ABSTRACT Stegomyia aegypti (Linnaeus, 1762) vectors arboviruses of public health concern in urban areas of tropical countries, so it is necessary to reduce its population. Among the control methods used, chemically synthesized molecules have been widely employed, nonetheless, the over usage of the same mechanism of action can result in the resistance selection. Considering the influence of insect resistance with the success of chemical control of vectors, this study aims to assess the susceptibility to organophosphorus of a population of S. aegypti from Paranaguá (Paraná, Brazil), after intense use of malathion during a dengue outbreak. World Health Organization susceptibility tests and expression of Acetylcholinesterase ace-1, cytochrome P450 monooxygenase CYP6N12, and α-esterases CCEae3A genes were evaluated. The mortality rate of wild females (66.5%) indicated their resistance status, furthermore, a new discriminant concentration was detected in this population (3.41%). Exclusively CYP6N12 gene was overexpressed in malathion-resistant females indicating its possible contribution to the transformation of this insecticide. Constant monitoring of insecticide resistance of current and past molecules, mainly in port areas where there is a large flow of species, is crucial for effective use of insecticide in vector control programs. Linnaeus, Linnaeus (Linnaeus 1762 countries used employed nonetheless selection S Paraná, Paraná (Paraná Brazil, Brazil , Brazil) outbreak ace1, ace1 ace 1, 1 ace-1 P P45 CYPN CYP N αesterases α esterases CCEaeA CCEae A evaluated 66.5% 665 66 5 (66.5% status furthermore 3.41%. 341 3.41% . 3 41 (3.41%) CYP6N1 malathionresistant resistant species programs 176 ace- P4 66.5 6 (66.5 34 3.41 4 (3.41% CYP6N 17 66. (66. 3.4 (3.41 (66 3. (3.4 (6 (3. ( (3

El dengue se incrementó drásticamente desde 1995 en el Estado de Paraná sin una explicación consistente. En un intento de contribuir con información a este problema, fue analizada la susceptibilidad de A. aegypti al insecticida temefos en varios municipios del Estado de Paraná, así como la variación estacional de la ovoposición de Aedes spp. en Maringá y Jacarezinho. La comparación del porcentaje de mortalidad y tasa de resistencia RR95 de CD = 0,0060 mg/L a temefos de la cepa Rockefeller con los individuos de las localidades seleccionadas mostró como resistentes a las poblaciones del vector de Foz de Iguazú (67,5 ± 7,7; RR95 = 3,9), Paranavaí (58,1 ± 14; RR95 = 3,4), Maringá (57,8 ± 5,2; RR95 = 6,9), Ibipora (68,75 ± 3,9; RR95 = 6,6) y Jacarezinho (73,3 ± 7,5; RR95 = 3) y una incipiente alteración de la susceptibilidad en la población de Cambé (81,56 ± 10; RR95 = 2,6). Las poblaciones del vector de Maringá e Ibipora presentaron resistencia media (RR95 > 5 e < 10) y las demás, baja resistencia (RR95 < 5). En Maringá e Ibipora la fluctuación de ovoposición fue menor en invierno.

The number of dengue cases has increased drastically the state of Paraná since 1995 without a consistent explanation. In order to contribute to this subject, the susceptibility of A. aegypti to the insecticide temephos was evaluated in several municipalities in Paraná, along with seasonal variation of oviposition of Aedes spp. in Maringá and Jacarezinho. Comparison of mortality and resistance rates RR95 (CD = 0.0060 mg/L) of the Rockefeller temephos strain (Rock) on individuals from these locales showed that vector populations from Foz do Iguaju (67.5 ± 7.7; RR95 = 3.9), Paranavaí (58.1 ± 14; RR95 = 3.4), Maringá (57.8 ± 5.2; RR95 = 6.9), Ibipora (68.75 ± 3.9; rR95 = 6.6), and Jacarezinho (73.3 ± 7.5; RR95 = 3) were resistant; while those from Cambé (81.56 ± 10; RR95 = 2.6) had an incipient change in susceptibility. The vector populations in Maringá and Ibipora displayed average resistances (RR95 > 5 and < 10), while the others showed low resistance (RR95 < 5). In Maringá and Jacarezinho, oviposition fluctuation was lower in winter.

Variabilidade genética de uma população de Aedes aegypti do Paraná, Brasil, usando o gene mitocondrial ND4. Para analisar a variabilidade genética de populações de Aedes aegypti, 156 amostras foram coletadas em dez cidades do estado do Paraná, Brasil. Foi examinada a distribuição dos 311 pares de base do gene que codifica a subunidade 4 da enzima NADH desidrogenase. Pela amplificação e o sequenciamento deste fragmento foram identificados 8 haplótipos distintos. Os valores de diversidade genética foram altos (h = 0.702; p = 0.01556). A análise de AMOVA indicou que a maior variação ocorreu dentro das populações com um valor de FST de 0.32996 altamente significativo. Valores de FST foram significativos na maior das comparações entre as cidades. O isolamento por distância não foi significativo (r = -0.1216 e p = 0.755), indicando que a distância genética não está relacionada a distância geográfica. A análise de Neighbor-joining mostrou dois grupos genéticos distintos dentro do estado do Paraná, grupo I e grupo II. O polimorfismo de DNA e os dados de AMOVA indicam decréscimo de fluxo gênico no estado do Paraná, o que pode resultar em aumento da competência vetorial da população.

Genetic variability of a population of Aedes aegypti from Paraná, Brazil, using the mitochondrial ND4 gene. To analyze the genetic variability of populations of Aedes aegypti, 156 samples were collected from 10 municipalities in the state of Paraná, Brazil. A 311 base pairs (bp) region of the NADH dehydrogenase subunit 4 (ND4) mitochondrial gene was examined. An analysis of this fragment identified eight distinct haplotypes. The mean genetic diversity was high (h = 0.702; p = 0.01556). AMOVA analysis indicated that most of the variation (67%) occurred within populations and the F ST value (0.32996) was highly significant. F ST values were significant in most comparisons among cities. The isolation by distance was not significant (r = -0.1216 and p = 0, 7550), indicating that genetic distance is not related to geographic distance. Neighbor-joining analysis showed two genetically distinct groups within Paraná. The DNA polymorphism and AMOVA data indicate a decreased gene flow in populations from Paraná, which can result in increased vectorial competence.

Se evalúan productos de origen vegetal en busca de sustancias bioactivas que tengan la capacidad de reducir la dependencia de insecticidas organofosforados y piretroides, a los que las poblaciones de insectos se han vuelto resistentes. Por esta razón el objetivo de este estudio fue evaluar si los aceites esenciales de Guatteria hispida, G. blepharophylla y G. friesiana presentan efecto insecticida contra A. aegypti bajo condiciones de laboratorio. Los aceites esenciales se extrajeron a través de hidrodestilación por medio de un aparato tipo Clevenger, analizados por Cromatografía Gaseosa acoplada a Espectrometría de Masas (CG-EM) y Resonancia Magnética Nuclear (RMN). Los bioensa-yos se analizaron de acuerdo con el modelo Probit. Los análisis de (CG-EM) y (RMN) confrmaron que las hojas de G. blepharophylla presentan óxido de cariofileno como el principal componente; en G. friesiana fue a-, b- y g-eudesmol, y en G. hispida a- y b-pineno y (E)-cariofileno fueron los compuestos predominantes. La concentraciones letales CL50, CL95 y CL99 fueron respectivamente 85,74, 199,35 y 282,76ppm para G. hispida; 58.72, 107.6 y 138.37 ppm para G. blepharophylla; 52,6, 94,37 y 120,22ppm para G. friesiana. El aceite extraído de G. friesiana presentó el mejor efecto insecticida.

the products of vegetal origin were assessed for bioactive substances to reduce reliance on organophosphate and pyrethroid insecticides, to which insect populations have become resistant. For this reason the aim of this study was to assess whether the essential oils of Guatteria hispida, G. blepharophylla and G. friesiana have insecticidal effect against A. aegypti under laboratory conditions. Essential oils were extracted through hydrodistillation using a modifed Clevenger apparatus and analyzed by Gas Chromatography (CG-FID), Gas Chromatography coupled to Mass Spec-trometry (GC-MS), and Nuclear Magnetic Resonance (NMR). the bioassays were analyzed according to the Probit model. The GC-MS and NMR analyses confrmed that the leaves of G. blepharophylla have the caryophyllene oxide as their main component; in G. friesiana the a-,b- and g-eudesmols prevail, and in G. hispida a- and b-pinene, and (E)-caryophyllene are the predominant compounds. the lethal concentrations LC50, LC95 and LC99, were respectively 85.74, 199.35 and 282.76ppm for G. hispida; 58.72, 107.6 and 138.37ppm for G. blepharophylla; and 52.6, 94.37 and 120.22ppm for G. friesiana. the oil extracted from G. friesiana presented the best insecticidal effect.

Objetivo: Analizar la distribución espacial y temporal del dengue en el Estado de Paraná y su relación con el incremento de los casos en las áreas de frontera 1995-2007. Métodos: Datos de la ocurrencia de los casos autóctonos e importados en cada municipio paranaense fueron geo-referenciados con ArcVier GIS 3.2 fue también realizado un análisis de correlación de Pearson (r), relacionando el número de casos del Estado de Paraná con los Estados de Mato Grosso y São Paulo, Brasil, Argentina y Paraguay. Resultados: El análisis de los mapas permitió reconocer áreas con mayor incidencia de virus y la dirección de la dispersión en el Estado. Se notaron tres olas epidémicas, con picos en los bienios 1995/96, 2002/03 y 2006/07. Se destacan las regiones metropolitanas de Londrina y Maringá y la ciudad de Foz do Iguaçu, como grandes centros urbanos y con elevado número de casos del dengue. Las áreas formadas por las mesoregiones Oeste, Centro-Oeste, Noroeste, Norte-Central y Norte Pionero contribuyeron con 98,47% del total de casos, siendo 99,98% autóctonos. Conclusiones: La ocurrencia de olas epidémicas y la continua notificación de casos de dengue, con confirmación serológica, es un indicio de que este problema se ha transformado en endémico en el Estado. Es observado que el mayor número de casos en el estado de Paraná ocurre en las fronteras con Paraguay y límites con el Estado de Mato Grosso do Sul. Salud UIS 2010; 42: 113-122.

Objectives: To analyze the spatial and temporal distribution of dengue in the Paraná state and its relationship to the rising of number of cases in the border areas from 1995 to 2007. Methods: Data of occurrence of autochthonous and allochthonous dengue cases in Paraná were georeferenced whit ArcView GIS 3.2. It was also performed an analysis of the Pearson correlation (r) between the total number cases to State of Paraná with Mato Grosso and São Paulo states, Brazil, Argentina and Paraguay. Results: The maps' analysis allowed the recognition of areas with higher dengue incidence and the direction of dispersion within the State. It is outstanding the occurrence of three epidemical waves with peaks in 1995/96, 2002/03 and 2006/07. It highlights the metropolitan regions of Londrina and Maringá and the city of Foz do Iguaçu, as large urban centers, present a high number of dengue cases. The area that comprises the West, Mid-west, Northwest, Mid-north and the so-called "Pioneer North" mesoregions contributed with 98.47% of the total number of cases and with 99.98% of solely the autochthonous ones. Conclusions: The occurrence of epidemic waves and the notification of continuous cases of dengue, with serologic confirmation, it is an indication that this disease has become endemic in the state. It is observed that the largest number of cases in the Parana state occurs in the border areas with Paraguay and currency with the Mato Grosso do Sul state. Salud UIS 2010; 42: 113-122.

Objetivos: Analisar a distribuição espacial e temporal da dengue no Estado do Paraná e sua relação com o incremento de número de casos das áreas de fronteira entre 1995 e 2007. Métodos: Dados de ocorrência dos casos de dengue autóctones e importados em cada município paranaense foram georreferenciados com ArcView GIS 3.2. Foi realizada também uma análise de correlação de Pearson (r), relacionando o número de casos do Estado de Paraná com os Estados do Mato Grosso e São Paulo, Brasil, Argentina e Paraguai. Resultados: A análise dos mapas permitiu reconhecer áreas com maior incidência da virose e a direção da dispersão no Estado. É notável a ocorrência de três ondas epidêmicas, com picos nos biênios 1995/96, 2002/03 e 2006/07. Destacam-se as Regiões Metropolitanas de Londrina e Maringá e a cidade de Foz do Iguaçu, como grandes centros urbanos e com elevado número de casos da dengue. A área formada pelas mesorregiões Oeste, Centro-Oeste, Noroeste, Norte-Central e Norte Pioneiro contribuíram com 98,47% do total de casos, sendo 99,98% autóctones. Conclusões: A ocorrência de ondas epidêmicas e a contínua notificação de casos de dengue, com confirmação sorológica, é um indício de que este agravo se tornou endêmico no Estado. É observado que o maior número de casos no Estado do Paraná ocorre nas áreas de fronteira com o Paraguai e divisa com o Estado do Mato Grosso do Sul. Salud UIS 2010; 42: 113-122

A seleção de locais adequados pelas fêmeas de mosquitos para depositarem seus ovos é um fator chave para a sobrevivência de seus imaturos (ovos e larvas). O conhecimento das relações ecológicas implicadas neste processo é de grande importância quando se refere a vetores de agentes patogênicos. A determinação do local de oviposição pelas fêmeas grávidas envolve uma rede de mensagens químicas, visuais, olfativas e táteis que facilitam a localização de lugares adequados para depositarem seus ovos. Neste trabalho é apresentada uma revisão bibliográfica dos principais aspectos relacionados com semioquímicos presentes na oviposição dos mosquitos auxiliando no entendimento dos mecanismos de atuação dos mesmos e potencializando a aplicação destes semioquímicos como uma possível ferramenta de monitoramento e controle de Culicidae.

The choice for suitable places for female mosquitoes to lay eggs is a key-factor for the survival of immature stages (eggs and larvae). This knowledge stands out in importance concerning the control of disease vectors. The selection of a place for oviposition requires a set of chemical, visual, olfactory and tactile cues that interact with the female before laying eggs, helping the localization of adequate sites for oviposition. The present paper presents a bibliographic revision on the main aspects of semiochemicals in regard to mosquitoes' oviposition, aiding the comprehension of their mechanisms and estimation of their potential as a tool for the monitoring and control of the Culicidae.

Avaliou-se a abundância e agregação dos ovos de Aedes aegypti L. e Aedes albopictus Skuse em Cambé, Ibiporã, Jacarezinho, Maringá e Paranavaí, PR, utilizando-se armadilhas de oviposição. De 225 armadilhas instaladas, 100 registraram-se positivas para ovos. Coletaram-se 4140 ovos, demonstrando distribuição altamente agregada. Ambas as espécies foram encontradas em Cambé, Jacarezinho, Maringá e Paranavaí. Ae. albopictus não foi detectado em Ibiporã, porém onde esteve presente foi menos abundante. A relação entre sexos aproximou-se de 1:1, para Ae. aegypti. Na comparação dos números de adultos coletados entre as duas espécies, obteve-se correlação negativa nas amostras de Maringá e Cambé, o que foi atribuído à sazonalidade dessas populações. A coexistência dessas espécies indica que elas estão sobre pressão dos programas de controle, sendo, portanto necessárias avaliações específicas.

The abundance and aggregation of eggs of Aedes aegypti L. and Aedes albopictus Skuse was evaluated in the municipalities of Cambé, Ibiporã, Jacarezinho, Maringá and Paranavaí, in the State of Paraná, Brazil by means of oviposition traps. Of the 225 installed traps, 100 were registered as positive for eggs; 4140 eggs were collected, thus demonstrating an highly aggregate distribution. Both species were registered in Cambé, Jacarezinho, Maringá and Paranavaí. Ae. albopictus was generally less abundant and was not present in Ibiporã nor in the oviposition traps of a second collection of Maringá. The relation between sexes for Ae. aegypti was approximately 1:1. In the comparison of the number of adults collected between the two species, a negative correlation was obtained in the samples of Maringá and Cambé, what was attributed the seasonality of these populations. The coexistence of these species indicates that both are under pressure by the control programs, therefore specific evaluations are necessary.

Fêmeas adultas, larvas e pupas de A. cruzii Dyar & Knab, 1908 e A. homunculus Komp, 1937 são muito semelhantes morfologicamente, sendo difícil a identificação através dos caracteres taxonômicos tradicionais. Nesse estudo, RAPD e RFLP foram utilizados para facilitar a identificação dessas espécies. O DNA amplificado com os iniciadores OPY-05 e OPY-10, e a digestão da região ITS2 com as enzimas HaeIII e Sau96I geraram padrões espécie-específicos. Desta forma, através do uso desses marcadores moleculares, as duas espécies podem ser corretamente identificadas quando somente fêmeas, larvas ou pupas são coletadas, ou quando os indivíduos são danificados durante a coleta.

Adults females, larvae and pupae of A. cruzii Dyar & Knab, 1908 and A. homunculus Komp, 1937 are very similar morphologically, causing difficulty in their proper identification with traditional taxonomic characters. Here, RAPD and RFLP were used to resolve this problem of identification of these two species. Mosquito DNA, amplified with the random primers OPY-05 and OPY-10, and enzymatic digestion of the ITS2 region with HaeIII and Sau96I generated species-specific patterns. Thus, through the use of these molecular markers, these two species may be correctly identified when only females, larvae ou pupae are collected, or when individuals are damaged in the collection process.

A variabilidade genética entre indivíduos de Anopheles cruzii procedentes de mesma progênie foi estudada. As progênies foram obtidas a partir de mosquitos coletados em Morretes e Paranaguá (dois municípios do estado do Paraná, região sul do Brasil). DNA foi extraído de cada indivíduo das diferentes progênies e seis iniciadores foram utilizados na PCR. Nas análises, todos os iniciadores revelaram alto grau de polimorfismos. O estudo detalhado da variabilidade existente entre indivíduos de mesma progênie poderá auxiliar a resolver problemas taxonômicos nesse grupo, tendo em vista que diferentes padrões de fragmentos são utilizados para identificar espécies.

Genetic variation in broods of Anopheles cruzii was studied. Mosquitoes were collected in Morretes and Paranaguá (two municipalities in the State of Paraná, Southern Brazil) from which broods were reared. DNA was collected from these broods, from which six random-sequence primers were used in PCR. In within-brood analyses, all markers revealed a high-degree of polymorphisms within the broods. Detailed studies of the within-brood variability will help solve taxonomic problems in this group, since differences in fragment patterns are used to distinguish species.

OBJETIVE: A simulation model is presented to show the predation dynamics of Mesocyclops spp. over Aedes aegypti.i METHODS: The system is represented through four differential equations. H'(t), quantity of eggs; L'(t), quantity of larvae; A'(t), quantity of adults and C'(t), quantity of copepods. Initially the equations are of the classic predator-prey type, according to Lotka (1924) and Volterra (1926). Then it is modified into a system with functional response for invertebrates, according to Holling. RESULTS: The first system effectively controls and stabilizes the mosquito population, while the second suggests that copepods may be ineffective as mosquito controllers. CONCLUSIONS: The need to study predator-prey systems (copepodos-mosquitos) with projects that integrate laboratory and of field tests is recognized. Only then will it be possible to establish the validity of predators as effective biological controllers of mosquitoes.

OBJETIVOS: Se presenta un modelo de simulación que muestra la dinámica de depredación de Mesocyclops spp., sobre Aedes aegypti MÉTODOS: Representado por cuatro ecuaciones diferenciales: H'(t), cantidad de huevos; L'(t), cantidad de larvas; A'(t), cantidad de adultos y C'(t), cantidad de copépodos. Inicialmente las ecuaciones son del tipo clásico presa-depredador, según Lotka y Volterra. Posteriormente se modifica en un sistema con respuesta funcional para invertebrados, según Holling. RESULTADOS: El primer sistema controla y estabiliza la población de mosquitos, el segundo muestra que los copepodos son inefectivos como controladores. CONCLUSIONES: Se reconoce la necesidad de estudiar sistemas presa depredador (mosquitos - copepodos) con trabajos que integren pruebas de laboratorio y de campo. Solo así será posible establecer la validez en el uso de estos últimos como controladores biológicos efectivos de mosquitos.

OBJETIVOS: Se presenta un modelo de simulación que muestra la dinámica de depredación de Mesocyclops spp., sobre Aedes aegypti MÉTODOS: Representado por cuatro ecuaciones diferenciales: H'(t), cantidad de huevos; L'(t), cantidad de larvas; A'(t), cantidad de adultos y C'(t), cantidad de copépodos. Inicialmente las ecuaciones son del tipo clásico presa-depredador, según Lotka y Volterra. Posteriormente se modifica en un sistema con respuesta funcional para invertebrados, según Holling. RESULTADOS: El primer sistema controla y estabiliza la población de mosquitos, el segundo muestra que los copepodos son inefectivos como controladores. CONCLUSIONES: Se reconoce la necesidad de estudiar sistemas presa depredador (mosquitos - copepodos) con trabajos que integren pruebas de laboratorio y de campo. Solo así será posible establecer la validez en el uso de estos últimos como controladores biológicos efectivos de mosquitos.

OBJETIVE: A simulation model is presented to show the predation dynamics of Mesocyclops spp. over Aedes aegypti.i METHODS: The system is represented through four differential equations. H'(t), quantity of eggs; L'(t), quantity of larvae; A'(t), quantity of adults and C'(t), quantity of copepods. Initially the equations are of the classic predator-prey type, according to Lotka (1924) and Volterra (1926). Then it is modified into a system with functional response for invertebrates, according to Holling. RESULTS: The first system effectively controls and stabilizes the mosquito population, while the second suggests that copepods may be ineffective as mosquito controllers. CONCLUSIONS: The need to study predator-prey systems (copepodos-mosquitos) with projects that integrate laboratory and of field tests is recognized. Only then will it be possible to establish the validity of predators as effective biological controllers of mosquitoes.