RESUMO Foi comparada a resposta imune de fêmeas suínas adultas imunizadas contra a leptospirose, com vacinas monovalentes produzidas com L.interrogans, sorovar Canicola estirpe LO4, isolada no Brasil. A vacina foi empregada em duas formas: cultura de bactérias totais inativada e acrescida do adjuvante de hidróxido de alumínio (WC-AlOH3) e a do tipo de subunidade constituída apenas por uma fração de lipopolisacarídios (LPS) extraídos do envelope externo da bactéria tendo como adjuvante o monofosforil lipídio A, também extraído da parede da leptospira (LPS-MPLA). O delineamento experimental incluiu: grupo 1 (n = 11): controle não imunizado; grupo 2 (n = 11): imunizado com duas aplicações em intervalo de 30 dias da vacina LPS MFLA; Grupo 3 (n = 11): imunizado com duas aplicações em intervalo de 30 dias da vacina WC-AlOH3. Todos os grupos foram imunizados simultaneamente sem ser considerado o estágio de gestação dos animais. Os níveis de anticorpos pós-vacinais, aglutinantes e neutralizantes foram avaliados, respectivamente, pelos testes de soroaglutinação microscópica com antígenos vivos (SAM) e o de inibição do crescimento de leptospiras in vitro (ICLIV). O monitoramento sorológico foi efetuado a cada 30 dias durante quatro meses após aplicação da primeira dose da vacina. Os animais do grupo controle, não vacinados, não apresentaram anticorpos aglutinantes para o sorovar Canicola durante todo o período experimental. Aos 32 e 68 dias da primo-vacinação, os níveis de anticorpos aglutinantes do grupo 2 (LPS-MPLA) foram significativamente superiores aos observados no grupo 3 (WC AlOH3), respectivamente p = 0,013 e p = 0,031. As diferenças observadas nos níveis de anticorpos inibidores do crescimento de leptospiras in vitro, induzidos pelas duas vacinas, não foram significativas (p > 0,05). A despeito do pico de anticorpos aglutinantes pós-vacinais ter sido registrado aos 68 dias da primeira imunização, os níveis mais elevados de anticorpos inibidores do crescimento de leptospiras já foram observados aos 30 dias da primo-vacinação. A vacina de subunidade apresentou a mesma capacidade de indução de anticorpos neutralizantes que a vacina de bactérias totais.

ABSTRACT It was compared the antibody response of sows immunized with two experimental vaccines produced with L.interrogans, serovar Canicola, strain LO-4, isolated in Brazil.One of the vaccines was the usual bacterin (whole culture inactivated with phenol and adjuvanted with aluminum hydroxide -WC-AlOH3) and the other one was a subunit vaccine produced with a lipopolysaccharide (LPS) fraction extracted from the bacteria outer envelop and with the lipid A, also extracted from the leptospira wall as adjuvant (LPS-MPLA). Experiment was as follows: group 1 (n = 11), not immunized control, group 2, (n = 11): two immunization with 30 days interval of LPS-MPLA vaccine and group 3 (n = 11): two immunization with 30 days interval of WC-AlOH3 vaccine All three groups were simultaneously immunized, independently of pregnancy stage. Both agglutinin and neutralizing post vaccination antibodies levels were measured respectively by the microscopic sera agglutination with live antigens test (MAT) and the in vitro leptospira growth inhibition test (GIT). Sera collections were performed each 30 days during four months after the first vaccination. Non vaccinated control group animals presented no agglutinating antibodies against Canicola serovar during the whole experiment. At 32 and 68 post vaccination days the agglutinating antibodies levels of group 2 (LPS-MPLA) were significantly higher than the observed in group 3 (WC AlOH3), respectively, p = 0.013 and p = 0.031. The differences observed in the growth inhibition antibodies titers of the two vaccines tested were not significant (p > 0.05). Despite the peak of post-vaccination agglutinins have been registered at 68 days after first immunization, higher levels growth inhibition antibodies were detected at 30 days of first vaccination. Subunit vaccine presented the same immunogenic capacity for the production of neutralizing antibodies as the whole culture one.

RESUMO A soroprevalência e os possíveis fatores de risco para a infecção por Brucella spp. foram estimados em 2.109 vacas do Município de Monte Negro, Rondônia. De cada animal selecionado foi coletado soro sangüíneo e para as propriedades envolvidas foi preenchido um questionário. As amostras coletadas foram analisadas pelas provas de Antígeno Acidificado Tamponado corado com Rosa Bengala, Soroalgutinação Lenta em Tubos e 2-Mercaptoetanol. A prevalência total da infecção por Brucella spp. em vacas no Município de Monte Negro foi de 15%, sendo 54 (63%) fazendas com animais reagentes. A regressão logística sugeriu que rebanhos com mais de 25 vacas (OD = 2,8; P = 0,02) e a presença de suínos (OD = 2,5; P = 0,04) foram fatores associados a soropositividade dos bovinos. Outras variáveis associadas à infecção pelo teste do Qui-Quadrado foram repetição de cio e nascimento de bezerros enfermos (P < 0,05).

ABSTRACT The seroprevalence of Brucella spp. and the possible associated risk factors were estimated for 2,109 adult cows in Monte Negro county, State of Rondônia, Brazil. A questionnaire was completed for each farm where cattle were sampled. Laboratory tests were Rose-Bengal Agglutination, Standard Tube agglutination, and Mercaptoethanol. The adjusted overall prevalence of Brucella spp. seropositive cows for Monte Negro county was 15% and at least 54 herds (63%) were positive. A logistic regression analysis suggested that the herd size of more than 25 cows and the presence of pigs were significant factors associated with the seropositivity (herd size: OD = 2.8; P=0.02; presence of pigs: OD = 2.5; P =0.04). Other significant variables associated to the infection, analysed by Chi-Square were the presence of seropositivity cows with the herd that were repeat breeders and birth of weak calves (P < 0.05).

Foram testados, pela técnica de soroaglutinação microscópica aplicada à leptospirose, 329 cães provenientes do município de Monte Negro, RO, dos quais 156 eram da área urbana e 173 da área rural. Simultaneamente foi aplicado questionário para verificar a existência de possíveis fatores de risco pela regressão logística. Abordaram-se questões referentes a idade, sexo, dieta, tipo de criação, ambiente, contato com outras espécies e hábito de caça. Foram detectadas reações com títulos >100 em 27,3%, com 90 cães positivos ao agente, das quais 23,7% eram da área (37/156) urbana e 30,6% (53/173), da área rural (P>0,05). Os sorovares predominantes, reatores com títulos mais elevados, foram Autumnalis (22%), Pyrogenes (12%), Canicola (10%) e Shermani (7,5%). Cães com idade acima de 12 meses apresentaram maior ocorrência de anticorpos quando comparados aos cães mais jovens (P<0,05). Dentre os fatores de risco analisados, foram significativos a alimentação (dieta à base de ração comercial - odds ratio: 3,3; intervalo de confiança: 95%: 1,2 - 9,2; P=0,02) e o sexo (macho - odds ratio: 2,3; intervalo de confiança: 95%: 1,3 - 3,9; P=0,003). Ressalta-se a ocorrência de reações para sorovares mantidos na natureza por animais silvestres.

The microscopic agglutination test was applied to 329 samples taken from 156 dogs from urban area and 173 from rural areas of Monte Negro County, Rondônia State, Brazil, to determine anti-Leptospira spp. antibodies. A survey was concomitantly done to detect eventual risk factors thru the use of logistic regression. Studied variables were age, sex, diet, management, environment, contact with other species and hunting habit. Titers >100 were detected in 27.3% (90/329) of the dogs, being 23.7% (37/156) urban and 30.6% (53/173) rural dogs. The most frequent serovars were Autumnalis (22.0%), Pyrogenes (12.0%), Canicola (10.0%) and Shermani (7.5%). Dogs older than 12 months showed higher positive frequencies than younger animals (P<0.05). Risk factor were associated with commercial food as compared to homemade food (odds ratio: 3.3; 95% confidence interval : 1.3 - 3.9; P=0.02) and associated with sex, with higher occurrence in males than in females (odds ratio: 2.3; 95% confidence interval: 1.3 - 3.9; P=0.003). It was emphasized the serological occurrence of serovars kept and spread in nature by wild animals.

RESUMO O meio de Middlebrook 7H11 modificado foi comparado ao meio de Stonebrink, a fim de se avaliar a sensibilidade e o tempo de detecção de micobactérias em amostras de leite, experimentalmente inoculadas com Mycobacterium bovis (estirpe AN5), em uma diluição 10-2, e submetidas a duas diferentes técnicas de processamento: gordura (técnica 1) e sedimento (técnica 2), descontaminadas pelo método de Petroff modificado (adicionado de Tween 80), confrontadas com a técnica do leite total submetida ao método de Petroff tradicional. Os resultados destas técnicas (1 e 2) foram comparados entre si pelos testes não paramétricos de Wilcoxon e de MannWhitney e demonstraram que as técnicas 1 e 2 forneceram maior recuperação de micobactérias e proporção de cultivos positivos nos meios de Stonebrink e Middlebrook 7H11; o meio de Middlebrook 7H11 permitiu a visualização precoce das micobactérias, podendo ser utilizado como uma técnica de diagnóstico rápida da tuberculose bovina, em amostras de leite, para fins de vigilância epidemiológica.

ABSTRACT The modified Middlebrook 7H11 cultivation technique was comparedwith the tradicional culture techniqueby using the Stonebrink medium. The purpose of this comparison was to to evaluate the sensitivity and the time for the detection of positive cultures of mycobacteria in milk samples experimentally inoculated with Mycobacterium bovis (strain AN5), at a dilution of 10-2 , and submitted to two types of procedures: technique 1 (skin milk) and technique 2 (pellet), decontamined by modified the Petroff´s method, added with Tween 80, and compared with total milk samples submitted to tradicional Petroff method in the same media types. The results of the two tecniques were compared with each other by the non-parametric Wilcoxon test and Mann-Whitney. The results obtained from this experiment showed that: techniques 1 and 2 produced great number of colonies and higher proportion of positive culture than the tradicional one by using total milk; the time needed for the detection of mycobacteria colonies was slightly shorter by the thin layer technique than by the tradicional culture method; in order to improve the epidemiological surveillance, this technique should be used as a complementary method to the tradicional one in the diagnosis of bovine tuberculosis.

Avaliou-se o perfil sorológico de 17 bezerras búfalas vacinadas nos dias zero, 30 e 210 com bacterina pentavalente comercial contra leptospirose, empregando-se a prova de soroaglutinação microscópica com antígenos vivos, durante o período de 360 dias. Utilizaram-se quatro bezerras-controle, e todos os animais foram negativos no dia zero. Nos animais vacinados, foram observadas reações aos 60 dias para todos os sorovares, associadas a títulos máximos para Canicola, Grippothyphosa e Pomona. No 90° dia, houve declínio acentuado dos títulos para todos os sorovares e ausência de títulos para Hardjo. Nos dias 120º, 150º, 180º e 210º, ocorreram oscilações de títulos para todos os sorovares. No 240º dia, foram encontrados títulos máximos para Hardjo, elevação para os outros sorovares e ausência de título para Canicola. Nos dias 270º, 300º e 330º, foi observado declínio gradativo dos títulos. No 360º dia, foram encontrados títulos residuais para Icterohaemorrhagiae, Grippothyphosa e Pomona e ausência de reação para os outros sorovares. Inferiram-se a reduzida persistência dos títulos vacinais mesmo após o reforço e revacinação e a baixa interferência da vacinação no diagnóstico sorológico.

The serological profile of 17 buffalo calves vaccinated at zero, 30 and 210 days of age using a commercial pentavalent bacterin against leptospirosis was evaluated using microscopic seroagglutination, during 360 days post-vaccination (PV). Four non-vaccinated buffalo calves were used as control. All animals studied showed a negative reaction at day zero. In the vaccinated animals, the serological responses for all serovars were detected at the 60th day PV, with maximum agglutinin levels for Canicola, Grippothyphosa and Pomona. The antibody levels decreased for all serovars at day 90 with zero titters for Hardjo serovar. At days 120, 150, 180 and 210 PV were observed oscillations of titters for all serovars. At day 240, maximum antibody levels for Hardjo, an increase of titters for others serovars and no reaction for Canicola were found. At days 270, 300 and 330 a gradual decrease of antibody levels were observed. At day 360 residual titters for Icterohaemorrhagiae, Grippothyphosa and Pomona, and no reaction for the other serovars were observed. The results indicate a short persistency of seric agglutinin levels induced by vaccination, even after improvement and preparation of the vaccine reinforcement, and low interference of vaccination with serodiagnosis.

RESUMO Com o objetivo de determinar a freqüência de aglutininas anti-leptospiras, foi realizado um inquérito sorológico em 164 matrizes de uma granja suína de ciclo completo localizada no Município de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Para a detecção de anticorpos anti-leptospiras, foi utilizada a técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se culturas vivas de 22 sorovares patogênicos e dois sorovares saprófitos de Leptospira spp. Para a determinação do sorovar mais provável, foram considerados o título de aglutininas e a freqüência de soros reagentes, e soros que apresentaram títulos iguais para dois ou mais sorovares foram excluídos desta análise. Das 164 matrizes suínas, 27 (16,5%) foram soropositivas para pelo menos um dos sorovares empregados. O sorovar mais provável foi o Hardjo (Hardjobovis), com 13 (54,2%) soros reagentes. Também foram constatadas reações sorológicas para os seguintes sorovares: Shermani (16,6%), Bratislava (12,5%), Autumnalis (12,5%) and Icterohaemorrhagiae (4,2%).

ABSTRACT A serologic survey was conducted among 164 sows from a single farrow-to-finish swine herd located in the Ibiúna municipality, state of São Paulo, Brasil, to determine the frequency of antileptospires agglutinins. For detection of anti-leptospires antibodies, the microscopic serumagglutination test (MAT) was carried out using live cultures of 22 pathogenic and two saprophytic Leptospira spp. serovars. The most frequent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins, and sera presenting equal titers for two or more serovars were not considered for this analysis. Of the 164 sows, 27 (16.5%) were seropositive for at least one Leptospira spp. serovar. The most frequent serovar was Hardjo (Hardjobovis), with 13 (54.2%) reactant sera. Other reactant serovars and respective frequency were: Shermani (16.6%), Bratislava (12.5%), Autumnalis (12.5%) and Icterohaemorrhagiae (4.2%).

Investigou-se a prevalência de leptospirose em cães da cidade de Campina Grande, PB, e realizou-se um estudo de fatores de risco para a infecção. Foram examinadas 285 amostras de soro sangüíneo de cães colhidas durante a campanha de vacinação anti-rábica animal, conduzida em setembro de 2003. O diagnóstico da leptospirose foi realizado pela técnica de soroaglutinação microscópica, utilizando-se uma coleção de 22 sorovares. Para a caracterização do sorovar mais provável, levou-se em conta a titulação e a freqüência. A prevalência encontrada foi de 21,4% (IC 95% = 16,8%-26,6%), com maior freqüência dos sorovares autumnalis (7,4%), copenhageni (6%) e canicola (2,1%). A análise de regressão logística multivariada mostrou que os fatores de risco para a leptospirose foram: idade superior a um ano (odds ratio = 3,00; P = 0,006), raça não definida (odds ratio = 4,02; P = 0,011) e ocorrência de enchentes (odds ratio = 2,32; P = 0,039).

The prevalence of leptospirosis was investigated in dogs from Campina Grande city, State of Paraíba, Brazil, and the risk factors for infection were analyzed. Two hundred and eighty five blood samples were collected from dogs during the rabies vaccination campaign, in September 2003. The diagnostic method run for leptospirosis was the microscopic agglutination test, using a batch of 22 leptospiral serovars. The most prevalent serovar was found crossing the results of frequency and titer of agglutinins. The prevalence was 21.4% (95% CI = 16.8%-26.6%) and most frequent reactant serovars were autumnalis (7.4%), copenhageni (6%) and canicola (2.1%). The multivariate logistic regression analysis showed that the risk factors for leptospirosis were: age older than one year (odds ratio = 3.00; P = 0.006), mixed breed (odds ratio = 4.02; P = 0.011) and occurrence of floods in the area (odds ratio = 2.32; P = 0.039).

RESUMO O presente trabalho teve por objetivo verificar se uma situação de estresse (gestação, parição e lactação) implica na reativação de lesão entérica causada pela inoculação oral de Mycobacterium avium em hamster e retorno à condição de fonte de infecção, com elimação do agente através das fezes. Foram utilizadas 24 hamsters fêmeas, as quais foram inoculadas com Mycobacterium avium, via oral, com a dose de 2,0 mg/animal. Em 45 oportunidades - do primeiro ao 229º dias pósinoculação - uma amostra de fezes de cada um dos animais foi colhida para exame bacteriológico. Aos 183 dias pós-inoculação, 10 hamsters machos foram introduzidos nas gaiolas de 10 fêmeas para o acasalamento. Desses 10 acasalamentos, sete resultaram em parição. O período médio entre o contato com o macho e a parição foi de 17 dias e entre a parição e o desmame foi de 30 dias. Observou-se que a situação de estresse simulada - gestação, parição e lactação não foi capaz de reativar as lesões intestinais. Esses resultados, obtidos com a utilização de modelo biológico hamster-Mycobacterium avium, foram discutidos com vistas ao controle das micobacterioses em suínos. gestação (gestação infecção 2 20 0 2, mganimal mg animal mg/animal 4 º bacteriológico 18 pósinoculação, pós inoculação, pós-inoculação 1 acasalamento acasalamentos 3 Observouse Observou intestinais resultados hamsterMycobacterium suínos

ABSTRACT The objective of the present work was to verify if a stressing condition (pregnancy, birthing and lactation) implicates in the reactivation of the enteric lesion caused by the oral inoculation of Mycobacterium avium in hamster and its return to shed the bacteria by feces. Twenty-four female hamsters were orally inoculated with Mycobacterium avium (2.0 mg/animal). At 45 opportunities - from the 1st to the 229th day after the inoculation - a fecal sample of each animal was collected for bacteriological procedures. At day 183 post-inoculation, 10 male hamsters were introduced in the cages of 10 females for mating. From these 10 matings, 7 resulted in birth. The average period of pregnancy was 17 days and between birth and weaning was 30 days. It was observed that the simulated stressing situation pregnancy, birthing and lactation did not reactivate the intestinal lesions. The results obtained with the use of the hamster-Mycobacterium avium biological model are discussed, aiming at the control of mycobacteriosis in swine. (pregnancy feces Twentyfour Twenty four 2.0 20 2 0 (2. mg/animal. mganimal mg/animal . mg mg/animal) 4 st th procedures 18 postinoculation, postinoculation post inoculation, post-inoculation 1 mating matings 3 lesions hamsterMycobacterium discussed swine 2. (2 (

RESUMO O presente trabalho teve por objetivos verificar se o hamster é suscetível à estirpe de Mycobacterium avium isolado de linfadenite de suíno e descrever o processo infeccioso a partir da inoculação via oral. No experimento 1 testou-se três concentrações de M. avium (108; 107 e 106 ufc/ 0,5 mL de solução salina) inoculadas pela via intraperitoneal, com o propósito de definir a doseteste do experimento 2. No experimento 2 inoculou-se 125 hamsters com 108 ufc de M. avium, pela via oral, pesquisando-se o agente no sangue, peritôneo, baço, fígado e pulmão, aos dois, 10; 25; 50; 80 e 256 dias pós-inoculação e exame histológico desses órgãos. Resultados: 1) o hamster mostrou-se suscetível à infecção por M. avium, inoculado pela via intraperitoneal e oral; 2) constatou-se bacteremia e o isolamento do agente em baço, fígado, pulmão e linfonodo mesentérico, além de lesões granulomatosas em todos os órgãos estudados, até 256 dias pós-inoculação, no experimento 2. Conclusões: 1) o M. avium desencadeou processo infeccioso do tipo crônico; 2) a estirpe em estudo demonstrou baixa virulência ; 3) o modelo testado presta-se para estudos experimentais com M. avium que demandam longos períodos de duração. oral testouse testou M (108 10 05 0 5 0, salina inoculouse inoculou 12 pesquisandose pesquisando sangue peritôneo baço dois 25 50 8 pósinoculação pós Resultados mostrouse mostrou constatouse constatou mesentérico estudados pósinoculação, inoculação, Conclusões crônico 3 prestase presta duração (10 (1 (

ABSTRACT The present work was aimed at verifying whether the hamster is susceptible to strain of Mycobacterium avium isolated from lymphadenitis of swine and to describe the infectious process from oral inoculation. In experiment 1 there was a test of three concentrations of M. avium (108, 107 and 106 ufc/0.5 mL of saline solution) inoculated for the intraperitoneal route, with the intention to define the dose-test of experiment 2. In experiment 2 125 hamsters were inoculated orally with 108 ufc of M. avium, searching for the agent in the blood, peritonium, spleen, liver and lung, at 2, 10, 25, 50, 80 and 256 days post-inoculation, with histological examination of these organs. Results: 1) the hamster was susceptible to infection by M. avium, inoculated by the intraperitoneal and oral route; 2) the hamsters were positive for bacteremia and the isolation of the agent in spleen, liver, mesenteric lymphnodes, beyond granulomatous lesions in all the organs studied, up to 256 days postinoculation, in experiment 2. Conclusions: 1) the M. avium set offan infectious process of the chronic type; 2) the strain in this study demonstrated low virulence; 3) the tested model is useful for experimental studies with M. avium that demand a long period of duration. inoculation M 108, (108 10 ufc05 0 5 ufc/0. solution route dosetest dose 12 blood peritonium spleen lung 25 50 8 postinoculation post inoculation, post-inoculation Results lymphnodes studied Conclusions type virulence 3 duration (10 ufc0 ufc/0 (1 ufc/ (

RESUMO O presente trabalho teve por objetivo comparar o desempenho de dois métodos de descontaminação na pesquisa de micobactérias a partir de amostras de fezes. Utilizou o método de Petroff - método básico, empregando a solução de hidróxido de sódio (NaOH) a 4%, e o método de Löwenstein-Jensen modificado - método ácido empregando a solução de ácido sulfúrico (H2SO4) a 4%.Doze hamsters fêmeas foram inoculadas pela via oral, com 108 ufc/animal de Mycobacterium avium e examinadas suas fezes em 16 tempos experimentais, completando-se um total de 192 análises. Cada amostra foi submetida ao método de descontaminação básica e ácida. O método básico obteve sucesso em 62 oportunidades (32,3%) e o método ácido em 56 (29,2%). Obteve-se concordância moderada entre os dois métodos (valor “kappa” igual a 0,6). O método de Petroff pode ser utilizado para a descontaminação de fezes e há a necessidade de se testar soluções de ácido sulfúrico com concentrações superiores a 4%, com o intuito de se conseguir o menor comprometimento da viabilidade e capacidade de multiplicação das micobactérias e ao mesmo tempo a inativação da microbiota acompanhante. NaOH (NaOH 4 4% LöwensteinJensen Löwenstein Jensen H2SO4 HSO H SO (H2SO4 4Doze Doze oral 10 ufcanimal ufc animal 1 experimentais completandose completando 19 análises ácida 6 32,3% 323 32 3 (32,3% 5 29,2%. 292 29,2% . 29 2 (29,2%) Obtevese Obteve valor kappa “kappa 0,6. 06 0,6 0 0,6) acompanhante H2SO (H2SO 32,3 (32,3 29,2 (29,2% 0, 32, (32, 29, (29,2 (32 (29, (3 (29 ( (2

ABSTRACT The present work had for objective compare the performance of two methods of decontamination in mycobacteria isolation from feces. One of the protocols used the method of Petroff - basic method, using the solution of sodium hidroxid (NaOH) 4%, the other used Löwenstein-Jensen modified method - acid method with sulfuric acid solution (H2SO4) 4%. Thirty females hamsters were inoculated orally with 108 cfu/animal of Mycobacterium avium and your feces were examinated 192 differents experimental moments. Each sample was submitted to the basic and acid method. Mycobacteria was isolated in 62 (32.3%) chances in the basic method and in 56 (29.2%) in the acid method. The “kappa” value was 0.6 demonstrating moderate agreement between them. The Petroff method can be utilized for the decontamination of feces and it is important to test others concentrations than 4% of the sulfuric acid solution in the fetching of the maximum decontamination of the sample and minor delay of the viability and capacity of multiplication of the mycobacteria. NaOH (NaOH 4 LöwensteinJensen Löwenstein Jensen H2SO4 HSO H SO (H2SO4 10 cfuanimal cfu animal 19 moments 6 32.3% 323 32 3 (32.3% 5 29.2% 292 29 2 (29.2% kappa “kappa 06 0 0. them H2SO (H2SO 1 32.3 (32.3 29.2 (29.2 32. (32. 29. (29. (32 (29 (3 (2 (

RESUMO O presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial zoonótico da população canina do Município de Santana de Parnaíba, São Paulo, com relação à leptospirose. O experimento foi conduzido durante a campanha de vacinacão anti-rábica animal de 1999, com a colheita de 410 amostras de soro canino e o preenchimento de um questionário pelos proprietários dos animais, para traçar um perfil epidemiológico da população e proceder à análise estatística dos fatores de risco. A leptospirose foi determinada através da técnica de soroaglutinação microscópica, utilizando uma coleção de 22 variantes sorológicas. Foi encontrada positividade de 15%, com maior freqüência das variantes copenhageni (24%), canícola (16%) e hardjo (16%). A análise estatística do questionário apontou significância na correlação entre a idade do animal e a ocorrência de soropositivos. Parnaíba Paulo antirábica anti rábica 1999 41 animais risco microscópica 2 sorológicas 15 15% 24%, 24 24% , (24%) 16% 16 (16% 16%. . soropositivos 199 4 1 (24% (16 19 (24 (1 (2 (

ABSTRACT This work aimed to evaluate the zoonotic potential of the canine population in the City of Santana de Parnaíba, State of São Paulo, related to leptospirosis. This study was held during the 1999 rabies vaccination campaign, when 410 serum samples were collected and a questionnaire was applied to the dogs’ owners to describe an epidemiologic profile of this population and conduce the statistical analysis, to assess the risk factors. The diagnostic method run for leptospiroses was the microtechnique of microscopic agglutination using a batch of 22 leptospiral serovars. The results obtained indicated 15% positive serum samples and the most frequent reactant serovars were copenhageni (24%), canícola (16%) and hardjo (16%). The statistical analysis of the questionnaire showed significant correlation between animal age and positive serum samples for leptospirosis. Parnaíba Paulo leptospirosis 199 campaign 41 dogs factors 2 15 24%, 24 24% , (24%) 16% 16 (16% 16%. . 19 4 1 (24% (16 (24 (1 (2 (

RESUMO São apresentadas as variantes sorológicas de leptospiras predominantes nos exames de soroaglutinação microscópica (SAM) efetuados no período de 1984 a 1997 em 31.325 bovinos de 1920 propriedades distribuídas em 540 municípios de 21 estados do Brasil. Os exames foram executados com uma coleção de 24 variantes sorológicas de leptospiras: australis, bratislava, autumnalis, butembo, castellonis, bataviae, canicola, whitcombi, cinoptery, grippotyphosa, hebdomadis, copenhageni, icterohaemorrhagiae, javanica, panamá, pomona, pyrogenes, hardjo, wolffi, shermani, tarassovi, sentot, andamana, e patoc; com triagem na diluição de 1:100 e titulação em série de diluições geométricas de razão dois. A distribuição percentual dos animais examinados por estado incluiu: SP (52,8%), MG (14,3%), RS (7,8%), PR (5,34%), RJ (3,66%), GO (3,34%), MS (2,81%), BA (2.10%), SC, (1,65%), MA (1.18%), ES (0,86%), PA (0.97%), MT (0,75%), PI (0.71%), CE (0.38%), DF (0,31%), TO (0.31%), AL (0.32%), PB (0.25%), RN (0.11%) e RO (0.07%). A distribuição temporal dos animais examinados incluiu 36,7% no intervalo entre 1984 a 1994 e 63,3% entre 1995 a 1997. Os resultados obtidos revelaram que houve 84,1% de propriedades acusando pelo menos um animal positivo; 94,18% de municípios acusando pelo menos um animal positivo e a presença de rebanhos contendo animais positivos em todos os 21 estados trabalhados. Os percentuais de animais reatores para pelo menos uma variante sorológica apresentaram a média de 37,94% , com flutuações na faixa de 25, 2 a 38, 3 % nos estados de SC, CE, PR, DF, SP e PA; de 40,7 a 58,4% nos estados de PB, TO, R.J, MG, GO, RO, RN, PI, MA e AL e superior a 61,0% nos estados da BA, ES, MS e MT. As variantes sorológicas mais prováveis por rebanho, considerando-se os que apresentaram título mais elevado e eliminando-se, desta análise, os animais que apresentaram título idêntico, para duas ou mais variantes sorológicas revelaram reações para a variante hardjo nos rebanhos do estado do RN e DF; hardjo e wolffi no MA, AL, BA, ES, MS, SP, RJ e GO; hardjo e grippotyphosa em TO, hardjo, castellonis e patoc em SC; hardjo, wolffi e grippotyphosa no CE; hardjo, wolffi e pomona no PR e MG; hardjo wolffi e pyrogenes no RS e RO; hardjo, icterohaemorrhagiae e pyrogenes na PB; hardjo, wolffi e hebdomadis no PI. SAM (SAM 198 199 31325 31 325 31.32 192 54 Brasil australis bratislava autumnalis butembo bataviae canicola whitcombi cinoptery copenhageni javanica panamá shermani tarassovi sentot andamana 1100 1 100 1:10 dois 52,8%, 528 52,8% 52 8 (52,8%) 14,3%, 143 14,3% 14 (14,3%) 7,8%, 78 7,8% 7 (7,8%) 5,34%, 534 5,34% 5 34 (5,34%) 3,66%, 366 3,66% 66 (3,66%) 3,34%, 334 3,34% (3,34%) 2,81%, 281 2,81% 81 (2,81%) 2.10%, 210 2.10% 10 (2.10%) SC 1,65%, 165 1,65% 65 (1,65%) 1.18%, 118 1.18% 18 (1.18%) 0,86%, 086 0,86% 0 86 (0,86%) 0.97%, 097 0.97% 97 (0.97%) 0,75%, 075 0,75% 75 (0,75%) 0.71%, 071 0.71% 71 (0.71%) 0.38%, 038 0.38% 38 (0.38%) 0,31%, 031 0,31% (0,31%) 0.31%, 0.31% (0.31%) 0.32%, 032 0.32% 32 (0.32%) 0.25%, 025 0.25% 25 (0.25%) 0.11% 011 11 (0.11% 0.07%. 007 0.07% . 07 (0.07%) 367 36 36,7 633 63 63,3 841 84 84,1 9418 94 94,18 trabalhados 3794 37 37,94 407 40 40, 584 58 4 58,4 R J R.J 610 61 61,0 rebanho considerandose considerando se eliminandose, eliminandose eliminando se, eliminando-se análise idêntico 19 3132 31.3 110 1:1 52,8 (52,8% 14,3 (14,3% 7,8 (7,8% 53 5,34 (5,34% 3,66 6 (3,66% 33 3,34 (3,34% 28 2,81 (2,81% 2.10 (2.10% 16 1,65 (1,65% 1.18 (1.18% 08 0,86 (0,86% 09 0.97 9 (0.97% 0,75 (0,75% 0.71 (0.71% 03 0.38 (0.38% 0,31 (0,31% 0.31 (0.31% 0.32 (0.32% 02 0.25 (0.25% 0.11 01 (0.11 00 0.07 (0.07% 36, 63, 84, 941 94,1 379 37,9 58, 61, 313 31. 1: 52, (52,8 14, (14,3 7, (7,8 5,3 (5,34 3,6 (3,66 3,3 (3,34 2,8 (2,81 2.1 (2.10 1,6 (1,65 1.1 (1.18 0,8 (0,86 0.9 (0.97 0,7 (0,75 0.7 (0.71 0.3 (0.38 0,3 (0,31 (0.31 (0.32 0.2 (0.25 0.1 (0.1 0.0 (0.07 94, 37, (52, (14, (7, 5, (5,3 3, (3,6 (3,3 2, (2,8 2. (2.1 1, (1,6 1. (1.1 0, (0,8 0. (0.9 (0,7 (0.7 (0.3 (0,3 (0.2 (0. (0.0 (52 (14 (7 (5, (3, (2, (2. (1, (1. (0, (0 (5 (1 ( (3 (2

ABSTRACT It were presented most frequent serovars of leptospires detected through Microscopic Agglutination Technique (MAT), between 1984 to 1997 in 31,325 bovines, from 1920 farms of 540 municipalities and 21 brazilian states. The MAT was conducted with a collection of 24 serovars: australis, bratislava, autumnalis, butembo, castellonis, bataviae, canicola, whitcombi, cinoptery, grippotyphosa, hebdomadis, copenhageni, icterohaemorrhagiae, javanica, panama, pomona, pyrogenes, hardjo, wolffi, shermani, tarassovi, sentot, andamana and patoc. The MAT cut off was the serum dilution at 1:100 and the tittles were obtained with a geometric serie of doble dilutions. The distribution of animals examined by estado were: SP (52,8%), MG (14,3%), RS (7,8%), PR (5,34%), RJ (3,66%), GO (3,34%), MS (2,81%), BA (2.10%), SC, (1,65%), MA (1.18%), ES (0,86%), PA (0.97%), MT (0,75%), PI (0.71%), CE (0.38%), DF (0,31%), TO (0.31%), AL (0.32%), PB (0.25%), RN (0.11%) e RO (0.07%). Thirty six and seven percent of serum samples were examined between 1984 to 1994 and 63,3% after Januray of 1995. The results showed that 84,1% of the farms; 94.18% of the municipalities and all of the states examined, it was found at least one positive animal. The proportion of reactors to at least one leptospira serovar presented the average of 37.94%. with flutuations between 25.2 to 38.3% in the States of SC, CE, PR, DF, SP and PA; from 40.7 to 58.4% PB, TO, RJ, MG, GO, RO, RN, PI, MA, AL. And higher than 61,0% in BA, ES, MS e MT. In each herd the most frequent serovar were that one wich presented the hightest title, when in the same serum sample it was found the same tittle for two or more serovars, this sample was removed from this analysis. The serovar hardjo was the most frequent in RN and DF; hardjo and wolffi in MA; AL; BA, ES, MS, SP, RJ and GO; hardjo and grippotyphosa in TO; hardjo, castellonis and patoc in SC; hardjo, wolffi and grippotyphosa in CE; hardjo, wolffi and pomona in PR and MG; hardjo, wolffi and pyrogenes, RS and RO; hardjo, icterohaemorrhagiae and pyrogenes, PB; hardjo, wolffi and hebdomadis in PI MAT, , (MAT) 198 199 31325 31 325 31,32 bovines 192 54 2 australis bratislava autumnalis butembo bataviae canicola whitcombi cinoptery copenhageni javanica panama pyrogenes shermani tarassovi sentot 1100 1 100 1:10 dilutions 52,8%, 528 52,8% 52 8 (52,8%) 14,3%, 143 14,3% 14 3 (14,3%) 7,8%, 78 7,8% 7 (7,8%) 5,34%, 534 5,34% 5 34 (5,34%) 3,66%, 366 3,66% 66 (3,66%) 3,34%, 334 3,34% (3,34%) 2,81%, 281 2,81% 81 (2,81%) 2.10%, 210 2.10% 10 (2.10%) SC 1,65%, 165 1,65% 65 (1,65%) 1.18%, 118 1.18% 18 (1.18%) 0,86%, 086 0,86% 0 86 (0,86%) 0.97%, 097 0.97% 97 (0.97%) 0,75%, 075 0,75% 75 (0,75%) 0.71%, 071 0.71% 71 (0.71%) 0.38%, 038 0.38% 38 (0.38%) 0,31%, 031 0,31% (0,31%) 0.31%, 0.31% (0.31%) 0.32%, 032 0.32% 32 (0.32%) 0.25%, 025 0.25% 25 (0.25%) 0.11% 011 11 (0.11% 0.07%. 007 0.07% . 07 (0.07%) 633 63 63,3 1995 841 84 84,1 9418 94 94.18 animal 3794 37 37.94% 252 25. 383 38.3 407 40 40. 584 58 4 58.4 610 61 61,0 title analysis (MAT 19 3132 31,3 110 1:1 52,8 (52,8% 14,3 (14,3% 7,8 (7,8% 53 5,34 (5,34% 36 3,66 6 (3,66% 33 3,34 (3,34% 28 2,81 (2,81% 2.10 (2.10% 16 1,65 (1,65% 1.18 (1.18% 08 0,86 (0,86% 09 0.97 9 (0.97% 0,75 (0,75% 0.71 (0.71% 03 0.38 (0.38% 0,31 (0,31% 0.31 (0.31% 0.32 (0.32% 02 0.25 (0.25% 0.11 01 (0.11 00 0.07 (0.07% 63, 84, 941 94.1 379 37.94 38. 58. 61, 313 31, 1: 52, (52,8 14, (14,3 7, (7,8 5,3 (5,34 3,6 (3,66 3,3 (3,34 2,8 (2,81 2.1 (2.10 1,6 (1,65 1.1 (1.18 0,8 (0,86 0.9 (0.97 0,7 (0,75 0.7 (0.71 0.3 (0.38 0,3 (0,31 (0.31 (0.32 0.2 (0.25 0.1 (0.1 0.0 (0.07 94. 37.9 (52, (14, (7, 5, (5,3 3, (3,6 (3,3 2, (2,8 2. (2.1 1, (1,6 1. (1.1 0, (0,8 0. (0.9 (0,7 (0.7 (0.3 (0,3 (0.2 (0. (0.0 37. (52 (14 (7 (5, (3, (2, (2. (1, (1. (0, (0 (5 (1 ( (3 (2

RESUMO O ceftiofur sódico ou a estreptomicina foram empregados para a terapia da leptospirose em hamsters (Mesocricetus auratus ) experimentalmente infectados com uma estirpe patogênica de L.interrogans sorovar pomona.O inóculo infectante foi ajustado para a média de 20 a 30 leptospiras por campo, aumento de 200 vezes. Na primeira etapa um grupo de animais foi tratado com uma única aplicação de estreptomicina na dose de 25mg/kg de peso vivo, via intramuscular e outro com o ceftiofur sódico em uma ou duas aplicações de 20mg/kg de peso vivo, via intramuscular. Na segunda etapa, o ceftiofur sódico foi empregado em uma única aplicação das concentrações de 30 ou 40 mg/kg de peso vivo, via intramuscular. Na terceira etapa o ceftiofur sódico foi empregado em uma única aplicação de 25mg/kg, de peso vivo, via intramuscular em hamsters inoculados com diferentes concentrações de leptospiras, série de cinco diluições geométricas de razão dez. Em todas as etapas a primeira aplicação do antibiótico foi efetuada 48 horas após o estabelecimento da infecção experimental. Os hamsters foram mantidos em observação atentando-se para a presença de sinais clínicos da leptospirose. Os que adoeceram foram sacrificados na fase agônica e a infecçào foi confirmanda através da constatação da presença de leptospiras no macerado de tecido hepático ou renal. Os animais que não apresentaram sinais clínicos foram sacrificados no 21º ou 30º dia pósinfecção, quando foi investigada a condição de portador renal de leptospiras. A técnica das diluições seriadas em meio de Fletcher foi empregada para a demonstração da presença de leptospiras em cultivos de tecido renal. A microtécnica de soroaglutinação microscópica, com antígenos vivos, foi utilizada para a pesquisa de aglutininas, séricas, anti leptospiras. Os resultados obtidos confirmaram a atuação da estreptomicina para o controle da leptospiremia e da leptospirúria em uma única aplicação na concentração de 25 mg/kg de peso vivo. O ceftiofur sódico na concentração de 20 mg/ kg de peso vivo, uma ou duas aplicações com intervalo de 24 horas, não foi eficiente para sustar a evolução da infecção mas, nas concentrações de 25, 30 e 40 mg/kg de peso vivo, uma única aplicação, foi capaz de impedir a manifestação da doença. Uma única aplicação do ceftiofur sódico na dose de 25mg/kg de peso vivo foi capaz de eliminar a infecção renal em 48 dos 50 animais inoculados com diferentes concentrações de leptospiras. Mesocricetus Linterrogans L interrogans pomonaO pomona 2 3 campo vezes 25mgkg mgkg 25mg mg 20mgkg 20mg 4 dez experimental atentandose atentando se º pósinfecção microscópica vivos aglutininas séricas mas doença 5

ABSTRACT The use of ceftiofur sodium or streptomycin for treatment of leptospirosis was investigated in hamsters (M.auratus) experimentally infected with L. interrogans serovar pomona. The inoculi of leptospires for infection was adjusted for a dilution that presents the median of 20 to 30 microrganisms per microscopic field, 200 times magnification. In the first experiment one group of animals received one dose of streptomycin, at the concentration of 25 mg/kg body weight by the intramuscular route and the other was treated with one or two intramuscular injections of ceftiofur sodium, 20 mg/kg body weight, each 24 hours. In the second experiment the ceftiofur sodium was tested in one intramuscular dose of 30 or 40 mg/kg/body weight. In the third experiment it was investigated one intramuscular dose of ceftiofur sodium at the concentration of 25 mg/kg/ body weight, against five serial dilutions of the leptospires inoculi. In all of the three experiments the first antimicrobial treatment was performed 48 hours after the infection with leptospires. The hamsters were observed two times a day searching for signs of the infection (weakness, hemorrhagies, icterus, incoordenation). When they became ill they were killed at the moribund stage of the disease and the leptospiral infection was atested by the demonstration of the microorganisms in liver or kidney suspensions examined under dark field microscopy. The animals that presented no signs of the disease were killed in the 21st or 30th post infection day, and at this time it was investigatet the presence of leptospires by cultivation of kidney samples and the presence of agglutinines in blood by the microscopic agglutinantion test. The results showed that streptomycin as able to stop the development of the infection with no kidney carriers in the survivors. With the ceftiofur sodium the lowest effective dose was one intramuscular injection of 25 mg/kg/body weight. All of the animals treated with this concentration presented no signs of infection and 96% (48/50) of them presented no leptospires in kidney cultures performed at the 21 post infection day. M.auratus Mauratus M auratus (M.auratus L pomona 2 3 magnification mgkg mg kg 4 mgkgbody weakness, weakness (weakness hemorrhagies icterus incoordenation. incoordenation . incoordenation) microscopy st th test survivors 96 48/50 4850 50 (48/50 9 48/5 485 5 (48/5 48/ (48/ (48 (4 (

RESUMO Alpacas (Lama pacos) criadas em Puno, Altiplano Peruano, América do Sul, foram submetidas ao exame de soroaglutinação microscópica aplicada ao diagnóstico da leptospirose frente a uma coleção de antígenos contendo 24 variantes sorológicas de leptospiras (australis, bratislava, autumnalis, butembo, castellonis, bataviae, canicola, whitcombi, cynopteri, grippotyphosa, hebdomadis, copenhageni, icterohaemorrhagiae, javanica, panama, pomona, pyrogenes, hardjo, wolffi, shermani, tarassovi, sentot, andamana e patoc). No período de dezembro de 1993 a agosto de 1994, foram trabalhadas quatro propriedades: Huanacamaya, INIA, Carolina e La Raia, com duas colheitas de sangue: chuvas (dezembro 93/ janeiro 94); secas (julho/agosto de 1994). No período de dezembro de 94 a janeiro de 1996, foram realizadas três colheitas na propriedade de Huanacamaya. Do total de 810 amostras de soros examinadas houve 53 reações positivas (6,54%) frente a sete variantes sorológicas: butembo, cynopteri, hebdomadis, icterohaemorrhagiae, shermani, patoc e pomona. Destas a pomona foi a mais freqüente (79, 24%). Não houve diferença das proporções de sororeatores entre as fazendas Huanacamaya, INIA e La Raia, tanto para a colheita de dez93/jan94 (chuvas) quanto para a de jul94/ ago94 (seca) (p>0,05). Para estas três últimas fazendas foi observada uma diminuição da proporção de soropositivos quando comparados os resultados da colheita de dez93/jan94 (chuvas) com os de jul94/ ago94 (seca) (Huanacamaya: p<0,001; INIA: p<0,001 e La Raia: p=0,02). Lama pacos Puno Peruano Sul 2 australis, australis (australis bratislava autumnalis butembo castellonis bataviae canicola whitcombi cynopteri grippotyphosa hebdomadis copenhageni icterohaemorrhagiae javanica panama pyrogenes hardjo wolffi shermani tarassovi sentot patoc. . patoc) 199 1994 propriedades Huanacamaya Raia sangue 93 94) julho/agosto julhoagosto julho 1994. 1994) 9 1996 81 5 6,54% 654 6 54 (6,54% 79, 79 (79 24%. 24% 24%) dez93jan94 dezjan dez93 jan94 dez jan dez93/jan9 (chuvas jul94 jul ago ago9 seca (seca p>0,05. p005 p p>0,05 0 05 (p>0,05) (Huanacamaya p0001 001 p<0,00 p=0,02. p002 p=0,02 02 p=0,02) 19 8 6,54 65 (6,54 7 (7 dez93jan9 dez9 jan9 dez93/jan jul9 p00 p>0,0 (p>0,05 p000 00 p<0,0 p=0,0 1 6,5 (6,5 ( dez93jan p0 p>0, (p>0,0 p<0, p=0, 6, (6, p>0 (p>0, p<0 p=0 (6 p> (p>0 p< p= (p> (p

ABSTRACT Alpacas (Lama pacos) reared in Puno, Peruvian Highlands, South America, had their sera examined in order to search for antileptospiral agglutinines (MAT) 24 serovars (australis, bratislava, autumnalis, butembo, castellonis, bataviae, canicola, whitcombi, cynopteri, grippotyphosa, hebdomadis, copenhageni, icterohaemorrhagiae, javanica, panama, pomona, pyrogenes, hardjo, wolffi, shermani, tarassovi, sentot, andamana and patoc). During the period from December 1993 to August 1994 the investigations were performed in four farms (Huanacamaya, INIA, Carolina and La Raia) and in each of them there were two blood collections, one in rainy season (December1993/ January1994) and the other in the dry one (July/ August1994).In the following period (December94/January1996) there were three other bleedings only on the Huanacamya farm. Of 810 examined serum samples there were 53 positive reactions with seven different serovars (butembo, cynopteri, hebdomadis, icterohaemorrhagiae, shermani, patoc and pomona) The most frequent serovar was pomona (79.24%). In 1993/1994 the proportions of reactants were significantly lower in dry season than in the rainy one in three of four farms. The other three collections done in the Huanacamaya farm ( December 1994 to January 1996) showed always lower results than in the first examination. During the whole experiment Alpacas did not present any clinical evidence of leptospirosis. Lama pacos Puno Highlands America MAT (MAT 2 australis, australis (australis bratislava autumnalis butembo castellonis bataviae canicola whitcombi cynopteri grippotyphosa hebdomadis copenhageni icterohaemorrhagiae javanica panama pyrogenes hardjo wolffi shermani tarassovi sentot patoc. . patoc) 199 Huanacamaya, (Huanacamaya INIA Raia December1993/ December1993 (December1993 January1994 July/ July (July August1994.In August1994In AugustIn August1994 .In December94/January1996 December94January1996 DecemberJanuary December94 January1996 (December94/January1996 81 5 (butembo 79.24%. 7924 79.24% 79 (79.24%) 19931994 1993/199 1996 examination leptospirosis 19 December199 (December199 January199 August199 December94/January199 December94January199 December9 (December94/January199 8 792 79.24 7 (79.24% 1993199 1993/19 1 December19 (December19 January19 August19 December94/January19 December94January19 (December94/January19 79.2 (79.24 199319 1993/1 December1 (December1 January1 August1 December94/January1 December94January1 (December94/January1 79. (79.2 19931 1993/ (December December94/January December94January (December94/January (79. (79 (7