Resumo Trichinella spp. é um parasito zoonótico de distribuição mundial detectado em carnívoros e onívoros de sangue quente e humanos. Até o momento, o Brasil é considerado pela Organização Mundial de Saúde Animal livre do ciclo doméstico da doença, enquanto o ciclo silvestre do parasito tem status de infecção em áreas limitadas. No entanto, em países vizinhos como a Argentina, larvas do parasito foram encontradas na fauna silvestre. O presente estudo teve como objetivo determinar a ocorrência de Trichinella spp. em animais silvestres atropelados no Paraná, Brasil. Amostras biológicas de 71 animais silvestres – 29 Didelphis albiventris, 11 Nasua-nasua, dez Cerdocyon thous, sete Dasypus novemcinctus, seis Leopardus gattulus, seis Sphiggurus spinosus e dois Puma concolor– coletadas de novembro de 2016 a novembro de 2021 foram submetidas à digestão artificial, seguindo a metodologia descrita do REGULAMENTO (CE) Nº2075/2005. Não foram encontradas larvas de Trichinella spp. nas carcaças dos animais selvagens atropelados. No entanto, considerando o amplo espectro de possíveis reservatórios que podem atuar como elo entre os ciclos silvestre e doméstico e considerando a condição atual da triquinelose silvestre no Brasil em áreas limitadas, o monitoramento frequente da fauna silvestre é necessário.

Abstract Trichinella spp. are zoonotic parasites that are widely distributed in warm-blooded carnivores and omnivores, including humans. Until the present moment, Brazil has been considered by World Animal Health Organization free from the domestic cycle of trichinellosis, whereas the parasite’s sylvatic cycle has the status of infection in limited zones. However, neighboring countries such as Argentina have reports of parasite larvae in the wild fauna. The present study aimed to determine the occurrence of Trichinella spp. in road-killed wild animals in Paraná, Brazil. Biological samples from 71 wild animals—29 Didelphis albiventris, 11 Nasua nasua, ten Cerdocyon thous, seven Dasypus novemcinctus, six Leopardus guttulus, six Sphiggurus spinosus and two Puma concolor—collected from November 2016 to November 2021 were subjected to artificial digestion, following the methodology described in the REGULATION (EC) No. 2075/2005. No Trichinella spp. larvae were detected in the carcasses of the road-killed wild animals. However, considering the wide spectrum of possible reservoirs that could act as a link between the sylvatic and domestic cycles and considering the current Brazilian status of sylvatic trichinellosis in limited zones, frequent monitoring of wild fauna remains necessary.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a soroprevalência e os fatores de risco associados à presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos do Paraná. A detecção dos anticorpos para T. gondii e N. caninum foi realizada, usando-se testes de ELISA indireto caseiro e comercial, respectivamente. A análise de regressão logística múltipla foi usada para verificar os fatores de risco associados à soroprevalência. Anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum foram observados em 42,7% e em 17,6% dos animais, respectivamente. Os fatores de proteção associados à soropositividade foram “algum nível de confinamento (confinamento ou semiextensivo)” (OR=0,53) para T. gondii e “presença de mão de obra especializada” para N. caminum (OR=0,64). Os fatores de risco foram “presença de gatos” para T. gondii (OR=1,75) e “alimentação de cães com resíduos placentários” (OR=1,79) para N. caninum. Além de apresentar uma significante e simultânea soroprevalência para ambos os agentes (9,9% dos animais), os resultados também indicam que as deficiências em gestão e saneamento ambiental, a presença de reservatórios e os tipos de exploração favorecem a soropositividade. Dessa forma, estudos como estes podem auxiliar em programas sanitários e políticas públicas para a prevenção de T. gondii e N. caninum nos rebanhos ovinos do Paraná.

Abstract The aim of this study was to evaluate the seroprevalence and factors associated with the presence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state. The detection of antibodies for T. gondii and N. caninum was performed by homemade and commercial indirect ELISA, respectively. Multiple logistic regression analysis was used to verify the factors associated with the seroprevalence. Antibodies anti-T. gondii and anti-N. caninum were observed in 42.7% and in 17.6% of the animals, respectively. The protective factors associated to seropositive were “some level of confinement” (full or semi-extensive confinement) (OR=0.53) for T. gondii and “use of skilled labor” (OR=0.64) for N. caninum. The risk factors were “presence of cats” (OR=1.75) for T. gondii and “feeding of dogs with sheep placental remains” (OR=1.79) for N. caninum. In addition, to presenting a significant and simultaneous seroprevalence for both agents (9.9% of the animals), the results also indicate that deficiencies in management and environmental sanitation, the presence of reservoirs, and types of exploitation enhance the seropositivity. Thus, studies like this might support sanitary programs and public policies for the prevention of T. gondii and N. caninum in the sheep herds of Paraná state.

Resumo O oocisto, forma resistente do Toxoplasma gondii, desempenha um papel importante na transmissão desse protozoário. O objetivo desta revisão foi relatar os métodos capazes de inativar oocistos por meio de uma revisão sistemática da literatura realizada nas bases de dados Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed e Scopus. As palavras-chave pesquisadas foram (((efeitos OR infectividade OR resistência) AND Toxoplasma) AND oocyst). Foram selecionados 16 artigos que descreveram 309 tratamentos diferentes. Dentre todos os protocolos avaliados, 35,60% (110/309) foram eficazes na inativação de oocistos. Os métodos físicos foram mais eficazes do que outros métodos (p <0,05). Oocistos esporulados e a cepa VEG de T. gondii foram mais resistentes (p <0,05) aos tratamentos. Embora seja eficaz contra vírus e bactérias, o uso de desinfetantes na água tem pouco ou nenhum efeito sobre os oocistos de T. gondii. O uso de radiação e pressão foram eficazes na inativação de oocistos. Como esses tratamentos não incluem mudança de temperatura, podem ser utilizados em alimentos de consumo cru, tais como vegetais, pois não acarretarão substancialmente alterações nas suas características físico-químicas. Portanto, esses métodos podem ser alternativas viáveis para o controle de T. gondii.

Abstract The oocyst, a resistant form of Toxoplasma gondii, plays an important role in the transmission of this protozoan. The objective of this review was to report the methods capable of inactivating oocysts through a systematic review of the literature carried out in the Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed and Scopus databases. The keywords searched were (((effects OR infectivity OR resistance) AND Toxoplasma) AND oocyst). We selected 16 articles that described 309 different treatments. Among all the protocols evaluated, 35.60% (110/309) were effective in inactivating oocysts. Physical methods were more effective than other methods (p <0.05). Sporulated oocysts and the T. gondii VEG strain were more resistant (p <0.05) to treatments. Although it is effective against viruses and bacteria, the use of disinfectants in water has little or no effect on T. gondii oocysts. The use of radiation and pressure were effective in inactivating oocysts, as these treatments do not include changes in temperature, they can be used in foods for raw consumption, such as vegetables, as it will not cause substantially changes in their physical and chemical characteristics. Therefore, these methods can be viable alternatives for the control of T. gondii.

Resumo O gado é uma fonte importante de espécies zoonóticas de Cryptosporidium para o homem. O objetivo deste estudo foi investigar a presença de Cryptosporidium, identificar a espécie e determinar os fatores de risco relacionados ao meio ambiente, aos animais e ao manejo em bezerros leiteiros em oito estados brasileiros. Um total de 408 amostras fecais de bezerros, com idade entre 1 e 60 dias, foram analisadas. Um questionário epidemiológico foi preenchido. A triagem das amostras foi realizada pela técnica de Ziehl-Neelsen, e as amostras positivas foram submetidas à “nested” PCR. As espécies de Cryptosporidium foram identificadas pela técnica de PCR-RFLP, utilizando-se as enzimas SSPI, ASEI e MBOII. A técnica de Ziehl-Neelsen mostrou que 89,7% (35/39) das fazendas e 52,9% (216/408) das amostras foram positivas. Por meio de nested PCR, esses protozoários foram detectados em 54,6% das amostras. As 56 amostras submetidas à PCR-RFLP apresentaram Cryptosporidium parvum. Houve maior prevalência do parasita em animais de 7 a 28 dias (62,6%). Diarreia, idade entre sete e 28 dias, e fonte de água mineral foram fatores associados ao risco de infecção. O sistema de manejo do tipo “casinha” para bezerros foi associado à redução da infecção. Esses achados demonstram o alto nível de Cryptosporidium spp. em circulação nos rebanhos bovinos e o predomínio da espécie C. parvum.

Abstract Cattle are an important source of zoonotic species of Cryptosporidium for humans. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium, identify the species and determine the risk factors relating to environment, animals and management among dairy calves in eight Brazilian states. A total of 408 fecal samples from calves aged 1-60 days were analyzed. An epidemiological questionnaire was completed. Sample screening was performed using Ziehl-Neelsen technique and the positive samples were subjected to nested PCR. Cryptosporidium species were identified by means of the PCR-RFLP technique, using SSPI, ASEI and MBOII enzymes. The Ziehl-Neelsen technique showed that 89.7% (35/39) of the farms and 52.9% (216/408) of the samples were positive. Through nested PCR, these protozoa were detected in 54.6% of the samples. The 56 samples subjected to PCR-RFLP presented Cryptosporidium parvum. There was higher prevalence of the parasite in animals aged 7 to 28 days (62.6%). Diarrhea, ages between seven and 28 days and a spring water source were factors associated with the risk of infection. The calf hutch-type management system was associated with reduced infection. These findings demonstrate the high level of Cryptosporidium spp. circulation in cattle herds and the predominance of the species C. parvum.

Resumo O objetivo deste estudo foi confirmar a emergência da leishmaniose visceral canina em Foz do Iguaçu próximo à fronteira com a Argentina e ao Paraguai, por meio do isolamento e identificação molecular de Leishmania infantum. Em um primeiro estágio de coleta de animais (2012), três amostras de aspirados de linfonodos e 46 camadas leucocitárias foram obtidas de cães soropositivos para leishmaniose. Em um segundo estágio de coleta (2013), foram coletadas amostras de camada leucocitária de 376 cães de 20 localidades próximas à fronteira com o Paraguai, rio Paraná, centro e periferia da cidade. Seis isolados foram obtidos, quatro da primeira etapa (4/49) e dois da segunda etapa (2/376); estes isolados foram submetidos à amplificação com iniciadores K26F/R, e a análise de sua sequência confirmou a espécie como L. infantum. A autoctonia dos casos foi confirmada, pois 100% dos cães nunca haviam saído da cidade. O estudo confirma a emergência de leishmaniose visceral canina no Paraná com identificação de L. infantum em cães da cidade de Foz do Iguaçu. Assim, medidas de controle devem ser elaboradas e implementadas por órgãos públicos e instituições de pesquisa do Brasil, Argentina e Paraguai em parceria com o objetivo de controlar a disseminação de zoonoses e os casos humanos de LV.

Abstract The aim of this study was to confirm the emergence of canine visceral leishmaniasis among dogs in Foz do Iguaçu. The disease was diagnosed through the isolation and molecular identification of Leishmania infantum. In the first sample collection stage (2012), three lymph node aspirates and 46 buffy coat samples were obtained mostly from the dogs that were seroreagents for leishmaniasis. In the second sample collection stage (2013), the buffy coat samples were collected from 376 dogs located close to Paraguay, Paraná river, center and peripheral parts of the city. The DNA from the six isolates, four from the first sampling stage (4/49) and two from the second sampling stage (2/376), was subjected to polymerase chain reaction using the K26F/R primers. The isolate was confirmed as L. infantum by sequencing. As none of the dogs had ever left the city, the isolates were confirmed as autochthonous. Further, the study confirmed the emergence of canine visceral leishmaniasis in Paraná through the identification of L. infantum among dogs in Foz do Iguaçu city. Hence, collaborative control measures should be designed and implemented by the public agencies and research institutions of Brazil, Argentina, and Paraguay to control the spread of visceral leishmaniasis.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum e seus fatores associados em caprinos de propriedades do Estado do Paraná, Sul do Brasil. A análise sorológica foi realizada, utilizando-se ELISA indireto em 629 amostras de soro caprino, coletadas em 32 propriedades distribuídas em cinco mesorregiões do Estado. A soropositividade foi observada em 30,7% dos animais para T. gondii, 6,3% para N. caninum e 3,0% para ambos. Os modelos finais de regressão múltipla mostraram que o uso de reprodução assistida reduziu a chance de soropositividade para T. gondii (PR=0,70), enquanto a presença no local de abate na fazenda (PR=2,03) aumentou. Para N. caninum, o fornecimento de ração concentrada (OR=4,80) e a morte dos animais no pré-desmame (OR=9,96) aumentaram a chance de soropositividade. O estudo das variáveis associadas às soropositividades sugere deficiências no saneamento e no manejo reprodutivo dos Animais. Além disso, reconhece pontos críticos para a infecção no manejo da produção animal.

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies and their associated factors among goats in farms from the Paraná state, South Brazil. The serological analysis was performed by indirect ELISA on 629 goat serum samples collected from 32 farms distributed in five mesorregions from the state. Seropositivity was observed in 30.7% of the animals for T. gondii, 6.3% for N. caninum, and 3.0% for both agents. Final multiple regression models showed that the use of assisted reproduction decreased the chance of seropositivity for T. gondii (PR=0.70) and the slaughtering site on the farm (PR=2.03) increased it. To N. caninum, the supplying concentrated feed to animals (OR=4.80) and animal pre-weaning death (OR=9.96) increased the chance of seropositivity. The variables associated with these seropositivities suggest deficiencies in sanitation and reproductive management. In addition, it recognizes critical points of infection for animal production management.

Resumo O objetivo deste estudo foi relatar um surto de toxoplasmose humana em uma instituição de pesquisa em Londrina, Paraná, no período de dezembro de 2015 a fevereiro de 2016. Amostras de sangue de 26 indivíduos sintomáticos foram coletadas e o imunoensaio de quimioluminescência de micropartículas foi realizado para detectar IgM, IgG e teste de avidez de IgG específica em laboratório oficial. Um total de 20 pessoas com sintomas e sorologia compatíveis com toxoplasmose aguda (IgM positiva e IgG com baixa avidez) foi selecionado como casos, enquanto 45 funcionários assintomáticos que trabalhavam nas mesmas equipes e durante os mesmos turnos foram utilizados como controles. Todos os participantes da investigação responderam a um questionário epidemiológico. Foram coletadas três amostras de água e uma de lodo das cisternas de abastecimento da instituição, 10 de solo, 11 de vegetais, três amostras de fezes de gato e um cadáver de filhote felino doméstico para detecção de T. gondii pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Após análise dos dados epidemiológicos, o consumo de hortaliças no restaurante da instituição foi a única variável associada à ocorrência da doença. Em resultados laboratoriais, todas as amostras apresentaram resultados negativos a PCR. O rápido reconhecimento do surto, notificação e investigação prematura poderia ter quebrado a cadeia de transmissão, evitando assim o surgimento de novos casos. Além disso, a adoção de boas práticas de manipulação de alimentos poderia ter impedido a ocorrência do surto.

Abstract The objective of this study was to report an outbreak of human toxoplasmosis at a research institution in Londrina, Paraná, from December 2015 to February 2016. Blood samples from 26 symptomatic individuals were collected and the microparticle chemiluminescence immunoassay was performed to detect IgM, IgG and specific IgG avidity test in the official laboratory. A total of 20 people with symptoms and serology compatible with acute toxoplasmosis (IgM positive and IgG with low avidity) were selected as cases, while 45 asymptomatic employees working in the same teams and during the same shifts were selected as controls. All the participants of the investigation answered an epidemiological questionnaire. Three samples of water and one sludge from the institution's supply cisterns, 10 soil samples, 11 plant samples, three cat fecal samples and one domestic feline cadaver were collected for analysis of the polymerase chain reaction (PCR) for T. gondii. After analyzing the epidemiological data, the consumption of vegetables in the restaurant of the institution was the only variable associated with the occurrence of the disease. In laboratory results, all the samples showed negative results to PCR. The rapid recognition of the outbreak, early notification and investigation could have broken the chain of transmission early, thus preventing the emergence of new cases. In addition, the adoption of good food handling practices could have prevented the occurrence of the outbreak.

Resumo Cryptosporidium e Giardia são protozoários causadores de diarreia em animais e humanos. A caracterização molecular destes protozoários em esgoto pode prover dados ainda desconhecidos da ocorrência de espécies. O objetivo do presente estudo foi monitorar a ocorrência de Giardia e espécies de Cryptosporidium em esgoto bruto e tratado em uma estação de tratamento de esgoto (ETE) de Londrina, Paraná. Amostras de esgoto bruto e tratado foram coletadas no período de um ano, com periodicidade quinzenal. A ocorrência destes protozoários foi caracterizada por meio de concentração das amostras e posterior extração de DNA seguida de nested-PCR para amplificação de fragmentos dos genes 18S rRNA de Giardia e 18S rRNA de Cryptosporidium. A caracterização das espécies de Cryptosporidium foi realizada por meio de análise por polimorfismo de comprimento do fragmento de restrição (RFLP) dos produtos obtidos. Foram coletadas no total 25 amostras de cada, esgoto bruto e esgoto tratado. Para Giardia, todas as amostras de esgoto bruto e 76% das de esgoto tratado foram positivas. Cryptosporidium esteve presente em 84% das amostras de esgoto bruto e em 8% do tratado. No esgoto tratado foi encontrado apenas C. muris, já nas amostras de esgoto bruto foram encontradas cinco espécies: C. muris, C. hominis, C. baileyi, C. suis e C. parvum em 100%, 19%, 9%, 9% e 4%, respectivamente. A presença de espécies mistas foi observada em 19,04% das amostras. A presença de Giardia e Cryptosporidium em esgoto tratado pode pôr em risco a saúde humana. A discriminação de espécies de Cryptosporidium revelou a presença de espécies zoonóticas incomuns como C. suis e C. muris.

Abstract Cryptosporidium and Giardia are protozoan parasites that cause diarrhea in humans and animals. Molecular characterization of these pathogens in sewage may provide insight on their occurrence and prevalence in Brazil. This study aimed to investigate the presence of Giardia and Cryptosporidium in raw and treated sewage from Londrina, Paraná, Brazil. Samples were collected every two weeks during a year. Samples were concentrated, then DNA was extracted and subjected to a nested PCR targeting the Giardia 18S rRNA gene and the Cryptosporidium 18S rRNA gene. Species of Cryptosporidium were characterized by restriction fragment length polymorphism (RFLP). All raw sewage and 76% of the treated sewage were positive for Giardia; 84% of raw sewage samples and 8% of treated sewage were positive for Cryptosporidium. C. muris, C. hominis, C. baileyi, C. parvum and C. suis were detected in 100%, 19%, 9%, 9% and 4% of raw sewage, respectively. C. muris was the only species found in treated sewage. Multiple species of Cryptosporidium were present in 19.04% of the raw sewage. Treated sewage water can pose a threat to human health. The speciation of Cryptosporidium revealed the presence of non-common zoonotic species as C. suis and C. muris.

ABSTRACT The aim of this study was to perform a systematic review of scientific papers that used spatial analysis tools in cases of leishmaniasis, in Brazil. The search for articles was carried out in PubMed, SciELO, Scopus and Web of Science databases. The keywords used in the identification of the articles were Thematic map AND Leishmaniasis, Spatial analysis AND Leishmaniasis, and Geoprocessing AND Leishmaniasis, in English language. A total of 360 articles were found, and 11 of them were analyzed after screening by title and abstract as well as reading of the full articles. The States studied were Sao Paulo, Acre, Maranhao, Piaui, Minas Gerais, Parana and Tocantins. Cutaneous leishmaniasis occurred predominantly in rural areas, with clusters in forest reserve regions or modified forest areas. Conversely, visceral leishmaniasis mainly occurred in peripheral and central urban areas associated with poorer environments and urban infrastructure, including worse sanitation. We conclude that the spatial distribution of leishmaniasis is closely related to the living environment of the risk population. The analyzed articles associated geospatial data with some risk factors for the disease, pointing out the locations where most cases occur, creating a relevant source to define control strategies.

Resumo O trabalho teve como objetivo determinar os fatores associados à contaminação de vegetais por protozoários zoonóticos. Amostras de água, solo e vegetais foram coletadas de julho/2014 a maio/2016, totalizando 83 amostras de 21 propriedades da região de Londrina, Paraná, Brasil. A amplificação de fragmentos de DNA de T. gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia intestinalis foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Os resultados da PCR foram positivos para T. gondii em 12,9% (8/62), Cryptosporidium spp. em 11,3% (7/62) e G. intestinalis. em 25,8% (16/62) das amostras. O sequenciamento de DNA identificou C. parvum em cinco amostras e G. intestinalis, Assemblage E em três amostras. As associações estatísticas evidenciaram maior probabilidade de amostras serem positivas para T. gondii ou para pelo menos um dos três protozoários quando a fonte de água de irrigação era o rio; uma maior chance de amostras positivas para Cryptosporidium spp. quando havia cervos na propriedade; e uma menor chance das amostras serem positivas para pelo menos um dos três agentes etiológicos quando o solo era suplementado com calcário. Os resultados expõem alguns pontos críticos de contaminação, fornecendo suporte para capacitar os agricultores em boas práticas de gestão durante o processo de produção.

Abstract The objective of this study was to determine factors associated with vegetable contamination with zoonotic protozoan. Samples of water, soil and vegetables were collected from July/2014 to May/2016, totaling 83 samples, 21 properties of Londrina region, Paraná, Brazil. DNA amplification of Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. and Giardia intestinalis in the samples was conducted using polymerase chain reaction (PCR). The PCR results were positive for T. gondii in 12.9% (8/62), Cryptosporidium spp. in 11.3% (7/62) and G. intestinalis in 25.8% (16/62) of the samples. DNA sequencing identified C. parvum in five samples and G. intestinalis Assemblage E in three. The statistical associations demonstrated greater probability of positive samples for T. gondii and for at least one of the three protozoa when the source of irrigation water was the river; a greater chance of positive samples for Cryptosporidium spp. when deer were present on the property; and a smaller chance of positive samples for at least one of the three etiologic agents when soil was supplemented with limestone. The results expose some critical contamination points, providing support for training farmers on good management practices during the production process.

Resumo O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de anticorpos anti- Leishmania spp. em cães da cidade de Foz do Iguaçu, estado do Paraná, Brasil, fronteira com a Argentina e o Paraguai. Amostras de sangue de cães foram coletadas para realização dos seguintes testes sorológicos: teste rápido imunocromatográfico DPP®, ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) e ensaio de imunofluorescência indireta (IFI). Em 2012, 285 cães foram analisados na fronteira com Argentina e, em 2013, amostras de soro de 396 cães na fronteira com o Paraguai. Utilizando ELISA para triagem e IFA para o teste confirmatório, os resultados mostraram uma prevalência de anticorpos de 1,8% (5/285) na fronteira da Argentina e 3,0% (12/396) na fronteira com o Paraguai. Ao usar o DPP® para triagem e ELISA como uma análise confirmatória, observou-se uma prevalência de cães sororreagentes de 2,5% (7/285) na fronteira com a Argentina e 5,1% (20/396) na fronteira com o Paraguai. A não coleta pública de lixo doméstico (p = 0,0004) mostrou-se associada à leishmaniose. Este estudo demonstra a presença de leishmaniose e sugere a emergência da leishmaniose visceral canina no estado do Paraná devido à ocorrência de cães sororreagentes na fronteira Argentina e Paraguai, que possuem características ambientais e geográficas que favorecem a disseminação do parasito.

Abstract The aim of this study was to investigate the occurrence of anti-Leishmania spp. antibodies in dogs from localities in the city of Foz do Iguaçu, Paraná state, Brazil, on the border with Argentina and Paraguay. Blood samples dogs were collected to perform the following serologic tests: immunochromatographic DPP® rapid test, indirect immunoenzymatic assay (ELISA) and indirect immunofluorescence assay (IFA). In 2012, 285 dogs were analyzed on Argentina border, and in 2013, serum samples from 396 dogs on the border of Paraguay were collected. Using ELISA for screening and IFA for the confirmatory test, the results showed that the antibody prevalence was 1.8% (5/285) on the border of Argentina and 3.0% (12/396) on Paraguay border. When using the DPP® for screening and ELISA as a confirmatory analysis, we observed a seroreagent prevalence in dogs of 2.5% (7/285) on Argentina border and 5.1% (20/396) on Paraguay border. The non-public collection of domestic waste (p= 0.0004) was shown to be associated with leishmaniasis. This study shows the presence of leishmaniasis and suggest the emergence of canine visceral leishmaniasis in state of Paraná due to the confirmed occurrence of seroreactive dogs on Argentina and Paraguay border, which has environmental and geographical characteristics that favor the spread of the parasite.

Resumo O objetivo desse estudo foi detectar a presença de anticorpos IgG anti-Leishmania spp. e anti-Trypanosoma cruzi em duas populações de gatos domésticos (Felis catus domesticus) do Norte do Paraná encaminhados para castração cirúrgica e determinar quais as características dos animais estudados que podem estar associadas à soropositividade. Amostras de soro de 679 gatos foram analisadas utilizando-se os testes imunoenzimático (ELISA) e a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), em série. Associações entre idade, sexo, raça, ano de atendimento e grupo animal foram verificadas usando regressão logística simples. Um percentual de 8,5% (58/679) dos gatos apresentou positividade para Leishmania spp. e 7,6% (51/673) para T. cruzi pelos testes ELISA e RIFI. Gatos mantidos em organizações não governamentais de proteção animal apresentaram maior sororeatividade para Leishmania spp. (p<0.0001). As sorologias reativas para Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi mostram que esses agentes estão presentes em gatos domésticos na parte norte do estado do Paraná, bem como, os proprietários de organizações não governamentais de proteção animal podem estar mais expostos à leishmaniose quando comparados com outros proprietários de animais avaliados no presente estudo.

Abstract The aim of this study were to detect antibodies anti-Leishmania spp. and anti-Trypanosoma cruzi in two different populations of domestic cats (Felis catus domesticus) from North Paraná referred for surgical castration and to determine which characteristics of the animals studied may be associated with seropositivity. Serum samples from 679 cats were analyzed using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) in series. Associations between age, sex, race, year of care and animal group were verified using the simple logistic regression. Percentage of 8.5% (58/679) of cats were positive for Leishmania spp. and 7.6% (51/673) for T. cruzi by the tests ELISA and IFAT. Animals collected by non-governmental animal protection organizations presented more seropositivity for Leishmania spp. (p<0.0001). Results shown that Leishmania spp. and T. cruzi are present in domestic cats in the northern part of the state of Paraná, as well as, owners of non-governmental animal protection organizations may be more exposed to leishmaniasis when compared to other animal owners evaluated in the present study.

RESUMO: O presente estudo teve como objetivo investigar um surto de aborto em um rebanho de cabras leiteiras no município de Arapoti, Paraná, Brasil. No início do surto, foram coletadas amostras de sangue de 33 cabras com sinais clínicos; mais tarde, de todo o rebanho caprino, dois gatos e dois cachorros. Foram obtidas amostras de leite das 78 cabras em lactação. Quatro amostras ambientais de solo e quatro de resíduos de comedouro também foram coletadas. O teste de imunofluorescência (IFI) foi utilizado para o sorodiagnóstico, a análise molecular foi conduzida por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR), para isolamento do agente etiológico utilizou-se o bioensaio. Os resultados da IFI revelaram que 76,53% (137/179) das cabras, todos os cães e gatos eram soropositivos para Toxoplasma gondii. O bioensaio revelou uma amostra de camada leucocitária e duas de leite contaminadas com T. gondii viável. Na PCR, 11 amostras de sangue total, oito de leite, três resíduos alimentares e todas as amostras de solo foram positivas. Os resultados do presente estudo confirmaram um surto causado por contaminação ambiental (de solo e alimentos) com oocistos de T. gondii que, provavelmente, foram eliminados por gatos que permaneceram na fazenda e tinham acesso ao estoque de alimento dos caprinos, reforçando a necessidade de assistência técnica veterinária e boas práticas de manejo.

ABSTRACT: The present study aimed to investigate an abortion outbreak in a dairy goat herd in the municipality of Arapoti, Parana, Brazil. At the beginning of the outbreak, blood samples were collected from 33 goats with clinical signs; later, of the whole goat herd, two cats and two dogs. Milk samples were collected from 78 lactating goats. Four environmental soil samples and four samples of feed residue from goat feeders were collected too. Immunofluorescence antibody test (IFA) was used for serodiagnosis, the molecular analysis was conducted by means of the polymerase chain reaction (PCR), for the isolation of the etiological agent the bioassay was used. The results of the IFA revealed that 76.53% (137/179) of the goats, two dogs and two cats were seropositive for Toxoplasma gondii. Bioassay revealed one buffy coat and two milk sample having viable T. gondii. In the PCR, 11 whole blood samples, eight milk, three feeder troughs, and all soil samples were positive. The findings of the present study confirmed an outbreak caused by environmental contamination (of soil and feed) with T. gondii oocysts that could have been shed by kittens that lived on the farm and had access to the stock of goat food, facilitating this contamination, which reinforces the need for veterinary assistance and good management practices on farms.

Resumo A criação de galinhas no estilo colonial/caipira é baseada em padrões de alimentação de pastagem, o que as torna potenciais contaminantes ambientais de oocistos de Cryptosporidium para humanos e outros animais. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a prevalência molecular de Cryptosporidium spp. em galinhas criadas em sistema colonial/caipira. Um total de 351 amostras de fezes de frangos foram examinadas em 20 fazendas. Para a detecção de Cryptosporidium spp., os fragmentos do gene rRNA 18S foram amplificados utilizando-se a reação de nested-PCR. A prevalência global de Cryposporidium foi de 25,6% (IC 95% = 21,2% - 30,6%). O sequenciamento dos fragmentos amplificados permitiu a identificação de três espécies que infectam aves: C. meleagridis em 57 (62,6%), C. baileyi em 15 (16,4%), C. parvum em 3 (3,2%) amostras, bem como, um novo genótipo de Cryptosporidium (C. genótipo BrPR1) foi identificado em 3 (3,2%) amostras. Cryptosporidium genotipo BrPR1 não foi ainda classificado como uma espécie, e seu espectro de hospedeiros é desconhecido. O presente trabalho permitiu concluir que Cryptosporidium, incluindo espécies zoonóticas, existe com alta prevalência em galinhas criadas em sistema colonial/caipira na região estudada.

Abstract Rearing free-range chicken is based on grazing feeding patterns, and these animals could be potential environmental contaminants of Cryptosporidium oocysts for humans and other animals. Therefore, the present study aimed to evaluate the molecular prevalence of Cryptosporidium spp. in free-range chickens from Brazil. A total of 351 fecal samples from chickens were examined from 20 farms. For detection of Cryptosporidium spp., 18S rRNA gene fragments were amplified using a nested PCR reaction. Positive samples were sent for sequencing. The overall prevalence of Cryptosporidium was 25.6% (95% CI = 21.2% - 30.6%). Sequencing of the amplified fragments allowed for the identification of three species: C. meleagridis in 57 (62.6%), C. baileyi in 15 (16.4%), C. parvum in 3 (3.2%) samples, and a new Cryptosporidium genotype (C. genotype BrPR1) in 3 (3.2%) samples. Cryptosporidium genotype BrPR1 has not yet been classified as a species, and its host spectrum is not known. Cryptosporidium, including zoonotic species, exists at a high prevalence in free-range chickens within the region studied.

Resumo Esse estudo objetivou detectar parasitos do gênero Leishmania, determinar a prevalência de anticorpos anti-Leishmania spp., identificar as espécies circulantes do parasito e determinar variáveis epidemiológicas associadas com a infecção em ratos capturados em área urbana de Londrina, Paraná, Brazil. A captura dos animais ocorreu de maio a dezembro de 2006, métodos sorológicos e moleculares foram realizados. O DNA foi extraído do sangue total, uma nested-PCR cujo alvo foi o gene SSu rRNA do gênero Leishmania, foi realizado em triplicata. As amostras positivas foram sequenciadas duas vezes pelo método de Sanger para a determinação da espécie. No total, 181 roedores foram capturados, todos foram identificados como Rattus rattus e nenhum apresentou alterações clínicas. Quarenta e um dos 176 (23,3%) animais foram positivos no ELISA para Leishmania e 6/181 (3,3%) foram positivos na RIFI. Nove dos 127 animais testados (7,1%) foram positivos na PCR; sete foram identificadas como L. (L.) amazonensis, um como L. (L.) infantum. Quatro ratos foram positivos em mais de um teste. Essa é a primeira descrição de roedores sinantrópicos naturalmente infectados por L. (L.) amazonensis (no mundo) e por L. (L.) infantum (no Sul do Brasil). Com relação a L. (L.) amazonensis, esse resultado é uma nova evidência da urbanização desse agente etiológico.

Abstract This study aimed to detect parasites from Leishmania genus, to determine the prevalence of anti-Leishmania spp. antibodies, to identify circulating species of the parasite, and to determine epidemiological variables associated with infection in rats caught in urban area of Londrina, Paraná, Brazil. Animal capture was carried out from May to December 2006, serological and molecular methods were performed. DNA was extracted from total blood, and nested-PCR, targeting SSu rRNA from Leishmania genus, was performed in triplicate. The positive samples were sequenced twice by Sanger method to species determination. In total, 181 rodents were captured, all were identified as Rattus rattus and none showed clinical alterations. Forty-one of the 176 (23.3%) animals were positive for Leishmania by ELISA and 6/181 (3.3%) were positive by IFAT. Nine of 127 tested animals (7.1%) were positive by PCR; seven were identified as L. (L.) amazonensis, one as L. (L.) infantum. Four rats were positive using more than one test. This was the first description of synanthropic rodents naturally infected by L. (L.) amazonensis (in the world) and by L. (L.) infantum (in South Brazil). Regarding L. (L.) amazonensis, this finding provides new evidence of the urbanization of this etiological agent.