ABSTRACT The search for vegetable extracts for phytosanitary control has been expanded to find new active ingredients to control plant diseases. This study aimed to evaluate the in vitro effect of the fixed constituents of Copaifera luetzelburgii, Croton zehntneri and Lippia lasiocalycina, at the concentrations of 2, 20, 200 and 2,000 μg mL-1, on the percentage of mycelial growth inhibition of Colletotrichum siamense, C. truncatum, Fusarium sacchari, F. udum, Lasiodiplodia theobromae and Thielaviopsis ethacetica, as well as the conidium concentration of C. siamense, F. sacchari and F. udum produced in culture medium with all the extracts. The tested ethanolic extract, especially at the highest concentration, inhibited the percentage of mycelial growth and/or conidium concentration of the evaluated fungi. The other concentrations showed low inhibitory effects or no activity against the fungi. The average values for percentage of mycelial growth inhibition of the ethanolic extract from L. lasiocalycina, C. zehntneri and C. luetzelburgii against the six fungi were 62.5, 53.4 and 51.0 %, respectively. The ethanolic extract of L. lasiocalycina showed the most significant effect on the percentage of mycelial growth inhibition and conidia concentration. The fixed constituents of C. luetzelburgii, C. zehntneri and L. lasiocalycina at 2,000 μg mL-1 showed to be efficient in inhibiting the mycelial growth of C. siamense, C. truncatum, F. sacchari, F. udum, L. theobromae and T. ethacetica, and inhibit the conidia production of C. siamense, F. sacchari and F. udum.

RESUMO A busca por extratos vegetais para serem utilizados no controle fitossanitário tem sido ampliada, visando encontrar novos ingredientes ativos para o controle de doenças de plantas. Objetivou-se avaliar o efeito in vitro dos constituintes fixos de Copaifera luetzelburgii, Croton zehntneri e Lippia lasiocalycina, nas concentrações de 2; 20; 200; e 2.000 μg mL-1, sobre o percentual de inibição de crescimento micelial de Colletotrichum siamense, C. truncatum, Fusarium sacchari, F. udum, Lasiodiplodia theobromae e Thielaviopsis ethacetica, bem como a concentração de conídios de C. siamense, F. sacchari e F. udum produzidos em meio de cultura com todos os extratos. O extrato etanólico testado, principalmente na maior concentração, inibiu o percentual de crescimento micelial e/ou concentração de conídios dos fungos avaliados. As demais concentrações apresentaram baixos efeitos inibitórios ou nenhuma atividade contra os fungos. Os valores médios para percentual de inibição de crescimento micelial do extrato etanólico de L. lasiocalycina, C. zehntneri e C. luetzelburgii contra os seis fungos foram de 62,5; 53,4; e 51,0 %, respectivamente. O extrato etanólico de L. lasiocalycina apresentou o efeito mais significativo sobre o percentual de inibição de crescimento micelial e concentração de conídios. Os constituintes fixos de C. luetzelburgii, C. zehntneri e L. lasiocalycina a 2.000 μg mL-1 mostraram-se eficientes na inibição do crescimento micelial de C. siamense, C. truncatum, F. sacchari, F. udum, L. theobromae e T. ethacetica, e inibem a produção de conídios de C. siamense, F. sacchari e F. udum.

ABSTRACT Lima bean plants showing mosaic and leaf distortion symptoms, similar to those induced by viruses, were observed in several production areas in the states of Ceará and Piauí, Northeastern Brazil. The aim of this study was to identify RNA genome viruses that infect lima bean. Field research was conducted from 2017 to 2018. Fifty-five symptomatic samples were randomly collected from seven properties in five municipalities and tested by RT-PCR and DNA sequencing with specific or universal primers for two viruses and two virus groups. Four virus species were identified: cucumber mosaic virus (CMV), cowpea mild mottle virus (CPMMV), cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV) and cowpea severe mosaic virus (CPSMV), which had infection levels of 21.8, 52.7, 47.2, and 1.8%, respectively, as well as double and triple infections. The CMV isolates belonged to subgroup IA. The CPMMV isolates had high nucleotide identity with CPMMV isolates from Brazil, USA and Mexico. The CABMV isolates showed moderate nucleotide identity with Brazilian isolates. Only one sample was infected with CPSMV. This is the first record of CPMMV and CPSMV naturally infecting lima bean. Approaches to virus control are discussed.

RESUMO Objetivou-se verificar o potencial de folhas de girassol mexicano (Tithonia diversifolia) como alternativa de manejo ao nematoide Pratylenchus brachyurus em quiabeiro. Foram conduzidos dois ensaios em casa de vegetação, em delineamento inteiramente casualizado, com sete repetições, sendo cada parcela composta por um vaso contendo uma planta. Utilizou-se o quiabeiro como planta indicadora e o sorgo como testemunha suscetível. Os tratamentos foram cinco níveis de fitomassa verde e seca (0, 5, 10, 15 e 20 g kg-1 de solo) de T. diversifolia, incorporada ou na forma de cobertura do solo, para avaliar o efeito sobre a população de P. brachyurus. A incorporação de folhas frescas de T. diversifolia no solo, como adubo verde, reduziu a população de P. brachyurus 60 dias após a inoculação, com destaque para o nível de 20 g kg-1 de solo que possibilitou reduzir a população do nematoide (FR=0,00). Com 5 g de fitomassa seca, em cobertura, de T. diversifolia foi possível reduzir 2,96 % a população do nematoide, enquanto que os níveis de fitomassa seca de 10, 15 e 20 g kg-1 de solo eliminou o patógeno. Conclui-se que a incorporação ao solo de folhas frescas de T. diversifolia, e a cobertura morta com folhas de T. diversifolia sobre o solo, na forma de fitomassa seca, proporcionaram redução na população de P. brachyurus no solo e nas raízes de quiabeiro, sendo uma alternativa importante para o manejo de P. brachyurus

ABSTRACT The objective of this study was to verify the potential of Mexican sunflower leaves (Tithonia diversifolia) as an alternative for the management of the nematode Pratylenchus brachyurus in okra. Two trials were conducted in a greenhouse, in a completely randomized design, with seven replicates, and each plot consisting of one pot containing one plant. Okra was used as an indicator plant and sorghum as a susceptible control. Treatments were five levels of green and dry phytomass (0, 5, 10, 15 and 20 g kg-1 soil) of T. diversifolia, incorporated in the soil or as soil cover, to evaluate their effect on P. brachyurus population. The incorporation of fresh leaves of T. diversifolia in the soil as green manure reduced P. brachyurus population 60 days after inoculation, especially the level of 20 g kg-1 soil, which allowed complete reduction in the nematode population (FR = 0.00). At 5 g dry phytomass of T. diversifolia, as soil cover, nematode population could be reduced by 2.96%, while the dry phytomass levels of 10, 15 and 20 g kg-1 soil eliminated the pathogen. In conclusion, the incorporation of fresh leaves of T. diversifolia in the soil and mulching with T. diversifolia leaves on the soil, in the form of dry phytomass, provided a reduction in the population of P. brachyurus in the soil and in the roots of okra, constituting an important alternative for the management of P. brachyurus.

A antracnose afeta a qualidade de inflorescências de plantas ornamentais tropicais, e a espécie fúngica Colletotrichum gloeosporioides tem sido relacionada a essa doença apenas por análises morfológicas. Por isso, o presente trabalho teve como objetivos identificar isolados de Colletotrichum coletados em plantas de antúrio (Anthurium andraeanum), bastão do imperador (Etlingera elatior) e helicônia (Heliconia spp.), por meio de caracteres morfológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a variabilidade genética por meio de oligonucleotídeos arbitrários (AP-PCR). Pelas características morfológicas de tamanho de conídio e de apressório, todos os isolados foram identificados como C. gloeosporioides. Um fragmento de 450pb específico para C. gloeosporioides foi amplificado em todos os isolados analisados, com exceção de C 23 e C 35. A caracterização molecular realizada com três oligonucleotídeos arbitrários ((GACAC)3, (GACA)4 e (CAG)5) possibilitou a formação de três grupos de isolados, com padrões de bandas distintos. Portanto, conclui-se que as metodologias utilizadas foram eficientes na identificação de isolados de C. gloeosporioides provenientes das espécies ornamentais avaliadas e que, nos isolados analisados, não existe relação entre a similaridade observada no padrão de bandas obtido por AP-PCR e a área de coleta ou a planta hospedeira.

Anthracnose affects inflorescences quality of ornamentals tropical plants and the fungi specie Colletotrichum gloeosporioides has been related with this disease based only on morphology. Therefore, the objectives of this research was to identify Colletotrichum isolates collected on anthurium (Anthurium andraeanum), torch ginger (Etlingera elatior) and heliconia (Heliconia spp.) plants by means of morphology and polymerase chain reaction (PCR) and also verify the genetic variability using arbitrary-primed PCR (AP-PCR). All isolates were identified as C. gloeosporioides by conidium and appressorium size. A fragment of 450bp specific for C. gloeosporioides was amplified for all isolates analyzed, except for C 23 and C 35 isolates. The molecular characterization yielded three groups of isolates with different band patterns by using (GACAC)3, (GACA)4 and (CAG)5 AP-PCR. The employed methodologies were efficient to identify the C. gloeosporioides isolates collected on ornamental plants and there isn't relation between similarity of band patterns and geographic region or plant specie on the isolates analyzed.

A análise SDS-PAGE do Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) purificado revelou a migração de três frações protéicas estimadas em 43, 23 e 21 kDa, correspondentes às proteínas do capsídeo: denominadas proteína maior (43 kDa) e menor (23 kDa; intacta e 21 kDa; clivada). As proteínas do capsídeo, na sua forma nativa, foram utilizadas na imunização de camundongos pelas vias oral e nasal, durante 10 dias consecutivos. As frações protéicas de 43 e 23 kDa, em sua forma desnaturada, foram utilizadas para imunização subcutânea. A resposta imunológica da mucosa foi avaliada pela proliferação celular das placas de Peyer de camundongos imunizados pela via oral com o CPSMV purificado. Ficou demonstrado que o CPSMV induz resposta imunológica, evidenciada pela síntese de anticorpos séricos, quando administrado na sua forma nativa pelas vias oral e nasal ou através de suas proteínas do capsídeo desnaturadas, pela via subcutânea. Não foi necessário o uso de adjuvantes, quer por via oral quer por via nasal. As frações protéicas de 43 e 23 kDa mostraram-se responsáveis pela imunogenicidade do vírus, como foi evidenciado pela síntese de anticorpos específicos detectados por ELISA. A análise da proliferação celular da placas de Peyer revelou um aumento (r=0,88) do número de leucócitos ao longo de 42 dias após a imunização. Esses resultados reforçam a possibilidade do uso do CPSMV como vetor seguro de antígenos de doenças humanas/animais pouco imunogênicos para produção de vacinas.

SDS-PAGE analysis of purified Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) revealed the migration of three protein fractions of 43, 23 and 21 kDa, corresponding to the capsid protein called large protein (43 kDa) and small protein (23 kDa; intact and 21 kDa; cleaved). The capsid proteins, in their native form, were used to immunize mice through oral and nasal routes for ten consecutive days. The denatured form of the 43 and 23 kDa protein fractions were used for subcutaneous immunization. The mucosal immune response was detected by the cellular proliferation of the Peyer's patches of mice immunized by oral route with CPSMV. It was demonstrated that CPSMV induces immune response, evidenced by the synthesis of specific antibodies, when administered in the native form by the oral and nasal routes or with two denatured capsid proteins by the subcutaneous route. The use of adjuvants in the oral and nasal immunizations was not necessary. The 43 and 23 kDa protein fractions were responsible for the immunogenicity of the virus, evidenced by the synthesis of specific antibodies detected by ELISA test. The cellular proliferation analysis of the Peyer's patches revealed an increase (r=0.88) of leucocytes along 42 days after immunization. The results reinforce the possibility of the use of CPSMV as a safe vector of antigens for human/animal diseases of low immunogenicity for the production of vaccines.

Foram avaliadas 20 linhagens de melancia, provenientes do cruzamento da cultivar comercial suscetível Crimson Sweet e da introdução PI 595201 resistente ao Watermelon mosaic virus (WMV) e Papaya ringspot virus (PRSV-W). As linhagens, e os parentais foram inoculados com o WMV ou com o PRSV-W em casa-de-vegetação distintas. Aos 35 e 49 dias após a primeira inoculação (DAI), as plantas foram avaliadas por meio de uma escala de notas, em que 1 (ausência de sintomas) a 5 (intenso mosaico e deformações foliares). Pelos resultados infere-se que, aos 35 DAI, as linhagens 1, 2 e 20 apresentaram resistência tanto para o WMV como para o PRSV-W, com médias de 1,95, 1,80 e 2,25 para o WMV, e de 2,50, 2,30 e 2,50 para o PRSV-W, respectivamente. As linhagens 5, 7 e 13 foram resistentes somente ao WMV e as plantas das linhagens 3, 10 e 18 para o PRSV-W. A reação das linhagens permaneceu em geral pouco alterada aos 49 DAI. A existência de linhagens resistentes somente ao WMV e somente ao PRSV-W, ao lado de linhagens resistentes a ambos os vírus, é indicativo de que as resistências ao WMV e ao PRSV-W não são controladas pelos mesmos genes.

Twenty advanced watermelon breeding lines, derived from the cross between cv. Crimson Sweet (susceptible) and PI 595201 (resistant to WMV and PRSV-W), were screened for resistance to both potyviruses. The twenty lines, among with Crimson Sweet and PI 595201, were inoculated with either WMV or PRSV-W, in two different greenhouse trials. Plants were evaluated for symptoms 35 and 49 days after the first inoculation (DAI), using a scale from 1 (no symptoms) to 5 (severe mosaic and foliar distortion). Evaluations at 35 DAI indicated that lines 1, 2 and 20 had good levels of resistance to both WMV and PRSV-W, with ratings of 1,95, 1,80 and 2,25 for WMV, and of 2,50, 2,30 and 2,50 for PRSV-W, respectively. Lines 5, 7 and 13 were resistant to WMV only, whereas lines 3, 10 and 18 were resistant to PRSV-W only. The reaction of the lines 49 DAI remained essentially unchanged. The existence of lines with resistance to WMV only and to PRSV-W only, along with lines with resistance to both viruses, indicates that resistance to WMV and PRSV-W are under control of different genes.