O objetivo deste estudo foi avaliar o cultivo de células da fração mononuclear da medula óssea e da fração vascular estromal do tecido adiposo de equinos em dois diferentes meios. Cinco cavalos foram submetidos à aspiração da medula óssea do esterno e à coleta de tecido adiposo da região glútea, próxima à inserção da cauda. A fração mononuclear e a fração vascular estromal foram obtidas das amostras e cultivadas em meio DMEM suplementado com soro fetal bovino a 10% ou em meio AIM-V. As culturas foram observadas uma vez por semana com um microscópio de luz invertida, com o intuito de se realizar uma análise qualitativa das características morfológicas das células, bem como do aspecto geral do cultivo celular. As unidades formadoras de colônia (CFU) foram contadas nos dias 5, 15 e 25 do cultivo celular. Durante a primeira semana, foram observadas diferenças entre amostras obtidas de mesma origem mantidas em diferentes meios. O número de colônias foi significativamente maior nas amostras de medula óssea em relação às amostras de tecido adiposo.

The objective of this study was to evaluate the culture of equine bone marrow mononuclear fraction and adipose tissue - derived stromal vascular fraction cells in two different cell culture media. Five adult horses were submitted to bone marrow aspiration from the sternum, and then from the adipose tissue of the gluteal region near the base of the tail. Mononuclear fraction and stromal vascular fraction were isolated from the samples and cultivated in DMEM medium supplemented with 10% fetal bovine serum or in AIM-V medium. The cultures were observed once a week with an inverted microscope, to perform a qualitative analysis of the morphology of the cells as well as the general appearance of the cell culture. Colony-forming units (CFU) were counted on days 5, 15 and 25 of cell culture. During the first week of culture, differences were observed between the samples from the same source maintained in different culture media. The number of colonies was significantly higher in samples of bone marrow in relation to samples of adipose tissue.

Cinco cavalos adultos foram submetidos à coleta de medula óssea do esterno e de tecido adiposo da região glútea. As amostras foram processadas para obtenção da fração mononuclear da medula óssea e fração vascular estromal do tecido adiposo, o número de células obtidas e a viabilidade celular foram determinados. Em seguida, realizou-se o congelamento das amostras em solução contendo 20% de soro fetal bovino e 10% de dimetilsulfóxido. Depois de um mês, realizou-se o descongelamento das amostras e a viabilidade celular foi novamente mensurada. Os resultados revelaram que as técnicas utilizadas tanto para coleta de medula óssea quanto de tecido adiposo em equinos são simples, rápidas e seguras. As metodologias adotadas para o processamento das amostras foram eficientes, obtendo-se aproximadamente 95% de viabilidade celular. Após o descongelamento, a viabilidade média das amostras de células mononucleares da medula óssea foi de 86% e da fração vascular estromal do tecido adiposo de 64%. Frente à importância da terapia celular na clínica médica de equinos, concluiu-se que é necessária a realização de mais estudos, visando padronizar uma técnica de criopreservação que mantenha a integridade das células da fração mononuclear da medula óssea e da fração vascular estromal do tecido adiposo de equinos.

In five adult horses, bone marrow was aspirated from the sternum and adipose tissue extracted from the gluteal region. The samples were processed to obtain the mononuclear fraction of bone marrow and stromal vascular fraction of adipose tissue, and the number of cells obtained and cell viability were determined. Next, the cell samples were frozen in medium containing 20% fetal bovine serum and 10% dimethylsulfoxide. After one month, the cells were thawed and cell viability was again determined. The results revealed that the techniques for collecting both bone marrow and adipose tissue in horses are simple, rapid and safe. The methods used for processing the samples were efficient, yielding about 95% cell viability. After freezing, mean viability of the mononuclear cells of bone marrow was 86%, and 64% for the stromal vascular cells of adipose tissue. In view of the importance of cell therapy in equine clinical medicine, it is concluded that further studies are needed for the standardization of a cryopreservation technique to maintain the integrity for the mononuclear fraction of bone marrow and the stromal vascular fraction of adipose tissue in horses.

A fase perinatal do desenvolvimento constitui um dos períodos de vida mais desafiadores para o sistema imunológico dos potros. O objetivo do presente estudo foi verificar o perfil protéico sérico de parâmetros relacionados à imunidade de equinos jovens no período perinatal, verificando-se a transferência de imunidade passiva. Oito animais desmamados há um dia, formaram o Grupo 1 (G1), enquanto vinte animais desmamados há mais de trinta dias formaram o Grupo 2 (G2). A concentração sérica de proteína total foi determinada por refratometria. Para o fracionamento das proteínas, utilizou-se eletroforese em gel de acrilamida. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de medidas repetidas e ao teste Tukey (p<0,05) para comparação das médias. As concentrações de IgA apresentaram diferença (p<0,05) entre os grupos, porém os valores observados encontravam-se dentro do considerado normal para equinos adultos. Não houve diferença (p>0,05) nas concentrações de IgG. O estabelecimento adequado da imunidade celular ocorre durante a fase neonatal, nos animais que ingerem adequadamente o colostro e o leite. O presente estudo determinou diferenças no perfil protéico sérico de parâmetros relacionados à imunidade de equinos jovens no período imediato ao desmame, comparados com animais desmamados há mais de 30 dias. De acordo com os valores observados, concluiu-se que os animais, mesmo desmamados precocemente, obtiveram transferência adequada de imunidade passiva.

The perinatal phase of foal development is one of the most challenger period for the immune system. The present study has analyzed serum protein profile, considering variables related to immunity in foals at the perinatal phase, verifying passive immunity transfer. The group 1 (G1) contained eight foals evaluated one day after weaning, and group 2 (G2) included twenty foals at more than thirty days after weaning. Total protein concentration was determined by means of refractometry. The concentration of serum proteins was determined through sodium dodecyl sulphatepolyacrylamide gel electrophoresis. Results were submitted to analysis of variance and Tukey test (P<0.05). IgA concentration showed difference (P<0.05) between the two studied groups, however data were within adult healthy horses normal values. IgG didn't show statistical difference (P>0.05). The cellular immunity establishment occurs in the neonatal phase, in foals that suckled colostrum and milk properly. The present study showed differences in serum protein profile, considering variables related to immunity, in foals immediately after weaning comparing to foals at more than 30 days after weaning. According to the observed values, we conclude that foals, even early weaned, showed proper passive immunity tranfer.

Objetivou-se avaliar em equino a influência do exercício progressivo e intenso realizado em esteira de alta velocidade sobre a temperatura de regiões da pele, incluindo face, pescoço e quartela, e do casco, incluindo coroa, parede e sola. Utilizaram-se cinco equinos Puro Sangue Árabes, desferrados, com idade média de 8±0,7 anos, sendo duas fêmeas e três machos, com peso corpóreo médio de 420±10kg. A intensidade de esforço foi determinada por meio da quantificação do lactato sanguíneo. As temperaturas foram determinadas com o auxílio de termógrafo, antes, durante e após o exercício. Realizou-se análise de variância seguida pelo teste de Tukey, sendo P≤0,05. A lactacidemia aumentou, principalmente nas velocidades intensas. Houve redução das temperaturas das regiões da face, pescoço e quartela após o exercício e diminuição das temperaturas da parede, coroa e sola do casco durante o exercício, enquanto a temperatura da manta de rolamento da esteira não se alterou em nenhum momento. Constatou-se indiretamente que a perfusão sanguínea do casco diminuiu durante o teste de esforço tanto em sua fase aeróbia como na anaeróbia. Nenhuma das intensidades de esforço foi capaz de alterar a temperatura da manta de rolamento da esteira. A temperatura do casco diminuída como decorrência fisiológica do esforço físico imposto, retornou aos valores normais após o término do exercício.

The objective of the study was to evaluate the influence of intense and progressive exercise performed on a high speed treadmill on the temperature of the skin of the face, neck, pastern, and hoof, including the crown, sole and wall. Five unshod Arabian horses were used, with a mean age of 8±0.7 years, two females and three males, average body weight of 420±10kg. The exercise intensity was determined by quantification of blood lactate concentrations. Temperatures were determined with thermography before, during and after exercise. The effect of exercise on the temperature of the anatomic structures studied was evaluated by ANOVA for repeated measures followed by Tukey test, with P≤0.05. Blood lactate increased, especially at more intense speeds. There were decreases in temperature of the regions of the face, neck and pastern after the exercise, of the wall, crown and sole of the hoof during the effort. The temperature of the moving belt blanket bearing did not change at any time throughout the test exercise. It was found, indirectly, that the blood perfusion in the hoof decreased both during the aerobic and anaerobic phase of the exercise test. None of the effort intensities was able to change the temperature of treadmill moving belt. The temperature of the hoof reduced as a physiologic consequence of the exercise and returned to normal values after the end of the test.

Com o objetivo de verificar o efeito da adição de níveis crescentes de óleo no concentrado sobre a atividade plasmática das enzimas creatina quinase (CK), aspartato aminotransferase (AST) e lactato desidrogenase (LDH) como indicativo de metabolismo energético, foram fornecidas dietas experimentais compostas de cinco níveis de óleo (controle, 6, 12, 18 e 24% do concentrado). Utilizaram-se 20 equinos da raça Árabe, peso médio de 400 kg, submetidos a prova de enduro de 80 km em esteira rolante. O enduro foi dividido em quatro anéis de 20 km, com duração média de 1 hora e dez minutos. A adição de óleo e a distância percorrida tiveram efeitos sobre as variáveis AST, CK e LDH, que apresentaram as respectivas expressões: AST (7,045-0,2292x+0,007991x2+0,008517z- 0,0003282xz), CK (8,06-,07020x+0,05546x2-0,001262x3+0,01204z+0,0006207xz) e LDH (6,624-0,3522x+0,03448x2-0,0008382x3+0,02401z-0,0007489xz) . O óleo é uma importante e bem aproveitada fonte de energia para equinos em exercício, pois sua adição na dieta de animais submetidos a prova de enduro promoveu alteração metabólica que favorece a produção de energia. O metabolismo animal poupou suas reservas energéticas oriundas da glicose, favorecendo a utilização do óleo. A menor atividade plasmática das enzimas AST, CK e LDH com a adição de óleo nas dietas indica direcionamento do metabolismo energético para a β-oxidação. Como apresentam várias isoenzimas, as enzimas estudadas atuam amplamente no metabolismo energético, favorecendo a constante reposição de ATP ao longo do exercício.

The objective of this study was to verify the effect of increasing soybean oil addition levels in the concentrate, on the enzymatic activity CK (Creatine Kinase), LDH (Lactate Dehydrogenase), AST (Astarte aminostrafase), as an indication of energetic metabolism. Compond experimental diets were given with five oil levels (control, 6, 12, 18 and 24% concentrate). Twenty Arabian equines, average weight 400 kg were submitted to a 80 km endurance race on a treadmill. The endurance was divided into four 20 km rings with an average duration of one hour and 10 minutes. A significant effect of oil addition and the covered distance was observed on the variables AST, CK, LDH and they present the respective expressions AST and (7,045-0,2292x+0,007991x2+ 0,008517z- 0,0003282xz) CKand(8,06-,07020x+0,05546x2-0,001262x3+0,01204z+0,0006207xz) , LDH and (6,624-0,3522x+0,03448x2-0,0008382x3+0,02401z-0,0007489xz) . The oil is an important and well-used energy source for horses in exercise, because its addition to the diet of animals submitted to endurance test cause metabolic alteration that favored energy production. The animal metabolism save its energy reserves derived from glucose and favored the use of the oil. The smaller plasmatic activity of the AST, CK and LDH, enzymes with the addition of oil to the diets indicated directioning of the energy metabolism to β-oxidation. As the enzymes show several isoenzymes, it was concluded that the enzymes studied act widely on the energetic metabolism, favoring constant ATP reposition during all exercise.

Este estudo objetivou determinar as adaptações do músculo Gluteus medius de cavalos da raça Brasileiro de Hipismo (BH), que participaram de atividades físicas leves por 10 meses. Foram utilizados 11 eqüinos, machos, da raça BH e com idade de 4 anos, provenientes do "Batalhão Nove de Julho" da Polícia Militar do Estado de São (PM-SP). Realizou-se a biópsia muscular percutânea nos animais inativos e, após participarem das atividades de ronda e policiamento desenvolvido pela PM-SP por 10 meses, foram retirados fragmentos do músculo Gluteus medius nas profundidades de 20mm e 60mm. Para a determinação dos tipos de fibra muscular, foram feitas análises histoquímicas por meio das técnicas de adenosina trifosfatase miofibrilar (mATPase) e nicotinamida adenina dinucleotídeo tetrazólio redutase (NADH-TR). Na análise morfométrica das fibras, calculou-se a área de secção transversal (AST), a freqüência média (F) e a área de secção transversal relativa (ASTR). Após o período de atividade física, as fibras tipo IIA apresentaram aumento da F e da ASTR nas duas profundidades. As fibras tipo I apresentaram diminuição da F na profundidade de 60mm e as fibras tipo IIX não sofreram alteração da F nas duas profundidades. A ASTR das fibras tipo I e IIX não apresentaram alteração após os 10 meses. A atividade física de baixa intensidade produziu adaptações significativas no músculo Gluteus medius de cavalos da raça BH, incluindo mudança nas propriedades metabólicas e contráteis evidenciadas pelo aumento da área ocupada pelas fibras tipo IIA, nas duas profundidades de biópsia.

This study aimed to determine the changes in the Gluteus medius of 4 year-old Brasileiro de Hipismo (BH) horses submitted to light physical activity for 10 months. The study involved 11 horses from the "Nove de Julho" Battalion of the Military Police of São Paulo State (PM-SP). Percutaneous muscle biopsy was performed in horses at maintenance and in those that had participated in routine police work for 10 months with the PM-SP. Fragments of the left Gluteus medius muscle was removed at depths of 20mm and 60mm. To determine the fiber types, the histochemical analyses were performed for myofibrillar adenosine triphosphatase (mATPase) and nicotinamide adenine dinucleotide tetrazolium reductase (NADH-TR). The morphometry of the fibers was performed by calculating the cross sectional area (CSA), relative frequency distribution (F) and relative cross-sectional area (RCSA). After the period of physical activity, type IIA fibers showed an increase in F and RCSA at both depths. The type I fibers showed a decrease in F at a depth of 60mm and the type IIX fibers showed no change in F at the two depths. With regard to the results for RCSA, type I and IIX fibers also did not show alterations after 10 months of light physical activity. Low intensity physical activity produced significant adaptations in the Gluteus medius muscle of horses of the BH breed, including changes in metabolic and contractile properties as evidenced by the increase in the area occupied by type IIA fibers at both depths of the biopsy.

Estudaram-se as variáveis eritrométricas, leucométricas e a concentração de proteína total (PT) de éguas gestantes das raças Brasileiro de Hipismo (BH) e Bretão. Utilizaram-se 175 éguas sadias, com 3 a 13 anos de idade. Dentre as éguas utilizadas, 89 foram da raça BH, divididas em 14 não-prenhes e 75 prenhes, e 86 éguas da raça Bretão divididas em 11 não-prenhes e 75 prenhes. As éguas foram subdivididas em quatro grupos por raça: grupo controle (éguas não-prenhes, n=14 para BH e n=11 para Bretão); grupo I (primeiro período de gestação, 25-110 dias, n=25 para BH e Bretão), grupo II (segundo período de gestação, 111-210 dias, n=25 para BH e Bretão); e grupo III (terceiro período de gestação, 211-340 dias, n=25 para BH e Bretão). Os valores médios de cada variável eritrométrica, leucométrica e de proteína total foram obtidos para cada raça e, posteriormente, realizou-se comparação entre as mesmas. O número de hemácias (He), volume globular (VG) e teor de hemoglobina (Hb) aumentaram no segundo período de gestação e diminuíram no último período tanto para a raça BH, como para a raça Bretão. Além disso, essas mesmas variáveis apresentaram diferença estatística significativa tanto nas éguas não-prenhas como nas prenhes durante os três períodos gestacionais. Os valores médios obtidos de leucócitos e neutrófilos segmentados aumentaram a partir do segundo período de gestação para as duas raças estudadas.

Erythrocyte and leukocyte parameters and total protein (TP) of Brasileiro de Hipismo (BH) and Breton mares were studied during pregnancy. A total of 175 healthy mares, varying from 3 to 13 years old were used. Among the animals, 89 were BH mares (14 non pregnant and 75 pregnant) and 86 Breton mares (11 non pregnant and 75 pregnant). The mares were divided into four groups for each breed: control group (non pregnant mares). group 1 (first period of pregnancy, 25-110 days, n=25), group 2 (second period of pregnancy, 111-210 days, n=25) and group 3 (third period of pregnancy, 211-340 days, n=25). The values for erythrocyte, leukocyte were compared with the obtained total protein. Red blood cells count (RBC), packed cell volume (PCV) and haemoglobin concentration (Hb) increased in the second period of pregnancy and decreased in the last period in both the BH and Breton breed, furthermore these same variables were found to significantly higher in the BH breed for non pregnant and pregnant mares during all three gestational periods. The numbers of total leucocytes and segmented neutrophils increased after the second period in both breeds studied.

O presente estudo teve como objetivo comparar os níveis plasmáticos de glicose e cortisol de um grupo de eqüinos atletas submetidos ao esforço de longa duração (enduro eqüestre) em distâncias de 30 e 60km, com velocidades médias de 10 e 15km h-1, respectivamente. Os animais foram aleatoriamente separados em dois grupos, sendo que a um deles foi administrada, por via oral, uma pasta eletrolítica hipertônica antes, durante e após as referidas provas. O outro grupo foi usado como controle. Os resultados das concentrações de cortisol revelaram um aumento significativo, no primeiro momento, em que a intensidade do esforço era maior (15km/h), ou com a continuação deste (30km de distância), no segundo momento, para todos os grupos. Os resultados referentes à concentração de glicose permaneceram constantes durante a prova de 30km; entretanto, nos primeiros 20km da prova de 60km, tais resultados revelaram um aumento significativo no grupo controle, retornando a valores basais no momento subseqüente. A reposição eletrolítica tem a sua importância na manutenção do equilíbrio hidroeletrolítico e ácido básico e, no presente estudo, pode ter contribuído para a manutenção da concentração média de glicose plasmática.

This study was aimed at comparing cortisol and glucose plasmatic levels in a group of trained horses submitted to 30 and 60km endurance exercises, at the average speed of 10 and 15km h-1, respectively. The horses were randomly divided in two groups, one treated, orally, with a hypertonic electrolyte paste before, during and after the tasks and the other used as control. Cortisol data revealed significant increase in the first moment when the intensity of the exercise was higher (15km/h) or with the prolongation of it (30km long), in the second moment to all groups. Glucose data remained constant during 30km ride; however after 20km distance, in 60km ride, it revealed a significant increase in control group, returning to basal levels in the subsequent moment. Electrolyte replenishment has its importance in the maintenance of the hidroelectrolyte and acid-base status and, in this study, may have contributed to the homeostasis of glucose levels.

O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos da suplementação oral com creatina sobre respostas fisiológicas ao treinamento aeróbico. Doze cavalos da raça Puro Sangue Árabe foram submetidos a treinamento aeróbico por 90 dias, com ou sem suplementação com creatina, que consistia da administração diária de 75g de monoidrato de creatina misturada à ração durante os 90 dias de treinamento. O treinamento físico foi conduzido exclusivamente em esteira rolante de alto desempenho sendo a intensidade do treinamento estabelecida em 80% da velocidade obtida através da V4 (velocidade na qual a concentração sangüínea de lactato atinge 4mmol L-1) determinada mensalmente para cada animal. Para o estabelecimento da V4 individual foi empregado um teste físico de esforço crescente em que, após um período de aquecimento de 4min a 4m s-1, a velocidade era aumentada à cada intervalo de dois minutos, para 6, 8 e 10m s-1. As amostras sangüíneas foram coletadas 15s antes do témino de cada intervalo para a determinação do lactato, hematócrito, hemoglobina e eritrócitos. Os resultados demonstraram um aumento significativo (P<0,05) da V4 dos animais que receberam creatina por 60 e 90 dias quando comparados, no mesmo período, com os animais que não receberam a suplementação. As outras variáveis hematológicas não apresentaram alterações. É possível sugerir que a suplementação prolongada com creatina pode promover efeitos benéficos no desempenho atlético de eqüinos.

The aim of the present study was to investigate the effect of long-term oral supplementation of creatine on the physiological responses to aerobic training. Twelve purebred Arabian horses were submitted to aerobic training for 90 days, with and without creatine supplementation which consisted of the daily administration of 75g of creatine monohydrate mixed into the ration for 90 days of training. Physical conditioning was conducted on a high performance treadmill and training intensity was stipulated by calculating the V4 (velocity at which blood lactate reaches 4mmol L-1) determined monthly for each animal. The individual intensity of physical force at 80% of aerobic threshold was established. An incremental exercise test was used to set the individual V4. After a warm up period of 4 min at 4m s-1, the speed was increased at 2min intervals to 6, 8 and 10m s-1. The blood samples were collected 15s before the end of each step to determine the concentration of lactate, packed cell volume, hemoglobin and red cell values. The results demonstrated a significant increase (P<0.05) in V4 in the groups that received creatine supplementation for 60 days or more when compared to the animals without creatine supplememntation. The other hematological variables were similar to all groups. The results showed that the prolonged creatine supplementation may have a beneficial al effect on the equine athletic performance.

Colheu-se sangue de 13 eqüinos competindo na prova de Fundo do Concurso Completo de Equitação, categoria internacional três estrelas, e dosou-se lactato sangüíneo na manhã antes da prova, antes e imediatamente depois das fases B e D e 10 minutos após a fase D. Foi observado aumento significativo nas concentrações de lactato apenas após o término da fase D, demonstrando que os animais foram submetidos a um grande esforço físico, com desenvolvimento de acidose metabólica decorrente do acúmulo de lactato. Houve diminuição significativa dos valores dez minutos após o término do cross-country, exceto para o eqüino de número 12, único animal a completar o percurso dentro do tempo estipulado, o qual apresentou sinais clínicos de exaustão.

Blood samples were collected from thirteen horses competing in the resistance phase of an advanced 3-day-event. Blood lactate was determined in the morning before competition, before and immediately after phases B and D, and 10 minutes after phase D. Significant increase in blood lactate was observed only after phase D, showing that animals were submitted to a great physical effort with development of metabolic acidosis due to lactate accumulation. There was significant decrease in blood lactate levels 10 minutes after cross country except horse 12, the only animal to finish phase D inside the given time, but showed clinical signs of exhaustion.

A infecção ocasionada pelo Rhodococcus equi é responsável por elevadas taxas de mortalidade e grandes perdas econômicas na equideocultura. Diante da importância dessa enfermidade, este trabalho objetivou a padronização de um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA teste) para a detecção de anticorpos anti-Rhodococcus equi em potros (n=16) antes e após a ingestão de colostro de mães vacinadas. Nesse ensaio, foram utilizados dois tipos de antígenos de Rhodococcus equi, o APTX (proteína semi-purificada VapA, extraído pelo detergente Triton X e precipitado em acetona), e o comercial¹. Os resultados da titulação em bloco determinou a concentração ótima dos antígenos em 2,0µg/ml e a diluição única do soro 1:200 para soros de referências negativo, positivo e soros testes. Anticorpos de classe IgG anti-R.equi foram detectados nos potros após a ingestão do colostro até 150 dias de experimento. O antígeno comercial detectou títulos de anticorpos maiores e de maior persistência que o APTX. No entanto, para ambos os antígenos utilizados, o ELISA-teste demonstrou elevada sensibilidade.

The infection caused by Rhodococcus equi (R.equi) is responsible for large economic damage, losses and high mortality rates. Due to the importance of this disease, the aim of this study was to the standarize the enzyme linked immunosorbent essay (ELISA test) for Rhodococcus equi antibodies detection in foals (n=16) before and after colostrum ingestion in vaccinated mares. Two antigens of Rhodococcus equi, APTX and a commercial one were used. The results of block titulation determinated optimal concentration of antigens on 2.0µg/ml and the diluition of serum 1:200 to serum of negative and positive reference and serum tests. IgG antibodies anti-R.equi were detected in foals 150 days after colostrum ingestion. The comercial antigen detected higher and more persistent antibodies title when compared to APTX antigen. Both antigens that had used the ELISA-test, demonstrated high sensitivity.