ABSTRACT Purpose: This study aimed to assess grating visual acuity and functional vision in children with congenital Zika syndrome. Methods: Initial and final grating visual acuity was measured using Teller acuity cards. Cerebral vision impairment standardized tests were used to assess functional vision. Patients were referred to the early visual intervention program for visually disabled children. Neuroimaging was performed. Results: In this study, 10 children were included with an age range of 1-37 months. Eight patients presented with macular atrophic scars. Neuroimaging revealed microcephaly and cerebral abnormalities in all patients. Low vision and cerebral vision impairment characteristics were observed in all children. The final grating visual acuity in this group varied from 3.00 to 0.81 logMAR. Conclusions: The grating visual acuity test revealed low vision in all children with congenital Zika syndrome. Functional vision evaluation revealed cerebral vision impairment characteristics in all patients, who were referred to the early visual intervention program. Visual acuity improved in six children. Purpose syndrome Methods cards performed Results 1 137 37 1-3 months scars 300 3 00 3.0 081 0 81 0.8 logMAR Conclusions 13 1- 30 3. 08 8 0.

RESUMO A ascite é uma condição patológica que se caracteriza pelo extravasamento do líquido dos vasos sanguíneos e por seu acúmulo na cavidade abdominal provocado por uma somatória de fatores. É considerada uma síndrome de caráter multifatorial e, uma vez desencadeado o processo ascítico, esse se torna, na maioria dos casos, irreversível. O objetivo deste trabalho foi relatar a ocorrência dessa síndrome em machos e fêmeas reprodutores de rã-touro (Lithobates catesbeianus), alimentados com ração comercial para peixes, com 40% de proteína bruta, durante três anos e já sendo observada má formação de fígado, por falta de deposição proteica, em animais adultos da mesma desova. A cultura do líquido ascítico demonstrou ausência de crescimento bacteriano. Na histopatologia, observou-se, para ambos os sexos, nos rins, grande número de estruturas tubulares com material fortemente eosinofílico e hialino, sugerindo coloide, tanto na região cortical como na medular. Visualizaram-se também granulomas em vários estágios de desenvolvimento, muitos apresentando material necrótico central. Ainda se pôde observar que os aparelhos renais, os glomérulos, em sua maioria, estavam hipoplásicos e com aumento do espaço de Bowman, e muitos hialinizados ou hemorrágicos; além de calcificação distrófica no parênquima e nos dos túbulos, havia material fibrinoide no seu interior. No fígado, pôde-se ver grande quantidade de melanomacrófagos no parênquima e focos de hepatite monolinfocitária e acentuada rarefação citoplasmática, assim como vários hepatócitos com núcleo em picnose e células em necrose e dissociação das trabéculas hepáticas. A causa da ascite pode ser devido às lesões observadas nesses órgãos.

ABSTRACT Ascites is a pathology characterized by the extravasation of fluid from blood vessels and its accumulation in the abdominal cavity, caused by several associated factors. In this paper, we report the occurrence of this syndrome in breeding male and female Bullfrogs fed a commercial fish feed with 40% crude protein. Liver malformation was already observed due to lack of protein deposition in adult animals from the same spawning. The culture of ascitic fluid showed absence of bacterial growth. Kidney histopathology showed, in both sexes, a large number of tubular structures with strongly eosinophilic hyaline material suggesting colloid growth in both the cortical region and spinal cord. The analysis also revealed granulomas in various stages of development, many showing central necrotic material. The kidneys, glomerular, were mostly hypoplastic, with enlarged Bowman space, and many were hyalinized or hemorrhagic; the parenchyma showed dystrophic calcification, and many tubules containing fibrinoid material. The liver displayed a large amount of melanomacrophages in the parenchyma and foci of mono-lymphocytic hepatitis and marked cytoplasmic rarefaction, as well as several hepatocytes with pyknotic nuclei and necrotic cells and dissociation of the hepatic trabeculae. Ascites may be caused by the lesions observed in these organs.

Sabendo-se que as fezes são uma importante via de eliminação de agentes virais pelos animais portadores e que, por estarem na água, os agentes patogênicos podem se propagar mais rapidamente, objetivou-se a pesquisa de vírus em conteúdo intestinal de rãs-touro (Lithobates catesbeianus) de cinco ranários comerciais na região do Vale do Paraíba, no estado de São Paulo, pela técnica de microscopia eletrônica de transmissão. As famílias Coronaviridae, Paramixoviridae, Parvoviridae e Herpesviridae foram observadas e fotografadas. Este trabalho ressalta a importância da adoção de medidas sanitárias nas criações, além da confirmação de que a observação de fezes pela microscopia eletrônica de transmissão é uma eficiente ferramenta de diagnóstico rápido para agentes virais.

Feces are an important viral agent elimination route for infected carrier animals and in aquatic organisms these pathogenic agents can very rapidly propagate due to the habitation environment. The objective of this work is to track viral particles in the intestinal contents of bullfrogs (Lithobates catesbeianus) from five commercial frog farms in the region of Vale do Paraíba, in the State of São Paulo, Brazil, using negative contrast transmission electron microscopy (TEM). The Coronaviridae, Paramyxoviridae, Parvoviridae and Herpesviridae families were observed and photographed in specimens. This work emphasizes the importance of adopting sanitary measures in commercial farms and confirms that observing feces by TEM is an efficient and rapid diagnostic tool for detecting viral agents.

In this study thirty shrimp samples from commercial marine shrimp (L. vannamei) farms of southern region of Brazil were obtained. Hepatopancreas and shell scrapings fragments collected in these animals were processed by transmission electron microscopy using negative staining (rapid preparation), immunoelectron microscopy and immunocytochemistry (immunolabelling with colloidal gold particles) techniques. On the transmission electron microscopy a great number of white spot virus particles, ovoid or bacilliform-to-ellipsoid, measured 230-290 nm in length and 80-160 nm in diameter with intra-nuclear projections were visualized by the negative staining technique in 27 (90%) out of 30 samples examined. Using immunoelectron microscopy technique, the anti-VP 664 serum agllutinated a large number of particles formed by antigen-antibody interaction. In the immunocytochemistry technique, the antigen-antibody reaction was styrongly marked by the particles of colloidal gold over the virus. Notably, this is the first report, to our knowledge, describing use of these microscopy techniques to study Brazilian L. vannamei marine shrimp samples; moreover, this methodology also appears to be a viable complementary tool for diagnosing the presence of the white spot virus within shrimp tissues. Importantly, these are the first photoelectron micrographs of the WSSV in Brazil.

Se obtuvieron para el estudio 30 muestras de camarones marinos comerciales (L. vannamei) de las granjas de la región sur de Brasil. Fueron procesados fragmentos de hepatopáncreas y raspados internos del cefalotórax recogidos en estos animales por microscopía electrónica de transmisión con tinción negativa (preparación rápida), inmunomicroscopía y técnicas de inmunocitoquímica (inmunomarcación con partículas de oro coloidal). En la microscopía electrónica de transmisión de un gran número de partículas de virus de la mancha blanca, ovoide o elipsoidal a baciliformes, medían 230-290 nm de longitud y 80-160 nm de diámetro. En 27 (90%) de las 30 muestras examinadas intra-nuclear proyecciones se visualizaron mediante la técnica de tinción negativa. Utilizando una técnica de inmunomicroscopía electrónica, el anti-suero VP 664 reunió a un gran número de partículas formadas por la interacción antígeno-anticuerpo. En la técnica de inmunocitoquímica, la reacción antígeno-anticuerpo fue fuertemente reforzada por las partículas de oro coloidal en los virus. En particular, en Brasil este es el primer informe, a nuestro entender, que describe el uso de estas técnicas de microscopía en muestras de camarón marino L. vanamei. Además, esta metodología también parece ser una herramienta complementaria viable para diagnosticar la presencia del virus de la mancha blanca en tejidos de camarón. Es importante destacar que estas son las primeras fotos en microscopia electrónica del WSSV obtenidas en Brasil.

RESUMO Estudou-se o comportamento bioquímico do fígado de rãs-touro (Rana catesbeiana) sadias e doentes provenientes de criações comerciais, no aspecto de quantificação de proteínas totais e fenóis, atividade enzimática da peroxidase e polifenoloxidase, glutationa na relação glutationa oxidada (GSH) e glutationa reduzida (GSSG) e concentração de glicogênio. Os animais sadios apresentaram sempre maior concentração de proteínas totais, menor concentração de fenóis, menor atividade enzimática, maior número na relação glutationa GSH/GSSG e maior concentração de glicogênio, enquanto que os animais doentes apresentaram resultados inversos. As lesões hepáticas caracterizaram-se por deficiência e degeneração protéica e hepatite. Também ficou caracterizada a presença de estresse oxidativo nas células hepáticas decorrentes destas lesões pela relação GSH/GSSG que foi baixa nos animais doentes. Estudouse Estudou se rãstouro rãs touro Rana catesbeiana comerciais fenóis polifenoloxidase GSH (GSH GSSG (GSSG glicogênio GSHGSSG inversos caracterizaramse caracterizaram hepatite

ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the biochemical aspects of the liver of both healthy and diseased bullfrogs (Rana catesbeiana), from commercial froggeries. The concentration of total proteins and phenols, the activity of peroxidase and polyphenoloxidase enzymes, obtained through spectrophotometry, glutathione, as the ratio of oxidised glutathione (GSH) to reduced glutathione (GSSG), and glycogen concentration were considered. The healthy animals always showed a higher concentration of total proteins, a lower concentration of phenols, a lower enzymatic activity, higher values in the ratio GSH/GSSG glutathione, and a higher concentration of glycogen, while the diseased animals showed opposite values. The hepatic lesions were characterised by proteic deficiency and degeneration, and hepatitis. The presence of an oxidative stress was also found in the hepatic cells from the lesions, with low values of the ratio GSH/ GSSG glutathione in the diseased animals. Rana catesbeiana, catesbeiana , catesbeiana) froggeries phenols enzymes spectrophotometry GSH (GSH GSSG, (GSSG) considered GSHGSSG degeneration hepatitis (GSSG

RESUMO Relata-se achados de inspeção post-morten de rãs-touro, provenientes de abatedouros comerciais fiscalizados nas regiões de Campinas e Vale do Paraíba, Estado de São Paulo, entre os anos de 1998 e 2002. Foram observadas lesões de edema na região cervical; petéquias hemorrágicas na musculatura da perna; avulsão de plexos nervosos dorsais; degeneração de tecido muscular das pernas e presença de nódulos intra-musculares nas pernas e na região dorsal. A causa para a avulsão do plexo nervoso pode ser decorrente de movimentação motora vertebral atípica e má postura do animal por causa de piso e/ou da altura do abrigo; o edema da região cervical e lesão degenerativa na perna podem ser decorrentes de traumatismos; os nódulos intra-musculares seriam conseqüentes de reação inflamatória à presença de parasita protozoário e as petéquias hemorrágicas podem estar relacionadas com deficiência protéica. As carcaças que apresentaram ablação, nódulos, edema e degeneração foram descartadas a bem da saúde alimentar, as com petéquias foram analisadas, aprovadas e liberadas para consumo. São sempre ocorrências raras que acometem poucos exemplares. Não se caracterizaram como doenças transmissíveis entre as rãs ou como provável zoonose. Relatase Relata postmorten post morten rãstouro, rãstouro touro, touro rãs-touro Paraíba Paulo 199 2002 dorsais intramusculares intra musculares dorsal eou abrigo traumatismos protéica ablação alimentar analisadas consumo exemplares zoonose 19 200 1 20 2

ABSTRACT The results of post-mortem inspections on bullfrogs (Rana catesbeiana) coming from commercial slaughterhouses, carried out by the inspection service of food from animal origin in the regions of Campinas and Vale do Paraíba, in São Paulo State, Brazil, between 1998 and 2002, are here reported. The following were observed: edema lesions in the cervical region; hemorrhagic spots in the muscles of the legs; avulsion of nervous plexus; degeneration of muscular tissue in the legs and the presence of intra-muscular nodules in the legs and dorsal region. The cause of the avulsion of nervous plexus could have been by atypical movement of spinal column and bad posture of the animals due to floor and/or the height of the shelter; edema in the cervical region and degenerative lesions of the leg could be due to traumas; the intra-muscular nodules were the consequence of an inflammatory reaction to the presence of parasitic protozoas; and the hemorrhagic spots could be related to protein deficiency. The carcasses which showed avulsion, nodules, edema and degeneration were discarded for consumer health reasons, the ones with spots were analysed, approved and made available for consumption. These are always rare occurrences, affecting few animals. They are not characterised as transmissible diseases within frogs or as probable zoonoses. postmortem post mortem Rana catesbeiana slaughterhouses Paraíba State Brazil 199 2002 reported observed intramuscular intra andor shelter traumas protozoas deficiency reasons analysed consumption occurrences zoonoses 19 200 1 20 2

RESUMO Com a finalidade de conhecer a presença de agentes virais em rãs-touro provenientes de criações comerciais, foram encaminhados para exame por microscopia eletrônica de transmissão, amostras de tecido muscular de animais abatidos comercialmente (1 caso); de fígado (2 casos) e de fígado e líquido ascítico (1 caso), de animais mortos por diferentes causas. Foi observada a presença de partículas semelhantes ao grupo Herpes em nódulos presentes na musculatura de animais abatidos em matadouro; grupo Herpes em fígado de animais mortos por intoxicação; grupo Herpes em fígado e no líquido ascítico e grupo Toga somente no líquido ascítico em animais que morreram por deficiência nutricional e grupo Paramixo em girinos mortos pela má qualidade da água devido a alterações ambientais. Acredita-se que nenhum destes grupos estejam envolvidos diretamente com as lesões e mortalidade e se desconhece sua importância como agentes primários ou oportunistas, em relação às rãs criadas intensivamente. Destes vírus, somente o grupo Herpes está relacionado à ocorrências conhecidas, exclusivamente em anfíbios silvestres. Estas são as primeiras observações por m.e.t. de partículas virais nesta espécie animal, no Brasil. rãstouro touro comerciais transmissão 1 ( caso caso) 2 casos caso, , causas matadouro intoxicação ambientais Acreditase Acredita oportunistas intensivamente vírus conhecidas silvestres met m t m.e.t animal Brasil

ABSTRACT To increase the knowledge of the presence of viral agent in bullfrogs from commercial froggeries, an examination was made, by transmission electron microscope, the muscles with nodules from slaughterhouse (1 case); livers (2 cases) and livers and ascitic liquid (1 case) from animals died by different causes. There were observed a Herpes-like particles in nodules in muscles of animals from slaughterhouse; Herpes-like particles in liver of animals that died by intoxication; Herpes-like particles in liver and ascitic liquid and Toga-like particles in ascitic liquid from animals that died by nutritional deficiency and Paramixo-like particles in the liver of tadpoles that had died due to bad water quality. The authors believe that neither of these groups of virus are involved directy with the lesions and mortalities of these cases and do not know their importance as primaries or opportunistic agents to bullfrog from froggery. Of these viruses, only the Herpes group is related with amphibians, solely in free-living wild animals. These are the first observations, by t.e.m. of virus like particles in bullfrogs in Brazil. froggeries made microscope 1 ( case 2 causes Herpeslike intoxication Togalike Toga Paramixolike Paramixo quality froggery viruses amphibians freeliving free living observations tem t e m t.e.m Brazil

RESUMO As comunicações, referendadas no Brasil, sobre processos patológicos na rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802) tiveram início a partir da década de 80, sendo que a sua grande maioria ocorreu na década de 90. Antes disto, as esparsas comunicações apresentavam um aspecto geral dos processos patológicos, situação que permaneceu até a metade dos anos 80, quando, a partir de 1984, começaram a ser relatados os casos patológicos decorrentes de vários processo. O progresso na área decorreu principalmente a partir daquela década, ao fato de que a ranicultura não mais se comportava como “criação empírica”, passando a tomar a forma de uma “criação organizada, moderna, zootecnicamente acompanhada e comercial”. Paralelamente iniciavam-se os Encontros Nacionais de Ranicultura (bienais) e a organização de Associações de Criadores. A partir dessa mudança, qualquer caso de doença/mortalidade refletia-se como sério prejuízo ao criador que passou a procurar instituições de pesquisa, de ensino e de fomento, para um diagnóstico e para saber quais medidas de controle, prevenção e tratamento deveriam ser tomadas. Foram localizados 127 documentos, sendo 36 sobre bacteriologia; 25 de sanidade geral; 23 de parasitologia; 17 de patologias diversas; 12 de fungos; 5 sobre água; 3 de vírus; 3 referências; 2 sobre tratamento e 1 sobre predadores. O período compreendido foi de 1947 (a primeira) até 2001. Brasil rãtouro rã touro Rana Shaw 1802 80 90 disto quando 1984 processo criação empírica, empírica , empírica” organizada moderna comercial. comercial . comercial” iniciavamse iniciavam bienais (bienais Criadores mudança doençamortalidade doença mortalidade refletiase refletia pesquisa fomento controle tomadas documentos bacteriologia parasitologia diversas fungos água vírus referências predadores 194 primeira 2001 180 8 9 198 19 200 18 20

ABSTRACT The published literature in Brazil on pathological processes in bullfrogs (Rana catesbeiana Shaw, 1802) began in the 1980s, though most of it was published in the 90s. Before this, communications were scarce and were concerned with general aspects of pathology. This situation began to change in 1984, with communications focused on specific issues. This change was due to the fact that growers were moving away from the former empirically based methods to develop modern and commercial organizations with scientific orientation, as well as the advent of the National Meeting of Frogfbreeding, held every 2 years, and the organization of Frogbreeder Associations. From this point on, any case of disease/mortality became a serious problem to farmers and the solution involved various research institutions and universities, as well developmental agencies in diagnosis, control prevention and treatment of bullfrog diseases. A total of 127 documents were compiled, 36 concerning bacteriology; 25 general health; 23 parasitology; 17 on distinct pathological processes; 12 on micology; 5 concerning water; 3 on viruses; 3 references; 2 concerning treatments and 1 about predator. The period was from 1947 (first) until 2001. Rana Shaw 1802 1980s s 90s pathology 1984 issues orientation Frogfbreeding years Associations diseasemortality disease mortality universities diagnosis diseases compiled bacteriology health parasitology micology water viruses references predator 194 first (first 2001 180 198 19 200 18 20