Abstract: This study evaluated 24 patients with lung cancer (CA) and 23 individuals with no smoking history or cancer in the family and without respiratory disease in childhood (CO). Peripheral blood lymphocytes was used to perform alkaline comet assay and to assess DNA damage as well as to evaluate methyl methane sulfonate (MMS) DNA repair after one hour and three hours at 37 ºC. The percentage of residual damage (RD) after three hours of MMS treatment, for each patient was assessed. The majority of patients were in the CA group, male patients, former smokers, with a history of smoking for 15 years and without associated comorbidities. Alkaline and residual damages were higher in the CA group when compared to controls (alkaline damage P = 0.015 and RD P = 0.05). After one hour of MMS treatment the DNA damage of the CA increased indicating failure to repair it, compared to the controls, and after three hours DNA repair was observed in both groups. Patients with lung cancer are mostly men, former smokers and with more than 15 years of tobacco consumption, undergoing chemotherapy, have high rates of DNA damage and deficiency in their ability to repair against induced damage when compared to controls.

RESUMO: Toxoplasma gondii é um protozoário apicomplexa que infecta animais de sangue quente, podendo ser considerado um dos principais parasitas capazes de infectar os seres humanos. Galinhas domésticas podem ser facilmente infectadas por protozoários, uma vez que estas podem ingerir oocistos encontrados no solo, sendo consideradas boas indicadoras de contaminação ambiental por T. gondii. O objetivo deste estudo foi determinar a presença de anticorpos anti-T. gondii em galinhas domésticas criadas extensivamente e avaliar os fatores de risco associados ao protozoário, na zona rural de Santa Maria, RS, Brasil. No período de março de 2013 a fevereiro 2014 foram coletadas 597 amostras de sangue de galinhas domésticas em 74 propriedades, oriundas de nove estratos que representam cada distrito da zona rural. Para avaliar os fatores de risco, nessas propriedades foi aplicado um questionário epidemiológico aos moradores. As amostras de soro foram testadas por imunofluorescência indireta, e 49,2% (294/597) foram positivas para anticorpos anti-T. gondii, com títulos variando de 16 a 4096. Das 74 propriedades analisadas, em 63 (85,1%) houve relatos que os gatos têm acesso ao deposito de alimentos, com associação significativa quando associado à presença de galinhas positivas (p=0,04) e o OR de 4,07. A variável “abate de animais” (aves e bovinos), em 51 (68,9%) das propriedades foi relatado o abate de bovinos e aves na propriedade, com valor de p significativo (p=0,05). A maioria das propriedades 59 (79,7%) foi relatada a presença de gatos domésticos, o que poderia estar associada com a alta soroprevalência encontrada em galinhas e a taxa de contaminação ambiental. A elevada prevalência de anticorpos encontrada neste estudo, além da alta frequência de propriedades com casos positivos, sugere uma grande contaminação ambiental nos distritos pesquisados, sendo assim um risco potencial para a saúde humana e animal.

ABSTRACT: Toxoplasma gondii is an apicomplex protozoan that infects warm-blooded animals and can be considered a major parasite capable of infecting humans. Domestic chickens can be easily infected by protozoa, since they can ingest oocysts found in the soil and are considered good indicators of environmental contamination by T. gondii. The aim of this study was to determine the presence of anti-T. gondii antibodies in free range chickens and to evaluate the risks factors associated with the protozoan in rural area of Santa Maria, RS, Brazil. From March 2013 to February 2014, 597 blood samples from domestic chickens were collected from 74 farms, from nine layers representing each district in the rural area. To evaluate the risk factors, in these farms an epidemiological questionnaire was applied to the residents. Serum samples were tested by indirect immunofluorescence and 49.2% (294/597) were positive for anti-T.gondii antibodies, with titres varying from 16 to 4096. Of the 74 analyzed farms, 63 (85.1%) reported that cats had access to food deposits, with a significant association when positive chickens were present (p = 0.04) and the OR of 4.07. The variable “slaughter of animals” (poultry and cattle) in 51 (68.9%) of the farms was reported the slaughter of cattle and birds in the farm, with significant p value (p = 0.05). Most farms 59 (79.7%) reported the presence of domestic cats, which could be associated with the high seroprevalence found in chickens and the rate of environmental contamination. The high prevalence of antibodies found in this study, in addition to the high frequency of farms with positive cases, suggests a great environmental contamination in the studied districts, thus being a potential risk to human and animal health.

RESUMO: Neosporose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Neospora caninum e resulta em grandes perdas econômicas para a bovinocultura, o que se deve a abortos e outras desordens reprodutivas. Gerbils (Meriones unguiculatus) são comumente utilizados como modelos experimentais para neosporose, devido a sua alta susceptibilidade à infecção por N. caninum, seja pela ingestão de oocistos ou pela inoculação parenteral de taquizoítos/bradizoítos. Porém, o risco de transmissão pela ingestão de taquizoítos não está totalmente elucidado. Neste estudo, foram avaliadas a infecção de gerbils neonatos por taquizoítos de N. caninum (cepa NC-1) inoculados por via oral e a distribuição do parasita nos tecidos desses gerbils, através da detecção de DNA do protozoário. Dezessete gerbils neonatos, com idade de 4-5 dias, foram inoculados com 4x105 taquizoítos por via oral e um gerbil foi mantido como controle não-infectado. DNA de N. caninum foi detectado em 100% dos gerbils inoculados, demonstrando a eficácia da via oral como potencial rota de infecção de neonatos por taquizoítos de N. caninum. DNA de N. caninum foi encontrado, em diferentes frequências, em todos os órgãos avaliados (coração, pulmões, rins, fígado, baço e cérebro). Esses resultados demonstraram infecção sistêmica dos gerbils neonatos após a inoculação oral de taquizoítos.

ABSTRACT: Neosporosis is a parasitic disease caused by the protozoan Neospora caninum which results in major economic losses for cattle breeding due to abortion and other reproductive disorders. Gerbils (Meriones unguiculatus) are commonly used as experimental models for neosporosis due to their high susceptibility to N. caninum infection, both by oocysts ingestion as by tachyzoites/bradyzoites parenteral inoculation. However, the risk of transmission by tachyzoites ingestion is not fully elucidated. In this study, infection of neonate gerbils by N. caninum (NC-1 strain) tachyzoites inoculated by the oral route and the parasite distribution in gerbils' tissues were evaluated by protozoan DNA detection. Seventeen neonate gerbils, aged 4-5 days, were inoculated with 4x105 tachyzoites by the oral route and one gerbil was kept as uninfected control. N. caninum DNA was detected in 100% of the inoculated gerbils, showing that the oral route is effective as a potential route of infection of neonates by N. caninum tachyzoites. N. caninum DNA was reported in all organs evaluated (heart, lungs, kidneys, liver, spleen and brain), with different frequencies. These results showed systemically distributed infection of neonate gerbils after oral inoculation of tachyzoites.

Resumo Neosporose é uma das maiores causas de perdas reprodutivas em rebanhos bovinos. O estágio da gestação em que ocorre a infecção ou o recrudescimento das formas bradizoítas, que se reflete no nível de anticorpos, é um dos fatores que define o futuro da gestação. Portanto, este trabalho visa a traçar um esboço do perfil sorológico de fêmeas naturalmente infectadas durante a gestação. Para isso, amostras séricas de 25 vacas da raça holandesa foram coletadas desde o dia da inseminação artificial até a véspera do parto, em intervalos mensais. Essas amostras foram testadas por imunofluorescência indireta em busca de IgG. Dos 25 animais, somente 13 foram utilizados na análise, por serem soropositivos desde o início ou por se soroconverteram durante a gestação. Observou-se um aumento gradual dos níveis de anticorpos ao longo da gestação, mais evidente na metade final do período. Observou-se também diferença significativa nos títulos de anticorpos entre os períodos iniciais e finais da gestação, sugerindo a reativação de formas bradizoítas. Tais resultados reforçam a ideia da flutuação nos níveis de anticorpos ao longo da gestação, influenciado pela reativação de N. caninum. O conhecimento dessa dinâmica é importante para a patogenia e epidemiologia da infecção bem como para o diagnóstico.

Abstract Neosporosis is one of the major causes of reproductive failure in bovine around the world. The period of gestation, in which the infection or the recrudescence of bradzoites forms occurs and reflects in the antibodies levels, is one of the factors that define pregnancy future. Therefore, this study aimed to determine the serological profile during pregnancy of naturally infected females. To do that, serological samples of 25 Holstain Friesian cows were collected from artificial insemination day until parturition, in monthly intervals. These samples were tested by indirect immunofluorescence for IgG anti-Neospora caninum. Of the 25 animals, only 13 were used in the analysis, because they were seropositive since the beginning or seroconverted during pregnancy. The results showed a gradual increase in antibody levels along pregnancy, more visible at the end of the period. We observed a significant difference in antibodies title between initial and final periods of pregnancy, which suggests the reactivation of bradzoite forms present in tissues during pregnancy. These results reinforce the knowledge of antibodies fluctuation along pregnancy, affected by N. caninum reinfection or reactivation. This serological knowledge is important to Neosporosis pathogeny, epidemiology and diagnostic.

Neosporose é uma doença infecciosa causada pelo parasito Neospora caninum. Nos caprinos, as informações sobre neosporose ainda são bastante limitadas, especialmente no Estado de Santa Catarina (SC), Sul do Brasil. Em virtude disso, este estudo teve como objetivo avaliar a soroprevalência e os fatores de risco envolvidos na infecção por N. caninum em caprinos das regiões Oeste e Planalto Serrano do Estado de SC. Amostras de sangue foram coletadas de 654 caprinos em 57 cidades. A técnica de imunofluorescência indireta (RIFI) foi usada para a detecção sorológica de anticorpos contra N. caninum. Trinta amostras (4,58%) foram soropositivas para o agente infeccioso com títulos variando entre 1:50 a 1:6400. Durante a coleta de sangue, um levantamento epidemiológico foi realizado para identificar fatores de risco para neosporose em caprinos. Problemas reprodutivos presentes nas fazendas, bem como a dieta e o contato direto com cães foram detectados como fatores de risco para a doença. Os resultados indicam que N. caninum infecta cabras nas regiões avaliadas, o que pode estar relacionado a problemas reprodutivos nesta espécie.

Neosporosis is an infectious disease caused by the parasite Neospora caninum. Knowledge regarding neosporosis in goats is still quite limited, especially in the state of Santa Catarina (SC), southern Brazil. Therefore, this study aimed to assess the seroprevalence and risk factors for N. caninum in goats in the western and mountain regions of SC. Blood samples were collected from 654 goats in 57 municipalities. The indirect immunofluorescence test was used for antibody detection against N. caninum. Thirty samples (4.58%) were seropositive, with titers ranging from 1:50 to 1:6400. An epidemiological survey was also conducted in order to identify risk factors for neosporosis in goats. It was found that reproductive problems on the farms, as well as the diet and direct contact with dogs were casual risks for neosporosis. These results indicate that N. caninum infects goats in these regions, which may lead to reproductive problems.

Neospora caninum é um protozoário de grande importância na pecuária, por determinar problemas reprodutivos principalmente em bovinos. Os gerbils (Meriones unguiculatus) podem atuar como modelos experimentais para reproduzir a neosporose aguda de bovinos. Neste trabalho, foram formados dois grupos de gerbils (n=10), inoculados com taquizoítos de N. caninum (cepa NC-1) nas doses de 5x10(6) taquizoítos ml-1 (G1) ou de 5x10(5) taquizoítos ml-1 (G2), doses capazes de induzir infecção aguda. Cérebro, medula espinhal, coração, pulmão, fígado, rins e baço foram coletados e a técnica de PCR foi realizada a partir das amostras de tecidos e órgãos. Na maioria dos animais, o DNA do N. caninum foi detectado pelo menos em cinco tecidos, considerando ambos os grupos (12/20; 60%). No grupo 1, a frequência de detecção de DNA, na totalidade das amostras, foi maior (52/70; 74,28%) quando comparada ao grupo 2 (38/70; 54,28%). A partir desses resultados, pode-se afirmar que o protozoário replicou eficientemente após inoculação e se disseminou pelos tecidos. Além disso, demonstrou-se que gerbils podem ser utilizados como modelo de infecção aguda pelo N. caninum, apresentando sinais clínicos da neosporose.

Neospora caninum is a protozoan of great importance for livestock, mainly by causing reproductive diseases in cattle. Gerbils (Meriones unguiculatus) may be a model to reproduce experimental acute neosporosis of cattle. In this study two groups of gerbils were formed (n=10) and gerbils were inoculated with N. caninum tachyzoites (NC-1 strain) at two different doses appropriate to cause acute neosporosis: 5x10(6) tachyzoites ml-1 (G1) or 5x10(5) tachyzoites ml-1 (G2). Brain, spinal cord, heart, lung, liver, kidneys and spleen were collected and PCR was performed using samples of these tissues and organs. DNA of N. caninum was detected in at least five tissues for most animals (12/20; 60%) considering both groups. In group 1, the frequency of DNA detection, evaluating all samples, was higher (52/70; 74.28%) compared to group 2 (38/70; 54.28%). These results showed that the protozoan replicated efficiently after inoculation spreading by several tissues. Also, was demonstrated that gerbils can be used as model for acute infection with N. caninum showing clinical signs of neosporosis.