CONTEXTO E OBJETIVO: A investigação genética dos tumores do sistema nervoso central (SNC) provê valiosa informação sobre os genes que regulam a proliferação, diferenciação, angiogênese, migração e apoptose. O objetivo deste estudo é determinar a prevalência entre os polimorfismos genéticos (códon 31 e da região 3' não traduzida, 3'UTR) e a expressão protéica do gene inibidor de quinase dependente de ciclina 1A (CDKN1A) em pacientes com e sem tumor do SNC. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal analítico com grupo controle, desenvolvido no Laboratório de Biologia Molecular do Departamento de Oncologia Pediátrica do Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto. MÉTODOS: 41 pacientes com tumor do SNC e um grupo controle de 161 indivíduos sem câncer pareados por idade, sexo e etnia foram genotipados mediante uma reação de polimorfismo no comprimento de fragmentos de restrição (RFLP). A análise das proteínas foi realizada em 36 pacientes com tumor de SNC mediante Western Blotting. RESULTADOS: A frequência do genótipo heterozigoto (Ser/Arg) e do homozigoto polimórfico (Arg/Arg) do códon 31 nos controles foi 28,0% e 1,2%, respectivamente. Entretanto, o sítio 3'UTR apresentou uma frequência de 24,2% (C/T) e 0,6% (T/T). Estas frequências não são significativamente diferentes (P > 0,05) daquelas observadas no grupo dos pacientes com tumor de SNC (19,4% e 0,0%, códon 31; 15,8% e 2,6%, sítio 3'UTR). Com respeito à expressão protéica, nos ependimomas, 66,67% não expressaram a proteína CDKN1A. Estes resultados foram similares entre os meduloblastomas e os astrocitomas, os quais não expressaram a proteína com 57,14% e 61,54%, respectivamente. CONCLUSÃO: Não foram encontradas diferenças significativas entre o padrão de expressão protéica, polimorfismos de CDKN1A e os três tipos de tumores de SNC em indivíduos brasileiros.

CONTEXT AND OBJECTIVE: Genetic investigation of central nervous system (CNS) tumors provides valuable information about the genes regulating proliferation, differentiation, angiogenesis, migration and apoptosis in the CNS. The aim of our study was to determine the prevalence of genetic polymorphisms (codon 31 and 3' untranslated region, 3'UTR) and protein expression of the cyclin-dependent kinase inhibitor 1A (CDKN1A) gene in patients with and without CNS tumors. DESIGN AND SETTING: Analytical cross-sectional study with a control group, at the Molecular Biology Laboratory, Pediatric Oncology Department, Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto. METHODS: 41 patients with CNS tumors and a control group of 161 subjects without cancer and paires for sex, age and ethnicity were genotyped using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). Protein analysis was performed on 36 patients with CNS tumors, using the Western Blotting technique. RESULTS: The frequencies of the heterozygote (Ser/Arg) and polymorphic homozygote (Arg/Arg) genotypes of codon 31 in the control subjects were 28.0% and 1.2%, respectively. However, the 3'UTR site presented frequencies of 24.2% (C/T) and 0.6% (T/T). These frequencies were not statistically different (P > 0.05) from those seen in the patients with CNS tumors (19.4% and 0.0%, codon 31; 15.8% and 2.6%, 3'UTR site). Regarding the protein expression in ependymomas, 66.67% did not express the protein CDKN1A. The results for medulloblastomas and astrocytomas were similar: neither of them expressed the protein (57.14% and 61.54%, respectively). CONCLUSION: No significant differences in protein expression patterns or polymorphisms of CDKN1A in relation to the three types of CNS tumors were observed among Brazilian subjects.

O glaucolido B é uma lactona sesquiterpênica, g-lactona a,b-insaturada, isolada da Vernonia eremophila Mart. (Vernonieae, Asteraceae); apresenta atividade esquistossomicida e antimicrobiana, além de atividade analgésica. A aceitação de uma substância para uso medicinal também depende de dados sobre sua toxicidade, além de sua eficiência medicinal. Assim, o objetivo deste trabalho foi testar a atividade clastogênica e citotóxica do composto glaucolido B in vitro e in vivo, utilizando linfócitos em cultura temporária e células da medula óssea de camundongos BALB/c, respectivamente. Analisaram-se o índice mitótico (MI) e as aberrações cromossômicas nos sistemas in vitro e in vivo, e trocas entre cromátides irmãs (SCE) e índice proliferativo (PI) somente no ensaio in vitro. Nas culturas de linfócitos humanos as concentrações superiores a 15 µg/ml de meio de cultura inibiram totalmente o crescimento celular. Os testes realizados com as concentrações 2, 4 e 8 µg/ml de meio de cultura demonstraram que o glaucolido B induziu aumento significativo na freqüência de aberrações cromossômicas nas culturas tratadas com as duas maiores concentrações, e mostrou-se citotóxico em concentrações iguais ou superiores a 8 µg/ml de meio de cultura, mas não aumentou a freqüência basal de SCE. A análise das células de medula óssea de camundongos não revelou aumento significativo na freqüência de aberrações cromossômicas com a administração de diferentes concentrações de glaucolido B (160, 320 e 640 mg/kg de peso corpóreo), e também não interferiu na divisão celular. Assim, este composto não apresentou ação clastogênica sobre células de mamíferos in vivo, no entanto teve efeito citotóxico e clastogênico in vitro, sendo necessário cautela no seu possível uso como medicamento.

Glaucolide B is a sesquiterpene lactone isolated from Vernonia eremophila Mart. (Vernonieae, Asteraceae) and has schistosomicidal, antimicrobial and analgesic activities. This study examined the cytotoxic and clastogenic activities of glaucolide B in human cultured lymphocytes and in bone marrow cells from BALB/c mice. The mitotic index (MI) and chromosomal aberrations were analyzed in both of the above systems, whereas sister chromatid exchanges (SCE) and the proliferation index (PI) were determined only in vitro. In human cultured lymphocytes, glaucolide B concentrations greater than 15 µg/ml of culture medium completely inhibited cell growth. At 4 µg/ml and 8 µg/ml of culture medium, glaucolide B significantly increased the frequency of chromosomal aberrations in lymphocytes and was also cytotoxic at concentrations ³8 µg/ml; there was no increase in the frequency of SCE. Glaucolide B (160-640 mg/kg) did not significantly increase the frequency of chromosomal aberrations in mouse bone marrow cells nor did it affect cell division. Since glaucolide B showed no clastogenic action on mammalian cells in vivo but was cytotoxic and clastogenic in vitro, caution is needed in its medicinal use.