RESUMO: A contaminação de superfícies por micro-organismos patogênicos e deteriorantes é uma preocupação constante na indústria de alimentos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de nanopartículas de prata (AgNPs) produzidas utilizando óleo essencial de Lippia origanoides Kunth e extrato etanólico da Hymenaea martiana Hayne, frente a bactérias de importância na contaminação em áreas de processamento do leite. Para isso, as AgNPs foram sintetizadas e sua atividade antimicrobiana foi avaliada através das concentrações inibitória e bactericida mínimas, tempo de morte, interferência sobre o biofilme, e por fim, a sua aplicação sobre superfícies de diferentes materiais. As AgNPs apresentaram atividade bacteriostática e/ou bactericida frente à Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus aureus (ATCC 33591), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Choleraesuis (ATCC 10708), Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella spp. e Pseudomonas aeruginosa, e interferiram na formação do biofilme mais do que sobre o biofilme consolidado. O tempo de uma hora foi o suficiente para reduzir as populações bacterianas, enquanto o Minimum Duration for Killing MDK 99% foi atingido próximo a 30 minutos. As AgNPs foram eficientes contra bactérias aderidas ao inox e ao polietileno. Assim, tendo em vista a crescente resistência microbiana e o desenvolvimento de novos produtos baseados nos conceitos da química verde, essas nanopartículas de prata apresentam-se como uma nova possibilidade de uso nos processos de higienização da indústria de alimentos. RESUMO microorganismos micro organismos alimentos forma (AgNPs Hayne leite isso mínimas morte fim materiais eou ou ATCC 25923, 25923 , 25923) 33591, 33591 33591) 25922, 25922 25922) subsp 10708, 10708 10708) monocytogenes spp aeruginosa consolidado bacterianas 99 3 minutos polietileno Assim verde apresentamse apresentam se 2592 3359 1070 9 259 335 107 25 33 10 2 1

ABSTRACT: Surface contamination by pathogenic and deteriorating microorganisms is a constant concern in the food industry. Therefore, in this study we evaluated the antimicrobial activity of silver nanoparticles (AgNPs), produced using the essential oil of Lippia origanoides Kunth and ethanolic extract of Hymenaea martiana Hayne, against bacteria used in milk processing. For this, AgNPs were synthesized and their antimicrobial activity was evaluated for minimum inhibitory and bactericidal concentrations, time-kill, interference on the biofilm, and application on the surfaces of different materials. AgNPs showed bacteriostatic and bactericidal activity against Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Staphylococcus aureus (ATCC 33591), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Choleraesuis (ATCC 10708), Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella spp.,andPseudomonas aeruginosa,and interfered with biofilm formation more than with consolidated biofilms. A 1hour period was sufficient to reduce the bacterial cells, whereas a Minimum Duration for Killing (MDK) of 99% was reached after approximately 30 min. AgNPs were effective against bacteria attached to stainless steel and polyethylene, but ineffective on tile surfaces. Thus, owing to the growing microbial resistance and the need to develop new products based on the concepts of green chemistry, these AgNPs are presented as a new possibility for cleaning processes in the food industry. ABSTRACT industry Therefore AgNPs, , (AgNPs) Hayne processing concentrations timekill, timekill time kill, kill time-kill materials ATCC 25923, 25923 25923) 33591, 33591 33591) 25922, 25922 25922) subsp 10708, 10708 10708) monocytogenes sppandPseudomonas spp andPseudomonas aeruginosaand aeruginosa biofilms hour cells MDK (MDK 99 3 min polyethylene Thus chemistry (AgNPs 2592 3359 1070 9 259 335 107 25 33 10 2 1

ABSTRACT: Given the need for alternative therapies for bovine mastitis, an infectious disease of high prevalence and significant economic impact in dairy farms, this study evaluated the in vivo antimicrobial efficacy of an intramammary formulation based on soluble polypyrrole (PPy), a promising conductive polymer for biomedical applications, especially as an effective antimicrobial agent. In this assay, mammary quarters of healthy Holstein Friesian cows (n = 8) were inoculated with Staphylococcus aureus and treated, via the intramammary route, with an experimental formulation based on soluble PPy (5%) and a commercial formulation based on gentamicin sulfate. The effect of these treatments was evaluated based on milk cultures, Total Bacterial Count (TBC), Somatic Cell Count (SCC), and milk composition analysis of mammary quarter samples in seven experimental moments. In addition, hematological evaluations of the animals were also performed. The intramammary application of three levels of the experimental formulation based on soluble PPy resulted in higher log/mL of the TBC and SCC compared to a positive control group and a group that received gentamicin sulfate. The experimental formulation did not induce changes in milk composition or in hematological parameters. Certain factors related to pharmacokinetics, such as the type of carrier used in the formulation and the pharmacodynamics of soluble PPy, may have contributed to the antimicrobial ineffectiveness of the experimental formulation. The results of this study neither define nor decrease the antimicrobial potential of soluble PPy. Further research is required to develop formulations that enable the antibacterial action of soluble PPy in the intramammary environment of dairy cows. ABSTRACT mastitis farms , (PPy) applications agent assay n 8 treated route 5% 5 (5% sulfate cultures TBC, (TBC) SCC, (SCC) moments addition performed logmL log mL parameters pharmacokinetics (PPy (5 (TBC (SCC (

RESUMO: Considerando a necessidade de terapias alternativas para a mastite bovina, uma inflamação, normalmente de causa infecciosa, de alta prevalência e de alto impacto econômico nas fazendas leiteiras, avaliou-se a eficácia antimicrobiana, in vivo, de uma formulação intramamária à base de polipirrol (PPy) solúvel, um polímero condutor promissor para aplicações biomédicas, especialmente como potente antibacteriano. Neste ensaio, quartos mamários de vacas holandesas sadias (n = 8) foram inoculados com Staphylococcus aureus e tratados, por via intramamária, com formulação experimental à base de PPy solúvel (5%) e com formulação comercial à base de sulfato de gentamicina. O efeito desses tratamentos foi avaliado com a realização de lactoculturas, da Contagem Bacteriana Total (TBC), da Contagem de Células Somáticas (SCC) e da análise da composição do leite das amostras obtidas de quartos mamários, em sete momentos experimentais. Avaliação hematológica dos animais também foi realizada. A aplicação intramamária de três doses da formulação experimental à base de PPy solúvel resultou em maiores log/mL da TBC e da SCC quando comparadas ao grupo controle positivo e ao grupo que recebeu sulfato de gentamicina. A administração da formulação experimental não induziu alterações na composição do leite e nos parâmetros hematológicos. Alguns fatores farmacocinéticos e farmacodinâmicos do PPy solúvel podem ser atribuídos a ineficácia antimicrobiana da pomada experimental. Outras pesquisas devem ser realizados em prol do desenvolvimento de formulações que permitam a atuação antibacteriana do PPy solúvel no ambiente intramamário de vacas leiteiras. RESUMO bovina inflamação infecciosa leiteiras avaliouse avaliou se vivo (PPy biomédicas antibacteriano ensaio n 8 tratados 5% 5 (5% gentamicina lactoculturas TBC, , (TBC) (SCC experimentais realizada logmL log mL hematológicos (5 (TBC (

RESUMO: A caprinocultura leiteira é um setor produtivo em crescimento, devido à alta demanda dos produtos lácteos considerados nutritivos e hipoalergênicos. Em consequência disso, são exigidas medidas de segurança na cadeia produtiva a fim de fornecer produtos inócuos ao consumidor. No entanto, os conceitos de biosseguridade ainda são incipientes na caprinocultura brasileira. Desta forma, este estudo tem a finalidade de revisar as principais medidas de biosseguridade aplicadas à caprinocultura leiteira e sugerir um programa que contemple estas medidas visando promover a saúde e o bem-estar animal. Além disso, a biosseguridade propicia a sustentabilidade do meio ambiente e potencializa melhorias neste setor agropecuário. Salienta-se que um programa de biosseguridade (PB) é composto por um conjunto de medidas e procedimentos de atenção à saúde do plantel, aplicados em todas as etapas da criação animal, interagindo com diversos setores que compõe o sistema produtivo, além de propiciar a implantação de um conjunto de políticas e normas operacionais, com o objetivo de proteger os rebanhos contra a introdução de qualquer agente infeccioso potencialmente patogênico. O PB necessita de planejamento, execução, monitoramento, auditorias, atualizações, bem como demanda de compreensão dos procedimentos e da sensibilização de todos os envolvidos nos processos da cadeia produtiva. Adicionalmente, inclui programas de educação continuada de todos os indivíduos e a elaboração de planos de contingência para situações emergenciais específicas. As informações incluídas neste estudo fornecerão aporte às propriedades de caprinocultura de leite para a implementação de ações que promovam melhorias na produtividade deste setor agropecuário.

ABSTRACT: The goat milk industry has unquestionably grown in recent years due to the high demand for dairy products, which are considered nutritious and hypoallergenic. As a result, security measures are required in the production chain to provide consumers with safe products, although the concept of biosecurity is still incipient in Brazilian goat farming. Therefore, this study aimed to review the main biosecurity measures applied to dairy goat farms and suggest a program that contemplates these measures to promote animal health and welfare, given that biosecurity bolsters environmental sustainability and improves this agricultural sector. Biosecurity programs (BP) are composed of a set of measures and procedures aimed at herd health and applied in all stages of animal husbandry, interacting with different sectors that make up the production system and providing a set of policies and operational norms to protect herds against potentially pathogenic agents. Thus, BP require planning, execution, monitoring, audits, updates, understanding of the procedures, and awareness of those involved in the production chain. In addition, it includes continuing education programs and the development of contingency plans for specific emergencies. The information included in this study provides input to dairy goat farms to implement practices that improve the productivity of this agricultural sector.

RESUMO A mastite é uma importante enfermidade que acomete rebanhos leiteiros de cabras e ovelhas. Os antimicrobianos são amplamente utilizados na terapia da mastite, contudo, o fenômeno da resistência bacteriana tem despertado o interesse por alternativas terapêuticas, destacando-se a pesquisa com óleos essenciais de diversas plantas. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antibacteriana de óleos essenciais frente a patógenos de importância na mastite caprina e ovina. A obtenção dos óleos essenciais foi realizada utilizando a técnica de hidrodestilação e a composição química foi analisada através de cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Para avaliar a atividade antibacteriana dos óleos essenciais (OE) de quatro plantas, utilizou-se os testes de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). Foram utilizados 15 isolados bacterianos previamente identificados como Staphylococcus spp. e Staphylococcus aureus. Utilizaram-se as seguintes espécies de plantas: Lippia origanoides (alecrim-pimenta), Lippia alba (erva cidreira), Cymbopogon citratus (capim-santo) e Ocimum basilicum (manjericão) frente aos 15 isolados bacterianos. Os três primeiros óleos essenciais apresentaram atividade antibacteriana sobre 100% dos isolados (15/15), com as CIMs de 560, 1173 e 1280 µg mL-1, e CBMs de 613, 1226 e 1333 µg mL-1, respectivamente. Por outro lado, o óleo de Ocimum basilicum (manjericão), não exerceu atividade sobre nenhum isolado (0/15). O carvacrol, citral, geronial e o estragol foram alguns dos compostos majoritários encontrados. Estes resultados podem auxiliar outras pesquisas que visam à utilização destes óleos essenciais como produtos potenciais e que possam futuramente auxiliar no tratamento da mastite em pequenos ruminantes. ovelhas contudo terapêuticas destacandose destacando se plantas forma ovina CGEM. CGEM CG EM . (CG-EM) OE (OE utilizouse utilizou CIM (CIM CBM. CBM (CBM) 1 spp aureus Utilizaramse Utilizaram alecrimpimenta, alecrimpimenta alecrim pimenta , (alecrim-pimenta) erva cidreira, cidreira cidreira) capimsanto capim santo (capim-santo manjericão (manjericão 100 15/15, 1515 15/15 (15/15) 560 117 128 mL1, mL1 mL 1, mL-1 613 122 133 respectivamente lado manjericão, 0/15. 015 0/15 0 (0/15) carvacrol citral encontrados ruminantes (CG-EM (CBM (alecrim-pimenta 10 151 15/1 (15/15 56 11 12 mL- 61 13 01 0/1 (0/15 15/ (15/1 5 6 0/ (0/1 (15/ (0/ (15 (0 (1 (

ABSTRACT Mastitis is an important infirmity that affects dairy goats and sheep flocks. Antimicrobials are widely used in mastitis therapy; however, the phenomenon of bacterial resistance has sparked interest in therapeutic alternatives, especially the research on essential oils from several plant species. Therefore, this study aimed to evaluate the antimicrobial activity of essential oils against pathogens of importance in caprine and ovine mastitis. The essential oils were obtained by hydrodistillation and the chemical composition was analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) tests were performed to evaluate the antimicrobial activity of the essential oils (EO) of four plants. Fifteen bacterial isolates, previously identified as Staphylococcus spp. and Staphylococcus aureus, were used. The following plant species were used against the 15 bacterial isolates: Lippia origanoides “alecrim pimenta,” Lippia alba “erva cidreira,” Cymbopogon citratus “capim-santo,” and Ocimum basilicum “manjericão.” The first three essential oils presented antimicrobial activity against 100% of the isolates (15/15), with MICs of 560 µg mL-1, 1,173 µg mL-1, and 1,280 µg mL-1, and MBCs of 613 µg mL-1, 1,226 µg mL-1, and 1,333 µg mL-1, respectively. Nevertheless, the essential oil of O. basilicum, which was also tested, exerted no activity against any of the isolates. Carvacrol, citral, geraniol, and estragole were some of the major compounds found. These results can aid other studies that aim to use these essential oils as potential products for subsequent use in the treatment of mastitis in small ruminants. flocks therapy however alternatives Therefore GCMS. GCMS GC MS . (GC-MS) MIC (MIC MBC (MBC EO (EO plants spp aureus 1 alecrim pimenta, pimenta erva cidreira, cidreira capimsanto, capimsanto capim santo, santo “capim-santo, manjericão. manjericão “manjericão. 100 15/15, 1515 15/15 , (15/15) 56 mL1, mL1 mL 1, mL-1 1173 173 1,17 1280 280 1,28 61 1226 226 1,22 1333 333 1,33 respectively Nevertheless O tested Carvacrol citral geraniol found ruminants (GC-MS “capim-santo “manjericão 10 151 15/1 (15/15 5 mL- 117 17 1,1 128 28 1,2 6 122 22 133 33 1,3 15/ (15/1 11 12 2 13 3 (15/ (15 (1 (

Resumo Considerando o potencial terapêutico de plantas medicinais como alternativas à antibioticoterapia, a pesquisa visa avaliar a atividade antimicrobiana de Commiphora leptophloeos contra isolados de Staphylococcus spp. de leite de ruminante com mastite subclínica. Para isso, foi elaborado o extrato etanólico bruto da casca e folhas de Commiphora leptophloeos, sendo as mesmas caracterizadas quimicamente por HPLC-DAD-MS e por MALDI-TOF. Os extratos foram então avaliados quanto aos seus efeitos antimicrobianos contra 60 isolados de Staphylococcus spp pela técnica de microdiluição em caldo para determinação da concentração bactericida mínima. Além disso, os extratos foram avaliados quanto à sua capacidade de interferir na formação do biofilme e com o biofilme já consolidado. Apesar de todos os extratos testados terem apresentado ação antimicrobiana, valores menores de CBM foram registrados para o extrato da casca na concentração 781,2 µg/mL (25/60). Os extratos da casca e das folhas foram capazes de interferir nos estágios iniciais da formação do biofilme, mas não ocorreu interferência do extrato no biofilme consolidado. Houve alta sensibilidade do isolados testados quando submetidos a extratos de folhas e casca de Commiphora leptophloeos, bem como a capacidade de extratos interferirem na formação de biofilme, indicando seu potencial uso na terapia de mastite de ruminantes.

Abstract Considering the therapeutic potential of medicinal plants as alternatives to antibiotic therapy, the research aims to evaluate the antimicrobial activity of Commiphora leptophloeos against isolates of Staphylococcus spp. from the milk of ruminants with subclinical mastitis. For this, the crude ethanolic extract from the bark and leaves of Commiphora leptophloeos was prepared, with these being chemically characterized by HPLC-DAD-MS and by MALDI-TOF. The extracts were then evaluated as to their antimicrobial effects against 60 isolates of Staphylococcus spp. through the broth microdilution technique to determine the minimum bactericidal concentration. In addition, the extracts were evaluated as to their ability to interfere with biofilm formation and with the already established biofilm. Although all tested extracts showed antimicrobial action, lower MBC values were recorded for the bark extract in the concentration 781.2 µg/mL (25/60). The extracts of the bark and leaves were able to interfere with the initial stages of biofilm formation, but there was no interference of the extract on the established biofilm. There was a high sensitivity of Staphylococcus spp. isolates from subclinical mastitis cases in ruminants when subjected to the extracts from bark and leaves of Commiphora leptophloeos, as well as regarding the ability of extracts to interfere in biofilm formation, indicating their potential in the use for ruminant mastitis therapy.

Resumo O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia in vitro de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite em cabras e, relacionar a resistência observada com a presença do gene icaD. A microdiluição em caldo foi utilizada para avaliar a atividade antimicrobiana in vitro dos desinfetantes, enquanto a técnica de vermelho congo para a avaliação da produção de biofilme e amplificação do gene icaD. Todas as amostras avaliadas foram sensíveis aos desinfetantes, com as seguintes faixas de atividade: amônia quaternária (0,13 - 21,33 µg/ml), clorexidina (4,00 - 313,00 µg/ml) e iodo (190,00 - 12500,00 µg/ml), no entanto o desinfetante a base de hipoclorito de sódio não apresentou atividade bactericida na faixa de concentração 15,0 a 0,03 µg/ml. O gene icaD apresentou frequência de 14,7% nos isolados. O teste exato de Fisher apontou efeito significativo da relação entre o valor da concentração bactericida mínima do desinfetante à base de amônia quaternária e a presença/ausência do gene icaD (P<0,01). Os desinfetantes comerciais com os princípios ativos amônia quaternária, clorexidina e iodo, apresentaram atividade in vitro até mesmo em concentrações inferiores às preconizadas pelos fabricantes o que torna necessária a realização periódica da avaliação do perfil de sensibilidade dos desinfetantes.

Abstract This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of commercial disinfectants on Staphylococcus spp., isolated from mastitis cases in goats, and to associate the observed resistance with the presence of the icaD gene. Broth microdilution was employed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of the disinfectants, whereas the Congo Red technique was used for the evaluation of biofilm production and amplification of the icaD gene. All evaluated samples were sensitive to disinfectants, with the following ranges of activity: quaternary ammonium (0.13 - 21.33 µg/ml), chlorhexidine (4.00 - 313.00 µg/ml) and iodine (190.00 - 12500.00 µg/ml); however, the sodium hypochlorite-based disinfectant showed no bactericidal activity in the concentration range from 15.0 to 0.03 µg/ml. The icaD gene presented a frequency of 14.7% in the isolate samples. Fisher’s exact test showed a significant effect of the relation between the minimum bactericidal concentration value of the quaternary ammonium-based disinfectant and the presence/absence of the icaD gene (P <0.01). Commercial disinfectants with quaternary ammonium, chlorhexidine and iodine active ingredients presented in vitro activity even at concentrations lower than those recommended by the manufacturers. Therefore, the periodic evaluation of the sensitivity profile of the disinfectants must be performed.

Resumo Coxiella burnetii é um agente zoonótico transmitido principalmente por pequenos ruminantes. No Brasil, a doença foi classificada como de notificação compulsória desde 2013, quando casos humanos foram relatados. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores de risco associados à presença de anticorpos anti-Coxiella burnetii em caprinos e ovinos em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Este estudo envolveu um inquérito sorológico de 412 caprinos e 403 ovinos em fazendas do município de Petrolina, no estado de Pernambuco. Os soros foram examinados pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) contra antígenos de C. burnetii . Informações sobre variáveis de manejo (variáveis independentes) que poderiam estar associadas à presença do microrganismo (variáveis dependentes) foram obtidas do proprietário de cada fazenda. Foi determinado que 2,2% (9/412) dos caprinos e 2,1% (9/403) dos ovinos tinham anticorpos reativos a C. burnetii. A presença de anticorpos anti-C. burnetii foram associados com a área seca do Sequeiro (região no norte do município de Petrolina) (P = 0,025), ovinos machos (P = 0,020) e criação intensiva de caprinos (P = 0,005). Este estudo, portanto, observou a presença de anticorpos anti-C. burnetii em pequenos ruminantes, confirmando pela primeira vez que este agente pode estar circulando em rebanhos caprinos no bioma Caatinga, semiárido do Brasil.

Abstract Coxiella burnetii is a zoonotic agent transmitted mainly by small ruminants. In Brazil the disease has been classified as a notifiable disease since 2013, when human cases were reported. This study aimed to identify risk factors associated with the presence of anti- Coxiella burnetii antibodies in goats and sheep in a semiarid region of Northeastern Brazil. Sera of 412 goats and 403 sheep from municipality of Petrolina, Pernambuco, were examined by the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) against antigens of C. burnetii. Information about management variables (independent variables) that could be associated with the presence of the microorganism (dependent variables) were obtained from the supervisor of each farm. It was determined that 2.2% (9/412) of the goats and 2.1% (9/403) of the sheep had antibodies reactive to C. burnetii. The presence of anti-C. burnetii antibodies was associated with the dry area of the Sequeiro (a region in the northern part of the municipality of Petrolina) (P = 0.025), male sheep (P = 0.020), and intensive goat breeding (P = 0.005). This study therefore showed the presence of anti-C. burnetii antibodies in goat and sheep, confirming for the first time that this agent is likely circulating among goat herds in the Caatinga Biome, semi-arid of Brazil.

RESUMO: Este trabalho teve como objetivo analisar o potencial das soluções de óxido de zinco e de nitrato de prata como alternativa para antissepsia de tetos de bovinos (in situ), considerando a escassez de literatura a respeito do uso destes compostos na profilaxia de mastites. Primeiramente foram realizados ensaios de microdiluição e CBM (Concentração Bactericida Mínima) a fim de verificar a atividade antimicrobiana das soluções de óxido de zinco e de nitrato de prata sobre 30 isolados de Staphylococcus spp., obtidos de casos de mastite. Todos os isolados apresentaram sensibilidade às duas soluções testadas, mas a solução de nitrato de prata apresentou menores valores de CBMs (3,05 a 97,65 μg/mL), quando comparada as CBMs da solução de óxido de zinco (97,65 a 6.250μg/mL). Posteriormente, foram conduzidos os ensaios de antissepsia dos tetos (in situ) através da imersão dos mesmos nas soluções antimicrobianas testadas. Para isso, foram utilizados 40 tetos (n=40) oriundos de vacas abatidas, os quais foram divididos em 4 grupos de 10 tetos, destinados ao teste das solução de óxido de zinco a 3% (30mg/mL), de nitrato e prata 1% (10mg/mL) e seus respectivos controles. Os tetos foram submetidos à contagem de microrganismos mesófilos na superfície dos tetos (UFC/cm2) antes e após a imersão nas soluções testadas. Como resultado, todas as soluções (de óxido de zinco e de nitrato de prata) apresentaram significativa redução de UFC/cm2 até aos 60 minutos após a imersão (M 0’ a M 60’). A solução de nitrato de prata apresentou redução de UFC/cm2 significativamente maior, quando comparado ao grupo testado com solução de óxido de zinco. Tais resultados validam o potencial das soluções de óxido de zinco e nitrato de prata para utilização no pré e pós-dipping em vacas leiteiras.

ABSTRACT: This study aimed to analyze the zinc oxide and silver nitrate solutions as an alternative antiseptic for cow teats (in situ), considering the lack in the literature about these compounds uses in mastitis prophylaxis. First microdilution tests med and MBC (Minimal Bactericidal Concentration were perfor in order to determine the antimicrobial activity of zinc oxide and silver nitrate solutions over 30 Staphylococcus spp. isolates, obtained from cows with mastitis. All strains tested showed sensitivity to both solutions, but the silver nitrate solution had lower MBC values (3,05 to 97,65ug/ml) compared with zinc oxide solution MBCs (97,65 to 6,250 ug/ml). Subsequently, the antiseptic teat tests were conducted (in situ) by immersing the teats in same antimicrobial solutions tested in the first experiment. Therefore, 40 teats were used (n = 40) originating from slaughtered cows were divided into 4 groups of 10 teats, to test test zinc oxide 3% (30mg/mL) and silver nitrate 1% (10mg/mL) solutions and their respective controls. The teats were submitted to mesophilic count on the teat surface (CFU/cm2) before and after immersion in tested solutions. As a result, all the solutions (zinc oxide and silver nitrate) had a significant reduction in CFU/cm2 until 60 minutes after immersion (M 0’ to 60 M’). Silver nitrate solution showed a reduction of CFU/cm2 significantly higher compared to the group treated with zinc oxide solution. These results validate the potential use of zinc oxide and silver nitrate solutions in dairy cows as a pre- and post-dipping antiseptic.

Resumo: Neste estudo, objetivou-se avaliar a composição química do leite após a infecção e tratamento da mastite induzida por S. Aureus. Foram utilizadas 10 fêmeas caprinas da raça Saanen. Fez-se a infecção experimental em 20 glândulas mamárias, formando-se quatro grupos experimentais, sendo cada um composto por cinco glândulas mamárias. Um grupo foi tratado com antimicrobiano comercial e outro com pomada à base de extrato natural de planta. Os demais grupos foram constituídos controles. Os valores obtidos para gordura, lactose, proteína, sólidos totais e produção leiteira foram analisados ao longo dos momentos experimentais, comparando-os entre si e entre os grupos experimentais. A mastite foi diagnosticada 24 horas pós inoculação, utilizando-se a lactocultura. Os animais não apresentaram alterações nos parâmetros clínicos avaliados. Para os percentuais de gordura, proteína e sólidos totais, observou-se uma elevação ao longo dos momentos experimentais, sem variação entre os grupos experimentais. Tendo em vista a importância da terapia antimicrobiana convencional e a crescente utilização de antimicrobianos naturais, os resultados obtidos mostram igualdade entre as duas opções terapêuticas, principalmente no aspecto de manutenção dos principais componentes do leite.

Abstract: This study aimed to evaluate the chemical composition of milk after infection and treatment of mastitis caused by Staphylococcus aureus. Ten Saanen goats were used. Experimental infection was performed in 20 mammary glands, forming four groups, each consisting of five mammary glands. One group was treated with commercial antimicrobial and another with natural plant extract-based ointment. The other groups were constituted as control. The values obtained for fat, lactose, protein, total solids, and milk production were analyzed through the experimental moments, comparing them among each other and between experimental groups. Mastitis was diagnosed by milk microbiology after 24 hours of inoculation. The animals showed no changes in the clinical parameters evaluated. For the percentage of fat, protein, and total solids, there was an increase over the experimental moments. However, there was variation among the experimental groups. Given the importance of conventional antimicrobial therapy and the increased use of natural antimicrobials, obtained results showed equality between the two treatment options, especially regarding the maintenance of the main milk components.

RESUMO Objetivou-se avaliar o potencial antibacteriano de plantas do bioma Caatinga do semi-árido pernambucano contra Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite subclínica em pequenos ruminantes. Foram utilizados seis extratos etanólicos de plantas existentes no bioma Caatinga do semiárido Pernambucano, como Encholirium spectabile Mart., Bromelia laciniosa Mart., Neoglaziovia variegata Mez., Amburana cearensis (Fr. Allem.) A.C.Smith, Hymenaea martiana Hayne. e Selaginella convoluta Spring. Observou-se a presença de compostos fenólicos, flavonoides, esteroides e terpenoides em todos os extratos avaliados neste estudo. Observou-se que os extratos da E. spectabile, B. laciniosa e N. variegata apresentaram atividade antimicrobiana, com as seguintes médias para a concentração bactericida mínima: 11.379, 11.405 e 11.995 µg/ mL, respectivamente. Observou-se maior atividade inibitória para as espécies A. cearensis e H. martiana, que inibiram 88,1 e 99,4 % dos isolados, respectivamente. O extrato etanólico da S. convoluta apresentou o menor percentual de inibição, sendo igual a 15% (n=24/160). Considerando o potencial antibacteriano destas plantas do bioma Caatinga frente à Staphylococcus isolados de casos de mastite subclínica em caprinos e ovinos, outros estudos sobre a atividade in vivo devem ser realizados.

ABSTRACT The aim of the present study is to assess the antibacterial potential of plants from the Caatinga biome of the semi-arid region of Pernambuco, against Staphylococcus spp. isolates from cases of subclinical mastitis in small ruminants, such as goats and ewes. Ethanolic extracts of the following plants from the Caatinga biome were used: Encholirium spectabile Mart., Bromelia laciniosa Mart., Neoglaziovia variegata Mez., Amburana cearensis (Fr. Allem.) A. C. Smith, Hymenaea martiana Hayne, and Selaginella convoluta Spring. The presence of phenolic components, flavonoids, steroids, and terpenoids was verified for all the tested extracts. The mean minimal bactericide concentrations of the extracts of E. spectabile, B. laciniosa, and N. variegate were 11,379, 11,405, and 11,995 µg/mL, respectively. The highest inhibitory activities were observed for A. cearensis and H. martiana, which inhibited 88.1 and 99.4% of the isolates, respectively. Other studies focusing on in vitro and in vivo activities should be undertaken.

RESUMO: Neste trabalho, objetivou-se avaliar duas técnicas diagnósticas (California mastitis test (CMT) e a contagem de células somáticas (CCS)) disponíveis para o diagnóstico da mastite em cabras leiteiras. Realizou-se infecção experimental em 20 metades mamárias, utilizando-se cepa de S. aureus, em uma dose infectante de 1,2x108 UFC mL-1 e um volume de 1mL/metade mamária. Para detecção da mastite subclínica, foi utilizado o CMT e a CCS. A cultura bacteriológica (CB) foi empregada como padrão ouro, sendo realizada logo após a coleta do leite. Foram estabelecidos quatro momentos experimentais (0, 24, 48 e 72 horas pós-infecção). A análise da curva de ROC confirmou que a melhor combinação (sensibilidade e especificidade) foi obtida com ponto de corte de 405,5, 6030,0 e 729,5x103 cells mL-1, respectivamente, em M1, M2 and M3. Ademais, levando em consideração a queda da sensibilidade ao longo dos momentos experimentais, é relevante a realização da cultura bacteriológica seriada, principalmente em rebanhos com elevada prevalência de S. aureus.

ABSTRACT: The aim of the present study was to assess two diagnostic techniques (California mastitis test (CMT) and the somatic cell count (SCC)) that can diagnose mastitis in dairy goats. Experimental infection was conducted using 20 mammary glands, a strain of Staphylococcus aureus, an infectious dose of 1.2x108CFU mL-1 and a volume of 1mL per mammary gland. The CMT and the SCC were used to detect subclinical mastitis. Bacterial culture (BC) was performed immediately after milk collection and was used as the gold standard. Four experimental time points were established (0, 24, 48 and 72 hours post-inoculation). Analysis of the ROC curve confirmed that the best combination of sensitivity and specificity were obtained with a cutoff point of 405.5, 6030.0 and 729.5x103 cells mL-1, respectively at M1, M2 and M3. Furthermore, considering the drop in sensitivity throughout the experimental time points, the use of serial bacterial cultures are recommended, particularly in herds with a high prevalence of S. aureus.

RESUMO: Alguns problemas de ordem sanitária ainda comprometem a produtividade de caprinos e ovinos. Sendo assim, foi realizado um estudo de diagnóstico sorológico da presença de anticorpos anti-lentivírus e anti-Brucella em pequenos ruminantes localizados em municípios dos estados da Bahia e Pernambuco. As coletas foram realizadas em estabelecimentos de abate e em propriedades rurais com produção de leite, totalizando 997 amostras de soro. Para o diagnóstico do CAEV, as amostras foram submetidas ao teste de Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA). Para a pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus e Brucella ovis, foram utilizadas as técnicas do Antígeno Acidificado Tamponado (caprinos) e Imunodifusão em Gel de Agarose (ovinos), utilizando-se antígeno e metodologia recomendada pelo Instituto de Tecnologia do Paraná-TECPAR. Na pesquisa de anticorpos anti-CAEV, observou-se uma soropositividade de 4,1 e 2,2% para os animais oriundos de estabelecimentos de abate e de propriedades leiteiras, respectivamente. Quanto à pesquisa de anticorpos anti-B.abortus em caprinos e ovinos, não se observou nenhum animal positivo. Em relação a B. ovis, pesquisada em 199 amostras de soro ovino, obteve-se uma soroposividade de 6,5% (n=13). Pode-se demonstrar a presença do vírus do CAEV nos rebanhos de corte e leite estudados, porém em baixa frequência. Por outro lado, a infecção natural pela Brucella abortus não ocorre nos rebanhos de caprinos e ovinos avaliados. Registra-se a soropositividade para Brucella ovis, porém em baixa frequência, sendo necessária a realização de testes diretos para diagnóstico da brucelose ovina.

ABSTRACT: Goat and sheep production in the semi-arid northeast of Brazil has shown great economic potential. However, health problems can compromise the productivity of these animals. Given the scarcity of studies about the occurrence of these diseases, the aim of the present study was to analyze the serological diagnosis of anti-Brucella and anti-lentivirus antibodies among small ruminants in municipalities located in the Brazilian states of Bahia and Pernambuco. The samples were collected from local slaughterhouses and dairy farms. In total, 997 serum samples from animals in slaughterhouses and dairy herds were collected. In order to diagnose the caprine arthritis encephalitis virus (CAEV), the samples underwent agarose gel immunodiffusion (AGID) testing. The buffered acidified antigen test (goats) and agarose gel immunodiffusion test (sheep) were used to detect anti-Brucella abortus and B. ovis antibodies following the methodology recommended by the Institute of Technology of Paraná (TECPAR). With anti-CAEV antibodies, seropositivity rates of 4.1% and 2.2% were recorded for animals from the slaughterhouses and dairy farms, respectively. None of the animals (goats or sheep) were positive for anti-B. abortus antibodies. With B. ovis, a seropositivity rate of 6.5% (n = 13) was recorded among the 199 sheep serum samples. Results of the present study confirmed the presence of the CAE virus in the meat and dairy herds studied, although the prevalence was low. Natural infection by B. abortus did not occur in the goat and sheep herds assessed. Seropositivity for B. ovis was confirmed, although prevalence was low. Direct tests are required to diagnose ovine brucellosis.

Para verificar a dinâmica da resistência aos antimicrobianos em uma propriedade rural no município de Santa Maria da Boa Vista, PE, foram avaliados 14 isolados de Staphylococcus epidermidis de caprinos com mastite subclínica. O perfil de resistência aos antimicrobianos foi determinado pelo teste de difusão em disco. A genotipificação foi realizada empregando o marcador REP (Repetitive Extragenic Palindromic) - PCR, utilizando o primer RW3A, enquanto os graus de similaridade e o fenograma de agrupamento foram estabelecidos por meio do coeficiente de Sorensen-Dice (SD) do algoritmo UPGMA, programa NTSYS-pc, o qual permitiu a identificação de 4 padrões dos 14 isolados de S. epidermidis, sendo oito no perfil A, quatro no perfil B, um no perfil C e um no perfil D. Para todos os grupos, a resistência à penicilina foi observada, enquanto que, para os grupos A e C, esta foi associada à lincomicina, no grupo B, esta foi associada à tetraciclina.

To verify the dynamics of antimicrobial resistance in a property in Santa Maria da Boa Vista city - Pernambuco were evaluated 14 Staphylococcus epidermidis isolates from goats with subclinical mastitis. The profile of antimicrobial resistance was determined by disk diffusion test. The genotyping was performed using the marker REP (Repetitive Extragenic Palindromic) - PCR, using RW3A primer, where the degrees of similarity and clustering phenogram were established by means of the Sorensen-Dice coefficient (SD) algorithm UPGMA, program NTSYS-pc, which allowed the identification of 4 patterns of 14 S. epidermidis isolates, being eight in the profile A, four in a profile B, one in profile C and one in profile D. For all groups to penicillin resistance was observed, while for groups A and C this was associated with lincomycin, for group B this was associated with tetracycline.

Objetivou-se com este estudo investigar a participação de Toxoplasma gondii em falhas reprodutivas em pequenos ruminantes de criatórios situados na Zona da Mata e no Agreste do Estado de Pernambuco e que apresentavam histórico de distúrbios reprodutivos. Foram selecionadas 12 propriedades das quais se coletaram amostras de 262 animais, sendo 167 caprinos e 95 ovinos. Realizou-se a pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, utilizando-se a técnica da Imunofluorescência Indireta (RIFI). Foram aplicados questionários investigativos nas propriedades visitadas para identificar os fatores de risco associados à infecção. Em 100% das propriedades foram encontrados animais soropositivos. Para T. gondii, das 167 amostras de soro caprino analisadas, 31,7% foram positivas, enquanto que na espécie ovina, das 95 amostras, 16,9% foram positivas. Para a espécie ovina, não foram observadas associações significativas. Para os caprinos, houve associação significativa (p<0,05) para as variáveis: manejo intensivo (OR=2,40), exploração leiteira (OR=2,10), animais procedentes de outros estados (OR=7,89) e monta natural (OR=5,69). Conclui-se que a infecção pelo T. gondii encontra-se disseminada nos rebanhos de caprinos e ovinos estudados e que medidas sanitárias devem ser adotadas para controlar os fatores de risco identificados neste estudo.

This study was conducted to investigate the participation of Toxoplasma gondii in reproductive failure in small ruminants raised in the Litoral/ Zona da Mata and Agreste of the State of Pernambuco, Brazil. Twelve flocks were selected from which 262 samples were collected, 167 from goats and 95 from sheep. Indirect Imunofluorescent Antibody Reaction (IFA) technique was used to detect antibodies anti-Toxoplasma gondii. A questionnaire was applied in flocks to identify risk factors associated with infection. Positive animals were found in 100% of the farms. Among 167 samples of goat serum analyzed, 31.7% were positive, whereas from 95 samples of sheep, 16.9% were positive. Results of brucellosis tests were negative for 100% of analyzed samples. For sheep, no significant association was found; however, for goats, there was a significant association (p<0.05) for intensive handling (OR=2.40), milk exploration (OR=2.10), animals originating from other states (OR=7.89) and natural breeding (OR=5.69). It was concluded that infection for T. gondii is spread in studied goat and sheep flocks and that sanitary measures must be adopted to control risk factors for infection.

Objetivou-se com este estudo identificar os fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em caprinos e ovinos nas regiões do Litoral/ Zona da Mata e Agreste do Estado de Pernambuco. Foram colhidas 290 amostras de soros para pesquisa de anticorpos contra clamídia em 12 propriedades. Para identificar os fatores de risco foram aplicados questionários junto aos proprietários. A freqüência de animais soro-reagentes nos rebanhos estudados foi de 10,3%, sendo 12,0% para caprinos e 8,1% para ovinos, identificando-se 11/12 (91,6%) focos da infecção. Registra-se a primeira ocorrência de anticorpos anti-C. abortus em caprinos no estado de Pernambuco e em ovinos no Brasil. Os fatores de risco associados à infecção em caprinos foram a raça (OR=9,10) e o manejo intensivo (OR=6,41) e para ovinos não foram encontradas associações significativas para nenhum fator analisado. Concluiu-se que a infecção por Chlamydophila sp. encontra-se disseminada em criações de caprinos e ovinos da Zona da Mata e Agreste do Estado de Pernambuco. Medidas de controle devem ser implantadas nos criatórios estudados, enfocando principalmente os fatores de risco identificados neste estudo para reduzir a possibilidade de infecção por este agente.

The study aimed to identify risk factors associated with Chlamydophila abortus infection in sheep and goats from the Litoral/Zona da Mata and Agreste region of Pernambuco state, Brazil. Serum samples (n=290) were analyzed to detect Chlamydophila spp. antibodies in 12 farms. Questionnaires were applied to identify risk factors. Frequency of serum-reactive animals were 10.3% (12.0% in ewes and 8.1% in goats) and 1/12 (91.6%) infection focuses were identified. This is the first report on anti-Chlamydophhila abortus antibodies in goats and sheep in Pernambuco and Brazil, respectively. Risk factors associated with goat infection were breed (OR=9.10) and management (OR=6.41). No significant associations in any of the analyzed factors were found for sheep. In summary, Chlamydophila sp. infection is disseminated in sheep and goat herds in the region. Control measures should be established, focusing primarily risk factor identified in this study, to reduce the possibility of infection by the agent.