RESUMO: Conhecer os crioprotetores não tóxicos aos oócitos de peixes é de extrema importância para testes que visam aumentar a resistência dos oócitos ao frio, permitindo, assim, estudos mais avançados em criopreservação. Desta forma, crioprotetores comumente utilizados como o metanol, dimetil sulfóxido, etilenoglicol, propilenoglicol, sacarose e frutose foram estudados. Os oócitos imaturos, nos estágios inicial até vitelogênico (diâmetro <1,7mm), e maduros (diâmetro >1,8mm) de Steindachneridion parahybae foram avaliados. Quatro experimentos distintos foram realizados, sendo três destes utilizando oócitos imaturos, e um usando oócitos no estágio maduro. Para cada estágio oocitários foram avaliados, considerando qual a melhor solução de manutenção a ser utilizada: Hank ou 50% L15 e; viabilidade após banhos por 30min (temperatura ambiente) em concentrações de crioprotetores, variando de 0,25 a 4M. Diferentes testes foram utilizados para avaliar a viabilidade dos oócitos: maturação in vitro seguido por observação da quebra da vesícula germinativa (somente para oócitos imaturos), coloração por Azul de Tripan (todos os estágios) e taxas de fertilização e eclosão (somente no estágio maduro). Os resultados mostraram que o efeito tóxico dos crioprotetores em oócitos geralmente crescem com o aumento das concentrações. A sensibilidade dos oócitos a crioprotetores aumentam de acordo com o estágio de desenvolvimento, com oócitos maduros sendo mais sensíveis. Sacarose, frutose, metanol, propileno glicol e dimetil sulfóxido podem ser usados como crioprotetores para oócitos de S. parahybae.

ABSTRACT: To know the non-toxic cryoprotectants to fish oocytes is of extreme importance for tests that aim to increase oocyte resistance to cold, thus allowing more advanced studies in cryopreservation. Therefore, commonly used cryoprotectants such as methanol, dimethyl sulfoxide, ethylene glycol, propylene glycol, sucrose and fructose were studied. Immature oocytes from the initial to vitelogenic (diameter <1.7 mm) and mature (diameter >1.8 mm) stages of Steindachneridion parahybae were evaluated. Four distinct experiments were performed, three using immature oocytes and one using oocytes at the mature stage. For each oocyte stage, the best maintenance solution to be used: Hank or 50% L15 and; viability after baths for 30min (room temperature) at cryoprotectant concentrations ranging from 0.25 to 4M were evaluated. Different tests were used to evaluate oocyte viability: in vitro maturation followed by observation of germinal vesicle breakdown (only for immature oocytes), Trypan Blue staining (all stages) and fertilization and hatching rates (mature stage only). Results showed that the toxic effect of cryoprotectants on oocytes generally increases with increasing concentrations. Sensitivity of oocytes to cryoprotectants increases according to the stage of development, with mature oocytes being more sensitive. Sucrose, fructose, methanol, propylene glycol and dimethyl sulfoxide can be used as cryoprotectants for S. parahybae oocytes.

RESUMO. O transporte de peixes vivos é uma prática comum na aquicultura. Por isso, o objetivo do presente trabalho foi analisar a qualidade de água e sobrevivência de alevinos Rhamdia quelen (2,55±0,44 g) seguindo 4, 8 e 12h de transporte simulado, em densidades de 30 e 60 peixes 5 L-1 e em temperaturas de 15, 20 e 25oC. Foram analisados: oxigênio dissolvido, pH, condutividade elétrica, amônia, nitrito, nitrato, turbidez, alcalinidade e sobrevivência. A temperatura e o tempo tiveram influência significativa nos níveis de amônia, pH, condutividade elétrica e oxigênio, e verificou-se mortalidades após 12 horas de simulação de transporte nos peixes mantidos a 20 e 25ºC. A densidade influenciou diretamente nos parâmetros de qualidade de água, tais como o aumento da condutividade elétrica e turbidez e a diminuição de oxigênio dissolvido e pH na densidade de 60 peixes 5 L-1. Em conclusão, recomenda-se o transporte de alevinos de R. quelen em temperaturas entre 15 e 25°C, em períodos inferiores a 12 horas. E a densidade de seis peixes por litro de água não compromete a homeostase dos alevinos, e consequentemente sua sobrevivência.

ABSTRACT. Transportation of live fish is routinely done in aquaculture; therefore, the aim of this study was to analyze the water quality and survival rate of Rhamdia quelen fry (2.55±0.44 g) following 4, 8 and 12h of simulated transportation, at stock densities of 30 and 60 fry 5 L-1 and temperatures 15, 20 and 25oC. Dissolved oxygen, pH, electrical conductivity, total ammonia, nitrite, nitrate, turbidity, total alkalinity and survival were analyzed. Temperature and time had a significant influence on ammonia, pH, electrical conductivity, and dissolved oxygen levels, and fish died after 12 hours of transportation simulation when kept at 20 and 25ºC. The density directly affected the water quality parameters, such as the increase in electrical conductivity and turbidity, and decrease in dissolved oxygen and pH at the density of 60 fish 5 L-1. In conclusion, the transportation of R. quelen fry should be carried out at temperatures between 15 and 25°C, for periods of less than 12 hours, and at stock density of up to 6 fish per liter of water so as not to impair the homeostasis of the fry, and consequently, their survival.

Resumo O Steindachneridion parahybae é um bagre ameaçado de extinção no Brasil e estratégias aplicadas para a otimização de gametas são necessárias. O objetivo deste estudo foi avaliar doses inseminantes e volume de água sobre os valores das taxas de fertilização, eclosão e larvas normais em S. parahybae. Utilizando-se um delineamento experimental casualizado em esquema fatorial (4×4), com quatro doses inseminantes: 1,0×104; 1,0×105; 1,0×106; 1,0×107 espermatozóides ovócito-1 e quatro volumes de água: 1; 35; 65 e 95mL de água g-1 de ovócitos. As combinações de doses e volumes foram realizadas em triplicatas (n=48). Cada incubadora (1,5L de volume útil) contendo 1g de ovócitos foi considerada como uma unidade experimental. Interações significativas entre doses inseminantes e volumes de água para os valores das taxas de fertilização e efeito quadrático das doses e do volume para os valores das taxas de eclosão foram verificadas. As dosagens e os volumes aplicados não influenciaram no percentual de larvas normais (87,70±5,06). Recomenda-se a aplicação de 5,5×106 espermatozoides ovócito-1 e a utilização de 1mL de água.g-1 de ovócitos no procedimento de fertilização artificial in vitro. Estes resultados permitiram desenvolver novas estratégias biotecnológicas aplicadas na conservação do S. parahybae.

Abstract The Steindachneridion parahybae is an endangered catfish from Brazil and strategies applied for gametes optimization are necessary. The aim of this study was to assess inseminating doses and water volume upon the fertilization, hatching rates and percentage of normal larvae in S. parahybae . Was used a randomized design in factorial scheme (4×4) with four inseminating doses: 1.0×104, 1.0×105, 1.0×106, 1.0×107spermatozoa oocyte-1 and four volumes of water: 1, 35, 65 and 95mL of water g-1 of oocytes. The combination of doses and volumes were performed in triplicates (n=48). Each incubator (1.5L of useful volume) with 1g of oocytes was considered as an experimental unit. Significant interaction between inseminating doses and volumes of water to the values of the fertilization rates and quadratic effect of doses and volume for the values of hatching rates were observed. The doses and volumes did not influence the percentage of normal larvae (87.70±5.06%). It is recommended the use of 5.5×106 spermatozoa oocyte-1 and 1mL of water g-1 of oocytes during in vitro fertilization procedure. These results allowed us to develop new biotechnological strategies applied to the conservation of S. parahybae .

The objective of this study was to evaluate the effects of water volume and water temperature on the sperm motility duration and the number of spermatozoa, and the water volume on the fertilization rates of oocytes of Rhinelepis aspera. Experiments were carried out to evaluate the effect of semen dilutions (1.74×10-5, 1.74×10-4, 1.74×10-3, 1.74×10-2, 1.74×10-1 and 1.00 mL of sperm.mL-1 of water) and water temperature (5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, and 50 ºC) on spermatozoa motility duration. In addition, the effects of insemination dose (7×10³, 7×10(4), 7×10(5), 7×10(6) and 7×10(7) spermatozoa.oocyte-1) and water volume (1.0, 30.0, 60.0, 90.0 and 120.0 mL water.2.0 mL-1 oocytes) on the artificial fertilization rates of oocytes were evaluated. The longest sperm motility duration were observed for the semen dilution of 1.74×10-5 mL semen.mL-1 water and in water at 5 ºC. The highest fertilization rates were obtained for insemination doses between 7.00×10³ and 1.23×10(7) spermatozoa. oocyte-1 and water volume of 28.11 mL water.2.0 mL-1 oocytes.

Um experimento foi realizado com o objetivo de estimar a concentração espermática das espécies dourado (Salminus brasiliensis), curimba (Prochilodus lineatus), jundiá (Rhamdia quelen), cascudo-preto (Rhinelepis aspera) e tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus) pelo método de espermatócrito. Utilizaram-se 19, 58, 51, 43 e 85 reprodutores de dourado, curimba, jundiá, cascudo-preto e tilápia-do-nilo, respectivamente. Com exceção da tilápia-do-nilo, os reprodutores foram submetidos ao processo de indução hormonal e posteriormente submetidos a coleta de sêmen. Foram comparadas as técnicas de mensuração da concentração espermática do sêmen por contagem em câmara hematimétrica de Neubauer e por espermatócrito. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de regressão a 5% de probabilidade. As concentrações espermáticas mensuradas por ambas as técnicas apresentaram relação linear, para curimbas, jundiás e tilápias-do-nilo, com equações y = 6,6624 × 10(9) + 3,68553 × 10(8)x; y = 2,153 × 10(9) + 4,426 × 10(8)x e y = -9,0897 × 10(8) + 6,0167 × 10(8), respectivamente. O método de espermatócrito pode ser utilizado para estimar a concentração espermática do sêmen de curimbas, jundiás e tilápias-do-nilo.

The objective of this experiment was estimate sperm concentration of "dourado" (Salminus brasiliensis), "curimba" (Prochilodus lineatus), "jundiá" (Rhamdia quelen), "cascudo-preto" (Rhinelepis aspera) and Nile tilapia (Oreochromis niloticus) by the method of spermatocrit. It was used 19, 58, 51, 43 and 85 brood fish of "dourado", "curimba", "jundia", "cascudo-preto" and Nile tilapia, respectively. Except for the Nile tilapia, the fishes were subjected to the hormonal induction process and then submitted to the semen collection. The measurement techniques of the sperm concentration by sperm count in Neubauer chamber (CSPZ) and by spermatocrit (ESPMT) were compared. The results were submitted to the regression analysis at 5% of probability. It was observed that the variables CSPZ and ESPMT presented linear relationship to the "curimba", "jundia" and Nile tilapia with equations y = 6.6624 × 10(9) + 368553 × 10(8)x; y = 2.153 × 10(9) + 4.426 × 10(8)x and y = -9.0897 × 10(8) + 6.0167 × 10(8), respectively. The method of spermatocrit can be used to estimate the sperm concentration of "curimba", "jundiá" and Nile tilapia.

Este estudo foi realizado para avaliar o efeito da contaminação da água por cádmio sobre a taxa de fertilização dos ovócitos e de eclosão dos ovos e a duração da motilidade espermática em jundiá (Rhamdia quelen). Foram realizados dois ensaios: no ensaio 1, foi avaliado o efeito do cádmio sobre a fertilização artificial dos ovócitos e a eclosão dos ovos e, no ensaio 2, o efeito do cádmio sobre a duração da motilidade espermática. Em ambos os ensaios, adotou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado com cinco níveis de cádmio na água (0; 20; 50; 80 e 110 mg L-1), avaliados com quatro (ensaio 1) ou três repetições (ensaio 2). As taxas de fertilização e eclosão tiveram resposta linear, mantendo-se constantes até os níveis de 28,6 e 40,4 mg L-1, respectivamente. A partir desses níveis, ocorreu um efeito linear inversamente proporcional entre as taxas de fertilização e eclosão e o aumento dos níveis de cádmio. O aumento do nível de cádmio na água teve efeito linear inverso na duração da motilidade espermática, proporcionando redução de 21,8s em água limpa para 10,6s em água contaminada contendo 110 mg-1. Níveis a partir de 20,0 e 28,6 mg L-1 influenciam espermatozoides e ovócitos de jundiá, respectivamente.

The objective of this work was to evaluate the effect of water contaminated by cadmium on the rates of oocyte fertilization and egg hatching, and sperm motility duration on jundiá catfish (Rhamdia quelen). Two trials were performed: in trial 1, it was evaluated the effect of cadmium on the artificial fertilization of oocytes and egg hatching and in trial 2, the effects of cadmium on the sperm motility duration were evaluated. In both trials, it was used a completely randomized experimental design with five levels of cadmium in the water (0; 20; 50; 80 and 110 mg L-1) evaluated with four (trial 1) or three replicates (trial 2). Fertilization and hatching rates showed linear response, remaining constant up to the levels of 28.6 and 40.4 mg L-1, respectively. From these levels, a linear effect inversely proportional between the fertilization and hatching rates and an increase in the levels of cadmium occurred. The increase on the level of cadium in the water had an inverse linear effect of sperm motility duration providing a reduction from 21.8s in clean water to 10.6s in contaminated water containing 110 mg L-1. Levels from 20.0 to 28.6 mg L-1 influence sperm and oocytes of jundiá catfish, respectively.

Objetivou-se foi avaliar a fertilização artificial e a duração da motilidade espermática em pacus com diferentes doses inseminantes, volumes de água e preservação do sêmen in natura. Foram realizados quatro experimentos para avaliação do efeito de doses inseminantes (7x10³, 7x10(4), 7x10(5), 7x10(6) e 7x10(7) espermatozoides ovócito-1) sobre a fertilização artificial dos ovócitos; do efeito do volume de água (0,5; 15,0; 30,0; 45,0 e 60,0 mL de água mL-1 de ovócitos) com doses inseminantes de 105.481 e 210.963 espermatozoides ovócito-1; do efeito de diluição do sêmen (0,005; 0,05; 0,5 e 5,0 µL de sêmen mL-1 de água) sobre a duração da motilidade espermática; e do efeito do armazenamento a 15 ºC por 9 h sobre a duração da motilidade espermática e o índice de sobrevivência espermática. Os maiores resultados obtidos foram: doses inseminantes entre 7x10³ e 7x10(7) espermatozoides ovócito-1; 15 a 60 mL de água mL-1 de ovócitos; diluição de 0.005 µL sêmen mL-1 de água e 98,65% de sobrevivência espermática até o tempo de preservação de 2h45min36s. A preservação a 15ºC por 9 horas não influencia a duração da motilidade espermática. As maiores taxas de fertilização podem ser observadas no emprego de 0,27 a 270 µL de sêmen mL-1 de ovócitos, com 15 a 60 mL de água para ativação.

The objective of this work was to investigate artificial fertilization and the duration of sperm motility in pacu with different insemination doses, water volume, and in natura semen preservation. It was carried out four experimentsfor evaluation of insemination doses (7x10³, 7x10(4), 7x10(5), 7x10(6), and 7x10(7) spermatozoa oocytes-1) on the artificial fertilization of oocytes; the effect of water volume (0.5, 15.0, 30.0, 45.0, and 60.0 mL water mL-1 of oocyte) with insemination doses of 105,481 and 210,963 spermatozoa oocytes-1; the effect of semen dilutions (0.005, 0.05, 0.5, and 5.0 µL semen mL-1 of water) on sperm motility duration; and the effect of storage at 15ºC for 9h on sperm motility duration and sperm survival ratio. The highest results obtained were: insemination doses from 7x10³ to 7x10(7) spermatozoa oocytes-1; from 15 to 60mL water mL-1 of oocytes; semen dilution of 0.005 µL semen/mL water and 98.65% sperm survival until 2h45min 36s preservation time. Preservation at 15ºC for 9h does not influence sperm motility duration. The highest fertilization rates can be observed by using 0.27 to 270 µL semen mL-1 of oocytes with 15 at 60 mL water for activation.

O experimento foi conduzido com o objetivo de avaliar o desempenho reprodutivo e zootécnico e a deposição de lipídios no tecido hepático de machos de tilápia-do-nilo alimentados com rações contendo diferentes níveis de energia digestível, obtidos com a inclusão de óleo de soja. Foram utilizados 400 reprodutores (300 fêmeas e 100 machos) distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, composto de cinco níveis de energia digestível (2.700, 2.950, 3.200, 3.450 e 3.700 kcal.kg de ração-1) e quatro repetições. Os reprodutores foram alimentados com rações contendo 35% de proteína bruta e submetidos ao manejo reprodutivo em hapas por 101 dias. O melhor resultado de concentração espermática e percentual de espermatozoides normais foram obtidos para reprodutores alimentados com rações contendo 3.465,56 e 3.443,43 kcal. kg de ração-1, que produziram 7,98 × 10(9) espermatozoides.mL de sêmen-1 e 38,98% de espermatozoides normais, respectivamente. A produção de sêmen, o pH seminal, o índice de sobrevivência espermática e o tempo de ativação espermática não foram afetados pelos níveis energéticos das rações. Os níveis de energia das rações não influenciaram o desempenho zootécnico dos peixes, mas promoveram aumento linear na deposição de lipídios nos hepatócitos e afetaram a qualidade seminal, estimulando a produção de espermatozoides e a melhora dos índices de normalidade da morfologia espermática em níveis energéticos próximos a 3.450 kcal. kg de ração-1.

This experiment was carried out to evaluate the reproductive and zootechnical performance, and lipid deposition in the liver tissue of the Nile tilapia males fed diets containing different levels of digestible energy obtained from inclusion of soybean oil. Four hundred 400 broodfish (300 females and 100 males) were assigned to a completely randomized design composed of five levels of digestible energy (2,700, 2,950, 3,200, 3,450 and 3,700 kcal digestible energy.kg of feed-1) and four replications. The breeding were fed diets containing 35% of crude protein and submitted to hapas reproductive management for 101 days. The model adjusted by multiple regression analysis suggests the best result for sperm concentration and percentage of normal sperm for breeding fed diets containing 3.465.56 and 3.443.43 kcal digetible energy.kg of feed-1, producing 7.98 × 10(9) sperm.mL of semen-1 and 38.98% of normal sperm, respectively. The diet energy levels also caused an increase of lipid inclusion in the hepatocytes. The sperm production, seminal pH, sperm survival index and sperm activation time were not affected by energetic levels of the diets. The zootechnical performance was not affected by the energy levels of the diets either. The energy levels in the diets caused a linear increase in the lipid inclusion in the hepatocytes and affected the sperm quality by stimulating the spermatozoa production and the improving of normality indices of sperm morphology in energy levels around 3,450 kcal digestible energy.kg of feed-1.

Objetivou-se determinar a dose inseminante adequada para uso na fertilização artificial de ovócitos de dourado (Salminus brasiliensis). Os ovócitos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, e fertilizados com uma das relações espermatozoides/ovócito 6,0×10³; 6,0×10(4); 6,0×10(5); 6,0×10(6) ou 3,0×10(7), cada uma com quatro repetições. Considerou-se unidade experimental uma incubadora de volume útil de 2,5 L, contendo 2,0 mL de ovócitos não-hidratados. As taxas de fertilização foram mensuradas 8 horas após o início da fertilização. Com intuito de verificar possíveis efeitos da diluição seminal na movimentação dos espermatozoides, realizou-se a mensuração do tempo de duração da motilidade espermática dos espermatozoides de dourado, ativados por meio de diferentes relações de diluição: 6,8×10-5; 6,8×10-4; 6,8×10-3; 6,8×10-2; 3,4×10-1 e 1,0 mL de sêmen por mL de água. O tempo de duração da motilidade foi avaliado em delineamento inteiramente casualizado composto de seis tratamentos e três repetições. As taxas de fertilização apresentaram relação quadrática com o número de espermatozoides por ovócito. As relações de diluição do sêmen tiveram efeito inversamente proporcional sobre a duração da motilidade espermática. A relação que proporcionou melhores taxas de fertilização artificial de ovócitos de dourado (Salminus brasiliensis) foi de 30.722 espermatozoides por ovócio.

The objective of the present study was to determine the proper insemination dose of dourado (Salminus brasiliensis) oocytes. The oocytes were placed in a randomized complete design and fertilized with one of the spermatozoa.oocytes-1 ratio, 6.0×10³, 6.0×10(4), 6.0×10(5), 6.0×10(6), 3.0×10(7) SPZ:OOC, each one with four replications. An experimental unit was considered to be an incubator with a 2.5L useful volume containing 2.0 mL non-hydrated oocytes. The fertilization rates were measured eight hours after the start of fertilization. In order to ascertain the possible effects of seminal dilution on the spermatozoa motility, the duration time of the spermatic motility of the dourado spermatozoa was measured when activated by different dilution ratios 6.8×10-5; 6.8×10-4; 6.8×10-3; 6.8×10-2; 3.4×10-1 and 1.0 mL semen.mL water-1. The motility duration time was assessed in a randomized complete design, with six treatments and three repetitions. The fertilization rates showed a quadratic relationship with the number of spermatozoids per oocyte. The semen dilution ratios had an inversely proportional affect on the spermatic motility time. The spermatozoa:oocytes ratio that provided the best artificial fertilization rates of dourado (Salminus brasiliensis) oocytes was 30,722 spermatoids per oocyte.

Um experimento foi conduzido com o objetivo de avaliar os desempenhos reprodutivo e zootécnico e a deposição de lipídios no tecido hepático de fêmeas de tilápia-do-nilo alimentadas com rações contendo diferentes níveis de energia digestível, obtidos pela inclusão de óleo de soja. Foram utilizados 100 reprodutores e 300 reprodutoras, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e quatro repetições. Os reprodutores, machos e fêmeas, foram alimentados com rações contendo, por quilograma, 35% de proteína bruta e 2.700, 2.950, 3.200, 3.450 ou 3.700 kcal de energia digestível. Os animais foram mantidos em hapas por 93 dias. O desempenho reprodutivo e zootécnico não foi influenciado pelos níveis energéticos das rações, o que pode estar relacionado ao curto período de tempo de alimentação com as dietas experimentais. Contudo, o aumento nos níveis de energia teve efeito linear nas deposições lipídicas nos hepatócitos. Desta forma, os níveis crescentes de energia digestível nas rações fornecidas às fêmeas de tilápia-do-nilo, obtidos pela inclusão de óleo de soja, apenas aumentam o tempo de sobrevivência das larvas ao jejum e a deposição de lipídios nos hepatócitos das fêmeas.

The experiment was carried out to evaluate the reproductive and animal performance and lipids deposition in the liver tissue of the Nile tilapia female, fed diets containing different levels of digestible energy, obtained by soybean oil inclusion. Three hundred breeding females and 100 breeding males were used, distributed in a completely randomized design with five treatments and four replications. The broods were fed diets containing 35% crude protein and 2,700; 2,950; 3,200; 3,450 and 3,700 kcal energy digestible/kg feed. The animals were stocked in hapas for 93 days. The reproductive and animal performance were not influenced by the energy levels. These results may be associated with the short period of time that the brood were fed the experimental diets. However, increasing energy levels caused a linear increase in lipids inclusions in hepatocytes. Thus, the increasing levels of digestible energy provided to Nile tilapia females, obtained by including soybean oil, only promoted increased lipid deposition in hepatocytes.

Objetivou-se determinar o período ontogênico de maior sensibilidade de tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus) aos tratamentos de masculinização com 17 a-metiltestosterona (MT), realizados via banhos de imersão com 2,0 mg MT.L-1 por um período de 36 horas. Nos tratamentos hormonais, foram utilizadas 3.000 tilápias distribuídas em 15 recipientes plásticos com capacidade para 2,0 L (unidades experimentais), em um delineamento experimental inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e três repetições. Os tratamentos consistiram de um tratamento controle (tilápias de 16 DPE [dias pós-eclosão] submetidas à imersão sem hormônio) e da imersão dos peixes em idades correspondentes a 16, 20, 24 e 28 DPE. Os parâmetros avaliados foram peso (PF) e comprimento finais (CF), taxa de sobrevivência (S) e proporção sexual. Os resultados de masculinização evidenciaram relação quadrática entre a idade e as taxas de masculinização, de modo que os melhores resultados foram obtidos aos 23,30 DPE (73,02% de machos). Os tratamentos não influenciaram as médias de PF, CF e S. A idade mais sensível aos tratamentos de masculinização via banhos de imersão para a linhagem de tilápia utilizada foi de 23,30 DPE.

The present experiment was carried out to determine the different stages during ontogenesis of greater sensitivity to hormonal treatments of sex reversal of Nile tilapia larvae (Oreochromis niloticus) with 17 a-metiltestosterone (MT) by bath immersion in 2.0 mg of MT.L-1 for 36-h period. In the hormonal treatment, 3,000 Nile tilapia were allotted to 15 2 L- plastic containers (experimental units) as a complete randomized design, with five treatments and three replicates. The treatments consisted of the fish immersion at different ages: control (fishes immersed at 16 DAH [days after hatching] and without hormone), and 16, 20, 24, and 28 DAH. Final weight (FW), final length (FL), survival rate (SR) and sexual rate were the evaluated parameters. The masculinization results showed positive quadratic relationship between tilapia age and hormonal treatments, and this fact suggests that the best results were obtained at 23.30 DAH (73.02% of males). No treatment effect on FW, FL and SR was observed. The most sensible age to the masculinization of Nile tilapia by immersion baths was of 23.30 DAH.

Para determinação da dose inseminante ideal na fertilização artificial de ovócitos de jundiá cinza (Rhamdia quelen), foram selecionadas duas fêmeas com papila urogenital avermelhada, abdômen arredondado e liberação de ovócitos de cor e tamanho uniforme e quatro machos que apresentavam liberação de sêmen sob pressão da papila genital. As fêmeas e os machos receberam duas doses de extrato de hipófise de carpa (doses inicial e final de 0,5 e 0,25 mg.kg-1 e de 5,0 e 2,5 mg.kg-1, para fêmeas e machos, respectivamente). As duas fêmeas produziram 169 g de ovos contendo 1.141 ovócitos.g de ovócitos-1 e os machos, um total de 23,6 mL de sêmen. Do sêmen dos quatro machos foi realizado um pool e analisadas as seguintes características: concentração espermática (1,97x10(10) espermatozóides.mL-1), índice de sobrevivência espermática (96%) e morfologia espermática (66,9% de espermatozóides normais). No ensaio de fertilização, utilizou-se delineamento experimental inteiramente casualisado, composto de cinco tratamentos (6x10³, 6x10(4), 6x10(5), 6x10(6), 2x10(7) espermatozóides.ovócito-1) e quatro repetições. Após 8 horas de incubação, foram analisadas as taxas de fertilização para cada tratamento. A melhor relação espermatozóide.ovócito-1 foi de 89.497 espermatozóide.ovócito-1, o que provocou taxa de fertilização máxima teórica de 86,68%.

Two females with colored urogenital organ, rounded off abdomen, color egg released, and uniform size and four males with semen released under abdomen pressure were selected to determine the best insemination dose for artificial fertilization of grey jundia, Rhamdia quelen (Quoy & Gaimardm, 1824), oocytes. Females and males received two doses of carp pituitary extract: the first one of 0.5 and 0.25 mg.kg-1 and the second of 5.0 and 2.5 mg.kg-1 for females and males, respectively. Both females produced 169 g of eggs with 1,141 oocytes.oocytes g-1. The males produced a total of 23.6 mL of semen. From all males semen pool sperm concentration (1.97 x 10(10) spermatozoa.mL-1), survival sperm index (96%) and sperm morphology were analyzed (66.9% of normal spermatozoa). The fertilization assay was conducted as a complete randomized experimental design with five treatments ((6x10³, 6x10(4), 6x10(5), 6x10(6), 2x10(7) spermatozoa.oocyte-1) and four replications. After eight hours of incubation, the fertilization rates for each treatment were analyzed. The best spermatozoa.oocyte-1 rate was of 89.497 spermatozoa.oocyte-1 that produced a maximum fertilization rate of 86.68%.