RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do vírus da Leucose Bovina (BLV - BovineLeukosis Virus) sobre o perfil sistêmico em vacas primíparas no período de transição. Novilhas prenhas das raças Holandesa e Jersey (n=24) foram distribuídas em pares em dois grupos experimentais: (BLV+) e (BLV-). Os animais BLV+ foram classificados em subgrupos com alta e baixa carga proviral, de acordo com a mediana dos valores obtidos. Os animais foram avaliados nas semanas -3, -2, -1, parto (0), +1, +2 e +3. Amostras sanguíneas foram obtidas para análises hematológicas e bioquímicas, além da dosagem de haptoglobina. Na fase de triagem observou-se soroprevalência de 57,25% e 38.7%, respectivamente no rebanho e na categoria novilhas (38,7%). Em relação ao eritrograma, a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) foi a única variável que apresentou interação grupo*tempo, observando-se maiores valores no grupo BLV+ (BLV+ = 33,29 ± 3,39%; BLV- = 31,08 ± 2,31%). BLV teve efeito sobre a atividade da enzima aspartato aminotransferase (AST), com maiores valores no grupo BLV+. Os animais BLV+ apresentaram 4,96 mais chances de inflamação (haptoglobina ≥ 2,0 mg/dL). A concentração do fibrinogênio também foi maior no grupo BLV+ no parto e semana +1 pós-parto. O efeito da carga proviral sobre os leucócitos totais e número absoluto de linfócitos foi detectado. No nosso conhecimento, este é o primeiro estudo reportando o efeito do BLV sobre a saúde de vacas primíparas no período de transição, e a dependência da carga proviral sobre o perfil leucocitário e o perfil pró-inflamatório dos animais BLV+. RESUMO Virus transição n=24 n24 n 24 (n=24 experimentais BLV. . (BLV-) obtidos 3, 3 -3 2, 2 -2 1, 1 -1 0, 0 , (0) + +3 bioquímicas haptoglobina observouse observou se 5725 57 25 57,25 387 38 7 38.7% 38,7%. 38,7% (38,7%) eritrograma CHCM (CHCM grupotempo tempo grupo*tempo observandose observando 3329 33 29 33,2 3,39% 339 39 3108 31 08 31,0 2,31%. 231 2,31% 2,31%) AST, AST (AST) 496 4 96 4,9 20 mg/dL. mgdL mg/dL mg dL mg/dL) pósparto. pósparto pós parto. pós-parto detectado conhecimento próinflamatório pró inflamatório n=2 n2 (n=2 (BLV- (0 572 5 57,2 38.7 38,7 (38,7% 332 33, 3,39 310 31, 23 2,31 (AST 49 9 4, n= (n= ( 57, 38. 38, (38,7 3,3 2,3 (n (38, (38 (3

ABSTRACT: This study aimed to evaluate the effect of bovine leukemia virus (BLV) on the systemic profile of naturally infected dairy heifers during the transition period. Pregnant Holstein and Jersey heifers (n=24) were distributed in pairs into two experimental groups: (BLV+) and (BLV-). Animals in the BLV+ group were divided into two subgroups based on the median BLV proviral load (high and low). The animals were then assessed at weeks -3, -2, -1, calving time (0), +1, +2, and +3. Blood samples were obtained for hematological and biochemical analyses, as well as haptoglobin measurements. Farm BLV screening revealed a herd BLV prevalence of 57.25% and heifer BLV prevalence of 38.7%. Mean corpuscular hemoglobin concentration was the only hematological variable for which group interaction was observed, with BLV+ cattle having higher values (33.29 ± 3.39%) than BLV- cattle (31.08 ± 2.31%). Aspartate aminotransferase activity was higher in the BLV+ heifers. The BLV+ group had greater incidence of inflammation (haptoglobin ≥ 2.0 mg/dL). Fibrinogen concentrations were also higher at weeks 0 and +1 in BLV+ heifers than in BLV- heifers. A high proviral load affected total leukocyte and lymphocyte count; however, this profile was not observed in the low proviral load and paired BLV- heifers. To our knowledge, this is the first study to report the impact of BLV infection on the health of dairy heifers during the transition period, demonstrating the effect of proviral load on white blood cell changes and early inflammation in infected animals. ABSTRACT (BLV period n=24 n24 n 24 (n=24 groups (BLV+ BLV. . (BLV-) low. low) 3, 3 -3 2, 2 -2 1, 1 -1 0, , (0) +2 +3 analyses measurements 5725 57 25 57.25 387 38 7 38.7% 33.29 3329 33 29 (33.2 3.39% 339 39 31.08 3108 31 08 (31.0 2.31%. 231 2.31% 2.31%) 20 2. mg/dL. mgdL mg/dL mg dL mg/dL) + count however knowledge n=2 n2 (n=2 (BLV- - (0 572 5 57.2 38.7 33.2 332 (33. 3.39 31.0 310 (31. 23 2.31 n= (n= ( 57. 38. 33. (33 3.3 31. (31 2.3 (n (3 3.

RESUMO: O diagnóstico de gestação é uma ferramenta importante no manejo da propriedade. A ultrassonografia é a principal técnica utilizada no diagnóstico de prenhez em ovelhas. Como alternativa, o radiomunoensaio (RIA) permite acurácia e a detecção precoce de proteínas associadas à prenhez (PAGs) no sangue. No entanto, as técnicas radioativas, como o RIA, têm sido cada vez mais desaconselháveis, devido ao risco ambiental. A homologia entre PAGs de ovinos e bovinos é alta, e os kits de ELISA utilizados para a detecção de PAGs em bovinos são mais seguros do que RIA. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar a viabilidade de detecção de PAGs no soro ovino para diagnóstico de gestação em soro ovino, utilizando um kit de ELISA produzido para bovinos. A sensibilidade e a especificidade do kit de ELISA foram de 93,5% e 98,9%, respectivamente, enquanto que os valores preditivos positivo e negativo foram de 99,0% e 93,1%, respectivamente, em comparação com a ultrassonografia (utilizada como referência). As PAGs atingiram concentrações consistentemente detectáveis no soro ovino em torno de 33 dias após o acasalamento. A acurácia do teste de ELISA foi de 96,1% a partir de 33 dias de gestação até o parto. As PAGs ainda eram detectáveis sete dias pós-parto. No entanto, a partir de 21 dias após o parto, as PAGs da prenhez anterior já não eram detectadas no soro. Em conclusão, o kit de ELISA bovino pode detectar a prenhez com precisão em ovelhas a partir de 33 dias após o acasalamento, e os níveis de PAGs da gestação anterior não são detectados a partir de 21 dias pós-parto. O teste de ELISA avaliado é uma ferramenta confiável para o diagnóstico de gestação em ovelhas em estágios aleatórios e como exame complementar no início da gestação.

ABSTRACT: Pregnancy diagnosis is an important tool for farm management. Ultrasonography is the main technique used for pregnancy diagnosis in ewes. As an alternative, radioimmunoassay (RIA) allows accurate and early detection of pregnancy-associated glycoproteins (PAGs) in sheep blood. However, radioactive-based techniques, as RIA, have been increasingly inadvisable due to environmental risk. Homology between ovine and bovine PAGs is high, and ELISA kits used for PAGs detection in cattle are safer than RIA. Thus, this study aimed to evaluate the feasibility of PAGs detection for pregnancy diagnosis in sheep serum samples using an ELISA kit produced for cattle. The sensitivity and specificity of the ELISA kit were 93.5% and 98.9%, respectively, whereas positive and negative predictive values were 99.0% and 93.1%, respectively, in comparison to ultrasonography diagnostic (control). PAGs reached consistently detectable concentrations in ovine serum around 33 days after mating. Accuracy of the ELISA test was 96.1% from 33 days of pregnancy until lambing. After parturition, PAGs were still detectable seven days post-lambing. However, from 21 days post-parturition, PAGs from the previous pregnancy were no longer detected in serum samples. In conclusion, the bovine ELISA kit can accurately detect pregnancy in sheep 33 days following mating, while PAGs levels from the previous gestation are no longer detected from 21 days post-partum. The evaluated ELISA test is a reliable tool for pregnancy diagnosis in sheep at random stages and as a complementary exam at early gestation.

O herpesvírus bovino tipo 2 (BoHV-2), agente da mamilite herpética bovina (BHM), possui distribuição mundial e foi identificado no Brasil, na década de 70. A partir de então, casos de mamilite clinicamente compatíveis com a BHM têm sido relatados por técnicos e produtores, o que sugere a presença e disseminação do agente no rebanho bovino brasileiro. Este trabalho relata um inquérito sorológico da infecção pelo BoHV-2 no Estado do Rio Grande do Sul (RS), em amostras coletadas como parte do Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCBT). Um total de 2.213 amostras de soro coletadas de fêmeas bovinas com idade igual ou superior a 24 meses, predominantemente de rebanhos leiteiros, de 136 municípios pertencentes a sete macrorregiões do RS, foram testadas para anticorpos anti-BoHV-2 pela técnica de soro-neutralização (SN). Anticorpos anti-BoHV-2 (títulos > 2) foram detectados em 24,5% (543/2.213) das amostras. Os índices de positividade variaram entre 12,9% (22/170), na região metropolitana de Porto Alegre, e 48,9% (69/137), na região centro oriental do RS. Em geral, os rebanhos leiteiros apresentaram prevalência maior (32,3%), seguidos dos rebanhos mistos (22%) e de corte (17,6%). Esses resultados demonstram uma ampla disseminação da infecção pelo BoHV-2 no rebanho bovino do Estado e sugerem a participação do agente em parte dos casos de mamilite descritos em gado leiteiro.

Bovine herpesvirus type 2 (BoHV-2), the agent of bovine herpetic mammillitis (BHM), has a worldwide distribution and was identified in Brazil in the 70's. Thereafter, cases of bovine mammillitis clinically compatible with BHM have been frequently reported by cattle owners and veterinarians, mainly in dairy herds, suggesting the dissemination of BoHV-2 among Brazilian cattle. This article reports a serologic survey for BoHV-2 antibodies in cattle from Rio Grande do Sul (RS), using serum samples obtained upon a statistically planned sampling as a part of the Program of Control/Eradication of Brucellosis and Tuberculosis (PNCBT). A total of 2.213 serum samples from cows with 24 months or older, predominantly from dairy herds, from 136 counties located in seven geographical regions of RS were tested by virus neutralization (VN). Serum samples with VN titers > 2 were detected in 24.5% (543/2.213) of the animals. Prevalence rates varied from 12.9% (22/170) in Porto Alegre metropolitan area to 48,9% (69/137) in the central-eastern region. In most regions, the highest prevalence rates were observed in dairy herds (32.3%), followed by double proposit (22%) and beef herds (17.6%). These results demonstrate that BoHV-2 infection is widespread among cattle in RS, and potentially involved in cases of mammillitis described in dairy cows.

Anticorpos monoclonais (AcMs) produzidos com uma amostra brasileira do herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) foram utilizados na adaptação e padronização de técnicas rápidas para o diagnóstico de infecções pelo BHV-1 e BHV-5. A detecção de antígenos virais por imunofluorescência em células descamativas (IFCD) foi comparada com o isolamento viral, em secreções nasais de 16 bezerros, sendo 6 inoculados com o BHV-1 e 10 com o BHV-5. De 203 amostras testadas, 182 (89,6%) apresentaram resultados concordantes nos dois testes (143 positivas; 39 negativas). Comparando-se com o isolamento, a IFCD apresentou sensibilidade de 96,6%, especificidade de 70,9%, e precisão de 89,6%. Os AcMs também foram utilizados para detectar antígenos do BHV-5 em impressões frescas do cérebro de bezerros acometidos de enfermidade neurológica e em células de cultivo utilizadas na técnica de soroneutralização (SN), permitindo a obtenção dos resultados em 24 horas. A técnica, denominada de soroneutralização rápida (SNR), apresentou sensibilidade de 97,3%; especificidade de 95,5% e precisão de 96,2% em comparação com a SN tradicional; e sensibilidade de 94,7%, especificidade de 97,3% e precisão de 96,1% em comparação com um ELISA comercial. Esses resultados demonstram que esses AcMs podem ser muito úteis para uso em técnicas rápidas de diagnóstico de infecções suspeitas de BHV-1 ou de BHV-5, sobretudo em situações de surto, quando a tomada de decisões adequadas depende de um diagnóstico rápido e confiável.

Monoclonal antibodies (mAbs) produced to a Brazilian isolate of bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) were used to standardize rapid tests for the diagnostic of BHV-1 and BHV-5 infections. The detection of viral antigens by immunofluorescence in descamative cells (IFDC) was compared to virus isolation in nasal secretions of 16 calves inoculated with BHV-1 (n=6) or BHV-5 (n=10). One hundred and sixty two out of 203 specimens (89.6%) had identical results in both assays (143 positive; 39 negative); the IFDC assay showing a sensitivity of 96.6%, specificity of 70.9% and precision of 89.6%. The mAbs were also used to detect BHV-5 antigens in fresh brain smears of calves from outbreaks of neurological disease; and in cell cultures used in a virus neutralizing (VN) test, allowing the obtention of results in 24 hours. The rapid virus neutralizing test (RVN) showed a sensitivity of 97.3%, specificity of 95.5% and precision of 96.2% comparing to the standard VN test; and a sensitivity of 94.7%, specificity of 97.3% and precision of 96.1% as compared to a commercial ELISA. These results demonstrate that these mAbs are useful in rapid diagnostic tests, which may be very important in field outbreaks, when taking adequate decisions depends on rapid and reliable diagnostic tests.