Bacteriocins are antibacterial, proteinaceous substances that mediate microbial dynamics. Bacteriocin production is a highly disseminated property among all major lineages of bacteria, including Shigella. In this paper, we addressed the purification and characterisation of a bacteriocin produced by a Shigella sonnei strain (SS9) isolated from a child with acute diarrhoea. The substance was purified through ammonium-sulphate precipitation and sequential steps of chromatography. The intracellular fraction obtained at 75% ammonium sulphate maintained activity following exposure to pH values from 1-11 and storage at -80ºC for more than two years and was inactivated by high temperatures and proteases. The molecular mass of the purified bacteriocin was determined by mass spectrometry to be 18.56 kDa. The N-terminal sequence of the bacteriocin did not match any other antibacterial proteins described. A putative new bacteriocin produced by S. sonnei has been detected. This bacteriocin may represent a newly described protein or a previously described protein with a newly detected function. Considering that SS9 expresses antagonism against other diarrhoeagenic bacteria, the bacteriocin may contribute to S. sonnei virulence and is potentially applicable to either preventing or controlling diarrhoeal disease.

Rotavírus é considerado o principal agente de diarréia infecciosa especialmente entre crianças mais jovens. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência de diarréia associada a rotavírus e a diversidade de eletroferotipos circulantes empregando-se imunocromatografia e eletroforese de RNA. Espécimes fecais de 391 crianças (267 com diarréia aguda) de nível socioeconômico baixo, atendidas no Hospital Infantil João Paulo II/Belo Horizonte, durante 2005 e 2006, foram incluídos na investigação. Rotavírus foi detectado em 79/20,2% das crianças, 64/24,0% com e 15/12,1% sem diarréia. Associação entre infecção pelo vírus e diarréia foi observada (p = 0,003). Um total de 76/19,4% e 69/17,6% crianças rotavírus-positivas foram detectadas por imunocromatografia e electroforese, respectivamente. Rotavirose foi mais frequentemente detectada em meses secos (p < 0,001) e quase exclusivamente em crianças com até três anos de idade. Embora predomínio de amostras com perfil longo (54/78,3%) tenha sido observado, identificou-se aumento da frequência de amostras com perfil curto. Apesar da queda da frequência de rotavirose em 2006, a doença ainda é muito comum na nossa região. Os dados demonstram que eletroforese do RNA viral é um método adequado para tipagem de rotavírus, mas não deve ser empregado como único método para diagnóstico da infecção pelo vírus. A alteração do padrão de distribuição de amostras, com aumento de frequência de perfil eletroforético curto em detrimento da queda de ocorrência de amostras com perfil longo, confirma dados previamente descritos para outros países da América do Sul.

Rotavirus has been considered the main agent of infectious diarrhea especially among younger children. We addressed the prevalence of rotavirus-associated diarrhea and the diversity of circulating electropherotypes by immunochromatography and RNA electrophoresis. Stool samples were taken from 391 children (267 with diarrhea) from the lower socioeconomic stratum who sought treatment in the Hospital Infantil João Paulo II/Belo Horizonte, during 2005 and 2006. Rotavirus was detected in 79/20.2% of subjects, 64/24.0% with diarrhea and 15/12.1% with no diarrhea. The virus was strongly associated with diarrhea (p = 0.003). A total of 76/19.4% and 69/17.6% rotavirus-positive children were identified by immunochromatography and electrophoresis, respectively. Rotavirus-associated diarrhea was more frequently detected in dry months (p < 0.001) and almost exclusively in children aged up to three years. Long profile strains prevailed (54/78.3%) but a shift toward short electropherotype was identified. Despite the decrease seen in 2006, rotavirus infection is still very common in our area. Although viral RNA electrophoresis is useful as a typing method, it should not be used exclusively in the diagnosis of rotavirus infection. We confirmed a shift from long to short profile strains, as already described for other South American countries.

Diarrhoeal disease is still considered a major cause of morbidity and mortality among children. Among diarrhoeagenic agents, Shigella should be highlighted due to its prevalence and the severity of the associated disease. Here, we assessed Shigella prevalence, drug susceptibility and virulence factors. Faeces from 157 children with diarrhoea who sought treatment at the Children's Hospital João Paulo II, a reference children´s hospital in Belo Horizonte, state of Minas Gerais, Brazil, were cultured and drug susceptibility of the Shigella isolates was determined by the disk diffusion technique. Shigella virulence markers were identified by polymerase chain reaction. The bacterium was recovered from 10.8% of the children (88.2% Shigella sonnei). The ipaH, iuc, sen and ial genes were detected in strains isolated from all shigellosis patients; set1A was only detected in Shigella flexneri. Additionally, patients were infected by Shigella strains of different ial, sat, sen and set1A genotypes. Compared to previous studies, we observed a marked shift in the distribution of species from S. flexneri to S. sonnei and high rates of trimethoprim/sulfamethoxazole resistance.

INTRODUÇÃO: A diarreia infecciosa aguda é considerada um problema de saúde pública associado a uma ampla gama de agentes etiológicos, entre os quais destaca-se Salmonella enterica, causa importante de diarreia inflamatória em países desenvolvidos e em desenvolvimento. OBJETIVOS: Avaliar a distribuição de S. enterica em crianças com diarreia aguda em Belo Horizonte e caracterizar as amostras isoladas. MATERIAL E MÉTODO: O grupo de estudo consistiu de 157 crianças de nível socioeconômico baixo. Espécimes fecais foram empregados para pesquisa de leucóc itos e cultivo de Salmonella. As amostras isoladas foram sorotipadas e submetidas à avaliação do perfil de suscetibilidade a antimicrobianos, da produção de betalactamases de amplo espectro (ESBL) e da presença de marcadores de virulência (invA, iroB e spvC). RESULTADOS: Cinco/3,2% crianças apresentaram-se infectadas por S. enterica; três/60%, por S. enterica Typhimurium; uma/20%, por S. enterica Enteritidis; e uma/20%, por S. enterica subsp. enterica sorotipo 8,20:z4,z23:-. Leucócitos fecais foram detectados em dois dos cinco espécimes positivos para S. enterica. As amostras isoladas de três crianças apresentaram resistência a ácido nalidíxico, ácido nalidíxico + cloranfenicol e ácido nalidíxico + cloranfenicol + ampicilina. Nenhuma amostra produziu ESBL. Todas as amostras albergavam os genes invA e iroB. O marcador spvC foi observado em amostras isoladas de duas crianças infectadas por S. Typhimurium e S. Enteritidis. CONCLUSÃO: Os resultados demonstram que diarreia associada a S. enterica é raramente observada entre crianças da nossa região e indicam a necessidade de avaliação periódica do perfil de suscetibilidade a antimicrobianos da bactéria para orientar o estabelecimento de antibioticoterapia, quando indicada.

Introduction: Acute infectious diarrhea is still regarded as a public health problem associated with a wide range of etiologic agents, from which Salmonella enterica is particularly worth mentioning inasmuch as it is a major cause of inflammatory diarrhea in both developed and developing countries. Objective: To assess the distribution of S. enterica among children with acute diarrhea in Belo Horizonte and to characterize bacterium isolates. Material and methods: The study group comprised a total of 157 children from low socioeconomic background. Stool samples were collected for leukocyte analysis and Salmonella bacterial culture. The isolates were serotyped and evaluated as to antimicrobial susceptibility profile, extended-spectrum β-lactamases (ESBL) production, and presence of virulence markers (invA, iroB, and spvC). RESULTS: A total of 5/3.2% children were infected by S. enterica, 3/60% by S. enterica Typhimurium, 1/20% by S. enterica Enteritidis and 1/20% S. enterica subsp. enterica serotype 8.20:z4,z23:-. Fecal leucocytes were detected in two out of five fecal specimens positive for S. enterica. Isolates from three children were resistant to nalidixic acid, nalidixic acid + chloramphenicol, and nalidixic acid + chloramphenicol + ampicillin. ESBL production was not detected. All samples presented invA and iroB genes. spvC marker was observed in isolates from two children infected by S. Typhimurium and S. Enteritidis. Conclusion: The results demonstrate that S. enterica infection is uncommon among children from our region. Furthermore, they indicate the need for periodic monitoring of bacterial antimicrobial susceptibility profile in order to establish suitable antimicrobial therapy when required.

INTRODUÇÃO: Diversos microrganismos são reconhecidos como agentes de diarreia aguda, entre eles, os adenovírus, cuja associação com a doença apresenta variações geográficas e é pouco conhecida no Brasil. OBJETIVOS: Investigar a presença de adenovírus em fezes de crianças com diarreia aguda e sem diarreia, em Belo Horizonte-MG, e estudar os fatores epidemiológicos associados à adenovirose intestinal. MATERIAL E MÉTODOS: O teste imunocromatográfico qualitativo (kit VIKIA® Rota-Adeno, bioMérieux) foi utilizado para pesquisa de antígenos de adenovírus em amostras fecais obtidas de 268 crianças com diarreia aguda e 124 sem diarreia, em 2005 e 2006, no Hospital Infantil João Paulo II, Belo Horizonte-MG. Dados laboratoriais, clínicos e epidemiológicos foram registrados em banco de dados (SPSS Statistical package, IBM). RESULTADOS: Adenovírus foi detectado nas fezes de 16 crianças (4,1%): 12 (4,5%) com diarreia e quatro (3,2%) sem diarreia. A virose foi mais comum em meninas e a distribuição etária da infecção foi homogênea. Entre as 16 crianças com infecção pelo vírus, 11 (68,8%) tinham até 12 meses de idade. Entretanto, diferença significativa não foi observada para os parâmetros analisados. Distribuição sazonal da infecção por adenovírus não foi detectada. CONCLUSÃO: Nossos dados demonstram que a prevalência da adenovirose é baixa na população pediátrica no nosso meio.

INTRODUCTION: Several microorganisms, among them enteric adenovirus, are widely recognized as etiological agents of acute diarrhea. The association between adenovirus and the disease varies among geographical regions and is poorly known in Brazil. OBJECTIVES: To investigate the presence of adenovirus in stool samples from children with and without diarrhea in Belo Horizonte-MG. To study factors associated with enteric adenovirus infection. MATERIAL AND METHOD: A qualitative immunochromatographic assay (kit VIKIA® Rota-Adeno, bioMérieux) was performed to detect adenovirus antigens in stool samples from 268 children with acute diarrhea and 124 without diarrhea at Hospital Infantil João Paulo II from January/2005 to December/2006. Clinical, laboratory, and epidemiologic data were recorded in SPSS database (SPSS Statistical package, IBM). RESULTS: Adenovirus was detected in 16 samples (4.1%): 12 of them (4.5%) were from children with acute diarrhea and 4 of them (3.2%) from children without diarrhea. The viral infection was more prevalent among girls and the age distribution was homogenous. Among the 16 children infected by adenovirus,11 (68.8%) were younger than 12 months old. However, no significant statistical difference was observed within the analyzed parameters. There was no seasonal distribution of adenovirus infection. CONCLUSION: Our data demonstrate that the prevalence of enteric adenovirus infection is low among children with diarrhea in Belo Horizonte-MG.

A exposição humana à água contaminada constitui um importante mecanismo para a transmissão de patógenos gastrointestinais. Cepas de Escherichia coli diarreiogênicas podem causar infecções entéricas em humanos e incluem seis categorias diferentes de acordo com fatores de virulência. Este trabalho tem por objetivos detectar a presença de cepas diarreiogênicas de E. coli nas águas de sete praias do reservatório de Lajeado, Tocantins, Brasil e testar a resistência a drogas antimicrobianas para correlacionar com a possível contaminação da água por fezes humanas. As contagens de coliformes totais e E. coli foram realizadas pela técnica do substrato cromogênico ColilertTM. A identificação bioquímica foi realizada utilizando kit API20E e a detecção dos fatores de virulência por PCR, empregando primers específicos para Shiga, LT e ST e genes de intimina. A susceptibilidade a 16 antibióticos foi testada pela técnica de difusão em discos de papel impregnados com antibiótico. Entre as 149 cepas de E. coli testadas, duas cepas de EPEC e duas de ETEC foram detectadas em águas de praias situadas em áreas urbanas, perto de descarga de efluentes. Estas cepas apresentaram resistência de 3 a 6 antibióticos. A provável origem humana das cepas é sugerida devido ao perfil de multiresistentes apresentado.

The exposure to contaminated water constitutes an important mechanism for the transmission of gastrointestinal pathogens. Diarrheagenic Escherichia coli strains cause enteric infections in humans and include six different categories according to virulence factors. This paper aims at detecting the presence of diarrheagenic E. coli strains in bathing waters of seven beaches of Lajeado Reservoir, in the Tocantins River in Brazil, and to test the resistance to antimicrobial drugs to correlate with possible contamination of the water with human feces. Total coliform and E. coli counts were done by the ColilertTM chromogenic substrate technique. Biochemical identification was accomplished by API20E and detection of virulence factors by PCR, employing specific primers for Shiga, LT, and ST and intimin genes. The susceptibility to 16 antibiotics was tested by disk-diffusion technique. Among one hundred and forty-nine strains of E. coli, two strains of EPEC and two of ETEC were detected in waters of beaches situated in urban areas, close to sewage discharge. These strains presented resistance to three to six antibiotics. Human origin is suggested based on the multiresistant profile of these strains.

Foi estudada a prevalência de Salmonella enterica (SE) em crianças (n = 400; 250 com diarreia) em Teresina-PI, entre 2004 e 2007. SE Newport foi isolada de duas crianças e os sorotipos O-C2-C3-ND, Enteritidis e Muenchen foram encontrados em uma criança cada. A infecção foi mais comum em crianças com até 6 meses de idade. Volume fecal aumentado, três a 10 evacuações/dia, vômitos e febre foram relatados para todas as crianças. Foi comum resistência a ácido nalidíxico (NAL) e sulfametoxazol-trimetoprima (SXT). Nossos dados demonstram a necessidade de monitoramento da magnitude das salmoneloses em diferentes regiões do mundo e da emergência de padrões de resistência.

We investigated the prevalence of Salmonella enterica (SE) among children (n = 400/250 with diarrhea) in Teresina-PI from 2004 to 2007. SE Newport was isolated from two samples and O-C2-C3-ND, Enteritidis, and Muenchen serological variants were isolated from one sample each. SE infection was more prevalent among children aged less than six months. Increased fecal volume, 3-10 evacuations/day, vomit and fever were reported for all cases. Resistance to nalidixic acid (NAL) and sulphamethoxazole-trimethoprim (SXT) was ubiquitous. Our data substantiate the need for monitoring SE infections worldwide and the emergence of antimicrobial resistance.

Helicobacter pylori é o principal agente de gastrite em seres humanos e fator de risco para úlcera péptica e câncer gástrico. A evolução da infecção está relacionada a diversos fatores, inclusive bacterianos, como presença de cagA e genótipo s1-m1 do vacA, associados com o desenvolvimento de úlcera e adenocarcinoma gástrico. O objetivo deste estudo foi investigar a associação entre cagA e alelos do vacA em H. pylori isolado de crianças e relacionar os achados com a doença apresentada pelo paciente. Foram estudadas 65 crianças (24 com úlcera duodenal e 41 sem úlcera gástrica ou duodenal). A pesquisa de cagA e de alelos do vacA foi feita por PCR em amostras da bactéria isoladas do estômago dos pacientes. Infecção mista foi identificada em dez (15,4%) crianças. Entre os pacientes com monoinfecção, o alelo s1 foi detectado em amostras isoladas de 40 (72,7%), e o m1 em 34 (61,8%). CagA foi identificado em H. pylori isolado de 38 (69,1%) pacientes. Foi observada associação entre presença de cagA e de genótipo s1-m1 (p = 10-7) e entre cagA e padrão s1-m1 com úlcera duodenal (p = 0,073 e p = 0,037, respectivamente). Em conclusão, infecção mista por H. pylori é comum em crianças brasileiras, e amostras da bactéria apresentando o alelo s1 e cagA são as mais prevalentes no nosso meio. A concomitância do alelo s1 do vacA e de cagA foi freqüentemente observada, e a associação de amostras positivas de s1 e de cagA com úlcera duodenal foi confirmada neste trabalho.

Helicobacter pylori is now accepted as the most important agent of gastritis in humans and as a risk factor for ulcer disease and gastric carcinoma ethiopathogenesis. The outcome of the infection is associated with several factors, among them bacterial ones such as cagA and vacA s1 genotype. We aimed to investigate the association between cagA and vacA genotypes in H. pylori strains isolated from children and to correlate these findings with patient's disease. A total of 65 children (24 with duodenal ulcer and 41 without gastric or duodenal ulcer) were included in the study. CagA and vacA alleles were identified by PCR in bacterium strains isolated from the gastric mucosa of the studied group. Multiple-strain infection was detected in 10 (15.4%) patients. Among children with nonmixed infection, s1 allele was found in H. pylori strains isolated from 40 (72.7%), and m1 allele in strains obtained from 34 (61.8%). CagA was found in bacterium strains isolated from 38 (69.1%) patients. Association between cagA and s1-m1 genotype (p = 10-7), and between these genotypes and duodenal ulcer (p = 0.073 and p = 0.037, respectively) was observed. In conclusion, multiple-strain infection is frequent in Brazilian children. H. pylori strains harbouring, simultaneously, cagA and vacA s1-m1 genotypes are the most frequent in our pediatric population and are associated to ulcer disease.