RESUMO Os fungos Colletotrichum truncatum e Macrophomina phaseolina estão entre os principais patógenos associados a sementes de feijão-fava no Brasil, sendo os agentes causais da antracnose e da podridão de carvão, respectivamente. Este trabalho teve como objetivo verificar a transmissão semente-plântula de C. truncatum e M. phaseolina em sementes de feijão-fava inoculadas artificialmente. Meios de cultura batata-dextrose-agar (BDA) com diferentes potenciais hídricos foram obtidos após a adição de manitol. Isolados de C. truncatum e M. phaseolina foram repicados para esses meios. Quarenta gramas de sementes foram distribuídas sobre o micélio fúngico, permanecendo por diferentes períodos de exposição, em função do tratamento: T1: 0,0 MPa sem inóculo por 48 h; T2: 0,0 MPa por 48 h; T3: - 0,2 MPa por 48 h; T4: -0,4 MPa por 48 h; T5: -0,6 MPa por 72 h; T6: - 0,8 MPa por 96 h e T7: -1,0 MPa por 120 h. As sementes foram incubadas a 25 ºC, com fotoperíodo de 12 horas. Foram avaliadas a germinação em rolo de papel, a emergência de plântulas em areia e a sanidade de sementes em BDA. O T4 proporcionou melhores condições para impedir temporariamente a germinação das sementes, promovendo maior incidência de sementes infectadas por C. truncatum e maior porcentagem de plântulas doentes. M. phaseolina reduziu a germinação das sementes, independente do tratamento inoculado. Ambos os fungos foram transmitidos das sementes para as plântulas de feijão-fava, causando sintomas em diferentes órgãos aéreos. A taxa de transmissão de C. truncatum e M. phaseolina foi de 83,1% e 76.46%, respectivamente.

ABSTRACT The fungi Colletotrichum truncatum and Macrophomina phaseolina are among the main pathogens associated with lima bean seeds in Brazil, and they are the causal agents of anthracnose and charcoal rot, respectively. The aim of this study was to verify the seed-seedling transmission of C. truncatum and M. phaseolina in artificially inoculated lima bean seeds. Potato-dextrose-agar (PDA) media with different hydric potentials were obtained after the addition of mannitol. Isolates of C. truncatum and M. phaseolina were peaked to these media. Forty grams of seeds were distributed over the fungal mycelium, remaining there for different exposure periods, as a function of each treatment: T1: 0.0 MPa without inoculum for 48 h; T2: 0.0 MPa for 48 h; T3: -0.2 MPa for 48 h; T4: -0.4 MPa for 48 h; T5: -0.6 MPa for 72 h; T6: -0.8 MPa for 96 h and T7: -1.0 MPa for 120 h. The seeds were incubated at 25 ºC under a 12-hour photoperiod. Germination in a paper roll, emergence of seedlings in sand and seed health in PDA were evaluated. T4 provided the best conditions to temporarily prevent seed germination, promoting a greater incidence of seeds infected by C. truncatum and a greater percentage of diseased plants. M. phaseolina reduced seed germination, independently of the inoculated treatment. Both fungi were transmitted from the seeds to the seedlings of lima bean, causing symptoms in various aerial parts. C. truncatum and M. phaseolina transmission rate was 83.1% and 76.46%, respectively.

RESUMO A antracnose é uma doença causada por fungos do gênero Colletotrichum que afeta inúmeras culturas, inclusive plantas ornamentais. Objetivou-se avaliar a patogenicidade e agressividade de isolados de Colletotrichum gloeosporioides Penz. (Sacc.) Cg1 (mamoeiro), Cg2 (goiabeira) e Cg3 (mangueira), nas variedades de pimentas ornamentais Stromboli, Etna e Pirâmide, em duas épocas do ano (julho/agosto e novembro/dezembro de 2013). Avaliou-se a patogenicidade dos fungos e a severidade dos sintomas nas plantas utilizando-se uma escala de notas. Os três isolados de C. gloeosporioides foram patogênicos às três variedades de pimenta ornamental avaliadas, apresentando níveis diferenciados de agressividade entre as variedades. Houve influência das condições ambientais na agressividade dos isolados, sendo que a maior severidade foi obtida na segunda época de condução do experimento.

ABSTRACT Anthracnose, a disease caused by fungi of the Colletotrichum genus, affects many crops, including ornamental plants. This study aimed at evaluating the pathogenicity and aggressiveness of the Colletotrichum gloeosporioides Penz. (Sacc.) isolates Cg1 (papaya), Cg2 (guava) and Cg3 (mango) in the ornamental pepper varieties Stromboli, Etna and Pirâmide, during two different periods (July/August and November/December 2013). The fungi pathogenicity and the severity of plant symptoms were assessed using a grading scale. The three C. gloeosporioides isolates were pathogenic to the three ornamental pepper varieties studied, exhibiting different levels of aggressiveness among them. The environmental conditions influenced the isolates aggressiveness, with the most severe symptoms observed in the second assessment period.

A antracnose, geralmente causada por Colletotrichum gloeosporioides, afeta a qualidade de inflorescências em diversas espécies de plantas ornamentais tropicais e destaca-se como uma das principais doenças de origem fúngica, para estas culturas. O objetivo deste trabalho foi verificar a agressividade e a produção de exoenzimas, em meio sólido, de 25 isolados de Colletotrichum obtidos a partir de inflorescências de antúrio, bastão do imperador e helicônia, com sintomas de necrose. As hastes florais sintomáticas foram colhidas em diversos municípios produtores do Estado de Pernambuco e, em seguida, levadas para o laboratório, onde foram realizados os isolamentos. Os isolados foram inoculados em hastes florais das três culturas avaliadas e a agressividade foi avaliada cinco dias após a inoculação. Os isolados também foram plaqueados, em meios de cultura específicos, para verificar a atividade amilolítica, lipolítica e proteolítica, sendo avaliados aos sete dias após a inoculação. A agressividade dos isolados foi variável e alguns isolados não foram patogênicos, quando inoculados em seus hospedeiros de origem. Seis isolados foram patogênicos a todas as espécies ornamentais avaliadas e quatro isolados apresentaram especificidade ao hospedeiro. Todos os isolados avaliados apresentaram atividade amilolítica, lipolítica e proteolítica. Não foi observada relação entre a agressividade e as atividades enzimáticas nos isolados testados.

Anthracnose, generally caused by Colletotrichum gloeosporioides, affects inflorescences quality in different species of ornamental tropical plants and it is one of the main fungal diseases to those crops. The objective of this study was to evaluate the aggressiveness and exoenzimes production on solid medium of 25 Colletotrichum isolates collected from anthurium, torch ginger, and heliconia plants with necrosis symptoms. The symptomatic floral stems were harvested in different counties of the Pernambuco State, Brazil, and carried to the laboratory, where the isolation process took place. The isolates were inoculated in the floral stems bracts of the three species studied, and the aggressiveness evaluated five days after inoculation. Isolates were also plated on specific culture media to determine amylolytic, lipolytic, and proteolytic activity, and assessed seven days after inoculation. The isolates aggressiveness was variable and some of them were not pathogenic when inoculated to their origin hosts. Six isolates were pathogenic to all the analyzed ornamental species and four isolates showed host specificity. All tested isolates presented amylolytic, lipolytic, and proteolytic activity. No relation between aggressiveness and enzyme activity was observed in the isolates tested.

A qualidade da haste floral de roseira é afetada por inúmeros defeitos, como botão pequeno ou presença de doenças e ferimentos. Este trabalho teve como objetivo avaliar as características morfológicas (comprimento e retidão da haste e do botão floral) e fitossanitárias (incidência de míldio, oídio, mofo cinzento e dano causado por lagarta) de sete variedades de roseira cultivadas em ambiente protegido. As características foram observadas em três avaliações. O comprimento médio de haste floral variou de 56,1 a 83,3cm, enquanto que o comprimento médio dos botões variou de 4,7 a 5,2cm. Foram observados sintomas de míldio, oídio, mofo cinzento e injúria causada por lagarta nas hastes florais, sendo o oídio o principal problema fitossanitário observado, tendo afetado de 2,9 a 41,3% das hastes, dependendo da variedade. Cerca de 70% das hastes de cada variedade apresentaram características do tipo de C ou D durante a etapa de classificação. Esses resultados reforçam a necessidade da avaliação das diversas características das variedades adquiridas, antes da implementação do cultivo comercial.

The quality of the rose's floral stem can be affected by numerous faults as small button or diseases and injuries. This study aimed to evaluate the morphological (length and rightness of stem and rose bud) and fitossanitary (downy mildew, powdery mildew, gray mold and caterpillar damage) characteristics in seven varieties of rose grown in a greenhouse. The characteristics were analyzed three times. The average length of floral stems ranged from 56.1 to 83.3cm, while the average length of buttons ranged from 4.7 to 5.2cm in the varieties evaluated. Symptoms of downy mildew, powdery mildew, gray mold and damage caused by caterpillar were observed, although powdery mildew were the main problem witch affect from 2,9 to 41,3% of floral stems. About 70% of the stems of all varieties showed characteristics of type C or D during the classification stage. These results reinforce the necessity of evaluating new varieties before the implementation of commercial cultivation.

A antracnose afeta a qualidade de inflorescências de plantas ornamentais tropicais, e a espécie fúngica Colletotrichum gloeosporioides tem sido relacionada a essa doença apenas por análises morfológicas. Por isso, o presente trabalho teve como objetivos identificar isolados de Colletotrichum coletados em plantas de antúrio (Anthurium andraeanum), bastão do imperador (Etlingera elatior) e helicônia (Heliconia spp.), por meio de caracteres morfológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a variabilidade genética por meio de oligonucleotídeos arbitrários (AP-PCR). Pelas características morfológicas de tamanho de conídio e de apressório, todos os isolados foram identificados como C. gloeosporioides. Um fragmento de 450pb específico para C. gloeosporioides foi amplificado em todos os isolados analisados, com exceção de C 23 e C 35. A caracterização molecular realizada com três oligonucleotídeos arbitrários ((GACAC)3, (GACA)4 e (CAG)5) possibilitou a formação de três grupos de isolados, com padrões de bandas distintos. Portanto, conclui-se que as metodologias utilizadas foram eficientes na identificação de isolados de C. gloeosporioides provenientes das espécies ornamentais avaliadas e que, nos isolados analisados, não existe relação entre a similaridade observada no padrão de bandas obtido por AP-PCR e a área de coleta ou a planta hospedeira.

Anthracnose affects inflorescences quality of ornamentals tropical plants and the fungi specie Colletotrichum gloeosporioides has been related with this disease based only on morphology. Therefore, the objectives of this research was to identify Colletotrichum isolates collected on anthurium (Anthurium andraeanum), torch ginger (Etlingera elatior) and heliconia (Heliconia spp.) plants by means of morphology and polymerase chain reaction (PCR) and also verify the genetic variability using arbitrary-primed PCR (AP-PCR). All isolates were identified as C. gloeosporioides by conidium and appressorium size. A fragment of 450bp specific for C. gloeosporioides was amplified for all isolates analyzed, except for C 23 and C 35 isolates. The molecular characterization yielded three groups of isolates with different band patterns by using (GACAC)3, (GACA)4 and (CAG)5 AP-PCR. The employed methodologies were efficient to identify the C. gloeosporioides isolates collected on ornamental plants and there isn't relation between similarity of band patterns and geographic region or plant specie on the isolates analyzed.

O efeito dos produtos acibenzolar S-metil ester (ASM, Bion®), fosfito de potássio (Hortifós PK®) e de um fertilizante foliar (Nutex Axcell®) foi avaliado sobre a germinação de esporos e no crescimento micelial de Phoma costarricensis. O efeito desses produtos também foi avaliado na severidade da mancha de Phoma em mudas de cafeeiro. O percentual de germinação dos conídios de P. costarricensis não foi afetado pelas doses de fosfito e ASM, mas reduções no crescimento micelial do fungo foram observadas. A AACPD e a severidade da doença foram menores em todos os tratamentos quando comparados com a testemunha inoculada. Nas plantas tratadas com o fungicida tebuconazole, utilizado como padrão, foi observada redução de 50,9% na severidade da doença. Os menores valores de severidade e de AACPD foram observados nas plantas tratadas com ASM 0,1 g/L; Fosfito 2,5 mL/L; Fosfito 5,0 mL/L e o fertilizante Nutex Axcell® 4,0 mL/L.

The effect of acibenzolar S-metil ester (ASM, Bion®), potassium phosfite (Hortifós PK®) and of a foliar fertilizer (Nutex Axcell®) was assessed on the spore germination and mycelial growth of Phoma costarricensis. The effect of these products on severity of Phoma leaf spot was also assessed on coffee seedlings. The percentage of conidial germination of P. costarricensis was not affected by doses of phosfite and ASM, but reductions on the mycelial growth of the fungus were detected. The area under the disease progress curve (AUDPC) and the disease severity were lower in all treatments compared to the inoculated control. There was a reduction of 50.9% on disease severity in plants treated with the standard fungicide tebuconazole. Low values for severity and AUDPC were observed when plants were treated with ASM 0.1 g/L; phosfite 2.5 mL/L; phosfite 5.0 mL/L and the fertilizer Nutex Axcell® at 4.0 mL/L, which differed from other treatments.

A análise SDS-PAGE do Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) purificado revelou a migração de três frações protéicas estimadas em 43, 23 e 21 kDa, correspondentes às proteínas do capsídeo: denominadas proteína maior (43 kDa) e menor (23 kDa; intacta e 21 kDa; clivada). As proteínas do capsídeo, na sua forma nativa, foram utilizadas na imunização de camundongos pelas vias oral e nasal, durante 10 dias consecutivos. As frações protéicas de 43 e 23 kDa, em sua forma desnaturada, foram utilizadas para imunização subcutânea. A resposta imunológica da mucosa foi avaliada pela proliferação celular das placas de Peyer de camundongos imunizados pela via oral com o CPSMV purificado. Ficou demonstrado que o CPSMV induz resposta imunológica, evidenciada pela síntese de anticorpos séricos, quando administrado na sua forma nativa pelas vias oral e nasal ou através de suas proteínas do capsídeo desnaturadas, pela via subcutânea. Não foi necessário o uso de adjuvantes, quer por via oral quer por via nasal. As frações protéicas de 43 e 23 kDa mostraram-se responsáveis pela imunogenicidade do vírus, como foi evidenciado pela síntese de anticorpos específicos detectados por ELISA. A análise da proliferação celular da placas de Peyer revelou um aumento (r=0,88) do número de leucócitos ao longo de 42 dias após a imunização. Esses resultados reforçam a possibilidade do uso do CPSMV como vetor seguro de antígenos de doenças humanas/animais pouco imunogênicos para produção de vacinas.

SDS-PAGE analysis of purified Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) revealed the migration of three protein fractions of 43, 23 and 21 kDa, corresponding to the capsid protein called large protein (43 kDa) and small protein (23 kDa; intact and 21 kDa; cleaved). The capsid proteins, in their native form, were used to immunize mice through oral and nasal routes for ten consecutive days. The denatured form of the 43 and 23 kDa protein fractions were used for subcutaneous immunization. The mucosal immune response was detected by the cellular proliferation of the Peyer's patches of mice immunized by oral route with CPSMV. It was demonstrated that CPSMV induces immune response, evidenced by the synthesis of specific antibodies, when administered in the native form by the oral and nasal routes or with two denatured capsid proteins by the subcutaneous route. The use of adjuvants in the oral and nasal immunizations was not necessary. The 43 and 23 kDa protein fractions were responsible for the immunogenicity of the virus, evidenced by the synthesis of specific antibodies detected by ELISA test. The cellular proliferation analysis of the Peyer's patches revealed an increase (r=0.88) of leucocytes along 42 days after immunization. The results reinforce the possibility of the use of CPSMV as a safe vector of antigens for human/animal diseases of low immunogenicity for the production of vaccines.

A antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc., é uma importante doença do bastão do imperador [Etlingera elatior (Jack) Smith] no Nordeste brasileiro. Considerando a inexistência de métodos padronizados para quantificação dessa doença, foi elaborada uma escala diagramática com os níveis 1, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 82 e 92% de área da bráctea lesionada, testando-se a acurácia, a precisão e a reprodutibilidade das estimativas de severidade da antracnose com e sem a utilização da escala. A escala diagramática foi validada por 10 avaliadores, usando 45 brácteas com diferentes níveis de severidade da antracnose. Sem a escala, a maioria dos avaliadores superestimou a severidade da doença. Com a escala, os avaliadores obtiveram melhores níveis de acurácia e precisão, com os erros absolutos concentrando-se na faixa de 10%. Os avaliadores apresentaram elevada repetibilidade (95%) e reprodutibilidade (<FONT FACE=Symbol>³</FONT>90% em 75,6% dos casos) das estimativas com a utilização da escala. A escala diagramática proposta demonstrou ser adequada para avaliação da severidade da antracnose em bastão do imperador.

Anthracnose caused by the fungus Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc. is an important disease of torch ginger [Etlingera elatior (Jack) Smith] in the Brazilian Northeast. Considering the inexistence of standard methods for assessment of this disease, a diagrammatic scale was developed with 1, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 82 and 92% of diseased bracts area and tested for accuracy, precision and reproducibility of the estimative of anthracnose severity with and without using the scale. The diagrammatic key was validated by 10 raters, using 45 bracts with different levels of severity. Without the diagrammatic scale most of raters overestimated disease severity. With the scale raters obtained better levels of accuracy and precision, with absolute errors concentrated around 10%. Raters showed great repeatability (95%) and reproducibility (<FONT FACE=Symbol>³</FONT>90% in 75.6% of cases) of estimative by using the scale. The proposed diagrammatic scale was suitable for the evaluation of torch ginger anthracnose severity.

O antúrio é uma planta semi-herbácea de folhas verdes vistosas, formato cordiforme e inflorescências com espatas de diversas cores de acordo com a cultivar, onde tanto a folhagem quanto as inflorescências são de importância ornamental. A antracnose causada por Colletotrichum gloeosporioides é uma das principais doenças nessa cultura, estando presente em vários plantios comerciais brasileiros. Os sintomas manifestam-se sobre as folhas, na forma de lesões pardas predominantes nas bordas ou junto às nervuras. Nas espatas ocorrem pequenas manchas escuras, que evoluem para uma podridão encharcada, prejudicando a comercialização das hastes. Essa pesquisa objetivou verificar o efeito da idade da espata, da quantidade de pontos e época de inoculação no desenvolvimento dos sintomas da antracnose, bem como a reação de cultivares de antúrio quando inoculadas com diferentes isolados de C. gloeosporioides (Cg). A idade da espata influenciou o desenvolvimento da lesão para os dois isolados avaliados. Em espatas no estádio 1, sem a completa abertura, as lesões formadas foram significativamente maiores do que aquelas formadas em espatas nos estádios 4 e 5. As maiores lesões causadas pelos isolados do patógeno foram formadas com cinco pontos de ferimento nas duas cultivares de antúrio (cvs. Tropical e Cananéia). A época de inoculação não influenciou no tamanho da lesão, nas duas cultivares avaliadas. Os menores períodos de incubação (PI) para o isolado Cg 1 foram observados nas cultivares Astral, Tropical, Netuno e Farao, diferindo significativamente das demais cultivares. Nas cultivares Sonate, Astral, Tropical, Netuno e Farao foram observados os menores PI para o isolado Cg 2. A menor área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD) resultante da inoculação com Cg 1 foi observada em Sonate, que diferiu das demais cultivares. As menores AACPD ocasionadas pelo isolado Cg 2 foram observadas em Laguna e Midori, que diferiram das cultivares Cananéia, Sonate, Astral, Tropical e Netuno.

The anthurium is a semi-herbaceous plant with green leaves, of heart form and inflorescence with espathe of different colors changing with the cultivar both of ornamental importance. The antracnose caused by Colletotrichum gloeosporioides is one the most important diseases the crop, found in many Brazilian commercial fields. The symptoms develop on the leaves forming dark lesions usually dose to the vein. In the espathe, small dark lesions may occur devaluating the product for selling. This research had the objective of verifying the effect of espathe age, the quantity of inoculation points, as well as the reaction of anthurium cultivars when inoculated with different isolates of C. gloeosporioides (Cg). The age of the espathe influenced the lesion development for both isolates. On espathe estage 1, not completed open, the lesions were significantly different from espathes on 4 and 5 estages. The biggest lesions were achieved with five wound points on the two cultivars (cvs. Tropical and Cananéia) and two isolates tested. The inoculation time did not influence the lesion size. The incubation period (IP) was variable with cultivars and isolate. The smallest IP for Cg 1 isolate were observed on CVA, Astral, Tropical, Netuno and Farao. On Sonate, Astral, Tropical, Netuno and Farao cultivars were observed the smallest IP for Cg 2 isolate. The smallest Area Under the Disease Progress Curve (AUDPC) were observed on Sonate for Cg 1 and on Laguna and Midori for Cg 2.