Resumo O surgimento de resistência bacteriana a antimicrobianos representa uma ameaça significativa à saúde. Para abordar esta questão, explorar a diversidade fúngica em ambientes de água doce na Floresta Amazônica tem potencial na busca de novos antimicrobianos. Este estudo teve como objetivo investigar a produção de metabólitos antibacterianos por fungos aquáticos de lagos amazônicos, especificamente os lagos Juá e Maicá (Brasil-PA). Os isolados fúngicos foram obtidos de fragmentos de madeira submersos nesses lagos, e os extratos de acetato de etila foram avaliados quanto à atividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus ATCC 25923, S. aureus (MRSA), ATCC 43300, Escherichia coli ATCC 25922 e E. coli (ESBL) NCTC 13353. Além disso, a toxicidade dos extratos (EtOAc com atividade antimicrobiana) contra fibroblastos humanos MRC-5 foi investigada. O estudo identificou 40 cepas de fungos com triagem antimicrobiana, e os extratos de acetato de etila de Fluviatispora C34, Helicascus C18, Monodictys C15 e Fusarium solani LM6281 exibiram atividade antibacteriana. F. solani LM6281 apresentou a menor concentração inibitória mínima (CIM) de 50 µg/mL contra cepas de S. aureus e CIM de 100 µg/mL contra cepas de E. coli incluindo ESBL. A citotoxicidade (IC50) do extrato (EtOAc) de F. solani LM6281 foi de 34,5 µg/mL. Estudos preliminares da cultura TLC e RNM-H do extrato (EtOAc) de F. solani sugeriram a presença de substâncias da classe dos terpenos, quinonas, fenólicos e flavonoides. Este estudo destaca o potencial de fungos de madeira submersos na região amazônica para produzir substâncias antibacterianas, identificando-os como fontes de novos compostos bioativos com potencial de uso na indústria farmacêutica e na bioeconomia regional. saúde questão amazônicos BrasilPA. BrasilPA Brasil PA . (Brasil-PA) 25923 S MRSA, MRSA , (MRSA) 43300 2592 E ESBL (ESBL 13353 disso EtOAc antimicrobiana MRC5 MRC 5 MRC- investigada 4 C34 C C18 C1 LM LM628 F (CIM µgmL µg mL 10 IC50 IC (IC50 345 34 34, RNMH RNM H terpenos quinonas flavonoides antibacterianas identificandoos identificando regional (Brasil-PA (MRSA 4330 259 1335 C3 LM62 1 IC5 (IC5 3 433 25 133 LM6 (IC 43 2 13

Abstract The emergence of bacterial resistance to antimicrobials poses a significant health threat. To address this issue, exploring the fungal diversity in freshwater environments in the Amazon Forest has potential in the search for new antimicrobials. This study aimed to investigate the production of antibacterial metabolites by aquatic fungi from Amazon lakes, specifically Lake Juá and Lake Maicá (Brazil-PA). The fungal isolates were obtained from wood fragments submerged in these lakes, and the ethyl acetate extracts were evaluated for antibacterial activity against Staphylococcus aureus ATCC 25923, S. aureus (MRSA), ATCC 43300, Escherichia coli ATCC 25922, and E. coli (ESBL) NCTC 13353. Additionally, toxicity of the extracts (EtOAc with antimicrobial activity) against human fibroblasts MRC-5 was investigated. The study identified 40 fungal strains with antimicrobial screening, and the ethyl acetate extracts of Fluviatispora C34, Helicascus C18, Monodictys C15, and Fusarium solani LM6281 exhibited antibacterial activity. F. solani LM6281 showed the lowest minimum inhibitory concentration (MIC) of 50 µg/mL against S. aureus strains and MIC of 100 µg/mL against E. coli strains including ESBL. The cytotoxicity (IC50) of the extract (EtOAc) of F. solani LM6281 was 34.5 µg/mL. Preliminary studies of the TLC culture and RNM-H from the extract (EtOAc) of F. solani suggested the presence of substances from the class of terpenes, quinones, phenolics, and flavonoids. This study highlights the potential of submerged wood fungi in the Amazon region to produce antibacterial substances, thus identifying them as sources of novel bioactive compounds with potential use in the pharmaceutical industry and regional bioeconomy. threat issue lakes BrazilPA. BrazilPA Brazil PA . (Brazil-PA) 25923 S MRSA, MRSA , (MRSA) 43300 25922 E ESBL (ESBL 13353 Additionally EtOAc MRC5 MRC 5 MRC- investigated 4 screening C34 C C18 C15 LM LM628 F (MIC µgmL µg mL 10 IC50 IC (IC50 345 34 34. RNMH RNM H terpenes quinones phenolics flavonoids bioeconomy (Brazil-PA 2592 (MRSA 4330 1335 C3 C1 LM62 1 IC5 (IC5 3 259 433 133 LM6 (IC 25 43 13 2

Resumo Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Abstract Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

RESUMO A hepatite E é uma zoonose emergente que afeta diversas espécies de mamíferos, inclusive o ser humano. É ocasionada por um vírus da espécie Orthohepevirus A que possui diversos genótipos e subgenótipos. No Brasil é descrito o genótipo HEV-3, cujo principal reservatório é o porco doméstico. Testes moleculares e sorológicos demonstram o HEV-3 em diferentes estados, tanto em animais quanto em humanos. No estado de São Paulo, existem diversos estudos sobre a epidemiologia da hepatite E em humanos, mas faltam informações sobre o HEV-3 em suínos. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de HEV por meio da técnica de RT-PCR e posterior sequenciamento em um banco de amostras de fezes de suínos colhidas entre 2008 e 2009, na região metropolitana de Campinas. Das 89 amostras analisadas, foi possível detectar o HEV-3 em sete e, pela reconstrução filogenética, foram encontrados os subgenótipos HEV-3b, HEV-3h, e HEV-3j. Uma amostra disponível no GenBank, proveniente de São Paulo, que ainda não havia sido subgenotipada, foi agrupada ao HEV-3i. Os subgenótipos HEV-3j e HEV-3i ainda não tinham sido relatados no país. O estudo demonstra uma grande diversidade genética do HEV no estado de São Paulo e reforça o caráter zoonótico da HEV-3.

SUMMARY: University education seeks to develop professional skills and capacities for autonomous learning. Active learning methodologies, centered on students, such as problem- based learning (PBL), could be very useful in improving academic performance in Basic Sciences courses in health and medical students. The objective of this study was to determine the impact of the use of the active problem-based learning methodology on the academic performance of university students who take morpho-biological courses in the Kinesiology and Obstetrics degree programs. From a total of 500 students who entered the first years of health degrees at the University of Tarapacá (academic year 2018), 100 students (over 18 years of age) were selected, separating as a control or non-intervened group (n = 50) to Obstetrics students and intervened group, with application of ABP (n = 50), students of the Kinesiology degree program. The study lasted 24 school weeks. The results show that the intervened group significantly improved academic performance, with 98 % approval and a final evaluation of 5.9. The control group achieved 84 % approval and a final evaluation of 4.8. It is concluded that the use of the active PBL methodology significantly improves the academic performance of health sciences students who take morpho-biological subjects and that activities with direct participation through questionnaires and group and individual scientific presentations, allow the student be their own agent of change in the educational assessment processes. It is suggested to implement this type of active methodologies in regular courses, also considering the psychological factors of learning.

RESUMEN: La educación universitaria busca desarrollar competencias profesionales y capacidades para el aprendizaje autónomo. Las metodologías de aprendizajes activos, centrado en los alumnos, como el aprendizaje basado en problemas (ABP), podría ser de gran utilidad en mejorar el rendimiento académico en asignaturas de las Ciencias Básicas en estudiantes de carreras de salud y medicina. El objetivo de este estudio fue determinar el impacto del uso de la metodología activa de aprendizaje basado en problemas, sobre el rendimiento académico de estudiantes universitarios que cursan asignaturas morfo-biológicas en las carreras de Kinesiología y de Obstetricia. De un universo de 500 alumnos que ingresaron a los primeros años de carreras de la salud de la Universidad de Tarapacá (año lectivo 2018), se seleccionaron 100 estudiantes (mayores de 18 años), separando como grupo control o no intervenido (n=50) a estudiantes de Obstetricia y grupo intervenido, con aplicación de ABP (n=50), estudiantes de la carrera de Kinesiología. El estudio tuvo una duración de 24 semanas lectivas. Los resultados muestran que el grupo intervenido mejoró significativamente el rendimiento académico, con un 98% de aprobación y una evaluación final de 5,9. El grupo control alcanzó un 84 % de aprobación y evaluación final de 4,8. Se concluye que el uso de metodología activa de ABP, mejora significativamente el rendimiento académico de los estudiantes de ciencias de la salud que cursan asignaturas morfo-biológicas y que las actividades con participación directa a través de cuestionarios y exposiciones científicas grupales e individuales permiten que el estudiante sea su propio agente de cambio en los procesos de evaluación formativa. Se sugiere implementar este tipo de metodologías activas en los cursos regulares considerando además, los factores psicológicos del aprendizaje.

RESUMO Objetivou-se comparar a qualidade de espermatozoides recuperados a fresco e após refrigeração a 4ºC do epidídimo de gatos domésticos utilizando-se os diluidores ACP-117c e Tris. Sessenta epidídimos foram distribuídos em seis grupos: 10 epidídimos a fresco com o Tris (T0h), 10 a 4°C/2h e recuperados com Tris (T2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com Tris (T4h), 10 epidídimos a fresco com o ACP-117c (A0h), 10 a 4 °C/2h e recuperados com ACP-117c (A2h), 10 a 4°C/4h e recuperados com ACP-117c (A4h). Os complexos testículo-epidídimo (CTE) do controle não foram refrigerados. Os outros foram refrigerados a 4°C durante duas e quatro horas. Os epidídimos foram separados das demais estruturas, e os espermatozoides recuperados pela técnica de flutuação modificada. Os parâmetros cinéticos foram avaliados em um sistema computadorizado, e o vigor, a viabilidade, a concentração, a funcionalidade de membrana e a morfologia celular foram avaliados em microscopia de luz. A motilidade progressiva com ACP-117c declinou após duas horas de refrigeração, mas não diferiu entre a recuperação a fresco e após refrigeração por quatro horas. Vigor e integridade funcional da membrana celular foram significativamente superiores no grupo A4h em comparação ao A0h. O vigor espermático em T2h e T4h reduziu significativamente em comparação com T0h. T0h foi significativamente superior ao A0h quanto aos parâmetros de vigor e integridade funcional da membrana espermática, entretanto, após quatro horas de refrigeração, o ACP-117c apresentou um maior percentual de células vivas. Os espermatozoides epididimários de felinos domésticos conseguem manter a qualidade necessária para serem utilizados em programas de reprodução artificial após serem refrigerados e recuperados por meio da técnica de flutuação modificada, e o diluidor ACP-117c pode ser utilizado com sucesso para recuperação de células espermáticas refrigeradas de gatos por até quatro horas.

ABSTRACT We aimed to compare fresh sperm and sperm cooled to 4ºC that had been recovered from the epididymides of cats using powdered coconut water (ACP-117c) and Tris extenders. Sixty epididymides were divided into 6 groups: 10 fresh epididymides were recovered using Tris (T0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using Tris (T2h); 10 were kept at 4°C/4h and recovered using Tris (T4h); 10 fresh were recovered using ACP-117c (A0h); 10 were kept at 4°C/2h and recovered using ACP-117c (A2h), and 10 were kept at 4°C/4h and recovered using ACP-117c (A4h). The testis-epididymis complexes (TEC) control were not cooled. The others were cooled at 4°C for 2 or 4h. The epididymis was separated and the sperm was recovered by the modified flotation method. Sperm kinetic parameters were evaluated by a computer-system analysis, and vigor, viability, concentration, membrane function and morphology of the sperm were assessed under a light microscope. The progressive motility with ACP-117c declined after 2h of cooling, but did not differ between fresh and 4h. The vigor and membrane function were higher in A4h than A0h. The vigor at T2h and T4h were decreased compared to T0h. T0h was higher than A0h for vigor and sperm membrane function. However, after 4h of cooling, ACP-117c maintained a higher percentage of living cells. Feline epididymal sperm quality can be maintained to the degree necessary for artificial breeding programs following cooling and ACP-117c may be successfully used to recover cat sperm that have been cooled for up to 4h.

RESUMO O objetivo do presente trabalho foi estimar a soroprevalência de anticorpos contra o vírus da influenza equina utilizando como unidades de análise os equídeos e as propriedades rurais do tipo familiar do Município de Uruará, PA. A presença de anticorpos contra o vírus da influenza equina A/Eq1/SP/56 (H7N7) e A/Eq2/SP/1/85 (H3N8) foi avaliada pela técnica de inibição da hemaglutinação (HI). O tamanho da amostra foi estimado a partir de um total de 2.069 propriedades, caracterizadas por agricultura familiar e ausência de vacinações contra qualquer enfermidade específica dos equídeos. Foi adotado o nível de confiança de 90%, com precisão de 15% e prevalência estimada de 50%. As seguintes prevalências de animais soro reagentes para os diferentes vírus foram observadas: 55,6% (45/81) (IC 49,8 a 61,3) para o vírus A/Eq1/SP/56 (H7N7) e 76,5% (62/81) (IC 70,7 a 82,3) para o vírus A/Eq2/SP/1/85 (H3N8). Todas as propriedades apresentaram pelo menos um animal soropositivo para os dois subtipos virais. Conclui-se que ambos os subtipos (H3N8 e H7N7) do vírus da influenza equina estavam circulando entre os equídeos e presentes em todas as propriedades estudadas no Município de Uruará, PA, Brasil, Amazônia Oriental, no ano de 1998.

ABSTRACT The aim of this study was to estimate the prevalence of herds and animals infected with equine influenza virus in Uruará County, Pará State, Brazil. Antibodies against equine influenza virus were detected by the haemagglutination inhibition test. Sample size was estimated from 2,069 holder farms that raised Equidae and did not vaccinate against equine influenza virus. A 90% confidence level was adopted with 15% precision and 50% estimated prevalence. The following prevalence of serum reactors animals were observed: 55.6% (45/81) (CI 49.8-61.3) A/Eq1/SP/56 (H7N7) and 76.5% (62/81) (CI 70.7-82.3) A/Eq2/SP/1/85 (H3N8). All the farms were positive for both subtypes of equine influenza virus. It is concluded that both subtypes of equine influenza virus were circulating among animals and on all farms in Uruará County, Pará State, Brazil, Eastern Amazon Region, in the year of 1998.

RESUMO O Circovírus suíno-2 (Porcine circovirus type 2 – PCV-2) é um vírus não envelopado, apresenta simetria icosaédrica e mede de 15 a 17 nm de diâmetro. É o menor vírus animal descrito e está relacionado a várias síndromes que acometem suínos, responsável por perdas econômicas nas granjas. A alta variabilidade da região do genoma que codifica as proteínas estruturais associada às co-infecções, dificulta o seu diagnóstico e sua prevenção.

ABSTRACT Porcine circovirus-2 (PCV-2) is an icosahedric nonenveloped virus with a diameter of from 15 to 17 nm. It is the smallest animal virus and is associated with many swine syndromes, responsible for economic losses for pig farms. The high variability of the enconding genes for the structural proteins associated with the co-infections makes the diagnosis and prevention of this virus more difficult.

Em Barbalha, Ceará, foram realizados levantamentos de casos de cisticercose suína, teníase e neurocisticercose humana causadas por Taenia solium, e realizou-se uma pesquisa quanto aos sistemas de criação de suínos na região. De 85 suínos abatidos em abatedouro local 4,7% apresentavam cisticercose, a maioria dos cisticercos localizava-se na língua e coração. Entre 2001 e 2004, das 302 criações de suínos denunciadas à vigilância sanitária, 96,6% eram chiqueiros. A teníase, entre 1998 e 2003, correspondeu a 1,1% das verminoses diagnosticadas pela Secretária de Saúde Municipal. Entre 2001 e 2003, os casos de neurocisticercose humana corresponderam a 5% das tomografias de crânio requisitadas nos hospitais da região.

In Barbalha, municipal district of Ceará state, an assessment of cases of porcine cysticercosis, taeniasis and human neurocysticercosis caused by the Taenia solium was performed in order to evaluate the situation of these diseases. It was also carried out a research about the types of swine farms registered in the area. Considering the 85 swine slaughtered at the slaughterhouse of Barbalha, 4.7% presented cysticercosis. Most cysticerci were located in the tongue and in the heart. Between 2001 and 2004, from 302 swine farms denounced to the Sanitary Surveillance, 9.6% were pigsties. Taeniasis, between 1998 and 2003, corresponded to 1.1% of the helminthes diagnosed by the Municipal Health Office. From 2001 to 2003, the cases of human neurocysticercosis corresponded to 5% of the skull tomographies requested in the hospitals of the area.

Samples of 114 bovine fetuses and 10 calves, which dead in perinatal period, were examined for detection of DNA. The most common detected agent was Brucella spp. in 17 samples (13.7%) followed by Leptospira spp. in 4 cases (3.2%),bovine herpesvirus (BHV) and bovine viral diarrhea (BVDV) in 3 animals (2.4%) each, and 1 for the association of BVDV and BHV. In 77.4 % (96/124) of the samples it was not possible to detect any agent.

RESUMO O Clostridium perfringens, microrganismo anaeróbio, está presente no solo e no trato intestinal dos mamíferos. Provoca gangrena gasosa e intoxicação alimentar nos seres humanos e doenças enterotoxêmicas nos animais domésticos. O C. perfringens é classificado em 5 tipos (A, B, C, D e E) mediante a produção de quatro toxinas principais (alfa-α, beta-β, gama-γ, delta-δ e épsilon-ε). A identificação destas toxinas é realizada através da reação de soroneutralização em animais utilizando anti-soros específicos, os quais, além do alto custo, são de difícil obtenção em laboratórios de referência internacionais. Visando contribuir para a tipificação de amostras de C. perfringens, em nosso meio, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a reação em cadeia da polimerase (PCR) na detecção dos genes que codificam as toxinas alfa (cpa), beta (cpb) e épsilon (etx) em isolamentos provenientes de bovinos. A sensibilidade analítica da técnica de PCR padronizada a partir do DNA total bacteriano foi de 2,27 ng/?L para o gene cpa e 227 pg/?L para os genes cpb e etx. Das 35 amostras de C. perfringens isoladas e tipificadas por PCR, 16 (45,7%) foram do tipo A, 18 (51,4%) foram do tipo C e 1 (2,9%) foi do tipo B.

ABSTRACT The Clostridium perfringens, an aerobic microorganism, is present in soil and intestinal tracts of mammals. It causes gaseous gangrene and food intoxication in human beings and enterotoxemic diseases in domestic animals.C. perfringens is classified into 5 types (A,B,C,D and E) according to the production of four main toxins: (alfa-α, beta-β, gama-γ, delta-δ e épsilon-ε). The identification of these toxins is made through serum neutralization test in animals, using specific anti-sera, however these reagents are of high cost and difficult to be obtained from international reference laboratories. To aid in the typing of the C. perfringens strains in our environment, the present work aimed to assess the use of the polymerase chain reaction (PCR) for the detection of the genes coding the alpha (cpa), beta (cpb) and epsilon (etx) toxins in bovines isolates.The analytical sensitivity of the PCR technique, standardized from the total bacterial DNA, was 2.27 ng/?L for the cpa gene and 227 pg/?L for the cpb and etx genes. Among the 35 C. perfringens isolates typed by PCR, 16 (45.7%) were of type A, 18 (51.4%) of type C, and 1 (2.9%) belonged to type B.

Amostras de 10 e 14 pulgas Ctenocephalides felis felis foram coletadas de cães nos municípios de Pedreira e Mogi das Cruzes, respectivamente, no estado de São Paulo, para pesquisa de Rickettsia spp. As pulgas foram individualmente submetidas à reação em cadeia pela polimerase, tendo como alvo os genes 17-kDa e 190-kDa (OmpA) de Rickettsia, sendo esse último específico para o GFM. Nove pulgas de Pedreira (90%) e quatro pulgas de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 17-kDa, e oito pulgas de Pedreira (80%) e quatro de Mogi das Cruzes (28%) foram positivas para o gene 190-kDa. As seqüências de nucleotídeos do gene 190-kDa de uma pulga de Pedreira e de uma pulga de Mogi das Cruzes foram 100% idênticas; quando comparadas com dados existentes no GenBank, foram 100% idênticas com a seqüência parcial do gene 190-kDa de Rickettsia felis. Esse foi o primeiro relato de sua ocorrência no estado de São Paulo.

Samples of 10 and 14 Ctenocephalides felis felis fleas were collected on dogs from Pedreira and Mogi das Cruzes municipalities, respectively, in the State of São Paulo, Brazil, for detection of Rickettsia spp. Individual fleas were submitted to Polymerase Chain Reaction targeting the 17-kDa and the 190-kDa (OmpA) genes of Rickettsiae. This later gene is specific for spotted fever group. Nine fleas from Pedreira (90%) and four fleas from Mogi das Cruzes (28%) were positive for the 17-kDa gene, and eight fleas from Pedreira (80%) and four from Mogi das Cruzes (28%) were positive for 190-kDa gene. The nucleotide sequence of the 190-kDa products of one flea from Pedreira and one flea from Mogi das Cruzes were 100% identical to each other, and when compared to the GenBank Data, they were 100% identical to the 190-kDa sequence of R. felis. This was the first report of its occurrence in the State of São Paulo.

RESUMO Inquéritos sorológicos indicaram a presença de infecção por Leptospira interrogans sorovar Bratislava em partes da Alemanha e em outros países do mundo. Duas porcas de uma criação de suínos da Alemanha que apresentaram títulos de 200 e 800 para L. interrogans sorovar Bratislava no teste da soroaglutinação micoscópica (SAM) foram monitoradas em condições experimentais com o emprego de métodos microbiológicos e moleculares (PCR) para a detecção de leptospira. Os cultivos de urina e órgãos foram negativos para leptospiras nos dois animais. A PCR também foi negativa em todas as amostras de uma das porcas, porém foi positiva em amostras de útero, oviduto e ovário do outro animal. As investigações histológicas dos rins desta porca apresentaram lesões de glomerulonefrite intersticial. Os resultados positivos da PCR demonstraram o tropismo das leptospiras para o trato genital. Este fato pode ser responsável por transtornos reprodutivos como abortamentos e infertilidades nos rebanhos.

ABSTRACT Reports based on serological data indicate Leptospira (L.) interrogans serovar Bratislava infection in pigs in parts of Germany and other countries. Two sows of a pig breeding herd located in Germany and which showed titres of 200 and 800 against L. interrogans serovar Bratislava in MAT were followed up under experimental conditions with microbiological and PCR methods for detection of leptospires. Cultures of urine and organs were negative for leptospires in both pigs. The PCR was also negative in all samples of one pig, but was positive in samples from uterus, oviduct and ovary of the other animal. The histological investigation of the kidneys from this pig showed an interstitial glomerulonephritis. The positive results of the PCR demonstrated the tropism of leptospires for the genital tract. This fact may be responsible for more unexpected abortion and infertility in pig breeding herds.

RESUMO O Herpesvírus Bovino tipo-1 (BHV-1) é o agente etiológico da Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR), Vulvovaginite Pustular Infecciosa (IPV) e Balanopostite Pustular Infecciosa (IBP) e o principal patógeno viral encontrado no sêmen bovino. A técnica padrão para o diagnóstico do vírus em amostra de sêmen é o isolamento viral, a qual apresenta uma série de desvantagens. O objetivo deste trabalho foi avaliar uma nested PCR (nPCR) para a detecção do BHV-1 em sêmen bovino. Os primers foram dirigidos para a região codificadora de gB e a especificidade do fragmento amplificado foi confirmada pelo perfil de restrição com as enzimas Fnu4HI e Sau96I. A nPCR avaliada revelou-se rápida e com alta sensibilidade analítica (105 vezes superior ao isolamento viral). Ao ser aplicada à série de amostras de sêmen colhidas de um touro proveniente de central de Inseminação Artificial, positivo ao isolamento viral em uma única das colheitas, a nPCR mostrou ser capaz de detectar a presença do BHV-1 27 dias antes e 3 dias após o isolamento viral. tipo1 tipo 1 tipo- BHV1 BHV (BHV-1 IBR, IBR , (IBR) IPV (IPV IBP (IBP bovino desvantagens (nPCR BHV- FnuHI Fnu HI Sau96I SauI Sau I revelouse revelou se 105 (10 . viral) Artificial colheitas 2 (BHV- (IBR 10 (1 (BHV (

ABSTRACTS Bovine Herpesvirus type 1 (BHV-1) is the causal agent of Bovine Infectious Rinotracheitis (IBR), (IPV) and (IBP) and it is the main viral pathogen found in bovine semen. The gold standard for BHV-1 direct diagnosis in bovine semen samples is viral isolation, which has numerous disadvantages. The aim of this study was to evaluate a nested PCR (nPCR) assay for BHV1 detection in bovine semen. The primers targeting gB and the specify of the amplicons was confirmed with Fnu4HI and Sau96I restriction profile. The nPCR showed fast and with a high analytic sensibility (105 times higher than viral isolation). When the assay was applied to a collection of semen samples collected from a bull from an Artificial Insemination Center with a single semen sample positive at viral isolation, the nPCR was able to detect the BHV-1 DNA 27 days before and 3 days after the viral isolation. BHV (BHV-1 IBR, IBR , (IBR) IPV (IPV IBP (IBP BHV- isolation disadvantages (nPCR FnuHI Fnu HI SauI Sau I profile 105 (10 . isolation) 2 (BHV- (IBR 10 (1 (BHV (

The aim of this study was to estimate the correlation between scrotal girth and spermatic concentration in German Sheepherd dogs. Thirteen German Sheepherd dogs were used and 44 semen samples were obtained by digital manipulation. The ejaculate was separated in its three fractions. The sperm rich fraction was kept for evaluation and determination of spermatic concentration by spectrofotometry. The parameters were expressed as mean and standard deviation. Spearman correlation test was used to estimate the correlation between spermatic concentration and scrotal girth. The mean spermatic concentration was 568.45±314.91x10(6) sptz/ml and the mean scrotal girth was17.6±1.6 cm and the correlation was r = 0.10. It can be conclude that scrotal girth can not be an appropriate measurement as indicative of spermatic concentration in German Sheepherd dogs.

A heminested-PCR (hn-PCR) using primers to the nucleoprotein-coding gene in a nested set was evaluated in the detection of Brazilian strains of rabies virus (RV). A representative number of RV nucleoprotein sequences belonging to genotype 1 were aligned. Based on such alignment, primers were directed to highly conserved regions. All 42 clinical samples positive by both fluorescent antibody and mouse inoculation tests were also positive by the hn-PCR. Brain tissue that had been left to decompose, obtained from an experimentally inoculated mouse was tested by hn-PCR and yielded positive results. In conclusion, primers designed here were capable of amplifying Brazilian RV isolates obtained from a rural epidemiological cycle.