RESUMO Phytophthora nicotianae é um fitopatógeno responsável por danos em culturas e ecossistemas naturais em todo o mundo. P. nicotianae está relacionada às doencas: gomose e podridao de raízes e o manejo destas doencas depende principalmente de certificação de mudas e erradicação de plantas infectadas. No entanto, pouco se sabe sobre a estratégia de infecção do patógenos em plantas de citrus, o que eleva a necessidade de examinar a sua virulência em níveis moleculares. Neste trabalho nós apresentamos um método otimizado para manipular geneticamente o micélio de P. nicotianae. P. nicotianae foi transformada com um vetor de expressão da proteína fluorescente DsRed. O método AMT otimizado gerou relativa alta eficiência de transformação. Também apresenta vantagens sobre os outros métodos porque é o de mais simples execução, não requer protoplastos ou esporos como alvos, é menos dispendioso e não requer equipamento específico. A transformação com DsRed não prejudicou a fisiologia, reprodução ou virulência do patógeno. O método AMT otimizado aqui apresentado é útil para rápida, eficaz e confiável transformação de P. nicotianae com qualquer gene de interesse.

ABSTRACT Phytophthora nicotianae is a plant pathogen responsible for damaging crops and natural ecosystems worldwide. P. nicotianae is correlated with the diseases: citrus gummosis and citrus root rot, and the management of these diseases relies mainly on the certification of seedlings and eradication of infected trees. However, little is known about the infection strategies of P. nicotianae interacting with citrus plants, which rises up the need for examining its virulence at molecular levels. Here we show an optimized method to genetically manipulate P. nicotianae mycelium. We have transformed P. nicotianae with the expression cassette of fluorescence protein DsRed. The optimized AMT method generated relatively high transformation efficiency. It also shows advantages over the other methods since it is the simplest one, it does not require protoplasts or spores as targets, it is less expensive and it does not require specific equipment. Transformation with DsRed did not impair the physiology, reproduction or virulence of the pathogen. The optimized AMT method presented here is useful for rapid, cost-effective and reliable transformation of P. nicotianae with any gene of interest.

Os citros apresentam uma taxonomia muito complexa, principalmente com relação ao número de espécies que constituem o gênero Citrus e os gêneros afins. Genótipos classificados como espécies podem ter sido originados por hibridação interespecífica e preservados por meio da embrionia nucelar. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar uma população de tangerineiras híbridas oriundas do cruzamento das tangerineiras 'Clementina Fina' (Citrus clementina Hort. ex Tan.), genitor feminino, e 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Ten.), genitor masculino, utilizando marcadores do tipo microssatélites (SSR). Com 12 pares de primers, foi possível diferenciar 93 acessos do estudo e agrupar a F1 em indivíduos mais próximos do genitor feminino e do genitor masculino. O PIC (Conteúdo de Informação de Polimorfismo) dos primers variou de 0,27 a 0,65. Toda a progênie do cruzamento entre 'Clementina Fina' e 'Montenegrina' analisada neste estudo é híbrida, e os SSRs foram eficientes para identificar híbridos com maior similaridade genética em relação aos genitores, mostrando a existência de variabilidade genética entre as plantas da população estudada.

Citrus have a very complex taxonomy, especially considering the number of species included in genus Citrus and related genera. What is classified as a species may have originated by interespecific hybridization and preserved through nucellar embryony. This research aimed to characterize a population of hybrid tangerines, originated from the cross of 'Clementina Fina' (Citrus clementina Hort. ex Tan.) as female and 'Montenegrina' (Citrus deliciosa Ten.) as male parents, using microsatellite molecular makers. With 12 pairs of primers it was possible to differentiate 93 of the studied accessions and to group F1 individuals nearer to the male or to the female parent. The primers PIC (Polymorphism Information Content) ranged from 0.27 to 0.65. All the analyzed progeny between 'Clementina Fina' and 'Montenegrina' is hybrid, where SSR were efficient in identifying hybrids more similar to the genitors, showing genetic variability among plants of the studied population.

O objetivo deste trabalho foi buscar novas fontes de resistência à leprose-dos-citros, no Banco Ativo de Germoplasma do Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronômico, em Cordeirópolis, SP. Foram utilizadas plantas obtidas por sementes de 26 acessos, infectadas com o vírus da leprose-dos-citros (Citrus leprosis virus - CiLV), por meio do seu vetor Brevipalpus phoenicis. O aparecimento de lesões, a partir de 21 dias após a inoculação, foi observado em 11 dos genótipos testados (42,3%). Quinze espécies, entre elas Citrus pennivesiculata e C. celebica, comportaram-se como altamente resistentes, enquanto outras, como C. keraji, foram mais suscetíveis que o padrão C. sinensis. Os dados mostraram grande variação de respostas de Citrus spp. à leprose, com elevado número de espécies resisentes, que podem ser utilizadas como fonte de resistência à doença em programas de melhoramento.

The objective of this work was to prospect for new sources of resistance to leprosis in the Citrus Germplasm Bank of Centro APTA Citros Sylvio Moreira, Instituto Agronômico, in Cordeirópolis, SP, Brazil. Plants obtained through seeds from 26 citrus accessions were mite-infected with Citrus leprosis virus (CiLV). Typical lesions started to appear in 11 genotypes (42.3% of the tested accessions) 21 days after inoculation. Fifteen species, among them Citrus pennivesiculata and C. celebica, behaved as highly resistant, while other genotypes, as C. keraji, were more susceptible than the standard C. sinensis. The data showed a wide variation in the response of Citrus spp. to leprosis, with a large number of resistant species, wich can be used as source of resistance to this disease, in breeding programs.

O objetivo deste trabalho foi obter plantas autotetraplóides de tangerina 'Ponkan', laranja 'Pêra-de-abril' e tangor 'Murcott', que serão usadas em cruzamentos com cultivares diplóides, visando à obtenção de indivíduos triplóides sem sementes. Utilizou-se o método de cultivo in vitro de segmentos de epicótilo em meio com colchicina (0,025, 0,05 e 0,1%), por diversos períodos (1, 2, 3, 7 e 14 dias), com subseqüente regeneração de brotações em meio sem a presença do alcalóide. As brotações foram microenxertadas in vitro e aclimatizadas em estufas. A determinação do nível de ploidia das plantas foi realizada por citometria de fluxo. A colchicina demonstrou ser tóxica aos explantes das três variedades, ocasionando redução significativa no número médio de brotações adventícias e aumento na porcentagem de explantes não-responsivos, em comparação com o controle. Entre as quatro plantas de laranja e uma de tangor obtidas, duas plantas de laranja e a de tangor, demonstraram ser autotetraplóides, apresentando folhas com maior espessura, arredondadas e coloração verde intensa. O método utilizado na duplicação cromossômica, com uso de colchicina, é eficiente em produzir plantas autotetraplóides de citros.

The objective of this work was to obtain autotetraploid plants of 'Murcott' tangor, 'Ponkan' mandarin and 'Pêra-de-abril' sweet orange to be used in crosses with diploid cultivars, aiming to produce triploid seedless hybrids. The methodology used was the in vitro culture of epicotyl segments in media containing different concentrations of colchicine (0.025, 0.05 and 0.1%), for several periods of time (1, 2, 3, 7 and 14 days), followed by the regeneration of adventitious shoots in culture media without the alkaloid. All shoots obtained were micro-grafted, acclimatized and transferred to a greenhouse. The evaluation of the ploidy level of the plants was performed by flow citometry technique. Colchicine was toxic to the explants of three varieties, and caused the reduction on the average number of shoots regenerated per explant as well as an increase in the percentage of non-responsive explants when comparing with the control plants. Among four plants of sweet orange obtained, two of them showed to be autotetraploid. The only plant of tangor obtained also showed to be autotetraploid. These plants presented thicker and roundisher leaves displaying deeper green color. The methodology used resulted efficient for obtaining tetraploid plants.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética em uma população de 148 híbridos de tangor 'Murcott' (Citrus reticulata Blanco x C. sinensis L. Osbeck) e laranja 'Pêra' (C. sinensis L. Osbeck) obtidos por polinização controlada, pelo uso de marcadores fAFLP e RAPD. Marcadores polimórficos (416 marcadores fAFLP e 33 RAPD) foram utilizados para avaliar a similaridade genética entre os híbridos, calculada com o coeficiente Jaccard pelo método UPGMA. A consistência de cada agrupamento foi determinada pelo programa BOOD. Houve alta similaridade genética entre os parentais. A laranja 'Pêra' apresentou maior número (132) de loci em heterozigose em relação ao tangor 'Murcott' (105), corroborando a teoria de origem híbrida para a laranja-doce. Observaram-se dois grupos distintos de plantas, e um deles abrangeu 80% dos híbridos com maior similaridade com a laranja 'Pêra'. A análise bootstrap não revelou consistência estatística entre esses grupos. Marcadores fAFLP são mais eficientes na avaliação do polimorfismo, sendo indicados para seleção de indivíduos híbridos mais próximos a um dos parentais.

The objective of this work was to evaluate the genetic diversity in a population of 148 hybrids of 'Murcott' tangor (Citrus reticulata Blanco x C. sinensis L. Osbeck) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis L. Osbeck), obtained by controlled polination, using fAFLP and RAPD markers. Polymorphic markers (416 fAFLP and 33 RAPD markers) were used to evaluate genetic similarity among the hybrids, calculated by the coefficient of Jaccard, using the UPGMA method. The consistency of each group was determined by software BOOD. There was high genetic similarity within the parents. 'Pêra' sweet orange had a higher number of loci in heterozygosis (132) compared to 'Murcott' tangor (105), supporting the theory of hybrid origin for sweet oranges. Two distinct groups of plants were observed: one group had 80% of the hybrids that displayed higher genetic similarity with 'Pêra' sweet orange. The bootstrap analysis did not show consistence between the groups. The fAFLP markers are more efficient to obtain polymorphism than RAPDs and are more suitable to select hybrids closer to the parents.

Laranjeiras 'Pêra' de dois anos e meio de idade enxertadas em limoeiros 'Cravo' foram cultivadas em vasos de 100 L com solo e submetidas ao estresse hídrico, pela suspensão da irrigação. Valores de assimilação de CO2 (A), transpiração (E) e condutância estomática (g s) começaram a declinar a partir do sétimo dia de estresse, embora o potencial da água na folha às 6 a.m. (psipd) e às 2 p.m. (psi2) começaram a declinar a partir do quinto dia de deficiência hídrica. A concentração interna de CO2 (Ci) das plantas estressadas aumentou a partir do mesmo dia, atingindo uma concentração máxima no dia de estresse mais severo. Assim, a eficiência de carboxilação dessas plantas, verificada pela relação A/Ci foi menor nesse dia, não ocorrendo recuperação dessa razão mesmo dez dias após a reidratação. Até o quinto dia após a reirrigação, somente o psipd e o psi2 se recuperaram, sendo semelhantes aos das plantas controle. Quando o potencial da água na folha diminuiu, ocorreu uma tendência de aumento da concentração de ácido abscísico (ABA) nas folhas; da mesma forma, foi possível verificar que a condutância estomática diminuiu em função do decréscimo em psi2. O acúmulo de ABA e o fechamento estomático ocorreram quando psi2 foi menor que -1.0 MPa. A deficiência hídrica em laranjeiras 'Pêra' aumentou o conteúdo de ABA, com conseqüente fechamento estomático e decréscimo em psi2.

Thirty-month-old 'Pêra' orange trees grafted on 'Rangpur' lemon trees grown in 100 L pots were submitted to water stress by the suspension of irrigation. CO2 assimilation (A), transpiration (E) and stomatal conductance (g s) values declined from the seventh day of stress, although the leaf water potential at 6:00 a.m. (psipd) and at 2:00 p.m. (psi2) began to decline from the fifth day of water deficiency. The CO2 intercellular concentration (Ci) of water-stressed plants increased from the seventh day, reaching a maximum concentration on the day of most severe stress. The carboxylation efficiency, as revealed by the ratio A/Ci was low on this day and did not show the same values of non-stressed plants even after ten days of rewatering. After five days of rewatering only psi pd and psi2 were similar to control plants while A, E and g s were still different. When psi2 decreases, there was a trend for increasing abscisic acid (ABA) concentration in the leaves. Similarly, stomatal conductance was found to decrease as a function of decreasing psi2. ABA accumulation and stomatal closure occurred when psi2 was lower than -1.0 MPa. Water stress in 'Pera´ orange trees increased abscisic acid content with consequent stomatal closure and decreased psi2 values.

Existem evidências do envolvimento de um ou poucos genes controlando o processo apomítico em citros; entretanto, a identidade destes genes, seus produtos e suas formas de atuação ainda não foram elucidados. Sendo as proteínas o produto final da expressão gênica, o processo apomítico pode ser investigado através do estudo da expressão protéica. A técnica da eletroforese bidimensional de proteínas foi empregada nesta pesquisa, objetivando a comparação de perfis protéicos de plântulas apomíticas e zigóticas de citros obtidas a partir de cruzamento entre Citrus sinensis L. Osb. cv. Pêra e Poncirus trifoliata cv. Rubidoux. Observou-se, nestes perfis bidimensionais, a ocorrência de três classes de proteínas: a primeira presente em ambos os perfis, a segunda exclusiva do perfil apomítico e a terceira exclusiva do perfil zigótico. Dentro da classe de proteínas compartilhada por ambos os perfis, observaram-se diferenças no nível de expressão entre zigóticos e apomíticos. A classe protéica exclusiva do perfil zigótico, provavelmente, está relacionada à expressão de genes herdados do parental masculino. Já dentre as proteínas exclusivas do perfil apomítico, podem estar proteínas relacionadas ao processo apomítico. O peso molecular e o ponto isoelétrico destas proteínas de expressão diferencial foram estimados e constituem, então, um banco de dados para futuros trabalhos de purificação e seqüenciamento das mesmas.

There are evidences that one or a few genes only regulate the apomictic process in citrus. However, the genes identities, their products and mode of action were not elucidated yet. As proteins are the final products of gene expression, the investigation of protein expression can lead to a better understanding of the apomictic process. In this research, the bidimensional protein electrophoresis technique was used to compare protein profiles from apomictic and zygotic seedlings of citrus. Three classes of proteins were observed based on bidimensional profiles: a) those observed in either one of the profiles, b) those exclusive to the apomictic profile, and c) those exclusive to the zygotic profile within that class of proteins shared by both profiles. Differences in the expression level were observed for apomitic or zygotic seedlings. The class of protein exclusive to the zygotic profile is probably related to the expression of genes inherited from the male parental. The proteins detected in the apomictic profile could be related to the apomictic process itself. The molecular weight and the isoelectric point of these differentially expressed proteins were also estimated and probably constitute an important data base for future work on purification and sequencing of these proteins.

O objetivo deste trabalho foi elaborar mapas de ligação de laranja 'Pêra' [Citrus sinensis (L.) Osbeck] e tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) utilizando marcadores RAPD e a estratégia pseudo-testcross. Os parentais foram escolhidos tomando-se por base o nível de resistência/suscetibilidade à clorose variegada dos citros (CVC). A segregação de 176 marcadores foi analisada em uma progênie de 94 híbridos F1, obtidos por meio de cruzamentos controlados. O mapa de ligação de laranja 'Pêra' apresentou 117 marcadores distribuídos em 12 grupos de ligação, totalizando 612,1 cM. Apenas seis marcadores não se ligaram a algum dos grupos de ligação e 48,7% deles apresentaram segregação distorcida. O mapa de ligação de tangerina 'Cravo' apresentou 51 marcadores distribuídos em 12 grupos de ligação, totalizando 353,3 cM. Apenas dois marcadores apresentaram-se desligados e 15,7% deles apresentaram segregação distorcida. A elaboração de mapas de ligação dessas cultivares é relevante para futuros estudos da herança da resistência à CVC, cancro cítrico e leprose.

The objective of this work was to construct linkage maps of 'Pêra' sweet orange [Citrus sinensis (L.) Osbeck] and 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) using RAPD markers and the pseudo-testcross strategy. The parents were chosen according to the resistance/susceptibility to citrus variegate chlorosis (CVC). The segregation of 176 markers was analyzed in 94 progeny of F1 hybrids, which were obtained from controlled crossings. The linkage map of 'Pêra' sweet orange had 117 markers defined by 12 linkage groups, which spanned 612.1 cM. Only six markers could not be linked to the linkage group and 48.7% of the markers showed segregation distortion. The linkage map of 'Cravo' mandarin had 51 markers defined by 12 linkage groups, which spanned 353.3 cM. Only two markers did not link to the groups and 15.7% showed segregation distortion. The construction of linkage maps is relevant to future mapping studies of the inheritance of CVC, citrus canker and leprosis.

The objective of this work was to analyze the effects of RAPD markers with skewed segregation on genetic linkage maps. Segregation data for 123 Citrus sinensis (L.) Osbeck cv. Pêra markers and 53 C. reticulata Blanco cv. Cravo markers in F1 progeny composed of 94 hybrids were used. Genetic linkage maps of the two varieties were constructed with non-skewed markers (p < 0.05 and p < 0.01) using the program MAPMAKER 3.0 and a pseudo-testcross strategy. The maps were compared to those constructed with all markers. Alterations in the genetic distances were observed based on the location of the skewed markers within the linkage groups. Generally, the skewed markers were located at the end of the linkage groups, sometimes forming entire linkage groups, without causing significant distance modifications. However, skewed markers located between non-skewed markers caused significant distance modifications and, in some cases, altered the order of the markers. Most of the skewed markers can be included in linkage maps, but in each case the degree of distance modification caused by each marker needs to be assessed.

O objetivo deste trabalho foi avaliar processos de seleção em uma população híbrida de citros, por meio de análise da segregação de marcadores RAPD. A segregação de 123 marcadores RAPD entre tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) e laranja 'Pêra' (C. sinensis (L.) Osbeck) foi analisada em uma progênie F1 composta por 94 híbridos. Composição genética, diversidade, heterozigosidade, diferenças estruturais dos cromossomos e presença de genes deletérios recessivos nos parentais foram discutidas com base nos tipos de segregação obtidos. Uma porcentagem elevada de marcadores com segregação distorcida em relação à proporção 1:1 esperada foi obtida na população F1. Muitos marcadores apresentaram segregação 3:1 em ambas as variedades e 1:3 em laranja 'Pêra' provavelmente decorrente de um processo de seleção direcional. A análise de distribuição da freqüência dos marcadores segregantes na população híbrida é um método simples que possibilita uma melhor compreensão da genética do grupo citros.

The objective of this work was to evaluate the processes of selection in a citrus hybrid population using segregation analysis of RAPD markers. The segregation of 123 RAPD markers between 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis (L.) Osbeck) was analysed in a F1 progeny of 94 hybrids. Genetic composition, diversity, heterozygosity, differences in chromosomal structure and the presence of deleterious recessive genes are discussed based on the segregation ratios obtained. A high percentage of markers had a skeweness of the 1:1 expected segregation ratio in the F1 population. Many markers showed a 3:1 segregation ratio in both varieties and 1:3 in 'Pêra' sweet orange, probably due to directional selection processes. The distribution analysis of the frequencies of the segregant markers in a hybrid population is a simple method which allows a better understanding of the genetics of citrus group.

As trocas gasosas e as concentrações de sacarose, amido e açúcares redutores foram analisadas em folhas de laranjeiras com e sem Clorose Variegada dos Citros (CVC), doença causada pela bactéria Xylella fastidiosa. Plantas sadias (PS) e plantas doentes (PD) foram avaliadas 20 e 26 meses após a inoculação da bactéria, em outubro de 1998 e abril de 1999, respectivamente. Na primeira data de avaliação, as taxas de assimilação de CO2 em PS foram maiores do que em PD nas primeiras horas da manhã e ao meio-dia, mas na segunda data de avaliação elas foram maiores em PS durante o dia todo. Na primeira data, houve aumento no conteúdo de sacarose de PD às 15 h e 17 h em relação ao de PS. Na segunda data, PD mostrou maior conteúdo de açúcares redutores somente no período da manhã, enquanto o conteúdo de sacarose apresentou decréscimo às 15 h. Na segunda data, as concentrações de amido foram sempre menores em PD, quando comparadas com as de PS. As variações de amido podem estar relacionadas com a disponibilidade de energia para atividades metabólicas de PD, uma vez que elas também apresentaram taxas de fotossíntese mais baixas. Os teores de açúcares solúveis não mostraram qualquer relação com a doença ou parâmetros de fotossíntese.

Gas exchanges, sucrose, starch and reducing sugar contents were analyzed in leaves of orange trees with and without Citrus Variegated Chlorosis (CVC), a disease caused by the bacteria Xylella fastidiosa. Healthy plants (HP) and diseased plants (DP) were evaluated 20 and 26 months after bacterial inoculation, in October 1998 and April 1999, respectively. On the first evaluation date, CO2 assimilation rates for HP were greater than DP in the early morning and midday, but on the second date they were greater in HP all along the day. On the first date, there was an increase in the sucrose content of DP at 15:00 h and 17:00 h in relation to HP. On the second evaluation date, DP presented greater reducing sugar content only in the early morning while sucrose content showed a decrease at 15:00 h. Also, on the second date, the concentrations of starch were always lower for DP compared to HP. It is suggested that this variation in starch levels might be related to energy availability in DP, as they also showed lower photosynthetic rates. Soluble sugars did not show any correlation with the disease and photosynthetic parameters.

Os marcadores moleculares têm sido utilizados como ferramentas em programas de melhoramento por hibridação sexual, permitindo a caracterização genética de grande número de genótipos. Os marcadores moleculares RAPD são os mais utilizados pois as técnicas empregadas são simples e de baixo custo. Avaliou-se a divergência genética entre híbridos F1 de tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) com laranja 'Pêra' (C. sinensis (L.) Osbeck) e estudou-se a variabilidade e a similaridade desses materiais entre si e em relação aos parentais. Reações RAPD, com 102 primers, foram realizadas em uma população de 94 híbridos e nos parentais. As análises multivariadas de divergência genética de componentes principais e agrupamento de Tocher foram realizadas, considerando-se, somente, os fragmentos polimórficos. As distâncias genéticas foram obtidas por meio do complemento aritmético do índice de Jaccard. Gráficos bidimensionais de dispersão das distâncias dos híbridos e parentais e da análise de divergência por meio de componentes principais foram construídos. Verificou-se elevada similaridade genética entre as variedades Cravo e Pêra e seus híbridos, demonstrando uma distribuição praticamente aleatória dos híbridos em relação aos parentais, porém em posições intermediárias. A análise de componentes principais apresentou aplicabilidade reduzida no estudo da divergência genética dos híbridos. O método de otimização de Tocher possibilitou a classificação dos híbridos e parentais em função de sua similaridade genética.

Molecular markers have been used as tools in breading programs of sexual hybridation, allowing the genetic characterization of a large number of genotypes. The RADP markers are the most used since the employed techniques are simple and of low cost. To evaluate the genetic divergence among F1 hybrids of 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis (L.) Osbeck), this study analyses the variability and similarity of the hybrids among themselves and with their parents. Random Amplified Polimorfic DNA marker analysis, with 102 primers, were applied to a population composed of 94 hybrids and their parents. Multivariate genetic divergence analysis of the principal components and Tocher grouping were carried out only considering the polymorphic fragments. Genetic distances were calculated by the arithmetic complement of the Jaccard index. Bidimensional dispersion graphs among hybrid and parent distances and of the divergence analysis by principal components were constructed. High genetic similarity among Cravo and Pêra varieties and their hybrids was verified, showing a casual distribution from the hybrids in relation to the parents, but in intermediary positions. The principal component analysis showed little applicability in the study of hybrid genetic divergence. The hybrids and parents were classified in groups based on the genetic similarity, using the Tocher optimization method.

Marcadores moleculares RAPD foram utilizados para avaliar a diversidade genética em uma população de 94 híbridos de tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) com laranja 'Pêra' (C. sinensis (L.) Osbeck), obtidos por polinização controlada. Nas reações de amplificação foram usados 102 "primers" decâmeros de seqüência arbitrária, que amplificaram 640 fragmentos, sendo 77,2% monomórficos entre os parentais. Utilizou-se o coeficiente de Jaccard para estimar a similaridade genética entre os híbridos, o método UPGMA para gerar o fenograma (NTSYS 1,7) e o software BOOD para determinar a consistência de cada agrupamento. Verificou-se que a laranja 'Pêra' apresenta maior heterozigosidade que a tangerina 'Cravo', sendo, respectivamente, 180 e 126 os números observados de loci em heterozigose. Houve alta similaridade genética entre os parentais, caracterizada pelo baixo polimorfismo de marcadores RAPD. Não houve a formação de agrupamentos estatisticamente significativos dos híbridos entre si e com os parentais, demonstrando que a constituição genética dos híbridos foi originada pela segregação independente das marcas RAPD, sendo quebrado o efeito de ligação em função do tamanho amostral em estudo. Híbridos com maior similaridade genética em relação à tangerina 'Cravo' e laranja 'Pêra' podem ser facilmente selecionados a partir de marcadores RAPD.

RAPD molecular markers were used to evaluate the genetic diversity in a progeny of 94 hybrids between 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis (L.) Osbeck), obtained by controlled pollination. One hundred two random decamer primers were screened, amplifying 640 fragments, 77.2% monomorphics between the parents. The Jaccard coefficient was used to estimate the genetic similarity among the hybrids, the UPGMA method to establish the phenogram (NTSYS 1.7) and the software BOOD to determine the significance of each cluster. The results indicated that 'Pêra' sweet orange heterozygosity degree is higher than 'Cravo' mandarin, with 180 and 126 loci in heterozygose, respectively. It was observed high genetic similarity between the parents, characterized by the low degree of RAPD polymorphism. Significant statistic groups were not established among the hybrids and the parents, showing that the hybrid genetic constitution was originated by independent RAPD markers segregation. Then, the ligation effect was broken because of the sample size. Hybrids with high genetic similarity degree in relation to 'Cravo' mandarin and 'Pêra' sweet orange could be easily selected using RAPD markers.