Resumo A conservação de sementes recalcitrantes de seringueira é pouco duradoura, quando comparada com espécies que possuem sementes ortodoxas. Dessa forma, a preservação da espécie ocorre especialmente em campo na forma da planta inteira, o que requer muito espaço físico. A biotecnologia, por meio da técnica da criopreservação pode ser uma ferramenta auxiliadora na manutenção da viabilidade das sementes durante o seu armazenamento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de embriões zigóticos de seringueira, contendo o tecido de reserva, submetidos a distintas formas de vitrificação, seguido da conservação por meio da criopreservação. Para realização da pesquisa foram utilizadas sementes de seringueira, produzidas no estado de São Paulo. Primeiramente, foram estudadas distintas formas de vitrificação dos embriões zigóticos contendo o tecido de reserva. Os embriões foram avaliados logo após a vitrificação e aos sete dias de conservação em nitrogênio líquido a uma temperatura de -196ºC. As avaliações realizadas foram: determinação do teor de água, viabilidade dos embriões pelo teste de tetrazólio, germinação in vitro e condutividade elétrica. Os resultados foram analisados em delineamento inteiramente casualizados, em esquema fatorial 2 x 5, sendo o primeiro fator época de avaliação (antes e após a criopreservação) e o segundo fator, as formas de vitrificação. Conclui-se que é necessário testar um maior período de exposição dos embriões nas soluções de vitrificação, especialmente nas soluções que apresentaram melhores resultados de viabilidade e germinação (soluções: • 50% de glicerol; • 30% (p/v) glicerol, 15% (p/v) de etilenoglicol, 15% (p/v) dimetilsulfóxido (DMSO) e 0,4 M de sacarose; e • 2 M glicerol seguidos de PVS). Adicionalmente, deve ser analisado um maior nível de desidratação dos embriões, o qual a espécie possa suportar, para que possam ser expostos a criopreservação.
Abstract The conservation of recalcitrant rubber seeds is not very durable when compared to species that have orthodox seeds. Thus, the preservation of the species occurs especially in the field in the form of the entire plant, which requires a lot of physical space. Biotechnology, through the technique of cryopreservation, can be an auxiliary tool in maintaining the viability of seeds during their storage. Thus, the objective of this work was to evaluate the viability of rubber tree zygotic embryos, containing the reserve tissue, submitted to different forms of vitrification, followed by conservation through cryopreservation. To carry out the research, rubber seeds, produced in the state of São Paulo, were used. First, different forms of vitrification of the zygotic embryos containing the reserve tissue were studied. The embryos were evaluated immediately after vitrification and after seven days of storage in liquid nitrogen at a temperature of -196 ºC. The evaluations carried out were: determination of the water content, viability of the embryos by the tetrazolium test, in vitro germination and electrical conductivity. The results were analyzed in a completely randomized design, in a 2x5 factorial scheme, the first factor being the time of assessment (before and after cryopreservation) and the second factor, the forms of vitrification. It is concluded that it is necessary to test a longer period of exposure of embryos in the vitrification solutions, especially in the solutions that presented better results of viability and germination (solutions: • 50% glycerol; • 30% (w/v) glycerol, 15% (w/v) ethylene glycol, 15% (w/v) dimethyl sulfoxide (DMSO) and 0.4 M sucrose; and • 2 M glycerol followed by PVS). In addition, a higher level of dehydration of the embryos, which the species can support, must be analyzed, so that they can be exposed to cryopreservation.