ABSTRACT Selenium (Se) is an antioxidant mineral and has been included in fish feed formulations in the organic form of hydroxy-selenomethionine (OH-SeMet). This study evaluated how different concentrations of this substance, supplemented in the diet, act on tambaqui (Colossoma macropomum) muscle before and after a stressor (transportation). Juvenile fishes were divided into five treatments receiving 0.0; 0.3; 0.6; 0.9; 1.2 mg kg-1 Se supplementation for 75 days. After that period, the fish were exposed to transportation for four hours. Sampling of muscle tissue for the measurement of biochemical parameters occurred on day 75, prior to transportation, and one week after transportation (day 83). The activity of enzymes superoxide dismutase and glutathione-S-transferase did not change. Supplementation with 1.2 mg kg-1 Se increased the level of reduced glutathione before transportation, and 0.9 and 1.2 mg kg-1 Se reduced the level of thiobarbituric acid reactive substances levels before and after transportation. After transportation, we observed reduced glutathione levels in fish treated with 0.3, 0.6 and 1.2 mg kg-1, reduced ascorbic acid level in fish fed 0.6 mg kg-1 Se, and reduced total protein concentration in fish fed 0.3 mg kg-1 Se, as compared to the levels before transportation. In conclusion, the presence of different concentrations of Se in the fish diet promoted different patterns of response to redox status, minimizing oxidative damage generated by the stressor event.

RESUMO O selênio (Se) é um mineral antioxidante e tem sido incluído em formulações de rações para peixes na forma orgânica de hidróxi-selenometionina (OH-SeMet). Este estudo avaliou como diferentes concentrações dessa substância, suplementada na dieta, atuam no músculo do tambaqui (Colossoma macropomum) antes e após um estressor (transporte). Os peixes juvenis foram divididos em cinco tratamentos recebendo a suplementação de 0,0; 0,3; 0,6; 0,9; 1,2 mg kg-1 de Se por 75 dias. Após esse período, os peixes ficaram expostos ao transporte por quatro horas. A amostragem de tecido muscular para medição dos parâmetros bioquímicos ocorreu no dia 75, antes do transporte, e uma semana após o transporte (dia 83). A atividade das enzimas superóxido dismutase e glutationa-S-transferase não se alterou. A suplementação com 1,2 mg kg-1 de Se aumentou o nível de glutationa reduzida antes do transporte, e 0,9 e 1,2 mg kg-1 de Se reduziram os níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico antes e após o transporte. Após o transporte, observamos redução nos níveis de glutationa reduzida nos peixes tratados com 0,3, 0,6 e 1,2 mg kg-1, redução nos níveis de ácido ascórbico nos peixes alimentados com 0,6 mg kg-1 de Se e redução na concentração de proteínas totais nos peixes alimentados com 0,3 mg kg-1 Se, em comparação com os níveis antes do transporte. Conclui-se que a presença de diferentes concentrações de Se na dieta dos peixes promoveu diferentes padrões de resposta ao estado redox, minimizando os danos oxidativos gerados pelo evento estressor.

RESUMO Obesidade leva ao acúmulo de gordura e disfunção do tecido adiposo. Compostos ativos foram descritos no óleo-resina de copaíba, que apresenta efeitos anti-inflamatórios, antimicrobiais e antioxidantes. Contudo, não há dados sobre os efeitos do óleo-resina de copaíba sobre o tecido adiposo. Assim, testamos a hipótese de que o óleo-resina de copaíba pode prevenir ou minimizar a obesidade, e inflamação e estresse oxidativo no tecido adiposo em resposta à dieta rica em sacarose. Ratos Wistar machos foram casualmente divididos para receber dieta padrão (C, n = 8), dieta padrão e 30% de sacarose na água de beber (S, n = 8), e dieta padrão e 30% de sacarose na água de beber + óleo-resina de copaíba (S+CO, n = 8). O óleo-resina de copaíba foi administrado via gavagem (200 mg kg-1 dia-1), por oito semanas. Animais dos grupos não suplementados (C e S) receberam veículo via gavagem, em volume equivalente ao oferecido ao grupo S+CO. Ao final do experimento, amostras de sangue e tecido adiposo epididimal foram coletadas para análises bioquímicas, inflamatórias e de estresse oxidativo. A suplementação com óleo-resina preveniu ganho de peso, adiposidade, resistência à insulina e aumento de IL-1β, inibiu parcialmente o aumento nos níveis de glicemia de jejum, lipídeos e níveis de IL-6 no tecido adiposo, além de melhorar o sistema de defesa antioxidante no tecido. Nossos resultados sugerem que o óleo-resina de copaíba pode ser usado como uma boa estratégia para a prevenção da obesidade e suas complicações.

ABSTRACT Obesogenic diets lead to fat accumulation and dysfunctional adipose tissue. Active compounds were described in copaiba oleoresin, which presents anti-inflammatory, antimicrobial, and antioxidant properties. However, there are no data regarding the effects of copaiba oleoresin in adipose tissue. Therefore, we tested the hypothesis that the copaiba oleoresin could prevent or minimize obesity and adipose tissue inflammation and oxidative stress in response to a high sucrose diet. Male Wistar rats were randomly assigned to receiving commercial chow (C, n = 8), commercial chow and 30% sucrose added to the drinking water (S, n = 8), or commercial chow and 30% sucrose added to the drinking water + copaiba oleoresin (S+CO, n = 8). Copaiba oleoresin was given at a dose of 200 mg kg-1 day-1 by gavage for eight weeks. C and S animals received vehicle, at equivalent volume, by gavage. At the end of the experiment, blood samples and epididymal adipose tissue were collected for biochemical, inflammatory, and oxidative stress analyses. Copaiba oleoresin supplementation prevented weight gain, adiposity, insulin resistance, and increased IL-1β levels. Additionally, copaiba oleoresin partially attenuated the increase in fasting glucose levels, lipids, and IL-6 levels, and improved the redox status in adipose tissue. Our results suggest that the use of copaiba oleoresin could be a good strategy for prevention of obesity and its complications.

RESUMO Copaifera multijuga, ou copaíba, é utilizada popularmente como chá para o tratamento de diversas afecções, o que se deve à presença de substâncias antioxidantes em sua composição, que protegem as células contra danos causados pelos radicais livres. O óleo-resina da árvore é usado como antiinflamatório e antitumoral. O presente estudo avaliou o efeito antioxidante do extrato etanólico da casca da copaíba sobre camundongos Swiss machos inoculados com tumor sólido de Ehrlich. Os camundongos foram inoculados subcutaneamente com 1x106 células de tumor de Ehrlich e foram tratados, via gavagem durante 30 dias, com doses de extrato etanólico de copaíba variando de 100 a 200 mg kg-1. Realizou-se análise bioquímica dos antioxidantes enzimáticos [superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa-S-transferase (GST)], antioxidantes não-enzimáticos [glutationa reduzida (GSH) e ácido ascórbico (ASA)], substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e carbonilação proteica (carbonil) em diferentes tecidos e apresentando resultados significativos. O extrato administrado na concentração de 200 mg kg-1 apresentou melhor capacidade antioxidante no fígado, aumentando a CAT, GST, GSH e diminuindo TBARS, além de aumentar a atividade da CAT e da carbonilação proteica no tecido cerebral. Os resultados mostram que o extrato de copaíba foi capaz de reverter o estresse oxidativo causado pelo tumor sólido de Ehrlich, provavelmente por conter compostos antioxidantes, e possivelmente teve um efeito antineoplásico após 30 dias de tratamento.

ABSTRACT Copaifera multijuga, commonly known as copaiba, is popularly used in the form of tea for various conditions due to the presence of antioxidant substances in its composition, which protect cells against damage caused by free radicals. Its oleoresin is also used as an anti-inflammatory and antitumoral agent. The present study investigated the antioxidant effect of the ethanolic extract of copaiba stem bark on Swiss mice inoculated with solid Ehrlich tumors. Mice were inoculated subcutaneously with 1x106 Ehrlich’s tumor cells and treated via gavage with ethanolic extract of copaiba for thirty days, with doses varying between 100 and 200 mg kg-1. Biochemical analyses of enzymatic antioxidants [superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione-S-transferase (GST)], non-enzymatic antioxidants [reduced glutathione (GSH) and ascorbic acid (ASA)], substances reactive to thiobarbituric acid (TBARS) and protein carbonylation (carbonyl) in different tissues were significantly affected. The extract administered at 200 mg kg-1 presented higher antioxidant capacity in the liver, increased CAT, GST, GSH and decreased TBARS, as well as increased CAT activity and protein carbonylation in brain tissue. The results showed that the copaiba extract was able to reverse the oxidative stress caused by solid Ehrlich tumor, probably due to the presence of antioxidant compounds, and had potential antineoplasic effect after a 30-day treatment.

RESUMO As propriedades do óleo-resina da copaíba, Copaifera multijuga são comumente citadas na literatura, mas há poucos estudos sobre extratos da casca do caule. Avaliamos os efeitos antioxidantes de extratos brutos etanólico (EE) e acetato de etila (EA) da casca do caule da copaíba e os comparamos à rutina no modelo de estresse oxidativo induzido por paracetamol (PCM) em camundongos. Todas as comparações de teste diferiram significativamente. A atividade da catalase hepática (CAT) e da glutationa-S-transferase (GST) diminuiu no grupo PCM, e houve um aumento de proteínas carboniladas no fígado, rim e cérebro. No entanto, as proteínas carboniladas diminuíram no fígado no fígado para o grupo PCM + EE, nos rins para os grupos PCM + EA e PCM + rutina, e no cérebro para todos os tratamentos. A GSH hepática diminuiu no grupo PCM e aumentou no grupo PCM + EE. Os extratos mostraram um efeito positivo sobre o ácido ascórbico (ASA), uma vez que foram capazes de restaurar os níveis dos parâmetros que foram alterados pelo PCM. Houve um aumento da atividade de ALT e AST no plasma dentro do grupo PCM. Embora a ALT tenha diminuído nos grupos PCM + rutina, PCM + EE e PCM + EA, EE e EA não afetaram a AST. O efeito antioxidante mais forte foi observado para o EE, provavelmente devido à presença dos compostos fenólicos epicatequina e epiafzelequina, assim como à maior concentração de fenóis totais e um excelente potencial antioxidante observado no teste DPPH·.

ABSTRACT The properties of oil-resin of copaiba, Copaifera multijuga are commonly mentioned in the literature, but there are few studies on extracts from its stem bark. We evaluated the antioxidant effects of ethanolic (EE) and ethyl acetate (EA) crude stem bark extracts from copaiba and compared them to rutin in a paracetamol (PCM)-induced oxidative stress model in mice. All test comparisons differed significantly. Hepatic catalase (CAT) and glutathione-S-transferase (GST) activity decreased in the PCM group, and there was an increase of protein carbonyls in the liver, kidney and brain. However, the protein carbonyls decreased in the liver for the PCM + EE group, in the kidneys for the PCM + EA and PCM + Rutin groups, and in the brain for all treatments. Hepatic GSH decreased in the PCM group and increased in the PCM + EE group. The extracts showed a positive effect on ascorbic acid (ASA), since they were able to restore the levels of parameters that had been changed by PCM. There was an increase of ALT and AST activity in the plasma within the PCM group. Even though ALT decreased in the PCM + Rutin, PCM + EE and PCM + EA groups, EE and EA did not have an effect on AST. The strongest antioxidant effect was observed for EE, due to the presence of the phenolic compounds epicatechin and epiafzelechin, as well as the highest concentration of total phenols and an excellent antioxidant potential observed in the DPPH· test.

RESUMO Capirona decorticans (Rubiaceae) é popularmente usada para tratar verrugas, feridas, micoses e sarna, e como um componente do chá de Ayahuasca. Apesar do uso popular, são limitadas as pesquisas fitoquímicas e farmacológicas sobre a espécie. Portanto, este estudo quantificou compostos fenólicos no extrato etanólico (EE) e na fração hidrometanólica (FM) (406 e 293 mgEAG g-1, respectivamente) de folhas de C. decorticans. Identificamos flavonoides por LC-MS / MS-MMR-ESI (apigenina, rutina, luteolina, miricetina, quercetina, quercetina-3-β-D-glicosídeo, quercetrina), e avaliamos o estresse oxidativo e o efeito mutagênico/antimutagênico de EE e FM em um experimento in vivo utilizando camundongos Swiss e ciclofosfamida (CP) como um indutor de danos no DNA e estresse oxidativo. Os camundongos foram pré-tratados por 15 dias consecutivos com EE ou FM (250 mg kg-1) e injetados intraperitonealmente com CP (25 mg kg-1). Proteínas carboniladas, ácido ascórbico, catalase e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico foram dosadas em tecidos hepáticos e renais. O efeito mutagênico/antimutagênico foi avaliado através do Teste de Micronúcleo. Houve carbonilação protéica no fígado de animais expostos à CP, que foi reduzida pela FM. Não houve efeito significativo sobre outros marcadores de estresse oxidativo. Os grupos tratados com os extratos apresentaram uma redução percentual significativa (EE = 96% e FM = 71%) na frequência de eritrócitos policromáticos micronucleados induzidos pela PC. O EE também apresentou mutagenicidade quando utilizado isoladamente. O EE e FM das folhas de C. decorticans apresentaram potencial antioxidante equivalente ao observado em outras espécies, não causaram estresse oxidativo, nem toxicidade, e tiveram efeito protetor e antimutagênico, embora a EE tenha apresentado mutagenicidade.

ABSTRACT Capirona decorticans (Rubiaceae) is popularly used to treat warts, wounds, mycoses and scabies, and is also a component of the Ayahuasca tea. Despite its popular use, the phytochemical and pharmacological research on this species is limited. Therefore, this work quantified phenolic compounds in the ethanolic extract (EE) and hydromethanolic fraction (FM) (406, 293 mgEAG g-1, respectively) from leaves of C. decorticans. We identified flavonoids by LC-MS/MS-MMR-ESI (apigenin, rutin, luteolin, miricetin, quercetin, quercetin-3-β-D-glucoside, quercetrin), and evaluated oxidative stress and mutagenic/antimutagenic effect of EE and FM through an in vivo experiment using Swiss mice and cyclophosphamide (CP) as an inducer of DNA damage and oxidative stress. Mice were pretreated for 15 consecutive days with EE or FM (250 mg kg-1) and then intraperitoneally injected with CP (25 mg kg-1). Carbonylated proteins, ascorbic acid, catalase and thiobarbituric acid-reactive substances were measured in hepatic and renal tissues. The mutagenic/antimutagenic effect was evaluated through the Micronucleus Test. Protein carbonylation in the liver of animals exposed to CP was reduced by FM. There was no significant effect on other markers of oxidative stress. The groups treated with the extracts showed a significant percentage reduction (EE = 96% and FM = 71%) in the frequency of micronucleated polychromatic erythrocytes induced by CP. EE showed mutagenicity when used alone. The EE and FM of C. decorticans leaves showed antioxidant potential equivalent to that observed in other species, did not cause oxidative stress, nor toxicity, and had a protective and antimutagenic effect, although the EE showed signs of mutagenicity.