Resumo Estudos microbiológicos da sanidade de psitacídeos que serão reintroduzidos são importantes para avaliar se esses animais atuam como portadores de agentes patogênicos para outros animais e humanos. A espectrometria de massa por ionização/dessorção de matriz assistida por laser/tempo de vôo (MALDI-TOF MS) é um método mais rápido e preciso para identificar bactérias na comparação com métodos convencionais de microbiologia. O objetivo deste estudo foi avaliar o estado de saúde de psitacídeos cativos, identificando bactérias Gram-negativas da microbiota fecal por MALDI -TOF MS. Os resultados indicaram alta frequência de bactérias Gram-negativas nas fezes (96,5%), principalmente da família Enterobacteriaceae (88,7%). As mais prevalentes foram Escherichia coli (39,0%), Proteus vulgaris (12,2%), Klebsiella spp. (12,1%) e Raoultella ornithinolytica (8,7%). Proteus hauseri, Citrobacter spp., Morganella morgannii, Providencia rettgeri, Enterobacter spp. e Escherichia hermannii foram isolados com menor frequência. Todos esses agentes são potencialmente patogênicos para os papagaios e podem causar infecções sistêmicas em outros animais e seres humanos. Esses achados reforçam que o MALDI- TOF MS é um método rápido e preciso de identificação do microrganismo e avaliação do estado de saúde dos psitacídeos, fornecendo dados relevantes para auxiliar na tomada de decisões sobre os protocolos sanitários em centros de triagem de animais selvagens e sobre a possibilidade de reintrodução futura.

Abstract Microbiological studies of the sanitary and health status of psittacine birds that will be reintroduced is important in evaluating whether these animals act as carriers of pathogenic agents to other animals and humans. Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a faster and more accurate method to identify bacteria than conventional microbiology methods. The aim of this study was to evaluate the health status of psittacines housed in captivity, by assessment of Gram-negative bacteria from fecal microbiota through MALDI- TOF MS identification. The results indicate high frequency of Gram-negative bacteria in feces (96.5%), especially from the Enterobacteriaceae family (88.7%). The most prevalent bacteria were Escherichia coli (39.0%), Proteus vulgaris (12.2%), Klebsiella spp. (12.1%) and Raoultella ornithinolytica (8.7%). Proteus hauseri, Citrobacter spp., Morganella morgannii, Providencia rettgeri, Enterobacter spp. and Escherichia hermannii were isolated with lower frequency. . All these agents are potentially pathogenic for parrots and can cause systemic infections in other animals and humans. These findings reinforce that MALDI- TOF MS proved to be a rapid and accurate method of identification of the microorganism and evaluation of the health status of psittacines, providing relevant data to assist decision-making regarding the sanitary protocols in wildlife centers, and possible future reintroduction of wild birds.

ABSTRACT Raoultella ornithinolytica is a gram-negative aerobic bacterium belonging to Enterobacteriaceae family, an emerging pathogen that causes several pathogenic conditions in man, with little veterinary importance; however, its identification is underestimated by conventional laboratory techniques. The present study reports the identification of R. ornithinolytica in Tinamus solitaries, during a routine sanitary evaluation of aerobic enterobacteria in cloacal microbiota of birds belonging to the Güira Oga Center, Puerto Iguazu, Argentina. The sample was preliminary classified as Klebsiella spp.; however, after the use of the MALDI-TOF MS technique it was identified as R. ornithinolytica. The sample was submitted to an antimicrobial susceptibility test, where it showed a similar pattern profile as reported in the literature, with resistance to ampicillin and other β-lactam antibiotics. It is possible that Raoultella spp are more common in birds as it is reported. Therefore, review studies on bacteria collections of avian origin, as well as cases with confirmation of Klebsiella, should be deeply evaluated in laboratorial routine, mainly due to the pathogenic potential of R. ornithinolytica for Poultry, as well as for public health.

RESUMO Os frutanos do tipo inulina são oligossacarídeos que favorecem a multiplicação de determinados gêneros bacterianos no intestino, promovendo um efeito prebiótico. Este trabalho avaliou o efeito da inulina extraída de raízes de yacon (Smallanthus sonchifolius) sobre a colonização intestinal de frangos de corte experimentalmente infectados por Salmonella Enteritidis. Sessenta frangos de corte com um dia de idade foram divididos em três grupos de tratamento, com duas repetições, criados até 21 dias. As aves do grupo yacon receberam 100mg de inulina/dia, via oral, por três dias consecutivos. No sétimo dia de vida, as aves tratadas e o controle positivo foram desafiados pela via oral com uma cultura de S. Enteritidis. Não foram observadas diferenças de desempenho zootécnico entre os grupos. O índice de infectividade das aves suplementadas com yacon foi menor até o sexto dia após o desafio, mas, ao término do experimento, foi superior ao controle positivo. Os dados deste trabalho demonstram que o uso da inulina nos três primeiros dias de vida promoveu uma redução da colonização intestinal dos frangos por Salmonella Enteritidis na primeira semana após o desafio. Novos estudos são necessários para determinar a dose e o tempo de tratamento ideal para um efeito protetor de maior duração.

ABSTRACT The fructan inulin-type oligosaccharides favor the multiplication of some bacterial genera in the intestine, promoting a prebiotic effect. This study evaluated the effect of inulin extracted from yacon roots (Smallanthus sonchifolius) on intestinal colonization of broilers experimentally infected with Salmonella Enteritidis. Sixty-one day old chicks were grouped into three treatments, with two replicates, and reared until 21 days. Birds in the yacon group received 100mg of inulin/day orally for three consecutive days. On the seventh day of life the treated birds and the positive control were challenged orally with a culture of S. Enteritidis. There were no differences between groups in live performance. The infectivity index of the chicks supplemented with yacon was lower until the sixth day after the challenge, but at the end of the experiment it was higher than the positive control. Data from this study show that the use of inulin during the first 3 days of life caused a reduction of intestinal colonization of chickens by Salmonella Enteritidis in the first week after challenge. Further studies are needed to determine the dose and the ideal time of treatment necessary for a longer protective effect.

This study was conducted to determine the presence of enterobacteria in the eggs of ostriches reared on a farm with a history of reproductive failure. Ninety samples from twenty eggs were submitted to bacteriological tests. The results showed Enterobacteria growth in 100% of the eggs. The microorganisms isolated were Hafnia alvei in 50% (10/20), Serratia spp. in 20% (4/20), Escherichia coli in 15% (3/20), and Citrobacter freundii in 15% (3/20). All eggs presented poor eggshell quality, which favored enterobacteria contamination. Hafnia alvei was present only in the internal egg structures (albumen and yolk sac), suggesting the possibility of vertical infection.

RESUMO Escherichia coli não é um componente da microbiota entérica de psitacídeos e a presença da bactéria nestas aves está associada à ocorrência de diarréias, doenças respiratórias e septicemias. Este trabalho avaliou a colonização intestinal por Escherichia coli em psitacídeos criados sob diferentes condições de biossegurança. Foram analisados 85 “swabs” de cloaca, através de exames bacteriológicos (cultura, isolamento e identificação bioquímica). Os resultados mostraram diferenças significativas na colonização intestinal por E. coli em psitacídeos, com 20% (10/50) de aves positivas no criatório conservacionista e 80% (28/35) no criatório recreacionista. Os dados evidenciam a importância da biossegurança, uma vez que o estado sanitário das aves alojadas em cativeiro pode ser influenciado pela finalidade do criatório.

ABSTRACT Escherichia coli is not considered a member of psittacine gut flora and the presence of the bacteria has been associated with enteric disorders, respiratory diseases and septicaemia. This survey determined the gut colonization by Escherichia coli on psittacine birds, raised under different biosecurity levels. The 85 cloacal swabs were examined by bacteriologic cultural methods. The results showed significant differences on E. coli gut colonization, with 20% (10/50) positive psittacine birds on conservationist farms and 80% (28/35) in a recreational zoo. This data suggests the importance of biosecurity level on the sanitary condition, sinced it can be influenced by aviary activity.

ABSTRACT The aim of this work was to verify the patogenicity of Clostridium perfringens type-A strains, carrying the CPB-2 gene, that codify the beta-2 toxin production. The rabbit ligated ileal loop model was used, inoculating culture suspensions of C. perfringens type-A CPB-2 carrier strains or its filtrates. The dilatation observed in 19 out of 24 loops receiving innocula from CPB-2 positive strains and in only one out of 12 loops treated with CPB-2 negative innocula constituted a significant statistical difference. There was no statistical difference in the dilatation of loops between using filtrates or bacterial suspensions. In the loops treated with suspensions of CPB-2 positive strains cultures, severe lesions were observed, and for those inoculated with filtrates of the same cultures less severe alterations were observed. In the loops inoculated with culture suspensions or filtrates from a CPB-2 negative strain and in those treated with sterile BHI broth, no histological changes were observed. The C. perfringens biotype-A strains carrying the CPB-2 gene, showed its virulence when inoculated into the rabbit ileum. typeA type A CPB2 CPB 2 CPB- gene beta2 beta beta- production used C 1 broth biotypeA biotype ileum

RESUMO O presente trabalho teve por objetivo verificar a patogenicidade de cultivos de amostras de Clostridium perfringens tipo A, portadoras do gene CPB-2 codificador da toxina beta-2. Utilizou-se o modelo de alças intestinais ligadas em coelhos, inoculadas com suspensão e filtrado de cultivos de amostras de C. perfringens tipo A, portadoras e não portadoras do gene CPB-2. Comparou-se os efeitos da inoculação das suspensões de culturas com os induzidos pelos filtrados destas suspensões. Obteve-se resultado estatisticamente significante quanto à distensão das alças, a qual foi observada em 19 das 24 alças testadas com inóculos procedentes de amostras CPB-2 positivas e, em apenas uma das 12 testadas com inóculos obtidos de amostra CPB-2 negativa. Não houve diferença estatisticamente significante entre a utilização das suspensões de culturas ou de seus filtrados, no que diz respeito à distensão das alças intestinais devido à exsudação de fluido. O exame histológico dos fragmentos de íleos inoculados com suspensão e filtrado de amostras CPB-2 positivas exibiram lesões acentuadas. Os segmentos inoculados com suspensão e filtrado de amostra CPB-2 negativa e caldo BHI estéril não exibiram alterações. As cepas de C. perfringens tipo A, portadoras do gene codificador da toxina beta-2, demonstraram sua virulência quando inoculadas em íleo de coelho. A CPB2 CPB 2 CPB- beta2. beta2 beta 2. beta-2 Utilizouse Utilizou se coelhos C CPB2. Comparouse Comparou Obtevese Obteve 1 fluido acentuadas alterações beta2, 2, coelho beta-