ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the antibacterial behavior of polypyrrole nanoparticles (PPy-NPs) in water against biofilm producer or not S. aureus isolated from cows and goats with mastitis. One hundred and thirty-eight isolates of S. aureus were initially evaluated for biofilm formation by spectrophotometry in microplates. In addition, the minimum inhibition concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of PPy-NPs in water for planktonic S. aureus were determined. From the bovine samples analyzed, 5 (4.46%) S. aureus isolates showed a strong biofilm production, 17 (15.18%) moderate production, 36 (32.14%) with weak production and 54 (48.21%) did not produce biofilms. Strains from goats (26) showed no biofilm production in 18 (69.23%) strains and weak biofilm production in 8 (30.76%) strains. The MIC and MBC of S. aureus to PPy-NPs were found in the same concentration (125µɡ/mL) in all strains tested, regardless of biofilm production or not. This finding provides a new insight into the interaction between PPy-NPs and S. aureus, and will offer potential benefits for the control of mastitis.

RESUMO Objetivou-se neste estudo padronizar um protocolo de reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de Microsporum canis em amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos. Foram selecionadas 48 amostras previamente identificadas por meio de cultura. Destas, 23 foram positivas para dermatófitos no cultivo. Padronizou-se a PCR a partir de primers desenhados para o alvo M. canis. Sessenta e um por cento (14/23) das amostras positivas para dermatófitos foram identificadas como M. canis em cultura. Desse total, 71,4% (10/14) apresentaram um fragmento de 218pb compatível com o esperado para a espécie fúngica alvo dessa reação. Observou-se uma sensibilidade de 71,4% e especificidade de 100% na PCR, além de uma boa concordância entre essas técnicas de diagnóstico (Kappa: 0,78; P<0,0001). O protocolo utilizado neste estudo apresentou alta especificidade na detecção de M. canis diretamente de amostras de pelos e/ou crostas de cães e gatos, viabilizando um diagnóstico mais rápido e específico, podendo esse protocolo ser empregado como um método confirmatório para agilizar a detecção de M. canis.

ABSTRACT The aim of this study was to standardize a Polymerase Chain Reaction protocol (PCR) for the detection of Microsporum canis in fur and/or crusts of dogs and cats. 48 samples previously identified by culture were selected. Of these, 23 were positive for dermatophytes in culture. PCR was standardized from drawn primers whose target is M. canis. A total of 61% (14/23) of the dermatophyte positive samples were identified as M. canis in culture. Of this total, 71.4% (10/14) presented a fragment of 218bp compatible with that expected for the fungal species target of the reaction. A sensitivity of 71.4% and specificity of 100% in the PCR were observed, in addition to a good agreement between the techniques (Kappa: 0.78; P< 0.0001). The protocol used in this study showed high specificity in the detection of M. canis directly from fur and/or crusts of dogs and cats, making possible a faster and more specific diagnosis. This protocol could be used as a confirmatory method, speeding the detection of M. canis.

RESUMO O objetivo deste estudo foi realizar uma investigação de Mycoplasma bovigenitalium e Ureaplasma diversum em bovinos leiteiros da microrregião do Vale do Ipanema, estado de Pernambuco, Brasil. Foram coletados suabes vaginais de 355 vacas em idade reprodutiva. As amostras foram analisadas por multiplex PCR (mPCR) e cultura. Foi realizada uma investigação dos fatores de risco para Mollicutes. Na mPCR, 9,29% (33/355) das vacas foram positivas para M. bovigenitalium e 21,69% (77/355) para U. diversum; coinfecção foi observada em 2,81% (10/355) das vacas. O isolamento microbiológico mostrou crescimento de Mycoplasma spp. em 81,81% (27/33) das amostras e em 24,67% (19/77) para Ureaplasma spp. Os fatores de risco relacionados à infecção por Mollicutes identificados foram sistema de produção semi-intensivo (OR= 4,6), aluguel de pastagem (OR= 3,6), não isolamento de animais com desordens reprodutivas (OR= 3,2) e monta natural e inseminação artificial (OR= 3,5). Houve uma associação significativa entre a infecção por Mollicutes e abortos no primeiro terço gestacional (P=0,001). Este é o primeiro relato da infecção por M. bovigenitalium e U. diversum em vacas na região semiárida do estado de Pernambuco, Brasil. As medidas preventivas direcionadas aos fatores de risco identificados podem diminuir a ocorrência de Mollicutes nesses rebanhos.

ABSTRACT The objective of this study was to conduct an investigation of Mycoplasma bovigenitalium and Ureaplasma diversum infections in cattle in the microregion of the Ipanema Valley, state of Pernambuco, Brazil. Vaginal swabs were collected from 355 breeding cows in reproductive age and were analyzed by multiplex PCR (mPCR) and culture. An epidemiological investigation of risk factors was performed for Mollicutes. mPCR analysis showed that, 9.29% (33/355) of the cows were positive for M. bovigenitalium and 21.69% (77/355) for U. diversum; coinfection was observed in 2.81% (10/355) of the cows. The microbiological isolation showed, 81.81% (27/33) of Mycoplasma spp. and 24.67% (19/77) of Ureaplasma spp.. The risk factors related to Mollicutes infection identified were semi-intensive breeding system (OR= 4.6), pasture rent (OR= 3.6), non-isolation of animals with reproductive disorders (OR= 3.2), and natural mounting and artificial insemination (OR= 3.5). There was a significant association between Mollicutes infection and abortions in the first gestational third (P= 0.001). This is the first record of M. bovigenitalium and U. diversum infection in cows in the semiarid region of the state of Pernambuco, Brazil. Preventive measures directed to the identified risk factors can decrease the occurrence of Mollicutes in these herds.

RESUMO Doenças entéricas de origem bacteriana são frequentes na indústria de suínos, destacando-se a colibacilose, que afeta principalmente leitões e causa grandes danos à indústria suína em todo o mundo. Cento e vinte e seis cepas de Escherichia coli foram isoladas de swabs obtidos de fragmentos de intestino delgado de 235 suínos saudáveis abatidos em matadouros de Pernambuco (Brasil). O objetivo do presente estudo foi analisar filogeneticamente essas cepas, bem como detectar a produção de biofilme e determinar o perfil de resistência antimicrobiana delas, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR), o teste de adesão em microplacas e a técnica de disco-difusão. 88,10% (111/126) das amostras foram classificadas no grupo filogenético B1; 4,76% (6/126) no grupo D; 3,97% (5/126) no grupo B2; e 3,17% (4/126) no grupo A. As taxas de resistência antimicrobiana observadas foram: lincomicina 100% (126/126), eritromicina 100% (126/126), clortetraciclina 94,44% (119/126), cefalotina 51,59% (65/126), ampicilina 38,89% (49/126), sulfametoxazol + trimetoprima 37,3% (47/126), ciprofloxacina 19,84% (25/126), norfloxacina 14,29% (18/126), gentamicina 8,73% (11/126) e cloranfenicol 5,55% (7/126). O índice de resistência múltipla (IRMA) variou de 0,2 a 0,9. Entre as amostras, 46,03% (58/126) produziram biofilme e 99,21% (125/126) foram multirresistentes. São necessários mais estudos para elucidar a importância de cada grupo filogenético em suínos e evitar a propagação de estirpes de E. coli multirresistentes.

ABSTRACT Enteric diseases of bacterial origin are frequent in the pig industry, of particular notoriety are the colibacillosis that mainly affect piglets and cause great damage to the swine industry worldwide. The aim of the study was to analyze phylogenetics, to detect biofilm production, and to determine antimicrobial resistance profile in 126 strains of Escherichia coli isolated from swabs obtained from fragments of the small intestines of 235 healthy pigs killed in slaughterhouses in Pernambuco (Brazil) using polymerase chain reaction (PCR), adherence to microplates test and disc diffusion technique. Of the analyzed samples, 88.10% (111/126) were classified in phylogenetic group B1; 4.76% (6/126) in group D; 3.97% (5/126) in group B2 and, 3.17% (4/126) in group A. Antimicrobial resistance rates observed were: lincomycin 100% (126/126), erythromycin 100% (126/126), chlortetracycline 94.44% (119/126), cephalothin 51.59% (65/126), ampicillin 38.89% (49/126), sulfamethoxazole + trimethoprim 37.3% (47/126), ciprofloxacin 19.84% (25/126), norfloxacin 14.29% (18/126), gentamicin 8.73% (11/126) and, chloramphenicol 5.55% (7/126). Multiple antibiotic resistance (MAR) ranged from 0.2 to 0.9. Of the strains tested 46.03% (58/126) produced biofilm, and 99.21% (125/126) of the strains exhibited multi-resistance. Further studies are required to elucidate the importance of each phylogenetic group in pigs and to prevent the propagation of multi-resistant E. coli strains.

RESUMO Objetivou-se com estudo determinar a ocorrência da infecção por Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus em búfalos no estado de Pernambuco, Brasil. Foram coletadas 133 amostras biológicas (muco cervicovaginal e raspado prepucial) de animais, procedentes de oito propriedades, de diferentes regiões do estado. O material biológico coletado foi transferido para solução salina tamponada (PBS) e, posteriormente, inoculado em meios de transporte específicos, Lander para diagnóstico de C. fetus subsp. venerealis e Diamond para T. foetus. Para o diagnóstico das infecções por Campylobacter fetus subsp. venerealis e Tritrichomonas foetus, as amostras foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) e cultivadas em meio ágar Columbia acrescido de antibiótico e Diamond, respectivamente. Para pesquisa de C. fetus subsp. venerealis, observou-se uma ocorrência de 1,8% (2/113) de animais positivos no exame microbiológico com confirmação pela PCR. Em relação à procedência, observou-se que 100% das amostras positivas pertenciam a dois machos do mesmo rebanho. Nenhum animal foi positivo na pesquisa de T. foetus. Este é o primeiro registro da infecção por C. fetus subsp. venerealis em búfalos no Brasil. Apesar da baixa ocorrência, recomenda-se adoção de medidas de controle, com o intuito de se evitar a disseminação do agente para outros rebanhos.

ABSTRACT The objective this study was to determine the occurrence of infection with Campylobacter fetus subsp. venerealis and Tritrichomonas foetus in buffaloes in the State of Pernambuco, Brazil. Biological samples were collected (cervico vaginal mucus and shaved prepucial) of 113 animals, coming from 8 properties in different regions of the state. The biological material collected was transferred into phosphate buffered saline (PBS) and inoculated in the specific transport, Lander for diagnosis of C. fetus subsp. venerealis and Diamond for T. fetus subsequently. For the diagnosis of infection by Campylobacter fetus subsp. venrealis and Tritrichomonas foetus the samples were submitted to Polymerase Chain Reaction (PCR) grown in Columbia agar plus antibiotics and Diamond, respectively. There was an occurrence of 1.8% (2/113) of positive animals in the microbiological examination with confirmation by PCR, for C. fetus subsp. venerealis. We observed that 100% of positive samples were from two (2) males from the same herd. No animals were positive for T. foetus. This is the first report of infection with C. fetus subsp. venerealis in buffaloes in Brazil. Despite rare occurrence, control measures are recommended in order to prevent the spread of the agent to other herds.

Este estudo teve como objetivo avaliar a frequência de mastite clínica e subclínica e descrever os micro-organismos envolvidos no processo inflamatório da glândula mamária nos rebanhos de búfalos leiteiros no Nordeste do Brasil. Foram analisadas 1.896 amostras de leite provenientes de 474 búfalos em quatro propriedades localizadas nos Estados de Alagoas, Bahia, Ceará e Pernambuco. Após o exame físico da glândula mamária, as amostras de leite de cada teto foram submetidas aos testes da caneca do fundo preto e CMT (California Mastitis Test). As amostras que apresentaram scores ++ e +++ no CMT e as positivas para a caneca do fundo preto foram submetidas ao exame microbiológico. Do total de amostras estudadas, 90/1.896 (4,74%) apresentaram mastite clínica. Com relação ao CMT, observou-se que 802/1.896 (42,2%) das amostras demonstraram mastite subclínica. Staphylococcus spp. foram os micro-organismos mais frequentes, seguidos de Corynebacterium spp. e bactérias gram-negativas. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram uma elevada prevalência de mastite subclínica em rebanhos bubalinos no Nordeste do Brasil, especialmente causadas por Staphylococcus coagulase negativa (SCN). Recomenda-se que o processo de ordenha seja aprimorado, incluindo melhorias na higiene e treinamento de ordenhadores, a fim de reduzir a frequência da doença nos rebanhos.

RESUMO Objetivou-se avaliar a frequência da infecção por Toxoplasma gondii em suínos abatidos para o consumo humano em dois matadouros na Região Metropolitana do Recife, Pernambuco com inspeção Sanitária Estadual. A pesquisa de anticorpos foi realizada por meio da reação de Imunofluorescência indireta, adotando-se o ponto de corte 1:64. Foram analisados 327 animais provenientes de seis cidades, Abreu e Lima, Igarassu e Paulista, Carpina, Paudalho e Tracunhaém. Observou-se frequência de 9,78% de soros positivos, com diluições iguais ou superiores a 1: 64. Os resultados obtidos alertam sobre os riscos de infecção por T. gondii pela ingestão da carne suína crua ou mal cozida, pois é provável que os suínos soropositivos abriguem cistos teciduais, ressaltando a importância de um manejo de criação adequado, visando a diminuição do risco de infecção nesta espécie.

ABSTRACT IGG ANTIBODIES TO TOXOPLASMA GONDII IN PIGS FROM SLAUGHTERHOUSES OF THE RECIFE METROPOLITAN AREA, PERNAMBUCO STATE, NORTHEAST BRAZIL. The objective of the present study was to evaluate the incidence of Toxoplasma gondii infection in pigs slaughtered for human consumption in two slaughterhouses with sanitary inspection in the Recife metropolitan area, Pernambuco State, Brazil. Antibody testing was performed by the indirect fluorescent antibody test, adopting the cut-off 1:64. A total of 327 animals were analyzed from six cities: Abreu e Lima, Paulista, Igarassu, Carpina, Paudalho and Tracunhaém. A frequency of 9.78% positive sera was observed for dilutions equal to or greater than 1:64. These data suggest risks of infection with Toxoplasma gondii by ingestion of raw or undercooked pork, since it is likely that seropositive pigs could contain tissue cysts, emphasizing the importance of creating a suitable management, aimed at reducing the risk of infection in this species.

O presente estudo teve como objetivo isolar e identificar a microflora bacteriana aeróbica presente na mucosa da cavidade oral e da cloaca de exemplares de jacarés-de-papo-amarelo (Caiman latirostris) nascidos e criados em cativeiro no Parque Zoológico Arruda Câmara, localizado na cidade de João Pessoa - PB. As bactérias mais freqüentes foram Staphylococcus sp. (14,74%), Corynebacterium sp.(13,68%), Escherichia coli (13,68%) e Shigella sp. (11,58%), e as menos prevalentes foram Citrobacter sp.(1,05%), Klebsiella pneumoniae (1,05%) e Salmonella sp. (1,05%). Ressalta-se a importância da participação desses microrganismos em processos infecciosos (septicemias) e em feridas provocadas por crocodilianos.

The objective of this study was to isolate and identify the aerobic bacterial microflora from the oral cavity mucosa and cloaca's samples, collected from Broad-snouted caiman (Caiman latirostris), born and bred in captivity at Parque Zoológico Arruda Câmara, João Pessoa, Paraíba, Brazil. The most common bacteria were Staphylococcus sp. (14.74%), Corynebacterium sp. (13.68%), Escherichia coli (13.68%) and Shigella sp. (11.58%), and the less common were Citrobacter sp. (1.05%), Klebsiella pneumoniae (1.05%) and Salmonella sp. (1.05%).This emphasizes the importance of these microorganisms' participation in infectious processes (sepsis) and injuries caused by crocodilians.

RESUMO Objetivou-se com este estudo investigar a presença de anticorpos anti-Brucella abortus em grupos ocupacionais envolvidos com a criação de bovinos no Município de Correntes, Estado de Pernambuco, avaliando-se os fatores de risco associados à infecção em humanos, e estimar a prevalência em rebanhos bovinos leiteiros. Para tanto, foram colhidas 1.089 amostras de bovinos adultos e de 56 pessoas e examinadas pelo teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). As amostras humanas foram submetidas à soroaglutinação lenta em tubos (SAL) e ao 2-mercaptoetanol (2-ME) e, quando reagentes a uma ou ambas as técnicas, para qualquer título, foram examinadas pela técnica de fixação do complemento (FC). Adicionalmente, pessoas submetidas à colheita de sangue foram solicitadas a responder um questionário investigativo. A prevalência para bovinos foi de 6,8% (74/1.089) obtidas através da SAL e 2-ME, e em humanos de 1,8% (1/56) ao AAT. Na SAL foi observada positividade em 21,4% (12/56) das amostras humanas, não havendo, entretanto, amostras reagentes ao 2-ME (0% 0/12) e ao FC (0% 0/12). Os fatores de risco estudados: consumo de leite cru e seus derivados, contato com secreções, manipulação de carnes, uso de luvas e transmissão iatrogênica na manipulação de vacina B19 não foram analisados estatisticamente, pois não se detectou nenhum indivíduo positivo ao teste de fixação do complemento. Os resultados deste estudo sugerem que a população da zona rural do Município de Correntes, PE, encontra-se exposta à infecção por B. abortus, embora não se possa inferir a existência de intercorrência entre a infecção bovina e a humana. De qualquer forma uma vigilância maior por parte das autoridades sanitárias deve ser implementada.

ABSTRACT The objective of this study was to investigate the presence of anti-Brucella abortus antibodies in occupational groups involved in cattle raising in Correntes County, Pernambuco State, Brazil, evaluating the risk factors associated with the infection in humans, and estimating the prevalence in dairy cattle. In order to do so, 1089 samples from adult bovines and from 56 humans were collected and examined by the tampon acidified antigen (TAA) test. The samples were subjected to slow serum agglutination (SSA) and to 2-mercaptoethanol (2-ME) and, when positive by one or both techniques, for any titer, were examined by the complement fixation (CF) technique. Additionally, people who were subjected to blood collection were asked to answer an investigative questionnaire. The prevalence for the bovines was 6.8% (74/1.089) obtained through the SSA and 2-ME, and in humans it was 1.8% (1/56) by TAA. In the SSA, 21.4% (12/56) of the human samples were positive, with, however, no samples positive by 2-ME (0% – 0/12) or by CF (0% – 0/12). The studied risk factors: intake of raw milk and its byproducts, contact with secretion, meat manipulation, glove utilization and iatrogenic transmission in the handling of the B19 vaccine, were not analyzed statistically, because no individual was detected positive by the complement fixation test. The results of this study suggest that the population of the rural zone in Correntes County is exposed to infection by Brucella abortus, although it is not possible to infer the existence of intercurrence between the bovine and human infection. Nevertheless, greater vigilance by the health authorities must be implemented.

RESUMO Com o objetivo de estudar a freqüência de agentes bacterianos envolvidos nos processos inflamatórios clínicos e subclínicos da glândula mamária de búfalas e realizar o perfil de sensibilidade dos agentes isolados, foram estudadas 128 búfalas em lactação, totalizando 512 quartos mamários. Realizou-se o “California Mastitis Test” para diagnóstico da freqüência de casos subclínicos e o exame físico da glândula mamária e teste da caneca telada para identificar os casos clínicos. As amostras de leite foram colhidas dos quartos que apresentaram reação ao C.M.T. (escores 1+, 2+, 3+) e daqueles com mastite clínica, sendo posteriormente realizados os exames microbiológicos para a identificação dos agentes envolvidos, além dos testes de sensibilidade a antimicrobianos. Observaram-se bactérias isoladas e associações destas em casos clínicos e subclínicos da doença, destacando-se o Staphylococcus coagulase negativa como o mais freqüente. Os testes de sensibilidade in vitro demonstraram maior eficácia para os antibióticos gentamicina (97,98%), florfenicol (93,94%) e enrofloxacina (90,90%). A gentamicina apresentou 100% de eficácia no tratamento dos casos clínicos, sendo considerada uma boa opção para o controle da doença no rebanho estudado.

ABSTRACT With the objective of examining the frequency of bacterial agents involved in the clinical and subclinical inflammatory processes of the mammary glands of buffalos and to study the sensitivity profile of the isolated agents 128 lactating buffalos (a total of 512 mammary quarters) were examined. The “California Mastitis Test” was the method used for the diagnosis of frequency of subclinical cases and physical examination of the udder and a screened mug test for identification of the clinical cases. Samples of milk were collected from the quarters that showed a reaction to CMT (scores 1+, 2+, 3+) and from those with clinical mastitis. All samples were previously microbiologically tested for the identification of the agents involved together with the sensitivity tests and antimicrobials. The results indicated that the bacteria isolated and associated in the clinical and subclinical cases of the disease were mainly Staphylococcus coagulase negative.The in vitrosensitivity tests showed greater efficacy for gentamicin antibiotics (97.98%), florfenicol (93.94%) and enrophloxine (90.90%). Gentamicin showed 100% efficacy in the treatment of the clinical cases and was considered the best treatment for the control of the disease in the herd in this study.

RESUMO A mastite, inflamação da glândula mamária, é uma das principais doenças da bovinocultura de leite tendo como principal agente infeccioso bactérias do gênero Staphylococcus spp. que comumente apresentam resistência aos antibióticos utilizados no tratamento da mastite. Desta forma, objetivouse com este estudo traçar o perfil de sensibilidade antimicrobiana de 59 cepas de estafilococos coagulase positivo, isolados de amostras de leite de vaca com mastite. Os testes de sensibilidade antimicrobiana foram realizados através da técnica de difusão com discos para 13 antibióticos, verificando-se que os mais eficazes foram a vancomicina com 100% de sensibilidade e a norfloxacina com 96%. O menos eficaz foi a penicilina com 20% de sensibilidade. Em alguns municípios estudados as cepas de estafilococos apresentaram resistência múltipla para 6 a 9 antibióticos simultaneamente. Conclui-se que a análise da sensibilidade antimicrobiana in vitro deve ser considerada pelos proprietários antes da tomada de decisões para a escolha do tratamento adequado para reduzir perdas na produção de leite e em programas de controle da doença em questão.

ABSTRACT Mastitis, inflammation of the mammary gland, is one of the main diseases of milk cattle, having as the main infectious agent the Staphylococcus spp. bacteria, which commonly presents resistance to the antibiotics used in the treatment of mastitis. For this reason, this study was aimed at drawing the profile of anti-microbial sensibility of 59 strains of coagulase-positive staphylococcus, isolated from samples of cow milk with mastitis. The tests of anti-microbial sensibility were accomplished through a diffusion technique with disks for 13 antibiotics, it being verified that the most effective were vancomycin with 100% of susceptibility and norfloxacin with 96%. The least effective was penicillin with 20% of susceptibility. In some of the studied coutries the staphylococcus strains presented multiple resistance to from 6 to 9 antibiotics simultaneously. The conclusion is that the analysis of the anti-microbial susceptibility in vitro should be considered by the proprietors before taking decisions about the choice of the appropriate treatment in order to reduce losses in the production of milk and in control programs of the disease in question.