ABSTRACT: This study detected Anaplasma marginale in calvesusing blood smears and nested PCR (nPCR) and to compare the results with the clinical signs presented by calves on a dairy farm in the municipality of Castanhal, located northeast of the state Pará (1°07’19.1”S and 47°53’53.0”W), eastern Amazon. To this end, 192 blood samples were collected from 24 animals at 1-20, 21-41 and 42-60 days of age. Blood smears and nPCR with primers for the msp5 gene were performed. The prevalence of A. marginale was 61.5% (118/192) for the blood smear technique and nPCR (msp5). The manifestation of clinical signs of anaplasmosis also increased significantly over the course of the study (P < 0.0001), being lower in animals aged 1-20 days, but increasing among those aged 21-41 and 42-60 days. These signs were characterized by apathy, fever, weight loss, diarrhea, dehydration, and hypochromic mucous membranes. Regarding the evaluation of the diagnostic techniques, no significant difference was observed in the detection of A. marginale between the blood smear and nPCR (P = 0.995), but the agent’s rickets increased on Day 47 (P < 0.01) in both tests, thereby demonstrating a near-linear pattern of increase in rickets over the 60 days, with a consequent decrease in globular volume. This shows that of the 24 animals studied, 21 were infected at some point during the study period. Additionally, there was no significant difference between blood smears and nPCR, probably due to medium and high parasitemia, which were directly related to the clinical signs and decrease in globular volume. ABSTRACT (nPCR Castanhal 1°0719.1S 107191S S 1°07 19.1 1 07 19 47°5353.0W, 4753530W W 47°53 53.0 , 53 0 47°53’53.0”W) Amazon end 2 120, 120 20, 20 2141 41 21-4 4260 42 42-6 age msp performed A 615 61 5 61.5 118/192 118192 118 (118/192 msp5. . (msp5) P 0.0001, 00001 0.0001 0001 0.0001) 1-2 apathy fever loss diarrhea dehydration membranes techniques 0.995, 0995 0.995 995 0.995) agents agent s 4 0.01 001 01 tests nearlinear near linear 6 volume studied period Additionally parasitemia 0719 1S 107 1°0 191 19. 5353 0W 47°5353.0W 4753 47°5 530 53. 47°53’53.0”W 12 214 21- 426 42- 61. 118/19 11819 11 (118/19 (msp5 0000 0.000 000 1- 099 0.99 99 0.0 00 071 10 1° 535 475 47° 118/1 1181 (118/1 (msp 0.00 09 0.9 9 0. 118/ (118/ (118 (11 (1 (

RESUMO: Objetivou-se, na construção deste trabalho, detectar Anaplasma marginale por meio do esfregaço sanguíneo e Nested PCR (nPCR) e comparar os resultados com os sinais clínicos apresentados pelos bezerros em uma propriedade leiteira localizada no município de Castanhal, região nordeste do estado do Pará (1°07’19,1”S e 47°53’53,0”W), Amazônia Oriental. Para isso, foram coletadas 192 amostras sanguíneas de 24 animais, divididos em três períodos: 1-20, 21-41 e 42-60 dias de idade. Foram realizados esfregaços sanguíneos e nPCR com iniciadores para o gene msp5. A prevalência de A. marginale foi de 61,46% (118/192) tanto para a técnica de esfregaço sanguíneo quanto para nPCR (msp5). A manifestação de sinais clínicos da anaplasmose também foi significativamente crescente ao longo do estudo (P < 0,0001), sendo menor em animais de 1 a 20 dias, mas expandindo-se entre os de 21 a 41 dias e 42 a 60 dias, esses sinais foram caracterizados por apatia, febre, perda de peso, diarreia, desidratação e mucosas hipocoradas. Quanto a avaliação das técnicas diagnósticas, não houve diferença significativa entre a detecção de A. marginale no esfregaço sanguíneo e na nPCR (P = 0,995), porém se observou aumento riquetsêmico do agente no 47º dia (P < 0,01) em ambos os testes, demonstrando, assim, um padrão de aumento da riquetsemia próximo ao linear ao longo dos 60 dias, com consequente diminuição do volume globular. Assim, demonstra-se que dos 24 animais estudados, 21 se infectaram em algum momento do período estudado, e não houve diferença significativa entre esfregaço sanguíneo e nPCR, em virtude, provavelmente, das parasitemias médias e altas, as quais estiveram diretamente relacionadas com os sinais clínicos e a diminuição do volume globular. RESUMO Objetivouse, Objetivouse Objetivou se, Objetivou-se trabalho (nPCR Castanhal 1°0719,1S 107191S S 1°07 19,1 07 19 47°5353,0W, 4753530W W 47°53 53,0 , 47 53 0 47°53’53,0”W) Oriental isso 2 períodos 120, 120 20, 1-20 2141 21-4 4260 42-6 idade msp5 msp 6146 61 46 61,46 118/192 118192 118 (118/192 . (msp5) P 0,0001, 00001 0,0001 0001 0,0001) expandindose expandindo 4 6 apatia febre peso diarreia hipocoradas diagnósticas 0,995, 0995 0,995 995 0,995) º 0,01 001 01 testes demonstrando assim globular Assim demonstrase demonstra estudados estudado virtude provavelmente altas 0719 1S 107 1°0 191 19, 5353 0W 47°5353,0W 4753 47°5 530 53, 5 47°53’53,0”W 12 1-2 214 21- 426 42- 614 61,4 118/19 11819 11 (118/19 (msp5 0000 0,000 000 099 0,99 99 0,0 00 071 10 1° 535 475 47° 1- 61, 118/1 1181 (118/1 (msp 0,00 09 0,9 9 0, 118/ (118/ (118 (11 (1 (

RESUMO: Os arbovírus são agentes transmitidos por artrópodes que representam considerável ameaça à saúde pública em todo o mundo, causando doenças em humanos e animais. Neste trabalho foi realizada investigação sorológica para detecção de anticorpos totais contra diferentes tipos de arbovírus em quatis (Nasua nasua) de vida livre do Parque Nacional do Iguaçu (PNI) através do teste de Inibição da Hemaglutinação. Amostras de soro foram testadas utilizando-se antígenos de 33 arbovírus pertencentes aos gêneros Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus. As análises evidenciaram que 23,6% (17/72) dos quatis apresentaram soropositividade para pelo menos um dos antígenos testados, incluindo reações monotípicas e heterotípicas. Foi detectada soropositividade para Alphavirus (5,9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64,7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, VNO, DEN1, DEN2, DEN3, DEN4, NJLV), Phlebovirus (88,2%, 15/17; ICOV, BUJV) e Orthobunyavirus (5,9%, 1/17; ORIV). A presença de anticorpos para esses vírus em quatis do PNI indica uma aparente transmissão silenciosa de arbovírus, incluindo N. nasua como um possível amplificador destes arbovírus na área estudada. Os dados encontrados servem de alerta quanto ao possível risco de estabelecimento de um ciclo de transmissão de arbovírus envolvendo insetos vetores e quatis, ou ainda, outros animais silvestres, consequentemente, podendo incluir o homem nessa cadeia de transmissão.

ABSTRACT: Arboviruses are agents transmitted by arthropods and represent a considerable threat to public health worldwide, causing diseases in humans and animals. A serological investigation was carried out to detect total antibodies against different types of arboviruses in free-living coatis (Nasua nasua) from the Iguaçu National Park (INP) through the Hemagglutination Inhibition test. Serum samples were tested using antigens from 33 arboviruses belonging to the genera Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus, and Phlebovirus. The data showed that 23.6% (17/72) of coatis were seropositive for at least one of the tested antigens, including monotypic and heterotypic reactions. Seropositivity was detected for Alphavirus (5.9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64.7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, WNV, DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4, and NJLV), Phlebovirus (88.2%, 15/17; ICOV and BUJV) and Orthobunyavirus (5.9%, 1/17; ORIV). The presence of antibodies to these viruses in coatis from INP indicated an apparent silent circulation of arbovirus, implying N. nasua to be a possible amplifying host of these arboviruses in the studied area. The data reported also serve as a warning about the possible risk of establishing an arbovirus transmission cycle involving vector arthropods and coatis, or even other wild animals, consequently, including humans in this transmission chain.

Resumo Foi avaliada a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em amostras de soro, coletadas de gatos domésticos, em Belém, Pará, Brasil. Também correlacionou-se a presença de anticorpos contra T. gondii com variáveis ambientais e hábitos de proprietários. Quatrocentas e quarenta e sete amostras de soro de gatos domésticos foram analisadas. Os soros foram testados por ensaio de imunofluorescência indireta, e as amostras de fezes foram analisadas por meio de reação em cadeia da polimerase. Entre os animais analisados, 21,92% (98/447) foram soropositivos. Foi encontrada associação estatística significante em relação à idade e à sorologia entre os animais acima de 1 ano (p <0,01): no grupo de até 1 ano, 12,82% (20/156) dos animais positivos e, no grupo acima de 1 ano, 26,80% (78/291) positivos. Os resultados mostram que os gatos daquela região possuem anticorpos anti-T. gondii, e seus donos não estão cientes da toxoplasmose ou de como evitar sua transmissão.

Abstract We evaluated the prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in the serum samples collected from domestic cats in Belém, Pará, Brazil. We also correlated the presence of T. gondii antibodies with environmental variables and cat-owner habits. Four-hundred and forty-seven serum samples from domestic cats were analyzed. The sera were tested using an indirect immunofluorescence assay. Among the animals analyzed, 21.92% (98/447) were seropositive. A statistically significant association was found in relation to age and serology among the animals over 1 year old (p<0.01): in the group up to 1 year old, 12.82% (20/156) of the animals were positive, and in the group over 1 year old, 26.80% (78/291) were positive. Our results show that the cats in Belém, Pará region have anti-T. gondii antibodies, and their owners are not aware of toxoplasmosis or how to prevent its transmission.

Resumo O estudo teve como objetivo identificar espécies de carrapatos presentes no ambiente e entre animais de cativeiro em Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brasil. Os carrapatos foram removidos manualmente de animais de cativeiro e no ambiente usando a técnica de arrasto em flanela. Um total de 91 carrapatos foram capturados (51 adultos, 25 ninfas e 15 larvas). Os espécimes foram identificados morfologicamente como Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale e Amblyomma sculptum, e foram distribuídos entre cinco espécies de mamíferos nativos e uma ave exótica. Este estudo também relata o primeiro caso de infestação do emu australiano (Dromaius novaehollandiae) por A. sculptum .

Abstract The study aimed to identify species of ticks present in the environment and among captive animals, in Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were isolated from captive animals by manual examination and free-living ticks in the environment were captured using the flannel drag technique. A total of 91 ticks were obtained (51 adults, 25 nymphs and 15 larvae). The specimens were identified morphologically as Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale and Amblyomma sculptum , and were distributed among five species of native mammals and an exotic bird. This study also reports the first case of infestation of the Australian emu (Dromaius novaehollandiae) by A. sculptum.

Resumo O estudo teve como objetivo realizar a caracterização morfológica, molecular e filogenética de Borrelia theileri obtida de Rhipicephalus microplus naturalmente infectado em bovino no estado do Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 50 fêmeas de R. microplus ingurgitadas foram analisadas para espiroquetas por meio de esfregaço de hemolinfa. Ovos macerados e carrapatos, assim como sangue de bovinos infectados por esses carrapatos, foram analisados os genes glpQ, flaB e hpt por PCR. Os produtos de PCR foram purificados e sequenciados para análise e construção de uma árvore filogenética. Apenas 2% (1/50) dos carrapatos geraram um resultado positivo tanto pelo esfregaço como pela PCR. As formas espirais (n = 50) apresentaram (média ± DP) comprimento médio de 19,17 ± 4,12, diâmetro de 0,2935 ± 0,0469 e número de voltas de 8,44 ± 2,59. Os alinhamentos das sequências dos três genes avaliados exibiram 98% de similaridade aos isolados de B. theileri, ocorrendo em um clado altamente relacionado à linhagem de B. theileri KAT. As amostras de maceração de ovos foram positivas para os três genes avaliados, enquanto o sangue bovino foi negativo pela PCR. Esta é a mais completa caracterização de B. theileri nas Américas, apresentando dados morfológicos, moleculares e filogenéticos, incluindo a transmissão transovarial da espiroqueta no carrapato hospedeiro.

Abstract This study aimed to perform a morphological, molecular and phylogenetic characterization of Borrelia theileri obtained from infected Rhipicephalus microplus in Brazil. Fifty engorged R. microplus females from cattle in the municipality of Seropédica, Rio de Janeiro, were analyzed for spirochetes by hemolymph smear. Macerated eggs and positive ticks, as well as blood from the bovine infested by these ticks, were analyzed the glpQ, flaB and hpt genes by PCR. The PCR products were purified and sequenced for analysis and construction of a phylogenetic tree. Only 2% (1/50) of the ticks generated a positive result by both smear and PCR. The spiral forms (n = 50) had (media ± SD) a mean length of 19.17 ± 4.12 µm, diameter of 0.2935 ± 0.0469 and number of turns 8.44 ± 2.59. Sequence alignments of the three evaluated genes exhibited 98% similarity to B. theileri isolates, occurring in a clade highly related to B. theileri strain KAT. Egg maceration samples were positive for the three evaluated genes, whereas bovine blood was negative by PCR. This is the most detailed characterization of B. theileri in the Americas to-date, presenting morphological, molecular and phylogenetic data, including the transovarial transmission of the spirochete in the host tick.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi detectar ovos de helmintos e oocistos de protozoários em amostras de fezes de aves da ordem Passeriformes no estado do Pará, Brasil. Amostras de fezes foram coletadas individualmente de 403 aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro no estado do Pará. As amostras foram processadas usando a técnica de dupla centrifugação em solução saturada de sacarose e as amostras positivas para oocistos de coccídios foram submetidas à esporulação em dicromato de potássio 2,0%. Ovos de helmintos e/ou oocistos de protozoários foram observados em 43,18% (174/403) das amostras fecais examinadas. Oocistos de coccídios foram detectados em 93,68% (163/174) das amostras positivas, enquanto que ovos de helmintos foram observados em 10,34% (18/174). A esporulação de oocistos ocorreu em 43,56% (71/163) das amostras, e somente oocistos de Isospora spp. foram detectados. Ovos de nematódeos das Superfamílias Trichostrongyloidea (4,60%; 8/174), Ascaridoidea (0,57%; 1/174) e Trichuroidea (0,57%; 1/174) foram diagnosticados nas amostras positivas. Ovos de Cestoda foram diagnosticados em 2,87% (5/174), enquanto que ovos de Trematoda foram detectados em 2,30% (4/174) das amostras positivas. Aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro nas áreas visitadas estavam parasitadas por helmintos e protozoários, predominando a infecção por coccídios do gênero Isospora.

ABSTRACT: The objective of this study was to detect helminth eggs and protozoan oocysts in samples of feces from birds of the order Passeriformes in Para State, Brazil. Fecal samples were collected individually from 403 passerine birds seized and kept in captivity in Para State. Samples were processed by the double centrifugation technique in saturated sucrose solution and the coccidial oocyst-positive samples were submitted to sporulation in potassium dichromate 2.0%. Helminth eggs and/or protozoan oocysts were observed in 43.18% (174/403) of the fecal samples examined. Coccidial oocysts were detected in 93.68% (163/174) of the positive samples, whereas helminth eggs were observed in 10.34% (18/174) of the positive samples. Oocyst sporulation occurred in 43.56% (71/163) of the samples, and only Isospora spp. oocysts were detected. Nematode eggs of the superfamilies Trichostrongyloidea (4.60%; 8/174), Ascaridoidea (0.57%; 1/174), and Trichuroidea (0.57%; 1/174) were diagnosed in the positive samples. Cestoda eggs were diagnosed in 2.87% (5/174), whereas Trematoda eggs were detected in 2.30% (4/174) of positive samples. Passerine birds seized and kept in captivity in the visited local presented parasitism by intestinal helminths and protozoan, with a predominance of infection with coccidia of the gender Isospora.

RESUMO: O objetivo do presente trabalho foi realizar o diagnóstico da infecção natural por Trypanosoma evansi em procionídeos de vida livre e de cativeiro dos estados do Amapá e Pará, Brasil. Durante o período de fevereiro de 2012 a agosto de 2013, amostras de sangue total e esfregaços sanguíneos foram obtidos de 45 procionídeos de vida livre e de nove mantidos em cativeiro em mantenedores e Parques Zoobotânicos dos estados do Amapá e Pará. As amostras de sangue total foram coletadas e mantidas a -20ºC para pesquisa de DNA de T. evansi pela PCR utilizando-se os iniciadores RoTat 1.2 forward e RoTat 1.2 reverse. Os esfregaços sanguíneos também foram processados e examinados para a pesquisa de formas tripomastigotas do agente. DNA de T. evansi foi detectado em 18,52% (10/54) dos procionídeos, ocorrendo em mãos-peladas de cativeiro e quatis de vida livre e de cativeiro no estado do Pará. Não foram observadas formas tripomastigotas nos esfregaços sanguíneos. DNA de T. evansi foi detectado em P. cancrivorus e N. nasua no estado do Pará, sendo este o primeiro relato em P. cancrivorus.

ABSTRACT: The present study aimed to diagnose the natural infection of captive and free-living procyonids with Trypanosoma evansi in the states of Amapá and Pará, Brazil. From February 2012 to August 2013, whole blood samples and blood smears were obtained from 45 free-living procyonids and from nine procyonids kept in captivity in wild life refuges and zoobotanical parks in the states of Amapá and Pará. Whole blood samples were collected and kept at -20ºC for the detection of T. evansi DNA by PCR using the RoTat 1.2 forward and RoTat 1.2 reverse primers. In addition, the blood smears were processed and examined for the presence of trypomastigote forms of T. evansi. T. evansi DNA was detected in 18.52% (10/54) of the procyonids, namely, in captive crab-eating raccoons and captive and free-living coatis in Pará State. No trypomastigote forms were observed in the blood smears. DNA from T. evansi was detected in P. cancrivorus and N. nasua in Pará State, being this the first such report in P. cancrivorus.