Abstract The genus Neorickettsia comprises trematode-associated bacteria that can cause diseases in animals and humans. Despite detection of Neorickettsia antigens in the intestine of coatis kept in captivity in southern Brazil through immunohistochemistry, the molecular identity of the bacteria in South American procyonids remains elusive. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Neorickettsia sp. in blood samples from coatis in central-western Brazil. Between March 2018 and January 2019, animals were captured and recaptured in two areas of the Cerrado (Parque Estadual do Prosa, PEP; and Vila da Base Aérea, VBA) located in the city of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, central-western Brazil. All captures were performed according to convenience. DNA from 97 blood samples was subjected to nested PCR (nPCR) targeting a fragment of the 16S rRNA gene of Neorickettsia sp. Six samples (3.6%; five from VBA and one from PEP) from different coatis were positive in nPCR based on the 16S rRNA. The sequences obtained (~500 bp) showed ˃ 99% similarity to N. risticii. Phylogenetic analysis clustered the sequences detected in the present study in a clade with N. risticii. This is the first molecular detection of Neorickettsia sp. in coatis in Brazil. trematodeassociated trematode associated humans immunohistochemistry elusive sp centralwestern central western 201 2019 Parque Prosa PEP Aérea Grande Sul convenience 9 (nPCR S 3.6% 36 3 6 (3.6% ~500 500 (~50 bp 99 N risticii 20 3.6 (3.6 ~50 50 (~5 2 3. (3. ~5 5 (~ (3 ~ (

Resumo O gênero Neorickettsia compreende bactérias associadas a trematódeos que podem causar doenças em animais e humanos. Apesar da detecção de antígenos de Neorickettsia por imuno-histoquímica no intestino de quatis mantidos em cativeiro no sul do Brasil, a identidade molecular da bactéria em procionídeos da América do Sul permanece indefinida. O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência de Neorickettsia sp. em amostras de sangue de quatis do Centro-Oeste do Brasil. Entre março de 2018 e janeiro de 2019, os animais foram capturados em duas áreas de Cerrado (Parque Estadual do Prosa PEP e Vila da Base Aérea VBA) localizadas na cidade de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Centro-Oeste do Brasil. Todas as capturas e recapturas foram realizadas por conveniência. O DNA de 97 amostras de sangue foi submetido a "nested" (nPCR), baseada em um fragmento do gene 16S rRNA de Neorickettsia sp. Seis (3,6% - 5 de VBA e 1 de PEP) amostras de quatis diferentes foram positivas na nPCR, baseada no rRNA 16S. As sequências obtidas (~500 pb) apresentaram ˃99% de identidade com N. risticii. A inferência filogenética agrupou as sequencias detectadas no presente estudo em um clado com N. risticii. Esta é a primeira detecção molecular de Neorickettsia sp. em quatis do Brasil. humanos imunohistoquímica imuno histoquímica Brasil indefinida sp CentroOeste Centro Oeste 201 2019 Parque Grande conveniência 9 nested "nested nPCR , (nPCR) S 3,6% 36 3 6 (3,6 ~500 500 (~50 pb 99 ˃99 N risticii 20 (nPCR 3,6 (3, ~50 50 (~5 ˃9 2 3, (3 ~5 (~ ˃ ( ~

Resumo Foi avaliada a epidemiologia, hematologia e patologia das infecções por Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, vírus da imunodeficiência felina (FIV) e vírus da leucemia felina (FeLV) e das coinfecções em gatos não domiciliados em uma área endêmica para leishmaniose. O diagnóstico foi realizado por exames sorológicos e necropsia. Foram descritas lesões macroscópicas e achados histopatológicos. Usaram-se imuno-histoquímica e hibridização cromogênica in situ para detecção de L. infantum. Encontrou-se infecção em 27 dos 50 gatos amostrados, dentre eles, 14 apresentavam coinfecções. Foi observada forte correlação entre esplenomegalia e linfadenomegalia com FeLV, e associação entre lesões hepáticas e caquexia com parasitismo por P. illiciens. Além disso, foi encontrado um aumento significativo na contagem de monócitos nos animais infectados pelo FeLV e uma diminuição na contagem de hemácias nos animais infectados pelo FIV. Formas amastigotas de Leishmania spp. e alterações teciduais foram detectadas em órgãos linfoides de um animal coinfectado com P. illiciens, T. gondii e FIV. O poliparasitismo registrado em gatos errantes do Centro-Oeste brasileiro deve ser considerado nas estratégias de controle de zoonoses. Além disso, gatos errantes de Campo Grande podem ser fontes de infecção de FIV, FeLV e P. illiciens para populações de gatos domiciliados.

Abstract We evaluated the epidemiological, hematological, and pathological data of Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Platynosomum illiciens, feline immunodeficiency virus (FIV), and feline leukemia virus (FeLV) infections and the coinfections in stray cats of an endemic area for leishmaniasis. The diagnosis was performed by serological tests and necropsy. We described gross lesions and histopathological findings. We used immunohistochemistry and chromogenic in situ hybridization for L. infantum detection. We found infection in 27 out of 50 sampled cats, among them, 14 presented coinfections. A strong correlation between splenomegaly and lymphadenomegaly with FeLV, and an association between hepatic lesions and cachexia with parasitism due to P. illiciens were observed. Moreover, we found a significant increase in the monocyte count in the FeLV-infected and a decrease in the red blood cell count in the FIV-infected animals. Amastigote forms of Leishmania spp. and tissue changes were detected in lymphoid organs of an animal coinfected with P. illiciens, T. gondii, and FIV. Polyparasitism recorded in stray cats of the Brazilian Midwest should be considered in effective control strategies for public health diseases. Moreover, stray cats of Campo Grande may be a source of infection of FIV, FeLV and P. illiciens for populations of domiciled cats.

ABSTRACT Background: Rickettsia of the spotted fever group (SFG) has been reported in ticks and domestic animals in Campo Grande (CG), Midwest Brazil. Methods: We searched for Rickettsia in the SFG in capybaras and their ticks in an urban park in the CG. Results: The seropositivity rate was 88.2% (15/17). Although 87.7% of the capybaras sampled showed infestations with Amblyomma sculptum, A. dubitatum, and Amblyomma spp., no molecular results were detected in ticks. Conclusions: Since Rickettsia from the SFG circulates among capybaras in the urban parks of Campo Grande, this large rodent species should be monitored within the One Health Agenda.

Resumo O objetivo do trabalho foi avaliar a influência do sexo, da sazonalidade e de infecções por Trypanosoma cruzi e Trypanosoma evansi nos valores hematológicos de lobinhos (Cerdocyon thous) que habitam o Pantanal Sul-Mato-Grossense. Entre novembro de 2015 e outubro de 2016, foram amostrados 48 lobinhos. Os valores hematológicos mensurados foram as contagens de eritrócitos e leucócitos, volume globular e volume corpuscular médio. Consideramos como parasitados os animais positivos para T.cruzi e T. evansi em qualquer um dos testes diagnósticos utilizados. Observamos que sete (14.5%) lobinhos encontraram-se parasitados somente por T.cruzi, sete por T. evansi, e nove (19%) estavam coinfectados. Os animais parasitados por T.cruzi mostraram um aumento significativo das contagens de leucócitos (14.7 x 103) em relação aos animais não parasitados (10.4 x 103), parasitados por T. evansi (12.4 x 103) e coinfectados (12.9 x 103). Observamos diferença significativa em relação aos valores médios de eritrócitos e volume corpuscular médio entre os períodos de cheia e seca: 2.6 x 106 e 165, e 3.4 x 106 e 132, respectivamente. Todos apresentaram macrocitose não confirmada morfologicamente.

Abstract The aim of this work was to evaluate the influence of sex, seasonality and infections by Trypanosoma cruzi and Trypanosoma evansi on the hematological values of crab-eating foxes (Cerdocyon thous) that inhabit the Pantanal from Mato Grosso do Sul. Between November of 2015 and October of 2016, 48 animals were sampled. The hematological values measured were erythrocyte and leukocyte counts, globular volume and mean corpuscular volume. We considered as parasitized the positive animals for T.cruzi and T. evansi in any of diagnostic tests used. We observed that seven (14.5%) of the crab-eating foxes were parasitized only by T.cruzi, seven by T. evansi, and nine (19%) were coinfected. The parasitized animals by T.cruzi showed a significant increase in leukocyte counts (14.7 x 103) compared to non-parasitized animals (10.4 x 103), parasitized by T. evansi (12.4 x 103) and coinfected (12.9 x 103). We observed a significant difference in relation to mean erythrocyte and mean corpuscular volume values between wet and dry periods: 2.6 x 106 and 165, and 3.4 x 106 and 132, respectively. All presented morphologically unconfirmed macrocytosis.

RESUMO A mandioca tem sido amplamente utilizada para alimentação animal e humana. Também tem sido demonstrado que possui propriedades anti-neoplásicas e anti-helmínticas. A toxicidade devido ao consumo da mandioca tem sido relatada em ruminantes e animais de laboratório. Assim, este estudo teve como objetivo investigar os efeitos tóxicos da acetona cianidrina, um metabólito da linamarina que está presente na mandioca, em ratos Wistar. Foram utilizados seis grupos de cinco animais cada para avaliar os efeitos tóxicos da acetona cianidrina administrada a 25 (G1), 50 (G2), 75 (G3), 100 (G4) e 125 (G5) umol / kg como uma dose oral única. O grupo controle recebeu água acidificada (pH 3,5). Os animais foram monitorados após a administração de acetona cianidrina e os sintomas clínicos foram registrados. Os níveis séricos das enzimas foram medidos para avaliar a função renal e hepática. Durante a necropsia, amostras teciduais foram coletadas para análise histopatológica. Após a administração, alguns animais dos grupos G2, G4 e G5 apresentaram sintomas neurológicos como convulsões, contração muscular involuntária, andar cambaleante, incordenação motora, prostração e midríase. Todos os animais do G5 e quatro animais do G4 morreram após sete minutos da administração de acetona cianidrina. Animais dos outros grupos, particularmente do G2, se recuperaram da fase aguda. A análise bioquímica revelou lesões e disfunção hepáticas. A histopatologia revelou lesões severas no fígado e cérebro. Os resultados permitem inferir que a acetona cianidrina tem efeitos tóxicos no fígado, pulmão e sistema nervoso central de ratos. No entanto, em concentrações de até 25 umol / kg os animais podem sobreviver à fase aguda.

ABSTRACT Cassava has been widely used for animal and human nutrition. It has also been demonstrated to have antineoplastic and anthelmintic properties. Toxicity due to cassava consumption has been reported in ruminants and laboratory animals; therefore, this study aimed to investigate the toxic effects of acetone cyanohydrin, a metabolite of linamarin that is present in cassava, in Wistar rats. Six groups of five animals each were used to evaluate the toxic effects of acetone cyanohydrin administered at 25 (G1), 50 (G2), 75 (G3), 100 (G4) and 125 (G5) µmol/kg as a single oral dose. The control group received acidified water (pH 3.5). The animals were monitored after administration of acetone cyanohydrin, and clinical symptoms were recorded. Serum enzyme levels were measured to assess the kidney and liver function. During necropsy, tissue samples were collected for histopathological examination. After administration, some animals in the G2, G4, and G5 groups presented neurological symptoms such as convulsions, involuntary muscle contraction, staggering gait, motor coordination disability, prostration, and mydriasis. All of the animals in the G5 and four animals in the G4 group died seven minutes after the administration of acetone cyanohydrin. Animals in the other groups, particularly in G2, recovered from the acute phase. Biochemical analysis revealed hepatic lesions and liver dysfunction. Histopathology revealed severe lesions in both the liver and brain. In conclusion, acetone cyanohydrin has toxic effects in the liver, lung, and central nervous system in rats; however, at concentrations up to 25 µmol/kg, the animals could survive the acute phase.

A infecção simultânea por parasitas de diferentes espécies pode resultar em alterações imprevisíveis. O presente estudo avaliou a patologia de cães naturalmente coinfectados por Leishmania infantum e Ehrlichia canis. A saúde dos cães foi investigada pelas análises histopatológicas, hematológicas e bioquímicas de 21 cães infectados somente por L. infantum e 22 cães coinfectados por L. infantum e E. canis. Observou-se uma reação inflamatória crônica, predominantemente linfohistioplasmocítica, na pele dos dois grupos. A plasmocitose, encontrada nos tecidos linfóides, provavelmente estava relacionada com a hipergamaglobulinemia observada em todos os cães amostrados. A desorganização da matriz extracelular da derme da região inguinal e da orelha, demonstrada pela substituição das fibras de colágeno espessas por fibras finas, foi relacionada com o grau de reação inflamatória, independente da presença de parasitas. Ainda, observamos duas vezes mais animais do grupo coinfectado apresentando formas amastigotas na pele de orelha pela histopatologia comparado ao número de cães infectados apenas por Leishmania, tornando-os desta forma mais infectivos aos vetores. Nossos resultados ressaltam que a saúde de cães coinfectados estava severamente comprometida devido aos altos níveis de proteína plasmática total, globulinas, fosfatase alcalina, creatina quinase e anemia acentuada.

Different parasites that commonly occur concomitantly can influence one another, sometimes with unpredictable effects. We evaluated pathological aspects of dogs naturally co-infected with Leishmania infantum and Ehrlichia canis. The health status of the dogs was investigated based on histopathological, hematological and biochemical analyses of 21 animals infected solely with L. infantum and 22 dogs co- infected with L. infantum and E. canis. The skin of both groups showed chronic, predominantly lymphohistioplasmacytic inflammatory reaction. The plasmacytosis in the lymphoid tissues was likely related with the hypergammaglobulinemia detected in all the dogs. The disorganization of extracellular matrix found in the reticular dermis of the inguinal region and ear, characterized by the substitution of thick collagen fibers for thin fibers, was attributed to the degree of inflammatory reaction, irrespective of the presence of parasites. In addition, the histopathological analysis revealed that twice as many dogs in the co-infected group presented Leishmania amastigotes in the ear skin than those infected solely with Leishmania, increasing the possibility of becoming infected through sand fly vectors. Our findings highlight the fact that the health of dogs infected concomitantly with L. infantum and E. canis is severely compromised due to their high levels of total plasma protein, globulins, alkaline phosphatase and creatine kinase, and severe anemia.

Patógenos transmitidos por carrapatos atingem uma variedade de hospedeiros vertebrados. Para identificar os agentes patogênicos transmitidos por carrapatos entre cães soropositivos para Leishmania infantum no município Campo Grande-MS, foi realizado um estudo sorológico e molecular para a detecção de Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Babesia vogeli em 60 amostras de soro e baço, respectivamente. Adicionalmente, foi realizado o diagnóstico confirmatório de L. infantum por meio de técnicas sorológicas e moleculares. Também foi realizado o alinhamento e análise filogenética das sequências para indicar a identidade das espécies de parasitas que infectam esses animais. Anticorpos IgG anti-Ehrlichia spp., anti-B. vogeli e anti-L. infantum foram detectados em 39 (65%), 49 (81,6%) e 60 (100%) dos cães amostrados, respectivamente. Vinte e sete (45%), cinquenta e quatro (90%), cinquenta e três (88,3%), dois (3,3%) e um (1,6%) cães mostraram-se positivos na PCR para E. canis, Leishmania spp., Leishmania donovani complex, Babesia sp. e Anaplasma sp., respectivamente. Após o seqüenciamento, os amplicons mostraram 99% de similaridade com isolados de E. canis, B. vogeli e A. platys e Leishmania chagasi. Os resultados deste estudo indicaram que os cães soropositivos para L. infantum de Campo Grande, MS, são expostos a vários agentes transmitidos por carrapatos, e, portanto, devem ser incluídos no diagnóstico diferencial em cães com suspeita clínica de leishmaniose.

Tick-borne pathogens affect a wide range of vertebrate hosts. To identify tick-borne pathogens among dogs from Campo Grande, MS, Brazil testing seropositive for Leishmania infantum (syn. L. chagasi), a serological and molecular study was conducted to detect Ehrlichia canis, Anaplasma platys and Babesia vogeli in 60 serum and spleen samples. A confirmatory diagnosis of L. infantum based on serological and molecular assays was also performed, as was sequence alignment and phylogenetic analysis to assess the identity of the parasite species infecting these animals. IgG antibodies to Ehrlichia spp., B. vogeli and L. infantum were found, respectively, in 39 (65%), 49 (81.6%) and 60 (100%) of the sampled dogs. Twenty-seven (45%), fifty-four (90%), fifty-three (88.3%), two (3.3%) and one (1.6%) dog were positive, respectively, for E. canis, Leishmania spp., Leishmania donovani complex, Babesia sp. and Anaplasma sp. in PCR assays. After sequencing, the amplicons showed 99% of identity with E. canis, B. vogeli, A. platys and Leishmania chagasi isolates. The findings of this study indicate that L. infantum-seropositive dogs from Campo Grande are exposed to multiple tick-borne pathogens, which should therefore be included in the differential diagnosis of dogs with clinical suspicion of leishmaniasis.

A leishmaniose visceral acomete vários órgãos entre eles os rins; o que pode levar a insuficiência renal e a morte. Com o objetivo de verificar este acometimento renal foram avaliados materiais de 100 cães naturalmente infectados e com diagnósticos sorológicos de leishmaniose visceral canina - LVC. As alterações inflamatórias estavam presentes em 25,3% dos túbulos, em 67,0% do interstício e em 52,0% dos glomérulos. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre a presença de glomerulonefrite em cães sintomáticos e oligossintomáticos. As glomerulonefrites membranosa e membrano proliferativa foram as mais freqüentes, ambas com 18,0% de freqüência seguidas da glomeruloesclerose segmentar e focal com 14,0%. Foram observadas alterações como cilindrúria, hipertrofia tubular e fibrose e infiltrados inflamatórios periglomerulares e peritubulares multifocais e difusos. Os achados concordam com os de outros autores indicando que o acometimento renal é comum na LVC e que os padrões de glomerulonefrites membranoploriferativa e membranosa; assim como o acometimento tubulointersticial são freqüentes.

Visceral leishmaniasis affects various organs including the kidneys; which can lead to renal failure and death. In order to verify this renal involvement, material was evaluated from 100 dogs naturally infected and with serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL). Inflammatory changes were present in 25.3% of the tubules, in 67.0% of interstitium and in 52.0% of glomeruli. There was no significant difference (p > 0.05) between the presence of glomerulonephritis in symptomatic and oligosymptomatic dogs. The membranous and membranoproliferative glomerulonephritis were the most frequent, both with 18.0% frequency, followed by focal segmental glomerulosclerosis with 14.0%. Changes such as cylindruria, tubular and fibrosis hypertrophy, periglomerular inflammatory infiltrate, and multifocal and diffuse peritubular inflammatory infiltrate were observed. The findings are consistent with those of other authors indicating that renal involvement is common in CVL and the standards of membranous and membranoploriferative glomerulonephritis, as well as the tubulointerstitial involvement, are frequent.