Resumo Antibiose é um mecanismo pelo qual certos microrganismos respondem à presença de outros, secretando compostos ou metabólitos capazes de inibir ou impedir o seu desenvolvimento. O extrato bruto de Trichoderma contém uma mistura de compostos secundários e tem sido utilizado na prospecção deste fungo para o controle biológico e demais fins industriais. Diante da crescente demanda da agricultura por alternativas ecologicamente compatíveis para o manejo de doenças, este trabalho teve como objetivo investigar o espectro de ação de Metabólitos Não Voláteis (MNVs), produzidos por isolados de Trichoderma, contra diferentes fungos fitopatogênicos. O potencial antagônico dos MNVs foi avaliado através do método de incorporação do extrato líquido filtrado em meio BDA. Os ensaios mostraram que todos os MNVs produzidos inibiram de forma semelhante o fungo Sclerotinia sclerotiorum. Por outro lado, os isolados CEN1245 e CEN1274, ambos Trichoderma brevicompactum, mostraram um amplo espectro de ação, atuando contra Sclerotium rolfsii, Colletotrichum gloesporioides, Verticillium dahliae, Fusarium oxysporum e Cylindrocladium sp. O presente estudo descreve isolados que produziram metabólitos não voláteis com amplo espectro de ação antifúngico, assim como patógeno-específico. Os MNVs de Trichoderma spp. obtidos de diferentes amostras de solo cultivadas com vegetais, mandioca e milho, foram eficientes na inibição de fungos fitopatogênicos pertencentes a outros patossistemas, como os de espécies florestais e frutíferas, o que poderia aumentar sua potencial aplicação no controle de doenças de plantas. Adicionalmente, estes fungos antagonistas devem ser mais bem estudados para identificação de moléculas bioativas de interesse industrial ou formulação de produtos para o controle biológico de patógenos de plantas.

Abstract Antibiosis is the mechanism by which certain microorganisms respond to the presence of others, secreting compounds or metabolites capable of inhibiting or impeding their development. The crude extract of Trichoderma contains a mixture of secondary compounds, which may show antibiotic effect, and has been used for the prospect of this fungus for biological control and other industrial purposes. Faced with the increasing demand of agriculture for ecologically compatible alternatives for the management of diseases, this work aimed to investigate the spectrum of action of Non-Volatile Metabolites (NVMs) of Trichoderma isolates against different plant pathogenic fungi. The antagonistic potential of NVMs was evaluated through the incorporation method of the filtered liquid extract in PDA medium. The assays showed that all the NVMs produced inhibited the fungus Sclerotinia sclerotiorum similarly. On the other hand, strains CEN1245 and CEN1274, both belonging to the species Trichoderma brevicompactum, showed broad spectrum against Sclerotium rolfsii, Colletotrichum gloesporioides, Verticillium dahliae, Fusarium oxysporum and Cylindrocladium sp. The present study describes isolates producing non-volatile metabolites with broad spectrum of antifungal action, as well as pathogen-specific. The Trichoderma spp. NVMs obtained from different soil samples cultivated with vegetables, cassava and maize were efficient in inhibiting plant pathogenic fungi belonging to other patossystems, such as forest or fruit, which could increase their potential application in biological control of plant diseases. In addition, these antagonistic fungi should be studied in greater depth for the identification of bioactive molecules of industrial interest or in commercial formulations of products for biological control of plant pathogens.

RESUMO A teca é uma espécie florestal que assumiu grande importância no Brasil, onde encontrou excelentes condições de desenvolvimento desde a sua introdução na década de 1960. Entretanto, problemas fitossanitários começam a ameaçar a exploração desta espécie madeireira. Um exemplo é o cancro da teca, causado pelo fungo Lasiodiplodia theobromae (Lt), cuja etiologia foi recentemente elucidada no Brasil e, portanto, ainda não existem métodos de controle recomendados. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o controle deste patógeno, investigando o potencial dos agentes de controle biológico (ACB) Trichoderma spp., Bacillus sp. e Enterobacter sp., inicialmente por meio de ensaios in vitro e, posteriormente, com realização de testes in vivo. De acordo com os resultados dos testes in vitro, os isolados de Trichoderma CEN162 e CEN1153 e a estirpe UnB1366 de Bacillus sp., foram os tratamentos que se destacaram, sendo capazes de inibir completamente o crescimento micelial de alguns isolados de Lt. Quando esses isolados foram testados de forma preventiva, observou-se variação nos níveis de controle, dependendo do isolado de Lt e da interação antagonista-clone, onde CEN162 (T. asperellum) e UnB166 (Bacillus sp.) apresentaram 100% de controle. Dessa forma, houve uma correlação positiva entre os testes in vitro e in vivo, uma vez que os mesmos ACB se destacaram. Apesar de ter-se obtido bons níveis de controle com os ACB utilizados, pode-se concluir que existe uma variação no antagonismo a diferentes isolados ou mesmo na interação antagonista-clone, corroborando as informações disponíveis na literatura científica sobre este fungo fitopatogênico.

ABSTRACT Teak is a forest species that has assumed great importance in Brazil, where it has found excellent conditions for development since its introduction into the country in the 1960s. However, phytosanitary problems are beginning to threaten the production of this timber species. An example is teak canker, caused by the fungus Lasiodiplodia theobromae (Lt), which has only recently been reported in Brazil, and for which, therefore, there are no recommended control methods. Thus, this study evaluated the control of this pathogen, investigating the potential of the biocontrol agents (BCAs) Trichoderma spp., Bacillus sp. and Enterobacter sp., initially through in vitro assays and, subsequently, with in vivo tests. According to the in vitro assay results, the Trichoderma isolates CEN162 and CEN1153 and the strain of Bacillus sp. (UnB1366) were the treatments that stood out, as they were able to completely inhibit mycelial growth of some isolates of Lt. When these isolates were tested in a preventive way, the control levels varied depending on the Lt isolate and the antagonist-clone interaction, where CEN162 (T. asperellum) and UnB166 (Bacillus sp.) showed 100% control. Thus, there is a positive correlation between the in vitro and in vivo tests, since the same BCAs stood out. Although good levels of control have been obtained with the BCAs used, it can be concluded that there is a variation in the antagonism to different Lt isolates or even in the antagonist-clone interaction, corroborating the information available in the scientific literature on this plant-pathogenic fungus.

Resumo Quarenta e nove isolados de Trichoderma obtidos no centro-oeste do Brasil foram avaliados quanto a sua atividade antagônica in vitro contra Sclerotinia sclerotiorum (agente causal do mofo branco) e identificados com base nas sequências ITS do DNA ribossômico nuclear. Os testes de cultivo pareado mostram que todos os isolados exibiram algum antagonismo, com um máximo de 77% de inibiação micelial e inibição total da produção de escleródios. Dois isolados se destacaram como os mais promissores, considerando ambos os parâmetros avaliados (CEN1253 - T. koningiopsis e CEN1265 - T. brevicompactum). Cinco espécies diferentes foram identificadas: T. harzianum (23), T. spirale (9), T. koningiopsis (8), T. brevicompactum (7) and T. asperellum (2). Estes isolados estão armazenados na Coleção de Fungos para Controle Biológico da Embrapa e as informações obtidas nos experimentos serão incorporadas na base de dados de ativos biológicos, no sistema de informações de recursos genéticos, e disponibilizados para estudos futuros.

Abstract Forty-nine isolates of Trichoderma from the Brazilian Midwest were evaluated for their antagonistic activity in vitro against Sclerotinia sclerotiorum (causal agent of white mold), which were then identified based on their nuclear ribosomal ITS sequences. Paired culture tests showed that all isolates exhibited some antagonism, with a maximum of 77% mycelial inhibition and complete inhibition of sclerotia production. Two isolates were found to be the most promising biocontrol agents, considering both antagonistic parameters (CEN1253 - T. koningiopsis and CEN1265 - T. brevicompactum). Five different species were identified: T. harzianum (23), T. spirale (9), T. koningiopsis (8), T. brevicompactum (7) and T. asperellum (2). These isolates are stored in the Embrapa Fungi Collection for Biological Control and the information obtained in the experiments will be incorporated into the database of biological assets within the genetic resources information system (Allele) and be made available for further studies.