Resumo Os fertilizantes organo-minerais suplementados com aditivos biológicos são uma alternativa aos adubos químicos. Neste estudo, microrganismos termoresistentes foram isolados de compostagem por procedimentos de duas etapas. Inicialmente, as amostras tomadas em diferentes períodos e temperaturas (33 dias a 52 ºC, 60 dias a 63 ºC e mais de 365 dias a 26 ºC) foram pré-incubadas a 80 oC por 30 minutos. Posteriormente, a seleção microbiana foi conduzida por métodos baseados em cultura in vitro e choque térmico a 60 oC e 100 oC por 2h e 4h. Quarenta e um isolados foram capazes de crescer a 60 °C por 4h; vinte e sete a 100 °C por 2h e dois a 100 °C por 4h. A identificação molecular por sequenciamento parcial do gene ribossomal 16S usando primers universais revelou que trinta e cinco isolados eram de oito espécies de Bacillus, um Brevibacillus borstelensis, três Streptomyces thermogriseus e dois fungos (Thermomyces lanuginosus e T. dupontii). Os dados dos ensaios de atividade de amilase, fitase e celulase e o índice enzimático (IE) mostraram que 38 dos 41 isolados termorresistentes produziram pelo menos uma enzima. Para a atividade da amilase, o maior valor de IE foi observado em Bacillus licheniformis (isolado 21C2, IE = 4,11), seguido por Brevibacillus borstelensis (isolado 6C2, IE = 3,66), Bacillus cereus (isolado 18C2, IE = 3,52) e Bacillus paralicheniformis (isolado 20C2, IE = 3,34). Para a fitase, os maiores valores de IE foram observados para B. cereus (isolado 18C2, IE = 2,30) e B. licheniformis (isolado 3C1, IE = 2,15). Em relação à produção de celulose, B. altitudinis (isolado 6C1) foi o mais eficiente (IE = 6,40), seguido por três Bacillus subtilis (isolados 9C1, 16C2 e 19C2) com valores de IE de 5,66, 5,84 e 5,88, respectivamente, e um B. pumilus (isolado 27C2, IE = 5,78). Pode-se inferir que os microrganismos selecionados são potencialmente úteis como aditivos biológicos em fertilizantes organo-minerais e outros processos biotecnológicos.

Abstract Organo-mineral fertilizers supplemented with biological additives are an alternative to chemical fertilizers. In this study, thermoresistant microorganisms from composting mass were isolated by two-step procedures. First, samples taken at different time points and temperatures (33 days at 52 ºC, 60 days at 63 ºC, and over 365 days at 26 ºC) were pre-incubated at 80 oC for 30 minutes. Second, the microbial selection by in vitro culture-based methods and heat shock at 60 oC and 100 oC for 2h and 4h. Forty-one isolates were able to grow at 60 °C for 4h; twenty-seven at 100 °C for 2h, and two at 100 °C for 4h. The molecular identification by partial sequencing of the 16S ribosomal gene using universal primers revealed that thirty-five isolates were from eight Bacillus species, one Brevibacillus borstelensis, three Streptomyces thermogriseus, and two fungi (Thermomyces lanuginosus and T. dupontii). Data from amylase, phytase, and cellulase activity assays and the enzymatic index (EI) showed that 38 of 41 thermo-resistant isolates produce at least one enzyme. For amylase activity, the highest EI value was observed in Bacillus licheniformis (isolate 21C2, EI= 4.11), followed by Brevibacillus borstelensis (isolate 6C2, EI= 3.66), Bacillus cereus (isolate 18C2, EI= 3.52), and Bacillus paralicheniformis (isolate 20C2, EI= 3.34). For phytase, the highest EI values were observed for Bacillus cereus (isolate 18C2, EI= 2.30) and Bacillus licheniformis (isolate 3C1, EI= 2.15). Concerning cellulose production, B. altitudinis (isolate 6C1) was the most efficient (EI= 6.40), followed by three Bacillus subtilis (isolates 9C1, 16C2, and 19C2) with EI values of 5.66, 5.84, and 5.88, respectively, and one B. pumilus (isolate 27C2, EI= 5.78). The selected microorganisms are potentially useful as a biological additive in organo-mineral fertilizers and other biotechnological processes.

Resumo O fungo micotoxigênico Fusarium verticillioides é o principal patógeno do milho e causa doenças do colmo e da podridão da espiga com perdas econômicas significativas. Além disso, o uso excessivo de fungicidas no controle de F. verticillioides constitui uma ameaça ao meio ambiente e à saúde humana. Assim, alternativas sustentáveis, como o controle biológico, são necessárias para minimizar os riscos associados ao método atual. Este estudo isolou e caracterizou bactérias e fungos que colonizam o estigma do milho para avaliar novos agentes de biocontrole em potencial. As amostras foram coletadas em campos de milho nas localidades brasileiras de Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR e Goiânia-GO. Cento e sessenta e sete microrganismos foram isolados, 46% endofíticos e 54% epifíticos. O teste de antagonismo empregando a técnica de disco de difusão em meio sólido, mostrou que 83% dos isolados apresentaram atividade antagonista contra F. verticillioides. Em seguida, 42 isolados mais eficientes foram identificados a partir do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA bacteriano e da região ITS de fungos. Os isolados bacterianos pertencem ao gênero Bacillus (57,1%), Burkholderia (23,8%), Achromobacter (7,1%), Pseudomonas (2,4%) e Serratia (2,4%), enquanto os fungos são Penicillium (2,4%), Candida (2.4), e Aspergillus (2,4%). Os resultados mostraram que microrganismos do estigma do milho podem representar novos agentes promissores para o controle de F. verticillioides.

Abstract The mycotoxigenic fungus Fusarium verticillioides is the primary maize pathogen and causes the maize stalk and ear rot diseases with significant economic losses. Furthermore, the excessive use of fungicides to control F. verticillioides constitutes threats to the environment and human health. Thus, sustainable alternatives such as biological control are needed to minimize the hazards associated with the current method. Although much is known about the vulnerability of the maize silks as a gateway for several fungal pathogens invading the developing grains, studies on the chemical properties of silk extracts and their resident microbiota are scarce. This study isolated and characterized bacteria and fungi that colonize the maize stigma to assess new potential biocontrol agents. The samples were collected from maize fields in the Brazilian localities of Sete Lagoas-MG, Sidrolândia-MS, Sertaneja-PR, and Goiânia-GO. One hundred sixty-seven microorganisms were isolated, 46% endophytic and 54% epiphytic. First, the antagonist activity was evaluated by the agar disc diffusion method performed in triplicate, and 83% of the isolates showed antagonist activity against F. verticillioides. Then, the 42 most efficient isolates were identified based on the partial sequencing of the bacterial 16S rRNA gene and fungi ITS region. The bacteria belong to the genera Bacillus (57.1%), Burkholderia (23.8%), Achromobacter (7.1%), Pseudomonas (2.4%), and Serratia (2.4%), while the fungi are Penicillium (2.4%), Candida (2.4), and Aspergillus (2.4%). The results showed that microorganisms from maize stigma might represent new promising agents for F. verticillioides control.

Mycoplasma haemocanis and Candidatus Mycoplasma haematoparvum are canine haemoparasites associated with anemia in dogs. The tick Rhipicephalus sanguineus has been pointed as the main vector of transmission, but a clear association between the exposure of dogs to ticks and infection has not been established. The aim of this study was to apply real-time PCR to study the prevalence of haemoplasmas in dogs from the Brazilian town of Ribeirão Preto, where R. sanguineus is a common vector for other haemoparasites such as Ehrlichia canis and Babesia canis. DNA of Mycoplasma haemocanis was detected in 3 and Candidatus Mycoplasma haematoparvum in 1 out of 154 tested dogs, indicating a low prevalence of these hemoparasites.

Mycoplasma haemocanis y Candidatus Mycoplasma haematoparvum son hemoparásitos caninos asociados a la anemia en perros. La garrapata Rhipicephalus sanguineus está indicada como el principal vector de transmisión, pero una clara asociación de la exposición de canes a garrapatas e infección no fue establecida. El objetivo de este estudio fue la aplicación de la PCR en tiempo real para estudiar la prevalencia de haemoplasmas en perros de la ciudad brasileña de Ribeirão Preto, donde R. sanguineus es un vector común para hemoparásitos, tales como Ehrlichia canis y Babesia canis. ADN de Mycoplasma haemocanis fue detectado en 3 perros y de Candidatus Mycoplasma haematoparvum en 1 perro, entre 154 analizados, indicando una baja prevalencia de esos hemoparásitos.

The rickettsial bacterium Ehrlichia canis is the etiological agent of canine monocytic ehrlichiosis, one of the most important canine tick-borne diseases in the world. In this study, a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay was developed for detection of E. canis DNA using LAMP primers targeting the groESL operon. Reactions were performed at 60°C for 60 min and the results were visualized by gel electrophoresis. Successful amplification was obtained using plasmid DNA containing a fragment of the groESL operon and DNA extracted from blood samples that tested positive for E. canis by real-time PCR. The specificity of amplification was confirmed by EcoRI restriction of internal sites in the LAMP primers and no cross-reactivity with blood samples positive for Babesia spp., another common tick-borne pathogen, was observed. The high cost of nucleic acid tests (NAT) is one of the disadvantages for their large-scale use as routine diagnostic tests. The E. canis LAMP assay developed here is an interesting alternative to PCR since it does not require a thermocycler, thus reducing costs for the veterinary clinical laboratory.

La bacteria rickettsia Ehrlichia canis es el agente etiológico de la ehrlichiosis monocítica canina, una de las más importantes enfermedades caninas transmitidas por garrapatas. En este estudio, un ensayo de amplificación isotérmica de ADN mediada por asas (LAMP) se desarrolló para la detección del ADN de E. canis usando iniciadores LAMP enfocando el operón groESL. Se produjeron reacciones a 60°C por 60 min y los resultados se visualizaron por electroforesis en gel. Se obtuvo una exitosa amplificación al usar ADN plasmídico conteniendo un fragmento del operón groESL y ADN extraído de muestras de sangre que dieron positivo para E. canis vía PCR en tiempo real. La especificidad de amplificación fue confirmada por la enzima de restricción EcoRI de sitios internos en iniciadores LAMP y no se observó ninguna reactividad cruzada con muestras de sangre positivas para Babesia spp., otro agente patógeno común transmitido por garrapatas. El alto costo de análisis de ácido nucleico es uno de los inconvenientes para su uso a gran escala como pruebas diagnósticas rutinarias. El ensayo LAMP para E. canis desarrollado aquí es una alternativa interesante para PCR, una vez que no requiere un termociclador programado y, consecuentemente, reduce costos para el laboratorio clínico veterinario.

O câncer é uma das principais causas de morte em cães o que tem impulsionado a pesquisa por novos antitumorais com ação mais específica. Neste trabalho, a atividade antitumoral de jasmonatos foi avaliada na linhagem de macrófagos caninos DH82 (ATCC # CRL-10389), a qual é originada de um caso de histiocitoma maligno. A atividade do metil jasmonato (MJ) e do ácido jasmônico (AJ) foram comparadas à doxorrubicina, através do método de coloração MTT. O MJ apresentou maior inibição (82,2%), seguido da Doxorrubicina (80,7%) e AJ (36,5%). Estudos mais completos da ação dos jasmonatos na saúde animal ainda são necessários, porém, os dados deste trabalho apontam o MJ como alternativa para o desenvolvimento de drogas para o tratamento das oncologias caninas.

Cancer is one of the leading causes of death in dogs, a fact that has boosted the investigation for new more specific antitumor drugs. This study evaluated the antitumor activity of jasmonates in the canine macrophage cell line DH82 (ATCC # CRL-10389) isolated from a case of malignant histiocytoma. The activities of methyl jasmonate and jasmonic acid were compared to that of doxorubicin by the MTT assay. Methyl jasmonate resulted in the highest inhibition of cell growth (82.2%), followed by doxorubicin (80.7%) and jasmonic acid (36.5%). More detailed studies regarding the action of jasmonates on animal health are necessary, but the present results indicate methyl jasmonate as an alternative to the development of drugs for the treatment of canine oncologies.

E. canis infection of the canine cell line DH82 is a routine in studies with this bacteria. A protocol for isolation of host cell free bacteria was developed based on the use of glass beads. Improvement of infection with E. canis isolated by this method was detected by real-time PCR.

As sequências parciais dos genes RNAr 18S de Babesia canis e RNAr 16S e Ehrlichiacanis detectados em cães de Ribeirão Preto, Brasil, foram comparadas à sequências de outras linhagens depositadas no GeneBank. A linhagem de E. canis circulando em Ribeirão Preto é idêntica a outras detectadas previamente na região, enquanto a sub-espécie B. canis vogeli é a principal linhagem de Babesia circulando em cães de Ribeirão Preto.

The partial DNA sequences of the 18S rRNA gene of Babesia canis and the 16S rRNA gene of Ehrlichia canis detected in dogs from Ribeirão Preto, Brazil, were compared to sequences from other strains deposited in GenBank. The E. canis strain circulating in Ribeirão Preto is identical to other strains previously detected in the region, whereas the subspecies Babesia canis vogeli is the main Babesia strain circulating in dogs from Ribeirão Preto.

A comparação de sequências parciais do gene 16S RNAr de Anaplasma platys detectadas em cães de Ribeirão Preto, Brasil, com sequências de outras linhagens previamente depositadas no GenBank indicam que existem pelo menos três linhagens de A. platys circulando na América do Sul.

Comparison of the partial DNA sequence of the 16S rRNA gene of Anaplasma platys detected in dogs from Ribeirão Preto, Brazil, to sequences of other strains previously deposited in GenBank showed that there are at least three A. platys strains circulating in South America.

New neurons are constantly added to the olfactory bulb of rodents from birth to adulthood. This accretion is not only dependent on sustained neurogenesis, but also on the migration of neuroblasts and immature neurons from the cortical and striatal subventricular zone (SVZ) to the olfactory bulb. Migration along this long tangential pathway, known as the rostral migratory stream (RMS), is in many ways opposite to the classical radial migration of immature neurons: it is faster, spans a longer distance, does not require radial glial guidance, and is not limited to postmitotic neurons. In recent years many molecules have been found to be expressed specifically in this pathway and to directly affect this migration. Soluble factors with inhibitory, attractive and inductive roles in migration have been described, as well as molecules mediating cell-to-cell and cell-substrate interactions. However, it is still unclear how the various molecules and cells interact to account for the special migratory behavior in the RMS. Here we will propose some candidate mechanisms for roles in initiating and stopping SVZ/RMS migration.

Foram investigados os efeitos de alguns fatores abióticos na taxa de eclosão dos ovos efipiais de Moina micrura. O conhecimento das melhores condições para a eclosão desses ovos pode ser importante na utilização dessa espécie para a aqüicultura, como alimento para larvas de peixes. Os efípios foram expostos a diferentes experimentos em laboratório por um período de sete dias. As melhores condições de eclosão foram: pH de 5 a 9, temperatura de 25ºC, fotoperíodo de oito ou mais horas de luz e intensidade luminosa igual ou maior que 850 lux. Diferentes concentrações de íons na água (de água deionizada e até 880 mg.L<FONT FACE=Symbol>-</FONT>1 de sais selecionados) não influenciaram a eclosão.

The roles of some abiotic factors in controlling the hatching rates of Moina micrura ephippial eggs were investigated. Determination of optimum hatching conditions would be important in developing the use of this species as a food for fish larvae in aquaculture. Ephippia were exposed to different treatments in the laboratory, and monitored for hatching over a period of seven days. Optimum hatching conditions were: pH 5-9, temperature 25ºC, photoperiod eight or more hours light per day and light intensity equal to or greater than 850 lux. Differences in water ionic concentrations (from deionized water to 880 mg.L<FONT FACE=Symbol>-</FONT>1 of selected salts) had no effect.