RESUMO O hexaclorobenzeno (HCB) foi amplamente utilizado como fungicida e é também subproduto de vários processos industriais, como na fabricação de solventes. Suas características químicas o tornam pouco disponível à degradação química e biológica, levando a bio-acumulação e biomagnificação ao longo da cadeia alimentar. Assim, sua detecção e quantificação em organismos e no ambiente são importantes e, para isto, metodologias eficientes devem possibilitar o rastreamento e a quantificação de contaminação ambiental da maneira mais econômica. Este trabalho comparou diferentes métodos de extração de HCB de sedimentos e águas de estuário e de mar, avaliando as vantagens de cada método. Os testes de recuperação utilizaram amostras de sedimentos e águas de estuário e mar tratadas com HCB em mistura com 14C-HCB como radiotraçador e quantificação do radiocarbono por espectrometria de cintilação em líquido (ECL). A recuperação de 14C-HCB das águas foi comparada por extração das amostras com hexano em coluna C18 e extração líquido-líquido também com hexano como solvente. Nos sedimentos testouse extração com mistura de hexano:acetona e energia de microondas. A extração por fase sólida (C18) foi o melhor método de extração de água, com 88,3% e 83,4% de recuperação, respectivamente de água de estuário e de mar. A extração de sedimento por microondas recuperou 99,5% e 99,9% de radiocarbono, respectivamente de sedimentos de estuário e de mar. A análise custo/benefício indica a extração por coluna C18 para águas e a extração por microondas para sedimentos como os melhores métodos de recuperação e que possibilitarão boa detecção de HCB em estudos de poluição.

ABSTRACT Hexachlorobenzene (HCB) has been widely used as a fungicide and is also a by-product of several industrial processes, such as solvent manufacturing. Its lipophilic and hydrophobic nature, besides its low rate of chemical and biological degradation, can lead to its bio-accumulation and bio-magnification throughout the food net. Therefore, its detection and quantification in organisms and environment are extremely important, and this creates the need for efficient methodologies allowing for its detection and quantification for environmental contamination studies, in a low-cost way. The present study compared different methods of HCB extraction from estuary and sea sediments and waters, assessing the advantages of each method. The recovery tests were performed with samples of estuary and sea sediments, and waters previously treated with HCB in mixture with 14C-HCB as a radiotracer, and the radiocarbon in the extracts was quantified by liquid scintillation counting (LSC). The recovery of 14C-HCB from waters was compared by hexane extraction in C18 cartridges and liquid-liquid extraction, also using hexane. The recovery of 14C-HCB from the sediments was tested with the mixture hexane:acetone and microwave energy. The solid phase (C18) extraction was the best method for water extraction, accounting for 88.3% and 83.4% of recovery, respectively, from estuary and seawater. The microwave extraction recovered 99.5% and 99.9% of14C-HCB, respectively from estuary and sea sediments. The cost/benefit ratio indicates the C-18 solid phase extraction for waters and the microwave extraction for sediments as the best recovery methods, which allow for good detection of HCB in pollution studies.

RESUMO A possibilidade de contaminação do ar e da água a partir de solo contaminado com hexaclorobenzeno foi estudada em laboratório através da análise da volatilização e da lixiviação de 14C-hexaclorobenzeno neste solo. Para o estudo de volatilização, amostras de terra contaminada misturadas a fontes de matéria orgânica, cal, ou alagadas foram tratadas com solução de 14Chexaclorobenzeno; os 14C-compostos voláteis formados foram capturados por lâminas de poliuretano, extraídos com hexano e analisados por Espectrometria de Cintilação em Líquido. A lixiviação do hexaclorobenzeno foi estudada através de percolação de água em tubos de PVC contendo amostras de terra contaminada tratadas com bagaço de cana de açúcar e/ou cal e solução de 14C-hexaclorobenzeno, dispostas sobre amostras de terra não contaminada; os tubos foram seccionados e a terra e a água lixiviada foram analisadas por Espectrometria de Cintilação em Líquido. Houve formação de14C-compostos voláteis em todas as amostras de terra, principalmente nas amostras alagadas e com adição de matéria orgânica e não se observou lixiviação do 14Chexaclorobenzeno, indicando possibilidade de contaminação do ar, mas não de águas subterrâneas.

ABSTRACT The possibility of air and water contamination by hexachlorobenzene derived from a contaminated soil was studied by analysis of volatilization and leaching of 14Chexachlorobenzene. For the volatilization study, contaminated soil samples mixed with organic material sources, lime, or flooded were treated with a 14C-hexachlorobenzene solution; the volatile 14C-compounds were captured by polyurethane lamina, extracted by hexane and analyzed by Liquid Scintillation Counting. The leaching of the hexachlorobenzene was studied by water percolation through PVC tubes containing contaminated soil treated with sugarcane bagasse and/or lime and 14C-HCB placed over noncontaminated soil; the tubes were cut in sections and the soil and the leached water were analyzed by Liquid Scintillation Counting. The volatilization of the 14C-compounds occurred in all the samples, mainly in the flooded samples with organic matter addition and the leaching of the 14C-HCB was not observed, indicating the possibility of contamination of the air but not the groundwater.

ABSTRACT Some crops, as cotton, need different pesticide treatments for control of pests and diseases. These compounds reach the soil where the may promote changes in the microbial activities which may affect the nutrient cycling and the soil fertility. The influence of some pesticides was studied on the soil microbial activity of Gley and Red Latosol soils, respectively from the "Instituto Biológico", SP, Brazil, experimental field (in São Paulo) and "Instituto Agronômico" Experimental Station (at Tatuí), all planted with cotton. The studies on the soil microbial activity were evaluated by measurements of the dehydrogenase (DHA) and arylsulfatase activities, by quantification of formazan and p-nitrophenol, respectively formed by reaction of these enzymes. The DHA activity in the Gley soil varied approximately from 90.7 to 218.7 µg formazan g-1 in the untreated subarea, and from 87.7 µg g-1 after treatment with carbaryl, to 258.8 µg g-1 soil after treatment of the treated subarea with monocrotofos. The variation in the amounts of the formazan formed in the Red Latosol from Tatuí was from 33.3 µg g-1 soil in the first inter-cropping period to 103.8 µg g-1 after the application of the mixture methyl parathion + deltametryn. The arylsulfatase activity varied approximately from 0.75 to 9.76 µg p-nitrophenol g-1 in the untreated subarea, and from 3.7 µg g-1 soil after treatment with carbaryl to 11.6 µg g-1 soil also after treatment with monocrotofos. In the Red Latosol from Tatuí, this enzyme activity varied from 0 in the inter-cropping period to 3.81 µg p-nitrophenol g-1 soil after the methyl parathion treatment. It was then verified that pesticides influenced differently the 2 types of soil, by promotion or inhibition of the studied soil enzymes activities. crops cotton diseases fertility soils Instituto Biológico, Biológico , Biológico" SP Brazil Paulo Agronômico at Tatuí) (DHA pnitrophenol, pnitrophenol p nitrophenol, nitrophenol 907 90 7 90. 2187 218 218. g1 g 1 g- 877 87 87. 2588 258 8 258. monocrotofos 333 33 3 33. intercropping inter cropping 1038 103 103. deltametryn 075 75 0.7 976 9 76 9.7 37 3. 116 11 6 11. 381 81 3.8 21 25 10 07 0. 97 9. 38

RESUMO Algumas culturas, como o algodão, necessitam de tratamentos com diferentes agrotóxicos para controle de pragas. Estes compostos atingem o solo e podem afetar a microbiota provocando mudanças nas atividades de ciclagem de nutrientes e conseqüentemente, na fertilidade dos solos. A influência dos vários agrotóxicos utilizados em algodão foi estudada sobre a atividade microbiológica de solo Gleissolo de área do campo experimental do Instituto Biológico, SP, que foi subdividida em duas subáreas, e em solo Nitossolo Vermelho Distrófico coletado de área da Estação Experimental do Instituto Agronômico, Tatuí, SP, todas sob plantio de algodão. Os estudos de atividade microbiológica do solo foram realizados por meio de medidas da atividade das enzimas desidrogenase (DHA) e arilsulfatase por quantificação de formazan e p-nitrofenol, respectivamente. A atividade da DHA no Gleissolo variou de aproximadamente 90,7 a 218,7 µg de formazan g-1 solo na subárea sem tratamento e de 87,7 µg g-1 solo após aplicação de carbaril a 258,8 µg g-1 solo após tratamento com monocrotofós na subárea tratada com os agrotóxicos. No Nitossolo Vermelho Distrófico, a variação da DHA foi de 33,3 µg formazan g-1 solo no primeiro período entre plantios a 103,8 µg g-1 solo após aplicação da mistura de paration metílico + deltametrina. A atividade da arilsulfatase variou aproximadamente de 0,75 a 9,76 µg p-nitrofenol g-1 solo na subárea sem tratamento de São Paulo e de 3,8 µg g-1 solo após tratamento com carbaril a 11,6 µg g-1 solo também após tratamento com monocrotofós. No solo de Tatuí a atividade desta enzima variou de 0 no período entre plantios a 3,81 µg g -1 solo após aplicação de paration metílico. Verificou-se que os agrotóxicos atuaram diferentemente nos 2 tipos de solo, ora inibindo, ora estimulando a atividade das enzimas estudadas. culturas pragas conseqüentemente solos Biológico SP subáreas Agronômico (DHA pnitrofenol, pnitrofenol p nitrofenol, nitrofenol respectivamente 907 90 7 90, 2187 218 218, g1 1 g- 877 87 87, 2588 258 8 258, 333 33 3 33, 1038 103 103, deltametrina 075 75 0,7 976 9 76 9,7 38 3, 116 11 6 11, 381 81 - Verificouse Verificou se inibindo estudadas 21 25 10 07 0, 97 9,

Com a difusão do uso de agrotóxicos, torna-se necessário aprofundar os conhecimentos sobre seu comportamento no ambiente, visando diminuir os riscos à biota e a possível contaminação de água, solo e alimentos. A influência da presença de minhocas da espécie Eisenia foetida sobre a dissipação do herbicida glyphosate, a bioacumulação do herbicida nestes vermes e a influência do herbicida sobre a bioatividade da microbiota endógena foram avaliadas em amostra de terra agrícola tratada com solução aquosa de 14C-glyphosate. Os estudos foram conduzidos em sistemas mantidos por dois ou quatro meses em amostras de terra tratadas com três diferentes concentrações de 14C-glyphosate, contendo ou não minhocas. Após esses períodos, amostras de terra e de minhocas foram submetidas à extração e combustão, para quantificação da radioatividade por espectrometria de cintilação em líquido (ECL). Paralelamente, a atividade da microbiota foi avaliada em relação à atividade da enzima desidrogenase. Os resultados mostraram que a presença de minhocas não alterou a dissipação de glyphosate na terra independentemente do período de contato, embora elas tenham bioacumulado resíduos do herbicida, numa relação diretamente proporcional ao tempo de contato com a terra tratada. O período de quatro meses favoreceu a formação de 14C-resíduos não-extraíveis ou ligados. Já a bioatividade não sofreu qualquer alteração, nem pela presença de minhocas nem dos tratamentos ou do tempo de exposição.

The widespread usage of pesticides leads to the need of improving the knowledge on their environmental behaviour in order to decrease the risks to biota, as well as the water, soil, and food contamination. The influence of the earthworms Eisenia foetida on the dissipation of glyphosate, the herbicide bioaccumulation in the worms and the influence of the herbicide on the endogeneous microbial bioactivity were evaluated in an agricultural soil sample treated with aqueous solution of 14C-glyphosate. The studies were performed in systems maintained for 2 or 4 months containing soil samples treated with three different concentrations of 14C-glyphosate and containing or not the earthworms. After these periods, soil samples and the earthworms were extracted and combusted for radiocarbon quantification by liquid scintillation counting (ECL). The microbial bioactivity was evaluated through the activity of the dehydrogenase enzyme. Results showed that earthworms did not influence the soil dissipation of glyphosate, independently of the contact period, although they bioaccumulated glyphosate residues, proportionally to the contact period. The higher period favoured the 14C-non-extractable or bound residues production. Soil bioactivity was not altered, neither by the earthworms, nor by the treatments or time after treatments.