A broca-da-bananeira (Cosmopolites sordidus) é a principal praga dos cultivos de banana, acarretando perdas significativas na produtividade da cultura, sendo recomendados inseticidas químicos para seu controle, os quais causam impacto ambiental. Por outro lado, os nematoides entomopatogênicos podem ser uma alternativa para o controle da praga, principalmente devido aos seus hábitos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar isolados de nematoides entomopatogênicos em condições de laboratório e a interação com inseticida químico (carbofurano), visando a sua utilização no controle da broca. Foram testados 16 isolados das famílias Sterinernematidae e Heterorhabditidae, aplicados sobre pseudocaule de banananeira (100 JIs/cm²) e comparados entre si quanto à mortalidade causada em indivíduos adultos de C. sordidus. Os isolados mais infectivos foram submetidos a experimentos de multiplicação in vivo no hospedeiro Galleria mellonella e de interação com o inseticida carbofurano incluindo, neste caso, análise de viabilidade e infectividade dos nematoides expostos ao produto, bem como o efeito do inseticida sobre as bactérias simbiontes dos nematoides entomopatogênicos. Os experimentos dessa fase foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, sendo os dados submetidos à ANOVA, com aplicação do teste de Tukey (p < 0,05). Os isolados mais virulentos foram o IBCBn24 e IBCBn40 (respectivamente 33,3% e 36,7% de mortalidade confirmada), os quais também apresentaram elevada multiplicação em cadáveres. O inseticida não afetou a viabilidade do isolado IBCBn40, mas prejudicou sua infectividade, porém, não afetou o desenvolvimento da bactéria simbionte.

The banana weevil borer (Cosmopolites sordidus) is the main pest of banana crops, causing significant losses in productivity, being recommended control by chemical insecticides which cause several environmental impacts. On the other hand, entomopathogenic nematodes can be an alternative to the pest control, mainly because of their habits. Thus, this study aimed at evaluating isolated entomopathogenic nematodes under laboratory conditions and also their interaction with a chemical insecticide (carbofuran), aiming at their use for the weevil borer control. Sixteen Sterinernematidae and Heterorhabditidae isolates were evaluated, applied over the banana tree pseudo stem (100 JIs/cm²) and they were compared to one another concerning mortality caused in adults individual of C. sordidus. The most infective isolates were subjected to in vivo multiplication at the host Galleria mellonella and interaction with the insecticide carbofuran, including in this case, viability and infectivity analysis of the entomopathogenic nematodes exposed to the product, as well as the effect of the insecticide on the symbiotic bacteria of the entomopathogenic nematodes. The experiments at this stage were conducted in completely randomized design and the data were subjected to ANOVA, with application of the Tukey test (p < 0.05). The most virulent isolates were IBCBn24 and IBCBn40 (respectively 33.3% and 36.7% of confirmed mortality), which also showed high multiplication in corpses. The insecticide did not affect the viability of the isolate, but it really harmed its infectivity, although it did not affect the development of the symbiotic bacterium.

Adultos do percevejo de renda Vatiga manihotae (Drake) foram coletados em uma plantação comercial de mandioca (Manihotae esculenta Crantz), variedade fécula branca, em Marechal Cândido Rondon, Paraná, região Oeste do estado, Brasil, com sinais da presença de fungo sobre o corpo, sendo realizados procedimentos para isolamento e identificação do fungo. Uma vez obtido, foram utilizados os postulados de Koch para estabelecer uma relação causal entre o patógeno obtido e o inseto. Nos cadáveres observou-se a repetição da sintomatologia anterior que confirmaou a relação causal da doença. O fungo foi identificado como Beauveria bassiana e causou a morte de apenas 14% dos insetos após 10 dias de inoculação. Este é o primeiro relato natural da ocorrência desta espécie de fungo infectando V. manihote e novos estudos de seleção de isolados devem ser realizados.

Adults of Vatiga manihotae (Drake) were collected on cassava plantation (Manihotae esculenta Crantz), fécula branca variety, in Marechal Cândido Rondon, West region of Paraná state, Brazil, showing symptoms of fungi infection. Isolation and fungi identification procedures were performed. After that, Koch's postulates were used to prove the link between the fungus and insect and i noculated insects showed symptoms similar to the previously observed. Fungus was identified as Beauveria bassiana and caused the death of 14% of the insects 10 days after inoculation. This is the first record of natural occurrence of this species of fungus infecting V. manihote and further studies should be conducted to evaluated new isolates to control of this species.

RESUMO O presente trabalho buscou desenvolver uma metodologia que possibilita a realização em laboratório, estudos de biologia e avaliação de estratégias de controle a Vatiga manihotae (Drake) (Hemiptera: Tingidae). O trabalho foi conduzido no período de setembro de 2008 a março de 2009. Foram coletadas em campo folhas de mandioca infestadas com ninfas e adultos do percevejo de renda e acondicionadas em gaiolas revestidas com tela antiafídica. Posteriormente, os insetos foram transferidos para bandejas plásticas cobertas com tampa telada. Os pecíolos das folhas de mandioca foram envoltos com algodão hidrófilo umedecido e revestido com papel alumínio, para a manutenção da turgidez da folha, as quais eram trocadas em média a cada dois dias, a fim de garantir a alimentação dos insetos. Após a aplicação dos produtos em teste, folhas da planta de mandioca foram infestadas com ninfas e adultos do inseto, e envoltas em gaiolas foliares confeccionadas com tela antiafídica e polietileno incolor e transparente. Essa técnica mostrou-se favorável para o desenvolvimento de bioensaios com V. manihotae, permitindo obter um grande número de adultos em folhas de mandioca, facilidade de manuseio e baixa mortalidade dos indivíduos.

ABSTRACT This study sought to develop a methodology that can be carried out in the laboratory, for studying the biology of Vatiga manihotae (Drake) (Hemiptera: Tingidae) and evaluating the control strategies for this cassava pest. The study was conducted from September 2008 to March 2009. Field collections were made of cassava leaves infested with nymphs and adults of the lacebug, and they were placed in cages lined with anti-aphid screen. Subsequently, the insects were transferred to plastic trays covered with a screened lid. The petioles of cassava leaves were wrapped with moistened cotton wool and covered with aluminum foil to maintain the turgidity of the leaves, which were exchanged on average every 2 days in order to ensure the supply of insects. After application of the test products, cassava leaves were infested with nymphs and adults of V. manihotae, and then wrapped in leaf cages made with colorless, transparent polyethylene screen. This technique proved to be favorable for the development of bioassays with V. manihotae, allowing for a large number of adults in cassava leaves, ease of handling and low mortality of individuals.

RESUMO As crescentes despesas com o custo do meio para o cultivo de Metarhizium anisopliae levantam a necessidade de averiguar a eficiência de alguns resíduos agroindustriais que, além de propriedades nutricionais importantes, possuem grande disponibilidade e baixo custo. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Tecnologia das Fermentações, UNIOESTE, Campus de Cascavel, PR. Neste trabalho, foram avaliados como substratos arroz polido (meio padrão), arroz vermelho, arroz polido suplementado com melaço (2,5%, 5% e 10%), resíduo de cervejaria, resíduo de fecularia, arroz polido + resíduo de cervejaria (1:1) e arroz polido + resíduo de fecularia (1:1). Os experimentos foram realizados em triplicata, em frascos Erlernmeyer de 250 mL contendo 30 g do substrato (ou 15 g de cada, quando em mistura) e umidade de 70 ± 10%. Os frascos foram inoculados com 0,5 mL da suspensão de conídios (1 × 108 conídios/mL) e incubados em BOD (25 ± 1o C, fotofase 12h, 7 dias). Dentre os meios testados, verificou-se uma elevada produção de conídios no meio composto por arroz + resíduo de cervejaria (11,3 × 108 conídios/g de substrato) e no arroz (9,6 × 108 conídios/g). Os conídios produzidos no meio de arroz + resíduo de cervejaria apresentaram atividade inseticida frente a Spodoptera frugiperda semelhante a dos conídios produzidos no arroz. Este novo meio de cultivo poderá proporcionar uma redução de custo de aproximadamente 50%, representando uma alternativa viável para a produção do fungo.

ABSTRACT Increasing costs of substrate for production of Metarizhiuma nisopliae raise the necessity of investigating the efficiency of some agro-industrial residues that, in addition to important nutritional properties, are widely available at low cost. The assays were conducted at the Fermentation Technology Laboratory, UNIOESTE, Cascavel, PR, Brazil. In this work, substrates such as polished rice (standard media), red rice, polished rice + sugar molasses (2.5%, 5% and 10%), brewery residue, cassava residue, polished rice + brewery residue (1:1) and polished rice + cassava residue (1:1) were evaluated. The experiments were carried out in triplicate, in Erlernmeyer flasks of 250 mL, containing 30 g of the substrate (or 15 g of each one, when as mixture) and moisture content of 70 ± 10%. The flasks were inoculated with 0.5 mL of conidia suspension (1 × 108 conidia/mL) and then incubated in controlled temperature and light (25 ± 1o C, 12 hours photophase, 7 days). High conidial production was verified in rice + brewery residue media (11.30 × 108 conidia/g of substrate and in the polished rice (9.59 × 108 conidia/g of substrate). The conidia produced in rice + brewery residue media showed an insecticidal activity against Spodoptera frugiperda similar to that attained with the conidia produced in rice. This new culture media may provide a reduction of approximately 50% in the production cost, thus presenting a viable alternative for the fungus production.

RESUMO Embora os inseticidas químicos sejam os mais utilizados no controle do cascudinho dos aviários (Alphitobius diaperinus), falhas no emprego levam ao insucesso do método. Assim, objetivou-se avaliar o efeito do tratamento do solo com inseticida químico sobre a população do cascudinho em aviário de frango de corte. O experimento foi realizado em um aviário comercial, em Cascavel, PR, acompanhando-se a população dos insetos por 6 meses previamente à aplicação, com armadilhas modificadas de Arends. No solo, a população foi monitorada pela retirada de amostras em três momentos: previamente à aplicação, logo após a ela e 3 meses após o tratamento. Após a retirada da cama, aplicou-se um inseticida comercial (cipermetrina, clorpirifós e citronelal) no solo do aviário (5 L de calda/m 2, 2,5 mL do produto/L de água), antes da colocação da nova cama e do alojamento do novo lote. A população dos insetos foi monitorada por igual período e com o mesmo tipo de armadilha. A média obtida antes do tratamento foi de 755 larvas e 89 adultos/armadilha. Após a aplicação, a média de larvas e adultos reduziu-se, para 166 e 23 indivíduos/armadilha, respectivamente. No solo, verificouse elevada mortalidade de larvas e pupas, devido ao contato com o produto que infiltrou, em média, 13 cm.

ABSTRACT Although the use of insecticides is the most common means to control the lesser mealworm ( Alphitobius diaperinus), irregular treatment causes insufficient control. Therefore, the present study was aimed to evaluate the effect of soil treatment with chemical insecticide on the lesser mealworm population. The experiment was carried out in a commercial poultry house, in Cascavel, state of Paraná, Brazil. Before application, in order to quantify beetle population, various Arend’s traps were placed in the poultry house litter for 6 months. After the poultry house was cleaned, the insecticide was applied (cypermethrin, chlorpyriphos and citronellal) on the soil (5 L of water solution/m2; 2.5 mL insecticide/L of water). Subsequently, the insect population was checked for 6 months. The results showed a mean of 775 larvae and 89 adults/trap before treatment and 166 larvae and 23 adults/traps afterward. In the soil, high larval and pupal mortality were observed, due to contact with the insecticide that infiltrated the soil on average 13 cm deep.

RESUMO A utilização de plantas inseticidas tem se mostrado uma ferramenta promissora para controle de insetos, contudo ainda há muito pouco no que diz respeito ao efeito sobre Alphitobius diaperinus (Panzer). Portanto, o objetivo do trabalho foi avaliar a atividade inseticida de extratos vegetais visando o controle desse inseto em aviários. Foram testados extratos etanólicos (E), diclorometânicos (D), hexânicos (H) e aquosos (A) de Annonamuricata, Chenopodiumambrosioides, Eucalyptus grandis, Melia azedarach, Ocimum basilicum, Ruta graveolens e Tagetes erecta, e um óleo comercial à base de nim, Azadirachta indica (Dalneem®). Os extratos e o óleo foram diluídos na concentração de 10% e pulverizados sobre os insetos, mantidos em placas de Petri. O controle recebeu aplicação de água destilada. Os tratamentos mais eficientes foram óleo comercial de A. indica (97,5%), extrato de R. graveolens (E) (61,3%), C. ambrosioides (H) (32,5%) e de folhas de M. azedarach (E e D) (ambos 26,3%). Comparou-se também a aplicação direta do óleo sobre o inseto e aplicação na superfície com a qual o inseto ficaria em contato, sendo maior a eficiência quando pulverizado sobre os insetos (100%) em relação ao contato com superfície tratada (40,9%). Comparando-se diferentes concentrações do óleo pulverizado nos insetos, observou-se relação direta entre atividade inseticida e concentração utilizada, não havendo efeito apenas na menor concentração (0,1%). Contudo, o óleo não apresentou atividade sobre os insetos quando aplicado na cama do aviário.

ABSTRACT The use of insecticidal plants seems to be a promising method for insect control, however there are few studies in relation to their effect on Alphitobius diaperinus (Panzer). The present study was carried out to evaluate the insecticidal activity of plant extracts for the alternative control of this insect in poultry houses. Tests were made using ethanolic (E), dichlorometanic (D), hexanic (H) and aqueous (A) extracts from Annona muricata, Chenopodium ambrosioides, Eucalyptus grandis, Melia azedarach, Ocimum basilicum, Ruta graveolens andTagetes erecta, and a commercial oil from Azadirachta indica (Dalneem®). Extracts and oil were diluted at 10% and sprayed on the insects, kept in Petri dishes, and the control consisted of distilled water. The most effective treatments were: A. indica commercial oil (97.5%), extracts from R. graveolens (E) (61.3%), C. ambrosioides (H) (32.5%) and leaf extracts from M. azedarach (E and D) (both 26.3%). The direct application of the neem oil on the insect was also tested in comparison to its application on the surface with which the insect would be in contact;in this case the efficiency was higher when sprayed on the insects (100%) in relation to the contact with treated surface (40.9%). Comparing different concentrations of the neem oil sprayed on the insects, a direct relation between insecticidal activity and concentration was observed, although no effect was observed at the lowest concentration (0.1%). However, the neem oil did not present activity on the insects when applied in the poultry litter.

RESUMO A broca-da-erva-mate, Hedypathes betulinus (Klug, 1825) (Coleoptera: Cerambycidae), é uma das principais pragas dessa cultura. Seu controle é dificultado devido aos hábitos crípticos das larvas, sendo a catação dos insetos adultos o método usado pelos produtores para diminuir a infestação. Este trabalho teve como objetivo avaliar pela primeira vez a suscetibilidade de H. betulinus ao nematoide entomopatogênico Steinernema carpocapsae , em condições de laboratório, visando futura utilização no controle da praga. O nematoide foi aplicado em quatro diferentes concentrações (12,5; 25; 50 e 100 Juvenis Infectantes/cm2), contra adultos. O inseto mostrou-se susceptível em todas as concentrações testadas, obtendo-se mortalidade de 35 a 78% para a menor e maior concentrações, respectivamente.

ABSTRACT Hedypathes betulinus (Klug, 1825) (Coleoptera: Cerambycidae) is the main pest of Paraguay tea. Its control is difficult, due to the cryptic habit of the larvae. Usually it is controlled by catching the adults. This work aimed for the first time to evaluate a new control method for this pest, testing the susceptibility of H. betulinus to the entomopathogenic nematode Steinernema carpocapsae in the laboratory. The nematode was applied in 4 doses (12.5; 25; 50 and 100 infective juveniles/cm2), against adult insects. The nematode caused mortality of 35% and 76% at the smallest and largest concentrations, respectively.

RESUMO O presente estudo descreve uma metodologia de avaliação populacional do cascudinho em aviários de frango de corte, como forma de estimar a eficiência de métodos de controle. A técnica é baseada na coleta de amostras da cama do aviário em 14 pontos previamente determinados, contagem de adultos, e posterior comparação percentual dos valores obtidos antes e após a adoção da estratégia de controle. A técnica permite avaliar a população de todo o aviário, bem como dos diferentes pontos e também diagnosticar o desperdício de ração e movimentos de insetos.

ABSTRACT This study describes the methodology used for evaluating the efficacy of the control strategies of the lesser mealworm population (Alphitobius diaperinus) Panzer in poultry houses. The technique is based on the sampling of litter at 14 points, the counting of adults, and comparison of the insects before and after application of the control strategy. It can be used to evaluate the population throughout the poultry house or at each point sampled. It also allows for the assessment of chicken-food waste and migration of insects.

RESUMO Avaliou-se o efeito de Metarhizium anisopliae (Metsch.) para Astyanax scabripinnis (Jenyns, 1842) (Pisces, Characidae), em condições de laboratório. Suspensões aquosas de conídios recémproduzidos, viáveis (viabilidade mínima 90%) e inviabilizados por meio de autoclavagem (121º C, 20 minutos, a 1 atm), na concentração de 6,5 x 1010 conídios/aquário (equivalente a 5 x 1015 conídios/ ha, que representa 1.000 vezes a concentração recomendada para o controle de cigarrinhas de pastagens, principal praga-alvo deste entomopatógeno no Brasil), foram aplicadas em aquários contendo A. scabripinnis . Foram analisadas amostras de água e dos peixes, dos quais foram dissecados as brânquias e o estômago, em diferentes intervalos de tempo, a fim de se avaliar a presença dos conídios. Observaram-se diariamente o comportamento e a mortalidade de peixes em ambos os tratamentos. Avaliou-se nos peixes sobreviventes a morfologia das células das brânquias e do fígado. Verificou-se que nas brânquias não houve alteração no número de conídios ao longo de 16 dias de contato, sendo que no estômago houve um ligeiro acréscimo inicial seguido de redução constante. A viabilidade dos conídios em todos os locais avaliados decresceu após 24 horas da aplicação. Constatou-se que não houve morte ou quaisquer alterações comportamentais após 30 dias de contato, indicando a ausência de efeitos adversos associados à capacidade do fungo em provocar infecção ou exercer efeitos tóxicos em ambos os organismos-teste.

ABSTRACT The effect of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin on Astyanax scabripinnis (Jenyns, 1842) (Pisces, Characidae) under laboratory conditions was evaluated. Aqueous conidial suspensions either with a minimum viability of 90% or containing conidia rendered unviable by autoclaving were applied in fish tanks containing A. scabripinnis, at the concentration of 6.5 × 1010 conidia/fish tank (equivalent to 5 × 1015 conidia/ha, which represents 1000 times the recommended concentration for the control of pasture spittlebugs, the main target pest of this entomopathogen in Brazil). Water and fish samples were analyzed; the fish gills and stomachs were dissected at different time intervals to evaluate the presence of conidia. Fish behavior and mortality were observed daily in both treatments. The morphology of gill and liver cells was evaluated in the surviving fish. No changes in the number of conidia were verified in the gills throughout 16 days of contact; in the stomach, there was a slight initial increase followed by a steady reduction. Conidial viability decreased in all places evaluated 24 hours after application. No fish death or any behavioral alterations occurred after 30 days of contact, indicating the absence of adverse effects associated with the entomopathogen on the test organisms. The absence of signs of infectivity and other adverse effects are a further indication in favor of the use of M. anisopliae as a biopesticide.

RESUMO O cascudinho infesta cama de aviários e é uma das pragas-chave da avicultura moderna. Embora ineficiente, seu controle é baseado no uso de inseticidas químicos. Diante da falta de informações acerca da bioecologia do inseto nas condições do Brasil, realizou-se este trabalho em aviários comerciais de frangos de corte, em Cascavel, PR, sendo um aviário de piso de cimento e com alimentação automatizada (Cimento-Automático) e outro com piso de terra batida e comedouros pendulares (Terra-Manual), ambos tendo o piso coberto por cama de maravalha. As avaliações foram realizadas semanalmente com armadilhas colocadas sob comedouros (15 no aviário CimentoAutomático e 10 no Terra-Manual), sendo também registrada a temperatura da cama, nos locais de amostragem. Verificou-se uma tendência em se encontrar menor número de insetos no aviário Cimento-Automático, pela maior dificuldade do inseto em se desenvolver em locais com este tipo de piso. Maiores populações do inseto foram constatadas nas áreas de alojamento em função das elevadas temperaturas e na concentração da ração durante todo o período de criação.

ABSTRACT The lesser mealworm infests chicken-house litter and is a key pest in modern poultry raising. Its control is inefficient and done mostly using insecticides. Due the lack of information on pest bioecology in Brazil, this study was carried out in Cascavel, state of Paraná, Brazil, in two broiler houses: the first with concrete floor and automatic trough (concrete-automatic) and the second with compact soil floor and manual trough (manual-soil), both covered with wood residues litter. The assessments were made in the houses weekly using traps (15 in the concrete-automatic and 10 in the manual-soil). Temperature was also recorded. In general, there was a tendency to find a lower number of insects in the concrete-automatic house due to difficulty of insect development on this kind of floor. Greater populations were found in the shelter areas due to greater temperature and food concentration throughout the entire period of rearing.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo verificar a eficiência do controle de Alphitobius diaperinus, utilizando uma combinação de Beauveria bassiana e inseticidas químicos, avaliando as possíveis interações de sinergismo, antagonismo ou aditivismo. Nos tratamentos para larvas foi pulverizado, separadamente, 0,1 mL do inseticida, 0,1 mL do fungo e 0,1 mL da mistura (inseticida + fungo). Após um minuto da aplicação, as larvas foram transferidas e individualizadas em caixas de acrílico e os adultos em placa de Petri. No tratamento contendo apenas fungo, os adultos foram mergulhados em 5 mL da suspensão de conídios. No tratamento combinado, os insetos foram pulverizados com inseticida e, após 24 horas, submersos em suspensão de conídios. Em uma segunda etapa foi realizado um experimento fungo + inseticida onde os insetos foram mergulhados em suspensão de conídios e, após 24 horas, pulverizados com inseticida. Na interação entre inseticidas e fungos houve predominância de efeitos antagônicos, que ocorreram em 52,27% dos experimentos. De modo geral, maiores concentrações de fungos levaram a efeitos aditivos. Os experimentos mostraram que, independentemente das Concentrações Letais dos dois inseticidas utilizados, aplicados tanto em adultos como em larvas, na maioria dos resultados os efeitos aditivos foram observados quando se utilizou a CL70 do fungo.

ABSTRACT The objective of this study was to verify the effectiveness of control of A. diaperinus, using a combination of Beauveria bassianaand chemical insecticides, and to evaluate possible synergistic, antagonistic, or additive interactions. In treatments against larvae, 0.1mL of the insecticide, 0.1mL of the fungus, and 0.1 mL of the mixture (insecticide + fungus) were spayed separately. One minute after application, the larvae were transferred and individualized in acrylic boxes, and adults transferred to a Petri dish. In the treatment containing the fungus alone, the adults were submersed in 5 mL of a conidial suspension. In the treatment consisting of insecticide + fungus, the insects were sprayed with insecticide and after 24 hours were submersed in a conidial suspension. The second stage of the experiment was carried out with fungus + insecticide, the insects being submersed in a conidial suspension and after 24 hours sprayed with insecticide. There was a predominance of antagonistic effects in the interaction between insecticides and fungi, which occurred in 52.27% of the cases. In general, higher concentrations of the fungus led to additive effects. The experiments showed that regardless of the lethal concentrations of both insecticides used, applied either on adults or on larvae, the additive effects were observed when the LC70 of the fungus was used.

RESUMO Objetivou-se comparar técnicas para a avaliação in vitro do efeito de herbicidas sobre Bacillus thuringiensis Berliner var. kurstaki (Btk). Foram testados os herbicidas sulfentrazone, lactofen, imazethapyr, fenoxaprop e metribuzin em duas concentrações, sobre células e esporos, em meio ágar nutriente sólido (MS) e caldo nutriente (CN) - líquido (ML), além da metabolização (MT) de tais produtos por Btk. Para células em MS, os herbicidas foram testados incorporados ao meio e em discos de papel-filtro impregnados nos produtos. Avaliou-se, respectivamente, as unidades formadoras de colônia por mililitro (UFC/mL) e a formação de halo de inibição. Para células, a mistura Btk + produtos + CN foi incubada em frascos erlemmeyer (30 ± 2° C, 150 rpm, 24h) e, em seguida, a mistura foi diluída e inoculada em MS, avaliando-se o número de UFC/mL. Os testes de MT e esporos foram realizados em líquido (água para MT e CN para esporos). O efeito dos produtos variou conforme a concentração utilizada, técnica de avaliação e a fase/estágio do microrganismo, sendo a técnica de avaliação em ML a mais indicada para a avaliação do efeito dos herbicidas sobre células de Btk, pois não apresenta limitações para difusão e permite quantificação. Os herbicidas, independentemente da concentração, foram incompatíveis para a célula, porém sulfetrazone e imazethapyr foram metabolizados por Btk. Todos herbicidas foram compatíveis com esporos, possibilitando a germinação, porém a concentração e tempo influenciaram nos resultados.

ABSTRACT The objective of this research was to compare techniques for the in-vitro evaluation of the effect of herbicides onBacillus thuringiensis Berliner var. kurstaki (Btk). The herbicides sulfentrazone, lactofen, imazethapyr, fenoxaprop and metribuzin were tested at two concentrations, on cells and spores, in nutrient agar (NA) solid medium (SM), and in nutrient broth (NB) liquid medium (LM), in addition to their metabolization (MT) by Btk. For cells, the fungicides in NA were tested incorporated into the medium and on filter-paper disks impregnated with the products. Evaluation was made, respectively, of the number of colony-unit formers per milliliter CFU.mL-1 and of the formation of an inhibition halo. For cells, the Btk + products + NB mixture was incubated in Erlenmeyer flasks (30 ± 2° C, 150rpm, 24h) and then the NB was diluted and inoculated onto NA, followed by evaluation of the number of CFU.mL-1. The MT and spore tests were performed in liquid medium (water for MT and NB for spores). The effects of the products varied with their concentration, the evaluation technique used and the developmental stage of the microorganism. The LM evaluation technique proved to be the best for evaluating the effect of herbicides on Btk cells, as it did not show any diffusion limitations and it also allowed for quantification. The herbicides, regardless of their concentration, were incompatible with the cells, although sulfetrazone and imazethapyr were metabolized by Btk. All herbicides were compatible with the spores, allowing for germination, but the concentration and time influenced the results.

RESUMO O trabalho foi desenvolvido com o objetivo de comparar a eficiência de preparações líquida e em pó do fungo Beauveria bassiana e também verificar quais efeitos que o tipo de solo e cama de aviário podem causar sobre o fungo, em condições de laboratório. A formulação em pó mostrouse mais eficiente que a líquida, causando mortalidade confirmada de larvas de 83,3 e de 33,4% de adultos, contra 18,7 e 12%, respectivamente para larvas e adultos. A CL50 da preparação em pó foi de 2,41 x 107 e 5,33 x 107 conídios/g e TL50 de 4,7 e 5,3 dias para larvas e adultos, respectivamente. O fungo em contato com o solo de aviário teve sua eficiência reduzida em cerca de 40% em relação ao tratamento com solo de barranco, e a mortalidade de larvas não diferiu quando se utilizou cama nova ou usada. A mortalidade de adultos foi baixa tanto para solo combinado à cama nova (11,5%) quanto usada (25%), bem como a mortalidade de larvas na aplicação do fungo sobre (58,7%) e abaixo (38,7%) da cama nova. Constatou-se que o aumento do tempo de contato dos insetos com os substratos tende a diminuir a mortalidade em cerca de 12 vezes, independente do substrato.

ABSTRACT This study was carried out in order to compare the effectiveness of liquid and powder preparations of the fungusBeauveria bassiana, and to verify the potential effects of soil type and poultry farm bedding on the fungus, under laboratory conditions. The powder proved more effective than the liquid formulation, causing a confirmed larval mortality of 83.3% and a confirmed adult mortality of 33.4%, against 18.7 and 12%, respectively, for larvae and adults. LC50 values of 2.41 x 107 and 5.33 x 107 conidia/g, and LT50 values of 4.7 and 5.3 days were obtained with the powder preparation for larvae and adults, respectively. When in contact with the poultry farm soil, the fungus had its effectiveness reduced by about 40% compared to the hillside soil treatment, and no differences in larval mortality were observed between fresh and soiled bedding. Adult mortality was low in the soil combined with either fresh (11.5%) or soiled bedding (25%), as was larval mortality in the application of the fungus over (58.7%) or below (38.7%) the fresh bedding. It was verified that an increased contact time of the insects with the substrates tended to decrease mortality by about 12 times, regardless of substrate.

RESUMO O Estado do Paraná é o maior produtor sericícola brasileiro. A atividade é explorada em aproximadamente 200 municípios, envolvendo cerca de 7.000 produtores rurais. Durante o estágio de lagarta, o bicho-da-seda (Bombyx mori L.) é susceptível a doenças causadas por vírus, fungos e bactérias. Estas doenças podem gerar sérios danos na produção de casulos e, conseqüentemente, prejuízos para o produtor. Com o objetivo de se verificar os entomopatógenos associados a lagartas de B. mori no Estado do Paraná, foi desenvolvido o presente trabalho nas principais regiões produtoras, no período de novembro de 2002 a abril de 2003. Para tanto, lagartas suspeitas de infecção, vivas e/ou mortas foram coletadas diretamente dos barracões de criação das empresas sericícolas. O material coletado foi armazenado em frascos plásticos identificados e colocado em caixas térmico. No laboratório, as lagartas foram processadas utilizando-se metodologias específicas de acordo com o patógeno suspeito. Após o isolamento foram identificados os entomopatógenos Baculovírus (31,4%), Beauveriabassiana (Bals.) Vuill. (5,3%) e Bacillus thuringiensis Berliner (2,2%).

ABSTRACT The state of Paraná exceeds all other Brazilian states in terms of silk production. Approximately 7,000 agricultural producers engage in this activity, in about 200 counties. During the caterpillar stage, silkworms (Bombyx mori L.) are susceptible to a number of diseases caused by viruses, fungi, and bacteria. These diseases seriously impact cocoon production, and consequently result in losses for producers. To study the entomopathogens associated to B. mori caterpillars in the state of Paraná, the present study was carried out at the main producing regions from November 2002 to April 2003. Live and/or dead caterpillars suspected of infection were collected directly from the rearing huts of silk-producing companies. The collected material was stored in plastic containers, properly identified and placed in cooler boxes. In the laboratory, the caterpillars were processed by specific methodologies according to the suspected pathogen. After isolation, the entomopathogens Baculovirus (31.4%), Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (5.3%) and Bacillus thuringiensis Berliner (2.2%) were identified.

RESUMO Objetivou-se comparar técnicas para a avaliação “in vitro” do efeito de fungicidas sobre Bacillus thuringiensis var. kurstaki (Btk). Foram testados os fungicidas epoxiconazole, fentin hidróxido, azoxystrobin, tebuconazole e carbendazin em duas concentrações, sobre células e esporos, em ágar nutriente (AN)-sólido (MS) e caldo nutriente (CN)-líquido (ML), além da metabolização (MT) destes por Btk. Para células em AN, os fungicidas foram testados incorporados ao meio e em discos de papel-filtro. Avaliou-se, respectivamente, as UFC/mL e a formação de halo de inibição. Para células, a mistura Bt + produtos + CN foi incubada em erlemmeyers (30 ± 2° C, 150 rpm, 24h), e em seguida, diluida e inoculada em AN, avaliandose o número de UFC/mL. Os testes de MT e esporos foram realizados em líquido (água). O efeito dos produtos variou conforme a concentração, técnica, tempo de contato e fase/estágio do desenvolvimento do patógeno. O teste ML é o mais indicado para a avaliação do efeito em células, sendo observado que a maioria dos fungicidas mostrou-se compatível com as mesmas, e apenas epoxiconazole e azoxystrobin foram metabolizados. Fentin hidróxido foi o único incompatível com esporos.

ABSTRACT The aim of this study was to compare techniques for the invitro evaluation of the effect of fungicides on Bacillus thuringiensis var. kurstaki (Btk). The fungicides epoxiconazole, fentin hydroxide, azoxystrobin, tebuconazole, and carbendazim were tested at two concentrations, on cells and spores, in nutrient agar (NA) – solid medium (SM), and in nutrient broth (NB) – liquid medium (LM), with an evaluation also being made of their metabolization (MT) by Btk. For cells, the fungicides in NA were tested incorporated into the medium and on filterpaper disks. The evaluation consisted, respectively, of the number of CFU/mL and of the formation of an inhibition halo. For cells, the Bt+products + NB mixture was incubated in Erlenmeyer flasks (30 ± 2° C, 150rpm, 24h) and then was diluted and inoculated onto NA; the number of CFU/mL was evaluated. The MT and spore tests were performed in liquid medium (water). The effects of the products varied with their concentration, technique used, contact time, and developmental stage of the pathogen. The LM test is the most recommendable for evaluating the effect on cells. It was observed that most fungicides were compatible with cells, and only epoxiconazole and azoxystrobin were metabolized. Fentin hydroxide was the only fungicide incompatible with spores.