ABSTRACT Purpose: To evaluate if the perconditioning affects the antioxidant capacity in mesenteric ischemia and reperfusion injury. Methods: Twenty-one Wistar rats were assigned into three groups, as follows: Sham, IR and rPER. The animals were subjected to mesenteric ischemia for 30 min. rPER consisted of three cycles of 5-min hindlimb ischemia followed by 5 min hindlimb perfusion at the same time to mesenteric ischemic period. After 5 minutes, blood and 5 cm of terminal ileum were harvested for thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) measurement. Results: rPER technique was able to reduce intestinal tissue TBARS levels (p<0.0001), but no statistic difference was observed in blood levels between groups, although it was verified similar results in rPER and Sham group. rPER technique also enhanced TEAC levels in both blood (p = 0.0314) and intestinal tissue (p = 0.0139), compared to IR group. Conclusions: rPER appears as the most promising technique to avoid IR injury. This technique reduced TBARS levels in blood and intestinal tissue and promoted the maintenance of antioxidant defense in mesenteric acute injury.

Resumo Contexto A lesão de isquemia e reperfusão contribui para a morbidade após procedimentos de revascularização. Juntamente com a reperfusão precoce, o condicionamento tecidual através de breves episódios de isquemia e reperfusão é considerado a melhor abordagem para limitar o dano tecidual. Apesar disso, os mecanismos do condicionamento isquêmico remoto são pouco compreendidos, o que pode levar a uma aplicação incorreta. Objetivos Avaliar se o condicionamento isquêmico remoto funciona no coração e no cérebro através do aprimoramento da defesa antioxidante das células e se é uma resposta sustentada ou temporária. Métodos Vinte e um ratos Wistar foram divididos em três grupos (n = 7): SHAM, no qual não foi realizado condicionamento isquêmico; RIC 10, no qual 10 minutos após o protocolo de condicionamento isquêmico, foi realizada a coleta dos órgãos; e RIC 60, no qual 60 minutos após o protocolo de condicionamento isquêmico, foi realizada a coleta dos órgãos. O protocolo de condicionamento isquêmico remoto consistiu em três ciclos de 5 minutos de isquemia, seguidos de 5 minutos de perfusão no membro posterior esquerdo, com duração total de 30 minutos. Amostras foram usadas para medir a capacidade antioxidante do tecido. Resultados O condicionamento isquêmico remoto aumentou a capacidade antioxidante do coração e do cérebro após 10 minutos (0,746 ± 0,160/0,801 ± 0,227 mM/L) quando comparado ao SHAM (0,523 ± 0,078/0,404 ± 0,124 mM/L) . Sessenta minutos após o condicionamento isquêmico remoto, não foi detectado aumento da capacidade antioxidante do coração ou do cérebro (0,551 ± 0,073/0,455 ± 0,107 mM/L). Conclusões O condicionamento isquêmico remoto melhora temporariamente as defesas antioxidantes do coração e do cérebro em ratos Wistar.

Abstract Background Ischemia-reperfusion injury contributes to morbidity after revascularization procedures. Along with early reperfusion, tissue conditioning by alternating intervals of brief ischemia-reperfusion episodes is considered the best approach to limit tissue damage. Remote ischemic conditioning is conducted remotely, in tissues other than those under ischemia. Despite this, remote ischemic conditioning protection mechanisms are poorly understood, which can lead to misapplication. Objectives To assess whether remote ischemic conditioning works in the heart and brain through enhancement of cells’ antioxidant defenses and whether the response is sustained or temporary. Methods Twenty-one male Wistar rats were assigned to three groups (n = 7): SHAM: same procedure as the other groups, but no remote ischemic conditioning was carried out. RIC 10: heart and brain were harvested 10 minutes after the remote ischemic conditioning protocol. RIC 60: heart and brain were harvested 60 minutes after the remote ischemic conditioning protocol. The remote ischemic conditioning protocol consisted of 3 cycles of 5 min left hindlimb ischemia followed by 5 min left hindlimb perfusion, lasting 30 min in total. Heart and brain samples were used to measure the tissue antioxidant capacity. Results Remote ischemic conditioning increased heart and brain antioxidant capacity after 10 minutes (0.746 ± 0.160/0.801 ± 0.227 mM/L) when compared to SHAM (0.523 ± 0.078/0.404 ± 0.124 mM/L). No enhancement of heart or brain antioxidant capacity was detected 60 minutes after remote ischemic conditioning (0.551 ± 0.073/0.455 ± 0.107 mM/L). Conclusions Remote ischemic conditioning temporarily enhances heart and brain antioxidant defenses in male Wistar rats.

Abstract Purpose: To evaluate the effects of hypertonic saline solution associated to remote ischemic perconditioning in renal ischemia/reperfusion injury in rats. Methods: Twenty five male rats (Wistar) underwent right nephrectomy and were distributed into five groups: Sham group (S); Ischemia/Reperfusion group (I/R) with 30 minutes of renal ischemia; Remote ischemic perconditioning group (Per) with three cycles of 10 minutes of I/R performed during kidney ischemia; Hypertonic saline solution group (HSS) treated with hypertonic saline solution (4ml/kg); remote ischemic perconditioning + Hypertonic saline solution group (Per+HSS) with both treatments. After reperfusion, blood samples were collected for BUN and creatinine serum levels analyzes. TBARS were evaluated in plasma and renal tissue to assess oxidative stress. Kidney histopathological examination were performed. Results: Per+HSS group showed a lower degree of renal dysfunction in relation to I/R group, whereas the technique of remote ischemic perconditioning isolated or associated with saline solution significantly reduced oxidative stress and histological damage. Conclusion: Remote ischemic perconditioning associated or not to saline solution promoted reduction of acute renal injury induced by ischemia/reperfusion.

PURPOSE: To evaluate the effects of copaiba oil as a prophylactic and/or therapeutic substance on survival of rats subjected to cecal ligation and puncture, describing histopathological and oxidative stress findings.METHODS:Forty rats (Ratus norvegicus) were distributed into five study groups (N=8): Sham group (ShG): normal standard animals; Sepse group (SepG): submitted a cecal ligation and puncture (CLP); Pre group (PreG): administered copaiba oil once daily by subcutaneous injection for five days before carrying out CLP; Post CLP group (PostG): administered copaiba oil once daily by subcutaneous injection from the first day of CLP until death by sepsis; and Pre/Post group (Pre/PostG): administered copaiba oil once daily by subcutaneous injection for five days before carrying out CLP and from the first day of CLP until de death by sepsis. After the death of the animals, blood was collected for assessment of oxidative stress and histological analysis were performed. The Kaplan-Meier curves of surviving time were realized.RESULTS: Survival analysis demonstrated that animals treated with copaiba oil prior to the execution of the CLP (PreG and Pre/Post groups) had longer survival compared to the sepsis group (p<0.0001) whereas animals receiving copaiba only after the completion of CLP (PostG) showed no statistically significant difference compared to the sepsis group. However, when comparing the two groups in which was administered copaiba previously (PreG and Pre/PostG groups), there was no statistical significance between the groups (p=0.4672). There was no statistical difference between histopathological findings or the levels of oxidative stress.CONCLUSION: Prophylactic subcutaneous administration of copaiba increases survival of rats subjected to severe sepsis by cecal ligation and puncture.

OBJETIVO: Verificar o potencial efeito protetor de suplementação com vitaminas antioxidantes em um modelo de síndrome de isquemia-reperfusão renal em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 29 ratos Wistar, divididos em três grupos: Grupo I e II (n=10 cada), submetidos a indução do estresse oxidativo pela aplicação de 60 minutos de isquemia renal, seguidos de 10 minutos de reperfusão; adicionalmente, os animais do Grupo II foram pré-tratados por doze dias com vitaminas antioxidantes (vitamina C 11,43mg/kg e vitamina E 28,57mg/kg) antes da submissão à isquemia; Grupo III (n=9), correspondendo aos animais Sham, que foram manipulados de forma equivalente aos outros grupos, porém sem indução do estresse oxidativo e sem suplementação antioxidante. Findo isso, as amostras de sangue e os rins foram colhidos para avaliação dos níveis do malondialdeído, do ácido úrico e da capacidade antioxidante total. RESULTADOS: Para o malondialdeído e ácido úrico do Grupo I foi observado um aumento estatisticamente significante (p<0,01) em relação ao Grupo III, o qual não apresentou diferença em relação ao Grupo II. Para os níveis de capacidade antioxidante total, foi encontrada uma diminuição nos animais do Grupo I em relação aos Grupos II e III (p<0,01). CONCLUSÃO: Esses dados confirmam não apenas a efetiva participação do estresse oxidativo neste modelo de síndrome de isquemia e reperfusão renal em ratos, como também que o uso de vitaminas antioxidantes, associadas à dieta, pode proteger os animais das alterações oxidativas.

OBJECTIVE: The objective of this study was to verify the potential protective effect of antioxidant vitamin supplementation in a model of renal ischemic-reperfusion injury in rats. METHODS: Twenty-nine Wistar rats were divided into three groups: groups I and II (n=10 each), were submitted to 60 minutes of renal ischemia, followed by 10 minutes of reperfusion; additionally, animals of group II were treated for twelve days with antioxidant vitamins (vitamin C 11.43mg/kg and vitamin E 28.5 mg/kg) before being submitted to ischemia; In group III (n=9), the animals were treated like the other groups but not submitted to ischemic-reperfusion injury and not given antioxidant supplements. Subsequently, blood samples and the kidneys were collected for assessment of malondialdehyde, uric acid and total antioxidant capacity. RESULTS: The malondialdehyde and uric acid of group I was significantly higher than those of group III (p<0.01), which in turn did not differ from group II. The levels of total antioxidant capacity of the animals of group I was lower than those of groups II and III (p<0.01). CONCLUSION: These data confirmed the effective participation of oxidative stress in this model of renal ischemia-reperfusion syndrome in rats and showed that the use of antioxidant supplementation can protect the animals from oxidative changes.

OBJETIVO: Avaliar em um modelo experimental de isquemia-reperfusão hepática os efeitos da injeção intraluminal de glutamina na capacidade anti-oxidante total em equivalência ao trolox (TEAC) do plasma, verificando a aplicabilidade de modificações ao método original de dosagem. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar foram submetidos a laparotomia e confecção de uma alça fechada de 20 cm de comprimento envolvendo o intestinal delgado distal seguido do clampeamento do hilo hepático por 30 minutos e reperfusão por 5 minutos. Na alça fechada foi injetada glutamina (grupo glutamina; n=10) ou água destilada (grupo controle; n=10). Em dez animais (grupo sham) não foi realizado clampeamento hilar. Coletou-se sangue para dosagem da capacidade antioxidante total em equivalência ao trolox em condições modificadas de temperatura, proporções relativas dos reagentes e tempo de leitura sob espectrofotometria. RESULTADOS: A capacidade antioxidante total foi significantemente maior (p<0.05) no grupo glutamina que no grupo controle (1,60[1,55-1,77] vs 1,44[1,27-1,53]) e grupo sham (1,60[1,55-1,77] vs 1,48[1,45-1,59]). Não houve diferenças estatísticas entre o grupo controle e o grupo sham. CONCLUSÃO: A glutamina melhorou a capacidade anti-oxidante total plasmática. O método de dosagem refletiu consistentemente alterações na defesa anti-oxidante nesse modelo experimental.

PURPOSE: To evaluate the effects of intraluminal injection of glutamine on the serum trolox equivalent antioxidant capacity in an experimental model of ischemia-reperfusion of the liver observing the applicability of modifications on the original assay method. METHODS: Thirty Wistar rats underwent laparotomy to perform a 20 cm blind sac of small bowel and occlusion of the hepatic hilo for 30 minutes and reperfusion for 5 minutes. Into the gut sac it was injected glutamine (glutamine group, n=10) or distilled water (control group, n=10). Ten other animals (sham group) underwent laparotomy without artery occlusion. Blood samples were collected for trolox equivalent antioxidant capacity assays in different temperature conditions, reagent quantities and time for spectrophotometer readings. RESULTS: Total antioxidant capacity was significantly greater in glutamine group than in both control group (1,60[1,55-1,77] vs 1,44[1,27-1,53]) and sham group (1,60[1,55-1,77] vs 1,48[1,45-1,59]). CONCLUSION: Glutamine enhanced serum antioxidant capacity. The assay technique consistently reflected the changes in the antioxidant defenses in this experimental model.

OBJETIVO: Verificar o efeito do tempo de isquemia sobre as alterações oxidativas, a capacidade antioxidante total e o óxido nítrico, no músculo, no rim e no plasma de ratos submetidos à isquemia e reperfusão de membros posteriores. MÉTODOS: 40 ratos machos foram distribuídos aleatóriamente em quatro grupos experimentais com 10 animais cada. Laparotomia, isolamento da aorta abdominal infra e justa renal. Grupos 1 e 3 (simulados) passagem do fio monofilamentar de polipropileno 7-0 ao redor da aorta sem liga-la e espera de 1 hora para o grupo 1 e de 6 horas para o grupo 3. Retirada do fio, espera de 15 minutos, eutanásia e colheita do material. Grupos 2 e 4 (experimentos), ligadura da aorta abdominal com o mesmo fio e isquemia de 1 hora no grupo 2 e de 6 horas no grupo 4. Retirada do fio e reperfusão por 15 minutos. Eutanásia e colheita de sangue por escoamento, músculo da pata posterior esquerda e rim esquerdo. Os parâmetros verificados foram: malondialdeído, capacidade antioxidante total e óxido nítrico. RESULTADOS: Utilizou-se o teste "t"de Student e o teste de MANN-WHITNEY como testes não paramétricos e fixou-se em 0,05 ou 5% o nível de rejeição. Houve alterações estatísticamente significantes do malondialdeído no rim. A capacidade antioxidante total apresentou alterações significantes no rim, no músculo e no plasma enquanto que, o óxido nítrico, alterou apenas no plasma. CONCLUSÃO: A variação do tempo de isquemia provocou alterações significantes do malondialdeído, da capacidade antioxidante total e do óxido nítrico.

PURPOSE: To verify the effect of the ischemia time on the oxidative alterations, total antioxidant status and the nitric oxide, in the muscle, kidney and plasma, in rats submitted to ischemia and reperfusion of hind limbs. METHODS: Forty male rats were randomized in four groups with ten animals each. Laparotomy, abdominal aorta infra e juxta renal isolation. Groups 1 and 3 (sham), passage of the polipropilen 7.0 monofilamentary thread aorta around without bending it and waiting time of 1 hour to group 1 and 6 hours to group 3. Withdrawal of the thread, waiting time of 15 minutes, euthanasia and material collection. Groups 2 and 4 (experiments), ligation of abdominal aorta with the same thread and ischemia of 1 hour in the group 2 and 6 hours to the group 4. Withdrawal of the thread and reperfusion for 15 minutes. Euthanasia and blood collection by flowing; withdrawal of the left hind limb muscle and of the left kidney. The parameters evaluated were: malondialdehyde, total antioxidant status and the nitric oxide. RESULTS: The "T"Student test and the MANN-WHITNEY test have been used as nonparametrics tests and the rejection level have been fixed in 0,05 or 5%. There were significative alterations of the malondialdehyde in the kidney. The total antioxidant status has been shoun significative alterations in the kidney, muscle and plasma. Although the nitric oxide has been altered in the plasma only. CONCLUSION: The ischemia time changing has provoked significative alterations of malondialdehyde, total antioxidant status and nitric oxide.

OBJETIVO: O objetivo deste estudo experimental foi avaliar o efeito da Terazosina e do Propranolol na prevenção da necrose induzida pela nicotina, em um retalho cutâneo randômico. MÉTODOS: Este estudo utilizou 32 ratos machos adultos Wistar-EPM divididos, ao acaso, em quatro grupos de oito animais. Todos os 32 animais receberam nicotina (2 mg/kg/dia), por via subcutânea, por uma semana antes e uma semana após a elevação do retalho. O grupo CG (Controle) recebeu água destilada (0,2 ml/dia), por gavagem e salina (0,5 ml), por via intraperitoneal, por sete dias no período pós-operatório. O grupo TG (Terazosina) recebeu terazosina (3 mg/dia), por gavagem, e salina, intraperitoneal, por sete dias no pós-operatório. O grupo PG (Propranolol) recebeu propranolol (1,5 mg/dia), intraperitoneal e água destilada, por gavagem, seguindo o padrão estabelecido. O grupo TPG (Terazosina + Propranolol) recebeu ambas as drogas. No sétimo dia de pós-operatório, a área de necrose distal dos retalhos foi determinada pelo método do gabarito de papel. Amostras de sangue e de pele foram coletadas de forma a permitir a determinação dos níveis de malondialdeído (MDA). RESULTADOS: O grupo controle apresentou um valor médio de necrose de 39,5 %; o grupo Terazosina 25,1 %; o grupo Propranolol 34,5 % e o grupo Terazosina + Propranolol 26,2 % de necrose. Os níveis de MDA no soro e nas amostras de pele comportaram-se de maneira similar, com uma exceção no caso do grupo Propranolol neste caso. CONCLUSÃO: A Terazosina foi eficaz na prevenção da necrose neste modelo animal e o Propranolol não foi eficaz neste caso.

PURPOSE: To evaluate the effect of Terazosin and Propranolol on the prevention of necrosis induced by nicotine, in a random skin flap. METHODS: This study utilized 32 adult male Wistar-EPM rats divided, at random, into four groups of eight animals each. All the 32 animals received nicotine (2 mg/kg/day) subcutaneously, for one week before and one week after flap elevation. CG (Control) group received distilled water (0.2 ml/day) by gavage and saline (0.5 ml) intraperitoneally, for seven days in the postoperative period. TG (Terazosin) group received terazosin hydrochloride (3 mg/day) by gavage and saline, intraperitoneally, for seven days in the postoperative period. PG (Propranolol) group received propranolol (1.5 mg/day) intraperitoneally and distilled water, by gavage, following the stablished pattern. TPG (Terazosin + Propranolol) group received both drugs. On the seventh postoperative day, the distal necrotic area of the flaps was determined via the paper template method. Blood and skin samples were collected in order to allow determination of Malondialdehyde (MDA) levels RESULTS: The control group had a mean value of 39.5 % of necrosis; the Terazosin group 25.1 %; the Propranolol group 34.5 % and the Terazosin + Propranolol group 26.2 % of necrosis. MDA levels in the serum and in the skin samples behave similarly, with an exception regarding Propranolol group in this case. CONCLUSION: Terazosin is effective in the prevention of necrosis in this animal model and Propranolol is not effective in this case.

OBJETIVO: Estudar o comportamento do estresse oxidativo (MDA) e da defesa antioxidante (CAT), em fragmentos de retalhos cutâneos randômicos isquêmicos em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 18 ratos adultos jovens, machos (Wistar EPM-1, 290 a 350g), submetidos à elevação de retalho cutâneo de base cranial no dorso, divididos em três grupos (N=6) em função do tempo pós-operatório: imediato (POI), terceiro e sétimo dias (PO3 e PO7, respectivamente). Ao final, foram coletadas amostras de sangue periférico e fragmentos de tecido do retalho e de área cutânea normal fora do retalho para dosagem de MDA e de CAT. RESULTADOS: Para MDA no soro, o grupo POI apresentou valores significativamente menores que os grupos PO3 e PO7, os quais não diferiram entre si. Não foi encontrada diferença entre os valores das amostras cutâneas em nenhum dos três grupos estudados. Para os valores da capacidade antioxidante total (CAT) não houve diferença significante entre os três grupos, quando analisado o soro dos animais, no entanto, para as amostras de fragmentos cutâneos, os valores diminuíram significativamente em função do tempo. CONCLUSÃO: A inexistência de diferença para os valores de MDA nas amostras cutâneas entre os grupos e a diminuição dos valores da CAT ao longo do tempo sugere que a presença de necrose na porção distal dos retalhos dos animais do grupo PO7 decorra, não somente da agressão oxidativa, mas também da diminuição da capacidade de defesa antioxidante local.

PURPOSE: to study oxidative stress (MDA) and total antioxidant status (CAT) in fragments of randomic ischemic skin flaps from rat dorsum. METHODS: 18 male rats, young adults (Wistar EPM-1, 290 - 350g), that underwent elevation of randomic ischemic flaps from dorsum, were divided in three groups (N=6), according to post-operative time-points: immediate (POI), third and seventh post-operative days (PO3 and PO7), respectively. At the end, peripheral blood samples and tissue fragments of the flap and of normal skin outside flap were draw for MDA and CAT measurement. RESULTS: serum MDA values in group POI were significantly lower than those in PO3 and PO7, both latter in the same range. No differences were found among MDA values of the skin samples in any of the three groups. The analysis of the total antioxidant status of the animal’s serum (CAT) did not show significant differences among the three groups. However, in the skin flap samples, the CAT values significantly decreased with time. CONCLUSION: The lack of significant differences among MDA values in skin samples from all groups, and the decreasing CAT values with time, suggest that the existence of necrosis at the distal portion of flaps in group PO7 is due not only to oxidant aggression but mainly to the reduction of local antioxidant status.