ABSTRACT Although zinc (Zn) is a micronutrient, excessive amounts in the soil can have toxic effects on plants. Fertilizers, limestone materials, pesticides, and fungicides added with Zn have contributed to increasing the concentration of this element in agricultural soils. Accordingly, it is necessary to find Zn-tolerant plant species to be properly used in degraded soil restoration programs. Thus, the current study aims to investigate the influence of different Zn concentrations on photosynthetic variables, antioxidant activity, and growth of I. marginata and A. edulis seedlings to determine their potential to be used as phytoremediation species. The experiment was installed in a 2×5 factorial scheme, with the first factor being two species (Allophylus edulis and Inga marginata), and the second factor: five concentrations of Zn (2, 75, 150, 225, and 300 μM), with three replications per treatment. Each sampling unit consisted of a pot with five plants. Photosynthetic, morphological variables of the shoot and root systems, chlorophyll a fluorescence, photosynthetic pigments, antioxidant enzyme activity, lipid peroxidation, hydrogen peroxide concentration, and Zn accumulated in the roots and shoot were evaluated. Zn stress has activated an efficient antioxidant system, which reduced oxidative damage in the leaves of both species; consequently, it did not decrease shoot biomass production in Inga marginata and Allophylus edulis seedlings. High Zn accumulation in plant tissues and lack of negative effects on Inga marginata and Allophylus edulis shoot have suggested that these plant species are tolerant to Zn and may be indicated for Zn-polluted soil phytoremediation purposes. (Zn micronutrient plants Fertilizers materials pesticides soils Accordingly Zntolerant programs Thus activity I A 25 2 5 2× scheme marginata, , marginata) 2, (2 75 150 225 30 μM, μM μM) treatment Photosynthetic systems fluorescence pigments peroxidation evaluated system consequently Znpolluted polluted purposes ( 7 15 22 3 1

RESUMO Embora o zinco (Zn) seja um micronutriente, quantidades excessivas no solo podem causar efeitos tóxicos às plantas. Fertilizantes, materiais calcários, pesticidas e fungicidas adicionados de Zn têm contribuído para aumentar a concentração deste elemento nos solos agrícolas. Dessa forma, é necessário encontrar espécies de plantas tolerantes ao Zn para serem adequadamente utilizadas em programas de restauração de solos degradados. Assim, o presente estudo tem como objetivo investigar a influência de diferentes concentrações de Zn nas variáveis fotossintéticas, na atividade antioxidante e no crescimento de mudas de I. marginata e A. edulis para determinar seu potencial para serem utilizadas como espécies fitorremediadoras. O experimento foi instalado em esquema fatorial 2×5, sendo o primeiro fator duas espécies (Allophylus edulis e Inga marginata), e o segundo fator: cinco concentrações de Zn (2, 75, 150, 225 e 300μM), com três repetições por tratamento. Cada unidade amostral foi constituída por um vaso com cinco plantas. Foram avaliadas variáveis fotossintéticas, morfológicas da parte aérea e do sistema radicular, fluorescência da clorofila a, pigmentos fotossintéticos, atividade de enzimas antioxidantes, peroxidação lipídica, concentração de peróxido de hidrogênio e Zn acumulado nas raízes e na parte aérea. O estresse por Zn ativou um eficiente sistema antioxidante, que reduziu o dano oxidativo nas folhas de ambas as espécies; consequentemente, não diminuiu a produção de biomassa aérea em mudas de Inga marginata e Allophylus edulis. O alto acúmulo de Zn nos tecidos vegetais e a falta de efeitos negativos na parte aérea de Inga marginata e Allophylus edulis sugeriram que essas espécies de plantas são tolerantes ao Zn e podem ser indicadas para fins de fitorremediação de solos poluídos com Zn. (Zn micronutriente Fertilizantes calcários agrícolas forma degradados Assim fotossintéticas I A fitorremediadoras 25 2 5 2×5 marginata, , marginata) 2, (2 75 150 22 300μM, 300μM μM 300μM) tratamento radicular fotossintéticos antioxidantes lipídica consequentemente 2× ( 7 15 1

ABSTRACT Copper (Cu) is an essential micronutrient for plants; however, it contaminates air, water, and soil in high concentrations. Phytoremediation is an alternative to using plants that are tolerant to excess metals in the soil. The study aimed to assess the tolerance of Cordia americana species to excess Cu using morphological, physiological, and biochemical variables. The plants were grown in a greenhouse under five Cu concentrations (0 (complete nutrient solution), 15, 30, 45, and 60 μM) in the nutrient solution. Twenty trays (16 liters each) were used, with five plants per tray. The morphological variables of the shoot and root system, photosynthetic variables, chlorophyll a fluorescence, photosynthetic pigments, antioxidant enzyme activity, hydrogen peroxide content, and Cu content accumulated in the tissues were evaluated. Root morphology, photosynthetic variables, chlorophyll a fluorescence, and photosynthetic pigments were not negatively affected by adding Cu to the cultivation system. Biochemical analyses demonstrated that the species used defense techniques against excess Cu, accumulating the metal in its root system and preserving the shoot for photosynthesis. The growth in shoots and roots and biomass production were not affected by increasing Cu concentrations. Therefore, the Cordia americana species has the potential to be used in areas contaminated with Cu. (Cu however air water physiological 0 ( complete solution, solution , solution) 15 30 45 6 μM 16 (1 each tray fluorescence activity evaluated morphology photosynthesis Therefore 1 3 4

RESUMO O cobre (Cu) é um micronutriente essencial para as plantas, porém, em altas concentrações, contamina o ar, a água e o solo. A fitorremediação entra como alternativa à utilização de plantas que sejam tolerantes ao excesso de metais no solo. O objetivo do estudo foi testar a tolerância da espécie Cordia americana ao excesso de Cu, utilizando variáveis morfológicas, fisiológicas e bioquímicas. A espécie foi cultivada em casa de vegetação, em cinco concentrações de Cu (0 (solução nutritiva completa), 15, 30, 45 e 60 μM) na solução nutritiva. Foram utilizadas 20 bandejas de 16 litros, com 5 plantas por bandeja. Foram avaliadas as variáveis morfológicas da parte aérea e do sistema radicular, variáveis fotossintéticas, fluorescência da clorofila a, pigmentos fotossintéticos, atividade de enzimas antioxidantes, conteúdo de peróxido de hidrogênio e teores de Cu acumulados nos tecidos. A morfologia das raízes, as variáveis fotossintéticas, fluorescência da clorofila a e pigmentos fotossintéticos não foram afetados negativamente mediante acréscimo do Cu no sistema de crescimento. As análises bioquímicas demonstraram que a espécie usou técnicas de defesa contra o excesso de Cu, acumulando o metal em seu sistema radicular e preservando a parte aérea para a fotossíntese. O incremento em parte aérea e raízes não foi afetado com o aumento das concentrações de Cu, bem como a produção em biomassa. Sendo assim, a espécie Cordia americana possui potencial para ser utilizada em áreas contaminadas com Cu. (Cu porém ar solo vegetação 0 ( completa, completa , completa) 15 30 4 6 μM 2 1 litros bandeja fotossintéticas antioxidantes tecidos crescimento fotossíntese biomassa assim 3