Resumo Objetivo Avaliar os efeitos do estrogênio, raloxifeno e genisteína na expressão de KISS1 (kisspeptina), KISS1R (receptor da kisspeptina), AR (receptor de androgênio) e INSR (receptor de insulina) nos ossos de ratas ovariectomizadas. Métodos Quarenta e oito ratas adultas foram divididas aleatoriamente em 6 grupos, contendo 8 animais cada: G1–controle não ovariectomizado); G2–ovariectomizado e tratado com estrogênios conjugados equinos (50 µg/Kg/dia); G3–ovariectomizado e tratado com raloxifeno (0,75 mg/kg/dia); G4–ovariectomizado que recebeu extrato de soja com genisteína (300 mg/kg/dia); G5–ovariectomizado que recebeu estrogênio e genisteína; e G6–ovariectomizado que recebeu estrogênio e raloxifeno. Após 3 meses da cirurgia, os animais castrados receberam os fármacos diariamente por via oral, durante 120 dias. Todos os animais foram sacrificados após esse período, por aprofundamento da anestesia. A tíbia esquerda foi removida para extração de RNA total e análise da expressão gênica de KISS1, KISS1R, AR e INSR, por reação de cadeia de polimerase quantitativa em tempo real (quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR, em inglês). Resultados KISS1 não foi detectado em nenhum dos grupos tratados. KISS1R, INSR e AR mostraram maior expressão no grupo G3 (p < 0,001), enquanto menores níveis de transcritos para esses genes foram observados em G4 e G5. Os animais de G2 apresentaram hipoexpressão dos genes avaliados. Conclusão Os resultados indicam que o raloxifeno, isolado ou combinado com estrogênio, foi capaz de induzir a expressão de genes associados à recuperação da homeostase do tecido ósseo em ratas ovariectomizadas. KISS kisspeptina, kisspeptina , (kisspeptina) KISSR R receptor kisspeptina) androgênio insulina ovariectomizadas cada G1controle Gcontrole G1 controle G ovariectomizado ovariectomizado) G2ovariectomizado Govariectomizado 50 (5 µg/Kg/dia µgKgdia µg Kg dia µg/Kg/dia) G3ovariectomizado 0,75 075 0 75 (0,7 mg/kg/dia mgkgdia mg kg mg/kg/dia) G4ovariectomizado 300 (30 G5ovariectomizado G5 G6ovariectomizado G6 cirurgia oral 12 dias período anestesia quantitative realtime time reaction qRTPCR, qRTPCR qRT PCR, PCR qRT-PCR inglês. inglês . inglês) tratados p 0,001, 0001 0,001 001 0,001) avaliados (kisspeptina 5 ( 0,7 07 7 (0, 30 (3 1 000 0,00 00 0, (0 0,0
Abstract Objective To evaluate the effects of estrogen, raloxifene and genistein on the expression of KISS1 (kisspeptin), KISS1R (kisspeptin receptor), AR (androgen receptor) and INSR (insulin receptor) in the bones of ovariectomized rats. Methods Forty-eight adult rats were randomly divided into 6 groups, containing 8 animals each: G1–nonovariectomized control; G2–ovariectomized and treated with conjugated equine estrogens (50 µg/Kg/day); G3–ovariectomized and treated with raloxifene (0.75 mg/kg/day); G4–ovariectomized animal that received soy extract with genistein (300 mg/kg/day); G5–ovariectomized animal that received estrogen and genistein; and G6–ovariectomized animal that received estrogen and raloxifene. Three months after surgery, the castrated animals received the drugs orally daily for 120 days. All animals were sacrificed after this period, by deepening the anesthesia. The left tibia was removed for total RNA extraction and analysis of gene expression of KISS1, KISS1R, AR and INSR, by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Results KISS1 was not detected in any of the treated groups. KISS1R, INSR and AR showed higher expression in the G3 group (p < 0.001), while lower levels of transcripts for these genes were observed in G4 and G5. G2 animals showed hypoexpression of the evaluated genes. Conclusion The results indicate that raloxifene, alone or combined with estrogen, was able to induce the expression of genes associated with the recovery of bone tissue homeostasis in ovariectomized rats. KISS kisspeptin, kisspeptin , (kisspeptin) KISSR R receptor, receptor androgen insulin Fortyeight Forty eight groups each G1nonovariectomized Gnonovariectomized G1 nonovariectomized G control G2ovariectomized Govariectomized 50 (5 µg/Kg/day µgKgday µg Kg day µg/Kg/day) G3ovariectomized 0.75 075 0 75 (0.7 mg/kg/day mgkgday mg kg mg/kg/day) G4ovariectomized 300 (30 G5ovariectomized G5 G6ovariectomized G6 surgery 12 days period anesthesia realtime real time qRTPCR. qRTPCR qRT PCR . (qRT-PCR) p 0.001, 0001 0.001 001 0.001) 5 ( 0.7 07 7 (0. 30 (3 1 (qRT-PCR 000 0.00 00 0. (0 3 0.0