RESUMO: A leptospirose é uma doença infecciosa zoonótica, causada pela bactéria Leptospira spp. Em equinos, as consequências da infecção não são claras e os sorogrupos envolvidos variam dependendo da região. Sendo assim, este trabalho objetivou avaliar a soropositividade de Leptospira spp. em equinos não vacinados na região serrana Catarinense e estimar os possíveis fatores de risco associados à infecção. Para tal, foram estudados 207 equinos, de 26 propriedades, sem histórico clínico da infecção e não vacinados para leptospirose. As amostras de soro foram submetidas ao ensaio de soro aglutinação microscópica (SAM) para os principais sorogrupos de referência. Animais com título ≥100 foram considerados reagentes. Os resultados da sorologia revelaram uma soropositividade de 45,4% (94/207) para os animais estudados. Com maior frequência foram observados anticorpos contra os sorogrupos Australis 16,9% (35/207), Icterohaemorrhagiae 14,4% (30/207), e Grippotyphosa 5,31% (11/207). Dentre os principais fatores de risco associados à infecção observados, foram o sistema de criação extensivo (OR=1,27; P<0,05) e a presença de outras espécies animais como bovinos (OR=3,85; P<0,01) e capivaras (OR=2,07; P=0,06). Os achados apresentados neste estudo mostraram que a leptospirose em equinos é endêmica na região da serra Catarinense, e revelam a necessidade de medidas emergenciais de vigilância e controle específicas para esta importante zoonose.

ABSTRACT: Leptospirosis is a zoonotic infectious disease caused by the bacterium Leptospira spp. The consequences of infection in horses are unclear, and the serogroups involved vary depending on the region. This study aimed to evaluate the seropositivity of unvaccinated horses in the Serra Catarinense region and the possible risk factors associated with the infection. We used 207 horses from 26 properties, with no clinical history of infection and unvaccinated for leptospirosis. We submitted serum samples to the microscopic agglutination serum (SAM) to obtain the main reference serogroups. We considered animals with titre ≥100 as infected. The results of the serology revealed seropositivity in 45.4% (94/207) of the animals studied. The most frequent antibodies reportedwere those against the serogroups Australis 16.9% (35/207), Ichterhaemorrhagiae 14.4% (30/207), and Grippotyphosa 5.31% (11/207). Among the primary risk factors associated with the infection we reported extensive rearing system (OR = 1.27; P<0.05) and the presence of other animal species such as cattle (OR = 3.85; P<0.01) and capybaras (OR = 2.07; P=0.06). The findings presented in this study showed that leptospirosis is endemic in horses in the Serra Catarinense region, and revealed the need for emergency surveillance and control measures specific to this important zoonosis.

Resumo Este trabalho compara a resposta superovulatória de éguas doadoras de embriões das raças Quarto de Milha (QM) e Crioula, utilizando um protocolo com baixa dose de extrato de pituitária equina (EPE). Oito éguas QM e seis éguas Crioulas foram acompanhadas durante 3 ciclos estrais consecutivos, sendo que cada ciclo corresponde a um grupo. Grupo Controle – monitoramento do crescimento folicular até a ovulação; Grupo EPE – monitoramento ultrassonográfico até que os folículos atingissem cerca de 20 mm de diâmetro e, posteriormente, administração de 7 mg de EPE, duas vezes ao dia, até a indução da ovulação com 2500UI de hCG; Grupo Pós-EPE – idem ao grupo controle. Os dados foram submetidos à análise de variância, utilizando o procedimento GLM do pacote estatístico SAS, sendo previamente testadas para normalidade dos resíduos, e as médias comparadas pelo teste de Tukey ao nível de 5%. Nas éguas Crioulas tratadas com EPE houve um aumento no número de ovulações (p=0,0534), com média de 3,33±2,06 quando comparadas aos grupos controle e pós-EPE e às éguas da raça QM (2,00±0,53). O tratamento com EPE na dose preconizada permitiu uma melhor resposta superovulatória e produção embrionária nas éguas Crioulas, quando comparadas com as éguas Quarto de Milha.

Abstract This study compared the superovulatory response of embryos donor mares of Quarter Horse (QH) and Crioula using a protocol with low dose of equine pituitary extract (EPE). Eight QH mares and six Crioula mares were monitored during 3 consecutive estrous cycles, with each cycle corresponds to a group. Control Group - monitoring of follicle growth up to the ovulation; EPE group - when the follicles reached 20 mm in diameter were administered 7 mg EPE twice daily. When the follicles achieved a diameter 35 mm, the ovulation was induced with 2500UI hCG; Post-EPE Group - idem to the control group. Data were analyzed using GLM procedure of the SAS statistical package. The variables were submitted to the Tukey’s test and least square means adjusted for multiple comparisons using the Tukey-Kramer’s test, with significance level of 5%. Values are presented as mean ± SD. In the Crioula mares treated with EPE, there was an increase in the number of ovulations (p =0.0534) with a mean of 3.33 ± 2.06 ovulations when compared to the control and post-EPE groups, and mares QM. (2.00±0.53). Treatment with EPE in the recommended dose allowed better superovulatory response and rate of embryo recovery in Crioula mares when compared to the QM mares

O presente estudo objetivou determinar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora spp. em equinos das regiões serrana e litorânea de Santa Catarina e identificar possíveis fatores de risco para a infecção. Foram analisadas 615 amostras por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI ≥1:50). Das 615 amostras, 25 (4,1%) foram positivas para Neospora spp. A recíproca dos títulos de anticorpos anti-Neospora spp. nos equinos foi assim distribuída: 1:50 (13), 1:100 (oito), 1:200 (três) e 1:400 (um). Das 311 amostras da Serra Catarinense, oito foram positivas (2,6%). Das amostras da Região Litorânea (304), 17 apresentaram anticorpos anti-Neospora spp., indicando uma prevalência de 5,6%. Não foi observada diferença estatística significante (P=0,06704) entre as soroprevalências para Neospora spp. em equinos das diferentes regiões, porém os animais do litoral de Santa Catarina apresentaram prevalência 2,2 vezes maior que aqueles da região serrana. O contato dos equinos com cães e/ou bovinos (P=0,007596) foi identificado como fator de risco para infecção por Neospora spp.

The aims of this study were to determine occurrences of Neospora spp. IgG antibodies in horses from two geographical regions of the state of Santa Catarina, southern Brazil, and identify risk factors for infection. Analyses were performed on 615 samples using the immunofluorescent antibody test (IFAT ≥ 1:50). Out of the 615 samples, 25 (4.1%) were positive for Neospora spp. The titers for Neospora spp. were distributed as follows: 1:50 (13), 1:100 (eight), 1:200 (three) and 1:400 (one). Out of the 311 samples taken in the mountain region, eight were positive (2.6%). Among the samples from the coastal region (304), 17 had Neospora spp. antibodies, thus indicating occurrence of 5.6%. Although no statistically significant difference was observed (P = 0.06704), the prevalence among animals of the coast was 2.2 times higher than that of the mountain region. Contact with dogs and/or cattle (P = 0.007596) were identified as risk factor for Neospora spp. infection.

O objetivo deste estudo foi determinar o efeito do nitrogênio liquido super resfriado por vácuo no desenvolvimento, após reaquecimento, de oócitos bovinos vitrificados imaturos ou maturados. O nitrogênio líquido foi mantido em atmosfera normal ou submetido ao vácuo (300mm Hg por 45s) este último reduzindo a temperatura do nitrogênio para -200°C. Oócitos parcialmente desnudos foram vitrificados logo após a seleção (estádio de vesícula germinativa; VG), ou após 22 horas de maturação (metáfase II; MII) em meio TCM 199 + 10% de soro de égua em estro. Para a vitrificação, os oócitos foram inicialmente expostos a uma solução intermediária (10% EG + 10% DMSO) por 30s e a seguir a uma solução de vitrificação (20% EG + 20% DMSO + 0,5M sacarose) por 20s. Grupos de 3 ou 4 oócitos foram envasados em palhetas estiradas e abertas e mergulhados no nitrogênio líquido. Os oócitos foram então reaquecidos por exposição ao ar (25°C) por 4s, seguido de exposição a concentrações decrescentes de sacarose (0,3 e 0,15M - 5 minutos cada). A fecundação (dia 0) foi realizada com 2 x 106 espermatozóides mL-1 (selecionados por "swim-up") e incubação por 18 a 22 horas. Os presumíveis zigotos foram cultivados a 39°C, em placas de quatro poços, com meio SOFaaci, com 5% de CO2 e umidade saturada. As taxas de clivagem (Dia 2) e de blastocistos (Dia 8) obtidas foram de 33,9 e de 4,2%, respectivamente, para oócitos no estágio de VG / pressão normal, de 41,2 e 8,8% para oócitos VG / vácuo, 43,5 e 6,7% para oócitos MII / pressão normal e de de 53,6 e 10,6% para oócitos MII / vácuo. Conclui-se que o emprego de nitrogênio líquido super resfriado pelo vácuo melhora as taxas de desenvolvimento de oócitos bovinos após a vitrificação.

The objective of this study was to determine the effects of vacuum-cooled liquid nitrogen on the development of vitrified immature (germinal vesicle stage; GV) and mature (metaphase II; MII) bovine oocytes after re-warming. Liquid nitrogen was exposed to either atmospheric pressure or to a vacuum (300mm Hg for 45sec); the latter decreased the temperature of the liquid nitrogen to -200°C. Partially denuded oocytes were vitrified either just after selection (GV) or after 22 hours of in vitro maturation (MII) in TCM 199 medium + 10% of estrous mare serum. For vitrification, oocytes were firstly exposed to an intermediate solution (10% EG + 10% DMSO) for 30sec, followed by the vitrification solution (20% EG + 20% DMSO + 0.5M sucrose) for 20sec. Groups of three or four oocytes were loaded into an open-pulled-straw and directly plunged into liquid nitrogen. Oocytes were subsequently re-warmed by exposure to air (25°C) for 4sec, followed by 5 min exposure to decreasing concentrations (0.3 and 0.15M) of sucrose. Fertilization (Day 0) was done with 2 x 106 spermatozoa mL-1 (selected by a swim-up procedure) and incubated for 18 to 22 hours. Presumptive zygotes were cultured at 39°C in four-well dishes with SOFaaci medium, under 5% CO2 and saturated humidity. Cleavage (Day 2) and blastocyst rates (Day 8) were 33.9 and 4.2%, respectively, for GV stage oocytes at atmospheric pressure, 41.2 and 8.8% for GV oocytes under vacuum, 43.5 and 6.7% for MII oocytes at atmospheric pressure, and 53.6 and 10.6% for MII oocytes under vacuum. In conclusion, vacuum-cooled liquid nitrogen improved developmental rates of vitrified-thawed bovine oocytes.