesity and cardiovascular diseases. The aim of the study was to evaluate whether the expression levels of the PTEN gene, the 32-bp deletion in the PTEN gene, and the methylation in the PTEN promoter are associated with Type 2 Diabetes Mellitus(T2DM) and cancer development. Peripheral blood samples were obtained from a total of 70 patients of both sexes: 40 patients with T2DM and 30 patients with T2DM and cancer(T2DM+C). In this a novel report that assesses the upregulation of PTEN in T2DM, we observed that PTEN expression is higher in T2DM patients than in healthy individuals and markedly lower in T2DM patients with cancer than in T2DM patients without cancer. Hypermethylation of the PTEN promoter is more frequent in T2DM patients with cancer. Genetic and epigenetic alterations of the PTEN gene may be a key in the relationship between T2DM and cancer. PTEN expression may serve as a potential candidate biomarker for cancer development in T2DM patients.

RESUMEN El filtrado de secuencias es un paso esencial sin importar el tipo de tecnología aplicada para la secuenciación de un genoma, en el cual las lecturas de baja calidad o una parte son eliminadas. En un ensamblado la construcción de un genoma se realiza a partir de la unión de lecturas cortas en cóntigos. Algunos ensambladores miden la relación que existe entre secuencias de una longitud fija (k-mer) que puede verse afectada por la presencia de secuencias de baja calidad. Un enfoque común para evaluar los ensamblados se basa en el análisis del número de cóntigos, la longitud del cóntigo más largo y el valor del N50, definido como la longitud del cóntigo que representa el 50 % de la longitud del conjunto. En este contexto, el presente estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto del uso de lecturas crudas y filtradas en los valores de los parámetros de calidad obtenidos en el ensamblado del genoma de Bacillus altitudinis 19RS3 aislada de Ilex paraguariensis. Se realizó el análisis de calidad de ambos archivos de partida con el software FastqC y se filtraron las lecturas con el softwareTrimmomatic. Para el ensamblado se utilizó el software SPAdes y para su evaluación la herramienta QUAST. El mejor ensamblado para B. altitudinis 19RS3 se obtuvo a partir de las lecturas filtradas con el valor de k-mer 79, que generó 16 cóntigos mayores a 500 pb con un N50 de 931 914 pb y el cóntigo más largo de 966 271 pb.

ABSTRACT Sequence filtering is an essential step regardless of the type of technology applied for sequencing a genome, in which low-quality readings or a portion are eliminated. In an assembly, the construction of a genome is carried out from the union of short reads in contigs. Some assemblers measure the relationship between sequences of a fixed length (k-mer) that can be affected by the presence of low-quality sequences. A common approach to evaluating assemblies is based on the analysis of the number of contigs, the length of the longest contig, and the value of N50 defined as the length of the contig representing 50 % of the length of the assembly. In this context, the objective of this study was to evaluate the effect of the use of crude and filtered reads on the values of the quality parameters obtained from the genome assembly of Bacillus altituidinis 19RS3 isolated from Ilex paraguariensis. The quality analysis of both starting files was performed with the FastqC software and the readings were filtered with the Trimmomatic software. The SPAdes software was used for the assembly and the QUAST tool for its evaluation. The best assembly for B. altitudinis 19RS3 was obtained from the filtered readings with the value of k-mer 79, which generated 16 contigs greater than 500 bp with a N50 of 931 914 bp and the longest contig of 966 271 bp.

Abstract A promising alternative for insect pest control in agriculture is the use of entomopathogenic fungi. The objectives of this work were to isolate and identify morphologically and molecularly strains of entomopathogenic fungi from crops of agricultural and forestry interest for the development of insect biocontrol technologies in Argentina. Three strains of Beauveria bassiana, and two strains of Metarhizium anisopliae were isolated and morphologically identified. Identity values greater than 99% with strains of B. bassiana and M. anisopliae were obtained in molecular databases. It was also confirmed by phylogenetic methods that the sequences obtained from these strains were positioned within the clade that contained the sequences of reference of B. bassiana and M. anisopliae respectively. These results deepen the knowledge of the mycobiota of Argentinian crops as a basis for the development of biotechnological products in the area of biological control.

ABSTRACT This research is aimed to evaluate the effect of copper on biomass growth, laccase activity and isoenzymes composition of Pleurotus sajor-caju, and its ability to grow on effluents of the citrus industry. The inhibitory effect of copper on growth was evidenced especially after 14 days of culture in the presence of the highest concentration of copper (1 mM) reducing almost three times its growth. The highest enzyme activity was reached at the 10th day of treatment, with ~ 53 U/L for the medium without copper and ~ 121 and ~ 68 U/L for medium supplemented with 0.5 and 1mM, respectively. Laccases in cell-free extracts obtained from culture added with copper showed to be more stable for more time at temperature changes. The optimum temperature for laccase activity increased from 50 to 60 ºC by effect of copper while the optimal pH was 5 in all experiments. In gels, it was possible to observe two isoenzymes of 65 and 35 kDa whose expression varied according to incubation time. Moreover, the isoenzyme of low molecular weight was induced by the presence of effluent in solid medium. P. sajor-caju had the ability to grow on effluents from the citrus industry, showing tolerance and potential for waste treatment, constituting a possible alternative to biodegrade and reduce the contaminating impact of effluents.

RESUMEN Esta investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto del cobre en el crecimiento de la biomasa, la actividad de lacasas y la composición de isoenzimas de Pleurotus sajor-caju, así como su capacidad para crecer en los efluentes de la industria citrícola. El efecto inhibidor del cobre sobre el crecimiento se evidenció especialmente después de 14 días de cultivo en presencia de la mayor concentración de cobre (1 mM), reduciendo casi tres veces el crecimiento. La actividad enzimática más alta se alcanzó a los 10 días para todos los tratamientos, con ~ 53 U/L para el medio sin cobre y ~ 121 U/L y ~ 68 U/L para los medios suplementados con 0.5 y 1 mM, respectivamente. Las lacasas en los extractos libres de células obtenidas del cultivo agregado con cobre mostraron ser más estables por más tiempo a los cambios de temperatura. La temperatura óptima para la actividad de lacasas aumentó de 50 a 60 ºC por efecto del cobre, mientras que el pH óptimo fue de 5 en todos los experimentos. En los geles fue posible observar dos isoenzimas de 65 y 35 kDa cuya expresión varió según el tiempo de incubación. Además, la isoenzima de bajo peso molecular fue inducida por la presencia de efluente en medio sólido. P. sajor-caju fue capaz de crecer en el efluente de la industria citrícola, demostrando tolerancia y un potencial para el tratamiento de residuos, constituyendo una posible alternativa para biodegradar y reducir el impacto contaminante de los efluentes.

Abstract Escovopsis is a genus recently described for which 5 new species have described in the last 6 years. The identification of fungal species is based on morphological structures. Currently, the use of genetic markers based on ribosomal DNA (rDNA) sequences has gained acceptance in numerous applications, such as the molecular identification of the fungal diversity. The objective of this work was to isolate and identify morphologically and molecularly Escovopsis strains native from Argentina. Three strains of Escovopsis were isolated from different samples of soil and fungal gardens from nests of leaf-cutting ants. Taxonomic identification and subsequent DNA extraction was carried out. The ITS1-5.8S-ITS2 region of the rDNA was amplified. This is the first work that records the isolation and morphological identification of strains of fungi of the genus Escovopsis native of Misiones (Argentina): 2 belonging to E. weberi and 1 to E. microspora. Particularly, for the E. microspora strain, it was possible to complement the morphological identification with molecular methods and phylogenetic analysis. The nucleotide sequence obtained from E. microspora represents a contribution for future studies in the area of molecular analysis of the ITS1-5.8S-ITS2 region of the genus Escovopsis.

Resumen Escovopsis es un género descrito recientemente para el cual se han reportado 5 nuevas especies en los últimos 6 años. La identificación de especies fúngicas está basada en la morfología de las estructuras reproductivas. Actualmente, el uso de marcadores genéticos basado en secuencias del ADN ribosomal ha ganado aceptación en numerosas aplicaciones, como la identificación molecular de la diversidad fúngica. El objetivo del presente estudio fue aislar e identificar morfológica y molecularmente cepas de Escovopsis nativas de Argentina. A partir de muestras de suelo y cultivos de hongos de nidos de hormigas cortadoras de hojas se aislaron 3 cepas de Escovopsis. Se realizó la identificación taxonómica y posterior extracción de ADN. Se amplificó la región ITS1-5,8S-ITS2 del ADNr. Este es el primer trabajo que registra el aislamiento e identificación morfológica de cepas del hongo biocontrolador del género Escovopsis nativas de Misiones (Argentina): 2 pertenecientes a la especie E. weberi y una a la especie E. microspora. Particularmente, para la cepa E. microspora, se logró complementar la identificación morfológica con métodos moleculares y análisis filogenéticos. La secuencia nucleotídica obtenida de E. microspora representa una contribución para futuros estudios en el marco del análisis molecular de la región ITS1-5.8S-ITS2 del género Escovopsis.

The objective of this work was to test different culture media in order to achieve high laccase production by Phlebia brevispora using low cost substrates. With a medium composed of malt extract, corn liquor and CuSO4, 3.807 U/L of laccase at day 14 of incubation were obtained. Laccase production was tested with two different soluble corn extracts, analytical and industrial grade, but no statistical significant differences in laccase production were detected when using corn liquor of industrial (3,761U/L), or analytical grade (3,726U/L), both values attained at day 10 of incubation. Thus, an inexpensive medium for laccase production could be selected, also replicable in a 5 L bioreactor.

El objetivo de este trabajo fue ensayar diferentes medios de cultivo para la producción de lacasa por el hongo Phlebia brevispora con el fin de lograr una elevada producción utilizando sustratos de bajo costo. Con el medio compuesto por extracto de malta, extracto soluble de maíz y CuSO4 se obtuvieron 3.807 U/L al día 14 de incubación. Se ensayó la producción de lacasa con dos extractos solubles de maíz diferentes, uno de grado analítico y el otro de grado industrial, pero no se detectaron diferencias significativas entre el extracto de maíz de grado industrial (3.761 U/L) y el extracto de maíz analítico (3.726 U/L), al día 10 de incubación. Se logró seleccionar un medio de cultivo económico que proporcionó elevada actividad lacasa, reproducible además en biorreactor de 5 L.

Resumen La actividad celulolítica de hongos autóctonos asociados a la selva subtropical de Misiones (Argentina) representa un desafío en el desarrollo tecnológico de la producción de bioetanol celulósico en la región, mediante el uso de recursos nativos. Los sistemas enzimáticos de estos hongos tienen potencial aplicación en la obtención de cocteles enzimáticos rentables. La habilidad celulolítica de 22 hongos causantes de pudrición blanca se analizó comparativamente, que fueron aislados de la selva subtropical de Misiones-Argentina, en cultivos agarizados con dos tipos de sustratos celulósicos, carboxi-metilcelulosa o celulosa cristalina. También se evaluó la actividad de dos enzimas celulolíticas en cultivos líquidos. Aunque todos los aislamientos fueron capaces de crecer y degradar ambos sustratos en medio agarizado y revelar actividad celulolítica total y endo-β-1,4-glucanasa en cultivo líquido, el aislamiento Irpex sp. LBM 034 mostró las mayores actividades en papel de filtro con 65.45 U L-1 y endo-β-1,4-glucanasa con 221.21 U L-1, respectivamente. Por tanto, se secuenció y analizó la secuencia ITS de este hongo a través de un análisis filogenético. Estos resultados indicaron que el aislamiento LBM 034, correspondiente a Irpex lacteus, tiene una habilidad celulolítica prometedora en la producción de enzimas con actividad endo-β-1,4-glucanasa, útil en la sacarificación sustentable de materiales celulósicos de la región.

Abstract The cellulolytic activity of fungi growing in the subtropical rainforest of Misiones (Argentina) represents a challenge in the technological development of the production of cellulosic bioethanol in the region using native sources. These fungi are promising to obtain sustainable enzyme cocktails using their enzymes. Cellulolytic ability of 22 white-rot fungi isolated from the subtropical rainforest of Misiones-Argentina in agar medium with two types of cellulosic substrates, carboxy-methylcellulose or crystalline cellulose, were comparatively analyzed, and the activity of two cellulolytic enzymes was evaluated in liquid medium. Although all isolates were able to grow and degrade both substrates in agar medium, and to produce total cellulase Filter paper (FPase) and endo-β-1,4-glucanase (EG) activities in broth, the isolate Irpex sp. LBM 034 showed the greatest enzymatic levels (FPase, 65.45 U L-1; EG, 221.21 U L-1). Therefore, the ITS sequence of this fungus was sequenced and analyzed through a phylogenetic analysis. These results indicate that the isolate LBM 034, corresponding to Irpex lacteus, has a promising cellulolytic ability and enzymes such as EG useful in sustainable saccharification of cellulosic materials in the region. Rev. Biol. Trop. 66(3): 1034-1045. Epub 2018 September 01.

ABSTRACT The use of lignocellulosic waste constitutes an abundant and inexpensive source; it also offers a solution to the problem of waste disposal. The aim of the study was to evaluate the effect of different conditions of a sequential acid-base pretreatment of pine sawdust, through the release of reducing sugars in the saccharification step. The lignocellulosic material was pretreated in two stages: acid pretreatment (PT1), using sulfuric acid and basic pretreatment (PT2), employing sodium hydroxide at three levels each one: 1, 2 and 3 % in a factorial design. Enzymatic hydrolysis was carried out at 50 ºC and 150 rpm in 50 mL vials. Samples were taken at 0.15, 24, 48, 72 and 96 h. The percentage of acid soluble lignin and the concentration of reducing sugars were determined. The optimum level of each factor favoring the highest delignification corresponded to 3 % sulfuric acid and 3 % sodium hydroxide. The production of reducing sugars was not affected by the PT2, but by the PT1, achieving a maximum for level 0 thereof (2 % of sulfuric acid). The sequential acid-base pretreatment was optimized and it was found that this pretreatment improves enzymatic hydrolysis of pine sawdust respect to unpretreated samples. The amount of reducing sugars obtained was comparable to that obtained by other authors.

RESUMEN El uso de residuos lignocelulósicos constituye una fuente abundante y de bajo costo, que genera, además, una solución al problema de su disposición final. El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de distintas condiciones de pretratamiento secuencial ácido-base de aserrín de pino, sobre la liberación de azúcares reductores en la etapa de sacarificación. El material lignocelulósico se pretrató en dos etapas: la primera, se realizó con ácido sulfúrico (PT1) y la segunda con hidróxido de sodio (PT2), ambas con tres niveles: 1, 2 y 3 % mediante un diseño 32 factorial. La hidrólisis enzimática se realizó a 50 ºC y 150 rpm en frascos de 50 mL. Se tomaron muestras a las 0.15, 24, 48, 72 y 96 h. Se determinó el porcentaje de lignina ácido soluble y la concentración de azúcares reductores. El nivel óptimo de cada factor que favoreció la mayor deslignificación correspondió a 3 % de ácido sulfúrico y 3 % de hidróxido de sodio. La producción de azúcares reductores no se vio afectada por el PT2, pero sí por el PT1, alcanzando un máximo para el nivel 0 del mismo (2 % de ácido sulfúrico). Se optimizó el pretratamiento secuencial ácido-base y se comprobó además que éste mejora la hidrólisis enzimática respecto al aserrín de pino sin pretratar. La cantidad de azúcares reductores obtenidos fue comparable a la obtenida por otros autores.

Abstract Oxidative enzymes secreted by white rot fungi can be applied in several technological processes within the paper industry, biofuel production and bioremediation. The discovery of native strains from the biodiverse Misiones (Argentina) forest can provide useful enzymes for biotechnological purposes. In this work, we evaluated the laccase and manganese peroxidase secretion abilities of four newly discovered strains of Trametes sp. that are native to Misiones. In addition, the copper response and optimal pH and temperature for laccase activity in culture supernatants were determined.The selected strains produced variable amounts of laccase and MnP; when Cu2+ was added, both enzymes were significantly increased. Zymograms showed that two isoenzymes were increased in all strains in the presence of Cu2+. Strain B showed the greatest response to Cu2+ addition, whereas strain A was more stable at the optimal temperature and pH. Strain A showed interesting potential for future biotechnological approaches due to the superior thermo-stability of its secreted enzymes.

El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial para producir enzimas ligninolíticas de diversas cepas de hongos de pudrición blanca, nativas de la Provincia de Misiones (Argentina). Coriolus versicolor v. antarcticus BAFC 266, Pycnoporus sanguineus BAFC 2126 y Phlebia brevispora BAFC 633 mostraron un gran potencial para producir fenoloxidasas. En Ganoderma applanatum cepa E, P. sanguineus BAFC 2126 y P. brevispora BAFC 633 se observó una marcada actividad lacasa y peroxidasa. C. versicolor v. antarcticus. G. applanatum (cepa A) y Trametes villosa, mostraron una reacción oxidativa altamente positiva sobre 2,6-dimetoxifenol a pH 4. C. versicolor v. antarcticus, G. applanatum (cepas D y F), T. elegans BAFC 2127 y T. villosa, mostraron una alta actividad manganeso peroxidasa y solo C. versicolor v. antarcticus mostró una alta actividad de lignino peroxidasa. La actividad tirosinasa fue evidente en las cepas D y F de G. applanatum y en Phanerochaete chrysosporium HHB 11741. La decoloración del licor negro Kraft reveló una actividad ligninolítica variable para las diferentes cepas estudiadas dependiendo de la concentración utilizada. Algunos hongos mostraron una moderada actividad ligninolítica con grandes halos de decoloración (p.e. Pleurotus sajor-caju y Steccherinium sp. BAFC 1171) indicando un significativo potencial para el aprovechamiento biotecnológico de estas cepas.

This research aimed to evaluate the potential of several native white rot fungi (WRF) isolated from subtropical environments of Misiones (Argentina) to produce different ligninolytic enzymes. Coriolus versicolor f. antarcticus BAFC 266, Pycnoporus sanguineus BAFC 2126 and Phlebia brevispora BAFC 633 showed the highest phenoloxidase activity. Ganoderma applanatum strain E, P. sanguineus BAFC 2126 and P. brevispora BAFC 633 revealed marked laccase and peroxidase activity. C. versicolor f. antarcticus, G. applanatum (strain A) and Trametes villosa, gave high positive reactions with 2,6-dimethoxyphenol oxidation at the lowest tested pH. C. versicolor f. antarcticus, G. applanatum strains D and F, T. elegans BAFC 2127and T. villosa, showed the highest manganese peroxidase activity. C. versicolor f. antarcticus also produced the highest lignin peroxidase activity. Tyrosinase activity was mostly evident in G. applanatum strains (D and F) and Phanerochaete chrysosporium HHB 11741. Kraft liquor decolorization results were variable and depended on the fungus and the liquor concentration. Some fungi with moderate ligninolytic activity showed high decolorization rates (e.g. Pleurotus sajor-caju and Steccherinium sp. BAFC 1171) indicating the significance of additional approach to evaluate a potential biotechnological application.

In Misiones two species of genus Ilex prevail: I. paraguariensis and I. dumosa, but only the first one should be used to manufacture yerba mate products. I. dumosa is frequently used in mixtures with I. paraguariensis, although amounts above 1% are considered adulterants. From the technological perspective, it is feasible to differentiate them through the use of molecular markers such as ITS regions of ribosomal DNA. The aim of this work was to optimize a molecular technique to detect I. dumosa in yerba mate packages when it could be found as adulterant. Fresh leaves and thirteen trademarks of yerba mate and yerba canchada were used for the experience. For primers design ITS regions of I. dumosa were used and amplification conditions were standardized and products were sequenced. The technique sensitivity and specificity were 93.3% and 100% respectively, with a detection limit of 1% w / w. The technique was validated through the analysis of commercial and artificially adulterated samples and no traces of I. dumosa were detected in all commercial packages tested.

En la provincia de Misiones predominan dos especies del género Ilex: I. paraguariensis e I. dumosa, pero solo la primera debe ser utilizada para la elaboración del producto yerba mate. I. dumosa es frecuentemente utilizada en mezclas con I. paraguariensis, aunque en cantidades superiores al 1% son consideradas adulterantes. Desde el punto de vista tecnológico es factible diferenciarlas a través del uso de marcadores moleculares como las regiones ITS del DNA ribosómico. El objetivo del trabajo fue diseñar una técnica molecular que permita detectar I. dumosa en paquetes de yerba mate cuando esta se encuentre como adulterante. Para ello se trabajó con hojas frescas, 13 marcas comerciales de yerba mate elaborada y yerba canchada. Para el diseño de los cebadores se utilizaron las regiones ITS de I. dumosa y se estandarizaron las condiciones de amplificación, los resultados fueron chequeandos mediante secuenciación. La sensibilidad del método fue de 93,3% y la especificidad de 100%, con un límite de detección de 1% p/p. La técnica fue validada a través del análisis de muestras comerciales y artificialmente adulteradas, sin encontrarse rastros del contaminante en ninguno de los paquetes comerciales testeados.

Provincia de Misiones posee actualmente una actividad forestal en pujante crecimiento ubicándose entre las primeras del país. Este marco de desarrollo productivo permite predecir un ámbito de crecimiento favorecido por las nuevas condiciones del mercado internacional. Por otro lado a pesar del avance de la tecnología industrial, no se ha alcanzado el nivel de desarrollo biotecnológico óptimo que conjugue la calidad genética con características fenotípicas de excelencia en las especies maderables de mayor demanda en la Provincia basándose la selección en criterios netamente fenotípicos y en la experiencia del productor, sin contarse con métodos moleculares desarrollados en la región. Este trabajo presenta los resultados del Proyecto Federal de Innovación Productiva (PFIP Mi09) cuyo objetivo principal fue estandarizar y transferir al sector productivo un conjunto de marcadores moleculares microsatélites para ser aplicado al análisis de poblaciones y forestaciones de Araucaria angustifolia y Pinus taeda provenientes de la Provincia de Misiones (Argentina). Esto permitirá conocer el perfil genético de plantaciones y poblaciones de estas especies forestales, pudiendo aplicarse a la certificación de calidad en la producción forestal o a la selección de ejemplares de especies nativas.

Misiones Province currently has the first intensive forestry activity of Argentine. This framework of productive development allows predict an area of growth favored by the new conditions of the international market. On the other side despite the progress of industrial technology, has not been reached the optimal level of biotechnological development that combining quality with genomic and phenotypic characteristics of forest species. This work presents the results of Federal Project of Productive Innovation (PFIP Mi09) whose main objective was standardize and transfer to the productive sector a set of microsatellites molecular markers to be applied to the populations analysis of Araucaria angustifolia and Pinus taeda forestation from the Misiones (Argentine). This will reveal the plantations and forest genetic profile and may be applied to genetic certification of forest production quality.

The Yabotí biosphere reserve is located in the center-east of Misiones (Argentina) and it covers a vast area of the basins of Yabotí streams, tributaries of Alto Uruguay River. Astyanaxis important in the trophic level and in the maintenance of the natural fish communities, since it is food for the last links of the food chain. Population analysis are important ecological data for supporting the reasonable use of the resource. Futhermore, there are no yet specific data for SSR regions in Astyanax abramis, only for Astyanax fasciatus. The objective of this work was to cross-amplify the microsatellites regions of in Astyanaxabramiswith specific primers designed for A. fasciatus. DNA was extracted from the caudal fin peduncle from 13 specimens. The PCR conditions were standardized to extend 3 microsatellite regions in A. abramis: Abral, Abra2, Abra3 y Abra4. Three of these were sequenced and registered in the Genebank database. Although our findings are preliminary, they confirm the transferability of the use of primers, identifying sequences preserved and allowing us to establish the first microsatellite sequence of the species under study.

La reserva de la Biosfera Yabotí se localiza en el centro-este de la Provincia de Misiones (Argentina) y cubre un amplio sector que comprende el arrojo Yabotí y sus efluentes. Astyanax es un importante eslabón en la cadena trófica y en el mantenimiento de las comunidades ícticas naturales. Los estudios poblacionales son datos ecológicos que permiten el análisis sobre el manejo sustentable del recurso y las regiones microsatélites representan marcadores de gran utilidad en este sentido. Sin embargo aun no existen datos genómicos de estas regiones en esta especie, siendo conocidos únicamente SSR para la especie emparentada Astyanax fasciatus. El objetivo de este trabajo fue lograr la amplificación interespecífica de regiones de microsatélites en Astyanax abramis utilizando cebadores diseñados para A. fasciatus. Se extrajo DNA de tejido muscular del pedúnculo caudal de 13 individuos. Se estandarizaron las condiciones para amplificar 4 regiones microsatélites en A. abramis: Abral, Abra2, Abra3 y Abra4, de los cuales 3 fueron secuenciados y registrados en Genebank. Nuestros hallazgos confirman la transferibilidad de los cebadores utilizados, reconociendo secuencias conservadas y permitiendo establecer las primeras secuencias microsatélites de la especie estudiada.

A modified salting-out procedure for DNA extraction from decremental blood sample volumes was developed (300; 100; 50; 25; 10; 5; 2,5; 1 and 0,5 µL). A 345 bp human prothrombin gene fragment and a STR marker commonly used for filiation analyses (LPL) were then amplified by Polymerase Chain Reaction and visualized in a 6.4 % polyacrylamide gel. In all cases the amplification reaction was successful, showing that the DNA extraction method proposed here yields DNA of reasonable purity and quantity from small blood sample volumes. Therefore, the quantity of sample needed to perform a molecular study can be reduced, which is fundamental in certain areas such as forensic genetics, where the quantity of samples available could be limited.

Se desarrolló un protocolo modificado de extracción de DNA por salting-out a partir de muestras de sangre con volúmenes decrecientes (300; 100; 50; 25; 10; 5; 2,5; 1 y 0,5 µL). Se llevó a cabo posteriormente una amplificación de un fragmento de 345 pb del gen de la protrombina y de un marcador STR (short tandem repeat) utilizado comúnmente para estudios de filiación, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, visualizándose los amplicones en un gel de poliacrilamida al 6,4 %. En todos los casos, la reacción de amplificación fue exitosa, demostrando así que el protocolo de extracción desarrollado permite obtener DNA en condiciones de pureza y cantidad suficiente a partir de pequeños volúmenes de sangre. De este modo, puede disminuirse la cantidad de muestra necesaria para realizar un estudio molecular, lo cual es fundamental en áreas como la genética forense donde la cantidad de muestra disponible puede ser limitada.