RESUMO A murcha de Fusarium causada pelo fungo Fusarium oxysporum f. sp. passiflorae (Fop) é a principal doença de origem fúngica da cultura do maracujazeiro. Os clamidósporos, estruturas de resistência produzidas por Fop, permitem a sua sobrevivência no solo por vários anos, além de possuir atividade saprofítica. Dentre os métodos de manejo, a biofumigação por incorporação de repolho e mandioca brava tem-se apresentado como uma alternativa viável no controle de patógenos veiculados pelo solo. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de diferentes debris (restos vegetais) na fase de sobrevivência de Fop em condições de laboratório. Foram realizados testes in vitro com incorporação de folhas dos materiais vegetais maracujá amarelo, repolho, mandioca brava e mandioca mansa em substratos infestados com diferentes isolados de Fop. Foram avaliados o crescimento micelial e a produção e germinação de clamidósporos. A incorporação dos debris de repolho e mandioca brava teve efeito fungistático sobre Fop, com redução no crescimento micelial e produção de clamidósporos. A incorporação de repolho ao substrato inibiu totalmente a germinação de clamidósporos em 78% dos isolados avaliados e reduziu o percentual de germinação dos demais.

ABSTRACT Fusarium wilt, caused by the fungus Fusarium oxysporum f. sp. passiflorae (Fop) is the main fungal disease in passion fruit crops. Chlamydospores, which are structures of resistance produced by Fop, allow the fungus survival in the soil for several years and have saprophytic activity. Biofumigation with incorporation of cabbage and bitter cassava has been a viable alternative, among management methods, for the control of soil pathogens. The objective of this work was to evaluate the effect of different plant debris (plant residues) on survival of Fop under laboratory conditions. In vitro tests were carried out with incorporation of leaves of yellow passion fruit, cabbage, bitter cassava, and sweet cassava plants into substrates infested with different Fop isolates. Mycelial growth and chlamydospore production and germination were evaluated. The incorporation of cabbage and bitter cassava debris had a fungistatic effect on Fop, with decreases in mycelial growth and chlamydospore production. The incorporation of cabbage into the substrate totally inhibited the chlamydospore germination in 78% of the evaluated isolates and decreased the germination percentage in the others.

RESUMO A fim de se obter agentes de biocontrole para controle da antracnose em frutos de mamão em pós-colheita, buscou-se: i) selecionar bactérias epifíticas de mamoeiro antagonistas a Colletotrichum brevisporum pela produção de compostos antimicrobianos difusíveis e voláteis, quitinase e inibição da germinação de conídios; ii) quantificar a produção de biofilme pelos isolados selecionados; iii) obter uma concentração de bactérias que proporcionasse o controle da antracnose em discos de frutos; iv) avaliar a redução da severidade da doença em frutos de mamão. De 224 bactérias, 74 exibiram um mecanismo de ação contra o patógeno, 13 isolados dois mecanismos, quatro apresentaram três, e uma bactéria exibiu todos. Mediante a verificação da compatibilidade entre antagonistas, e a quantificação da formação de biofiolme, estabeleceram-se cinco “Mix” compostos por quatro isolados bacterianos. Em discos de frutos as bactérias foram avaliadas nas concentrações 106, 107 e 108 UFC mL-1. À exceção do Mix 2, os demais reduziram significativamente a antracnose nos discos quando comparados ao controle. Os “Mix” 1, 3, 5, na concentração 108 UFC mL-1 exibiram melhor desempenho reduzindo a doença em até 75 %, 89,78 % e 90,8 %, respectivamente. Os Mix 3 e 5, na concentração de 108 UFC mL-1, foram avaliados em frutos juntamente com o fungicida sintético Piraclostrobina. Não se verificou diferença significativa entre os Mix e o fungicida, que atingiu níveis de redução da doença superiores a 97 %, e as combinações com 98 %, frente ao controle não tratado.

ABSTRACTUMO Aiming to obtain biocontrol agents for post-harvest anthracnose control in papaya fruits, the present study sought to: i) select, from papaya fruits, epiphytic bacteria that are antagonistic to Colletotrichum brevisporum, based on the production of diffusible and volatile antimicrobial compounds, chitinase, and conidial germination inhibition; ii) quantify biofilm production by the selected strains; iii) obtain a concentration of bacteria that would provide anthracnose control in fruit discs; iv) evaluate the disease severity reduction in papaya fruits. Of 224 bacteria, 74 exhibited one mechanism of action against the pathogen, 13 isolates showed two mechanisms, four isolates had three mechanisms, and one bacterium showed all mechanisms. Verification of compatibility between antagonists, as well as biofilm quantification, led to the formation of five “Mix” composed of four bacterial isolates. In fruit discs, bacteria were evaluated at the concentrations 106, 107 and 108 CFU mL-1. Except Mix 2, the remaining combinations significantly reduced anthracnose in the discs when compared to control. Mix 1, 3 and 5, at the concentration 108 CFU mL-1, showed the best performance, reducing the disease severity by up to 75.0%, 89.78% and 90.8%, respectively. Mix 3 and 5, at the concentration 108 CFU mL-1, were evaluated together with the synthetic fungicide Pyraclostrobin in fruits. There was no significant difference between the Mix and the fungicide, which reached disease reduction levels superior to 97%, while combinations reached 98%, compared to the untreated control.

ABSTRACT. Modifications were made in the PCR conditions aiming to overcome the problem of non-amplification of the Xanthomonas phaseoli pv. manihotis (Xpm) fragment, using the primer pair XV / XK described in the literature. The objective of this study was to propose changes in the primers already described (XV / XK_MOD) and validate the use of these new primers in identifying Xpm. The validation procedure was carried out with the primer pair XV and XK_MOD, using different strains of Xpm, other plant pathogenic and endophytic bacteria genera and one isolate of X. phaseoli pv. passiflorae. As a control, additional reactions were conducted in multiplex with the universal primers for the 16S rRNA gene of the bacteria together with XV / XK and XV / XK_MOD. Using the forward primer (XV) described in the literature together with the modified reverse primer (XK_MOD), it was possible to achieve amplification from DNA extracted from in vitro cultures and from infected tissue, but no amplification was noticed for the primer pair described in the literature, confirming the effectiveness of the proposed modification.

RESUMO Apesar da importância da passicultura no Brasil, essa atividade foi forçada a ser itinerante, devido à ocorrência de doenças nas regiões produtoras, em particular a fusariose. O uso de rizobactérias é uma alternativa de controle potencial, mas outras ações são necessárias para garantir a atividade dessas bactérias no campo. Objetivou-se avaliar a influência de três culturas monocotiledônicas sobre a atividade de rizobactérias antagonistas a Fusarium oxysporum f. sp. passiflorae (Fop). As rizobactérias foram isoladas de maracujazeiro e testadas para a produção de compostos difusíveis e voláteis, bem como quitinases que inibem Fop. De um total de 167 isolados, dois produziram compostos voláteis, 21 compostos difusíveis e 32 quitinases. Três combinações compatíveis de isolados que possuíam pelo menos dois mecanismos de ação contra Fop, e podiam crescer em ampla faixa de pH, foram aplicadas em vasos com sorgo, milho ou milheto, além de vasos em pousio (controle), em casa-de-vegetação. Avaliaram-se o carbono da biomassa microbiana, respiração basal do solo, quociente metabólico e atividade da enzima fosfatase ácida. A interação entre as espécies cultivadas e as combinações de rizobactérias foi significativa apenas para o quociente metabólico, cujos valores tendem a ser superiores no cultivo de milheto na combinação 3 (R77/R95/R104/R120), a mais diversificada metabolicamente. A mais alta atividade de fosfatase ácida também foi obtida com milheto. Os resultados relativos à atividade enzimática e quociente metabólico indicam que o milheto proporciona maior atividade dos antagonistas no solo.

ABSTRACT In spite of the importance of passion fruit cultivation in Brazil, this activity has been forced to be itinerant, due to the occurrence of diseases in producing regions, in particular fusariosis. The use of rhizobacteria is a potential control alternative, but other improvements are necessary to guarantee the activity of these bacteria in the field. This study aimed at evaluating the influence of three monocotyledonous groups on the activity of rhizobacteria antagonistic to Fusarium oxysporum f. sp. passiflorae (Fop). Rhizobacteria were isolated from passion fruit plants and tested for the production of diffusible and volatile compounds, as well as chitinases that inhibit Fop. From a total of 167 isolates, two produced volatile compounds, 21 diffusible compounds and 32 chitinases. Three compatible combinations of isolates that had at least two action mechanisms against Fop and could grow in a wide pH range were applied in pots with sorghum, millet or maize, in addition to pots left fallow (control), in a greenhouse. The microbial biomass carbon, soil basal respiration, metabolic quotient and activity of the acid phosphatase enzyme were evaluated. The interaction between the cultivated species and rhizobacterial combinations was significant only for the metabolic quotient, whose values tended to be higher under millet cultivation in combination 3 (R77/R95/R104/R120), the most metabolically diversified one. The highest activity of acid phosphatase was also obtained with millet. The results for enzymatic activity and metabolic quotient indicate that millet provides a greater activity of the antagonists in the soil.

A ocorrência de Pseudomonas viridiflava é descrita em sementes de couve chinesa (Brassica rapa var. pekinensis) importadas do Japão. Do ponto de vista epidemiológico, a detecção dessa bactéria é de extrema importância. Embora já existam, em nosso país, relatos desse patógeno nas culturas de alface, alho, cebola, cenoura, feijão e mandioca, sua presença em sementes de couve chinesa pode se constituir num risco potencial para outras espécies de brássicas aqui cultivadas.

A natural occurrence of Pseudomonas viridiflava in chinese cabbage (Brassica rapa var. pekinensis) imported seeds from Japan is described. From the epidemiological point of view, this is a very important observation since the bacterium could be a source of inoculum for other cultived brassicas in Brazil.

O objetivo deste trabalho foi avaliar procariotas quanto ao potencial de antagonismo direto para o biocontrole da podridão-mole-do-tomateiro (Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum). Avaliaram-se 45 isolados bacterianos pelo teste de antibiose contra o patógeno. Foram feitos dois ensaios em que sementes de tomate (Lycopersicon esculentum Mill.) cv. Santa Clara foram infectadas com isolados antagônicos. As mudas foram transplantadas para solos infestados com suspensões de propágulos P. carotovorum com OD540 de 0,45 e 0,65. Os antagonistas UFV-0005, UFV-043, UFV-BF112 e UFV-0006 foram eficientes em proteger plantas de tomateiro contra a podridão-mole.

This work aimed to evaluate prokaryotes to provide direct antagonism and biocontrol of tomato soft rot (Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum). Forty-five bacterial isolates previously selected for biological control of several tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) diseases were evaluated using an antibiosis test. 'Santa Clara' tomato seeds were inoculated with potential antagonist isolates and transplanted to a soil infested with the pathogen, in two asseys, at a propagule concentration of OD540 0.45 and 0.65. Antagonists UFV-0005, UFV-043, UFV-BF112, and UFV-0006 protected tomato plants against soft rot disease.

Ao longo de vários anos, no Laboratório de Bacteriologia de Plantas e Controle Biológico (LBPCB) do Departamento de Fitopatologia da Universidade Federal de Viçosa têm-se, sistematicamente, isolado, de rizosfera, rizoplano e filoplano de plantas cultivadas de importância econômica, milhares de procariotas os quais são testados, um a um, como agentes de biocontrole de enfermidades. A grande maioria deles, como esperado, não exibe qualquer potencialidade como agente de biocontrole e é descartada. Alguns poucos são selecionados, através de demorados ensaios de biocontrole experimental tanto em casa de vegetação como em campo. Neste trabalho, mostra-se que muitos dos organismos em estudo, mesmo havendo sido selecionados, principalmente, por induzirem resistência sistêmica na planta alvo, expressam constitutivamente mecanismos de antagonismo microbiano que parecem fazer parte de seu perfil enquanto agentes de biocontrole.

Along several years, at the Laboratory of Plant Bacteriology and Biological Control of the Department of Plant Pathology of the Federal University of Viçosa, thousands of prokaryote isolates have been obtained from the rhizosphere, rhizoplane and phylloplane of economically important plants. Every obtained isolate is tested as biocontrol agents. As expected, the majority does not show any biocontrol potentiality and is discarded. Few are selected through time-consuming experimental biocontrol trials in greenhouse and field. Even being selected mainly for their ability to induce resistance in target plants, many of them constitutively express mechanisms of antagonism against pathogens that seem to be part of their performance while biocontrol agents.

O objetivo deste trabalho foi investigar se o mecanismo de indução de resistência é responsável pela capacidade de um isolado bacteriano residente no filoplano (Bacillus cereus), obtido de plantas sadias de tomateiro, em controlar diversas doenças da cultura. A fim de investigar o modo de ação envolvido no controle, foi utilizado um isolado de Pseudomonas syringae pv. tomato como patógeno desafiador. A ausência do mecanismo de antibiose contra o patógeno, o aumento significativo dos níveis de peroxidases em plantas expostas ao antagonista e submetidas à inoculação do patógeno desafiador, assim como a sistemicidade da proteção, são evidências que sugerem que o mecanismo de biocontrole em questão se refere à indução de resistência sistêmica (IRS).

The objective of this work was to verify if the induced resistance mechanism is responsible for the capacity of a phylloplane resident bacteria (Bacillus cereus), isolated from healthy tomato plants, to control several diseases of this crop. A strain of Pseudomonas syringae pv. tomato was used as the challenging pathogen. The absence of direct antibiosis of the antagonist against the pathogen, the significant increase in peroxidases activity in tomato plants exposed to the antagonist and then inoculated with the challenging pathogen, as well as the character of the protection, are evidences wich suggest that biocontrol efficiency presented by the antagonist in previous works might be due to induced systemic resistance (ISR).

Supressão de doenças de plantas por microrganismos endofíticos tem sido demonstrada em diversos patossistemas. Neste trabalho foram selecionados isolados de bactérias endofíticas de folhas e ramos de cafeeiro com potencial para o controle biológico da ferrugem do cafeeiro, pois é conhecido que esses microrganismos podem possuir essa característica. Bactérias endofíticas isoladas previamente de folhas e ramos de Coffea arabica L e Coffea robusta L foram avaliadas quanto ao seu potencial de biocontrole da ferrugem do café causada pelo fungo Hemileia vastatrix Berk. & Br., raça 2. As bactérias foram testadas para a inibição da germinação de urediniosporos do fungo e em bioensaios para o controle do desenvolvimento da ferrugem alaranjada do cafeeiro em discos de folhas, folhas destacadas e mudas da cv. Mundo Novo. Os isolados de bactérias endofíticas testados demonstraram eficácia na inibição da germinação de urediniosporos e/ou no desenvolvimento da ferrugem, com valores acima de 50%, embora os resultados obtidos nos testes de germinação de urediniosporos tenham sido inferiores ao tratamento com propiconazole (testemunha padrão). Nos testes em discos de folhas, folhas destacadas e em plantas de cafeeiro, os isolados endofíticos TG4-Ia, TF2-IIc, TF9-Ia, TG11-IIa e TF7-IIa demonstraram melhor controle da ferrugem do cafeeiro. Os isolados endofíticos TG4-Ia e TF9-Ia foram identificados como Bacillus lentimorbus Dutky e Bacillus cereus Frank. & Frank., respectivamente. De acordo com os resultados verifica-se que alguns isolados foram eficientes em controlar a ferrugem do cafeeiro, embora alguns tenham aumentado a severidade da doença. Apesar do número relativamente baixo de bactérias endofíticas testadas, resultados promissores foram obtidos em relação ao controle biológico da ferrugem, sendo que esses poderão no futuro apresentar uma alternativa aos fungicidas.

Suppression of plant diseases due to the action of endophytic microorganisms has been demonstrated in several pathosystems. Experiments under controlled conditions involving endophytic bacteria isolated from leaves and branches of Coffea arabica L and Coffea robusta L were conducted with the objective of evaluating the inhibition of germination of Hemileia vastatrix Berk. & Br., race II, urediniospores and the control of coffee leaf rust development in tests with leaf discs, detached leaves, and on potted seedling of cv. Mundo Novo. The endophytic bacterial isolates tested proved to be effective in inhibiting urediniospore germination and/or rust development, with values above 50%, although the results obtained in urediniospore germination tests were inferior to the treatment with fungicide propiconazole. Endophytic isolates TG4-Ia, TF2-IIc, TF9-Ia, TG11-IIa, and TF7-IIa, demonstrated better coffee leaf rust control in leaf discs, detached leaves, and coffee plant tests. The endophytic isolates TG4-Ia and TF9-Ia were identified as Bacillus lentimorbus Dutky and Bacillus cereus Frank. & Frank., respectively. Some endophytic bacterial isolates were effective in controlling the coffee leaf rust, although some increased the severity of the disease. Even though a relatively small number of endophytic bacteria were tested, promising results were obtained regarding the efficiency of coffee leaf rust biocontrol. These selected agents appears to be an alternative for future replacement of chemical fungicide.