The objective of the present work was to induce chromosome doubling in genotypes of Brachiaria ruziziensis with potential for production of good-quality biomass and tolerance/resistance to stress caused by aluminum and spittlebugs. Germinated seeds of B. ruziziensis were immersed in 0.1% colchicine solution for 2 or 3 hours. Ploidy level was determined by flow cytometry and confirmed by chromosome count. Fertility of the tetraploid plants was assessed through evaluation of pollen viability by staining. There was no statistical difference with regard to seedling survival and number of duplicate seedlings between the treatments. Survival rate was 8%, of which 11.45% were tetraploid genotypes. The mean viability of pollen grains from the evaluated tetraploid plants ranged from 51.75 to 55.50%. So, the tetraploids plants obtained from genotypes of a bred population of ruzigrass produce fertile pollen, in percentages that render crosses viable in genetic breeding programs.

Os programas de melhoramento de Brachiaria spp. utilizam os cruzamentos intraespecíficos e interespecíficos entre plantas sexuais e apomíticas para obtenção de novas cultivares com características desejadas. Como existem diferentes níveis de ploidia dentro e entre as espécies deste gênero, torna-se necessária a avaliação dos genótipos utilizados em programas de melhoramento para a orientação das estratégias de cruzamentos adotadas pelos melhoristas. Neste trabalho, o conteúdo de DNA e o número cromossômico foram determinados para caracterizar o nível de ploidia de genótipos de Brachiaria spp. Na análise de 15 genótipos, o conteúdo de DNA variou de acordo com o nível de ploidia (2x, 3x e 4x) e entre espécie e/ou taxon. O conteúdo de médio de DNA foi de 1,74 pg (2x) para B. ruziziensis, 3,74 pg (4x) para B. decumbens e de 3,52 pg (4x) para B. brizantha. Para o genótipo 86 obteve-se 2,57 pg de DNA e 2n = 3x = 27, indicando tratar-se de um acesso triplóide, provavelmente um híbrido natural. A variação no conteúdo de DNA total permitiu diferenciar Brachiaria ruziziensis (2n = 2x = 18) das espécies tetraploides (2n = 4x = 36) Brachiaria decumbens e Brachiaria brizantha, bem como o provável híbrido triplóide (2n = 3x = 18) dessas espécies.

Breeding programs for Brachiaria spp. use both intraspecies and interspecies crosses between sexual and apomictic plants in order to obtain new cultivars with the desired characteristics. As there are different ploidy levels both within and between species of this genus, it becomes necessary to evaluate the genotypes used in breeding programs, as a guide to breeders when adopting crossing strategies. In this work, DNA content and chromosome number were determined in order to characterise ploidy levels in Brachiaria spp. genotypes. In the analysis of 15 genotypes, DNA content varied with the ploidy levels (2x, 3x and 4x), and between species and/or taxon. The average DNA content was 1.74 pg (2x) in B. ruziziensis, 3.74 pg (4x) in B. decumbens and 3.52 pg (4x) for B. brizantha. For the genotype 86, 2.57 pg of DNA was obtained and 2n = 3x = 27, indicating a triploid accession, probably a natural hybrid. The variation in the total DNA content allowed the differentiation of Brachiaria ruziziensis (2n = 2x = 18) from the tetraploid species Brachiaria Brizantha and Brachiaria decumbens (2n = 4x = 36), as well as the probable hybrid triploid (2n = 3x = 18) of these species.

A citometria de fluxo permite estimar o conteúdo de DNA de um grande número de plantas rapidamente. No entanto, protocolos inadequados podem comprometer a confiabilidade dessas estimativas, levando a variações nos valores de conteúdo de DNA para uma mesma espécie. Neste trabalho, objetivou-se propor um protocolo eficiente para a estimativa do conteúdo de DNA de genótipos de Brachiaria spp. com diferentes níveis de ploidia, utilizando a citometria de fluxo. Foram avaliados quatro genótipos (B. ruziziensis, diploide e tetraploidizada artificialmente; B. brizantha tetraploide e um híbrido natural triploide), 3 soluções tampões (MgSO4, Galbraith e Tris-HCl) e três espécies como padrões de referência interno (Raphanus sativus, Solanum lycopersicum e Pisum sativum). As variáveis mensuradas foram: nota do histograma (1 a 5), coeficiente de variação e estimativa do conteúdo de DNA. A melhor combinação para as análises do conteúdo de DNA de Brachiaria spp. por citometria de fluxo foi o emprego do tampão MgSO4 com o rabanete como padrão de referência. O tamanho dos genomas expresso em picogramas de DNA foi apresentado para todos os genótipos e a importância da pontuação do histograma na confiabilidade dos resultados das análises do conteúdo de DNA foi discutida.

Flow cytometry allows to estimate the DNA content of a large number of plants quickly. However, inadequate protocols can compromise the reliability of these estimates leading to variations in the values of DNA content the same species. The objective of this study was to propose an efficient protocol to estimate the DNA content of Brachiaria spp. genotypes with different ploidy levels using flow cytometry. We evaluated four genotypes (B. ruziziensis diploid and artificially tetraploidized; a tetraploid B. brizantha and a natural triploid hybrid), three buffer solutions (MgSO4, Galbraith and Tris-HCl) and three species as internal reference standards (Raphanus sativus, Solanum lycopersicum e Pisum sativum). The variables measured were: histogram score (1-5), coefficient of variation and estimation of DNA content. The best combination for the analysis of Brachiaria spp. DNA content was the use of MgSO4 buffer with R. sativus as a internal reference standard. Genome sizes expressed in picograms of DNA are presented for all genotypes and the importance of the histogram score on the results reliability of DNA content analyses were discussed.

Objetivou-se, neste trabalho, a obtenção de protoplastos de híbridos triplóides entre o capim-elefante e o milheto como base para futuros trabalhos de duplicação cromossômica. Foram utilizados explantes de mesofilo de plantas cultivadas in vitro e in vivo, ou de calos de dois híbridos triplóides (H1 e H2), os quais foram tratados com soluções enzimáticas em diferentes concentrações da enzima celulase R-10 (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%), acrescidas de 0,2% macerozyme e 0,1% driselase ou 1,0% pectolyase Y-23 e 0,5% hemicelulase. A digestão enzimática foi monitorada a cada hora durante 5 horas. Obtiveram-se protoplastos a partir de folhas in vitro e in vivo dos dois híbridos triplóides, sendo as folhas in vitro as melhores fontes de explante. A quantidade de protoplastos variou em função do híbrido, da solução enzimática e do tempo de tratamento.

The objective of this work was to obtain protoplasts from napier grass and pearl millet triploid hybrids as a basis for future studies on chromosomal duplication. Explants were taken from mesophyll of in vitro- and in vivo-cultured plants or from calli of two triploid hybrids (H1 and H2), which were treated with enzymatic solutions containing different concentrations of cellulase R-10 (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0%) with an additional 0.2% macerozyme and 0.1% driselase or 1.0% pectolyase Y-23 and 0.5% hemicellulase. Enzymatic digestion was monitored once every hour for five hours. Protoplasts were obtained from in vitro and in vivo leaflets of both triploid hybrids, and in vitro leaflets were the best explant sources. The quantity of produced protoplasts varied according to the hybrid, the enzymatic solution and the treatment time.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de três substratos orgânicos - casca de arroz carbonizada, pó de casca de coco seco e verde - e dois adubos -Vitasolo® e húmus de minhoca -, na aclimatização de plântulas de Heliconia psittacorum L., provenientes da micropropagação. Aos 75 dias, avaliaram-se a altura das plantas, o diâmetro do pseudocaule, o número de folhas e a área da terceira folha. A casca de arroz foi mais eficiente que o pó de casca de coco, verde ou seco; o pó de casca de coco verde foi mais eficiente que o pó de casca de coco seco; e o húmus foi mais eficiente que o Vitasolo®.

The objective of this work was to evaluate the efficiency of three organic substrates, carbonised rice hull, dry and green coir dust, and two fertilizers, Vitasolo® and earthworm humus, in the acclimatization of plantlets of Heliconia psittacorum L., obtained from micropropagation. After 75 days, the height of the plants, diameter of pseudo-stem, number of leaves and area of the third leaf were evaluated. The rice hull was more efficient than the coir dust (dry or green); the green coir dust was more efficient than dry coir dust; and the humus was more efficient than Vitasolo®.