BACKGROUND Gene reporter-fluorescent cells have emerged as alternative method for drug screening. OBJECTIVE Achievement of constitutive expression of fluorescent protein GFP by Leishmania braziliensis as alternative method for drug screening. METHODS L. braziliensis-GFP was generated using Leishmania tarentolae pLEXSY-egfp for constitutive expression of GFP. Fluorescent cells were selected and subjected to standardisation tests of anti-promastigote and anti-intracellular amastigote assays. FINDINGS Our results showed that L. braziliensis-GFP method is faster and more sensitive than Allamar Blue-resazurin. MAIN CONCLUSION Transfected parasites maintained stable fluorescence after successive in vitro passages and pLEXSY system can be used to achieve non-L. tarentolae fluorescent cells.

O herpesvírus bovino 1 (Bovine herpesvirus 1 - BoHV-1) causa grandes prejuízos econômicos à pecuária bovina mundial, por comprometer os sistemas respiratório e reprodutivo de bovinos de corte e leiteiros. Nas últimas décadas, os registros de casos clínicos ocasionados pelo BoHV-1, no Brasil, mostram que têm aumentado gradualmente, o que torna importante o delineamento de estudos que mostrem a distribuição da infecção nas diversas regiões do país. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de anticorpos anti-BoHV-1 em rebanhos bovinos leiteiros do Estado do Espírito Santo (ES), região ainda carente de informações sobre a distribuição desse patógeno. Para o estudo, foram utilizadas amostras de soro de bovinos leiteiros, não vacinados contra o BoHV-1, de 1.161 animais, provenientes de 59 rebanhos, oriundos de 23 municípios pertencentes às macrorregiões metropolitana, norte, noroeste e sul do ES. Para a identificação de animais soropositivos, foi aplicada a técnica de vírus-neutralização em microplacas. Das amostras de soros avaliadas, 775 (66,75%) apresentaram anticorpos neutralizantes contra BoHV-1, sendo todos os rebanhos considerados positivos. As percentagens das frequências de animais positivos foram bastante variadas, apresentando 49,06, 62,15, 67,21 e 80,04%, para as macrorregiões metropolitana, sul, norte e noroeste, respectivamente. Neste estudo, os resultados claramente indicam a circulação do agente viral no rebanho bovino leiteiro do ES, sendo necessário o controle e monitoramento das enfermidades relacionadas com o BoHV-1.

Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) causes major losses in worldwide livestock, affecting the respiratory and reproductive tracts of bovine. In the past decades, the number of cases in Brazil has been gradually increasing. Therefore, it is important to assess the distribution of infection in different regions of the country. In the state of Espírito Santo (ES) the BoHV 1 infection rate in dairy cattle herds is unknown. Thus, the aim of this study was to detect neutralizing antibodies against BoHV-1 in serum samples from 1,161 non-vaccinated cows from 59 dairy cattle herds in 23 municipalities of the Metropolitan, North, Northwest and South macro-regions. The identification of seropositive cows was evaluated by the virus neutralization test. The results showed that of all serum samples evaluated 775 (66.75%) had neutralizing antibodies against BoHV-1. Moreover, all herds were found positive; however, the percentage of positive cows varied among regions; 49.06%, 62.15%, 67.21% and 80.04% for the Metropolitan, South, North and Northwest macro-regions, respectively. In this study, the results clearly indicate the dissemination of the viral agent in dairy cattle in the ES state, requiring the monitoring and control of diseases related to BoHV-1 infection.

O presente estudo objetiva comunicar a ocorrência do parasitismo por Amblyomma ovale (Koch, 1844) em cão, no município de Apodi, Rio Grande do Norte, Brasil. Os exemplares foram identificados como sendo uma fêmea e dois machos de A. ovale, além destes, o animal estava parasitado por cinco fêmeas de Rhipicephalus(Boophilus) microplus, sete fêmeas e três machos de R. sanguineus. O encontro de A. ovale confirma os resultados da literatura de que esses carrapatos, relatados em várias espécies de carnívoros silvestres, também podem infestar cães no Brasil. Este carrapato tem sua distribuição confirmada em vários estados brasileiros, sendo este o primeiro relato no Estado do Rio Grande do Norte. Este achado alerta para o risco do carreamento de patógenos emergentes e re-emergentes para regiões peridomiciliares, seja devido a frequência destes carrapatos em ambientes silvestres ou da presença de animais silvestres parasitados próximos a ambientes peridomiciliares, expondo cães domésticos ao parasitismo por carrapatos A. ovale e, consequentemente, a agentes potencialmente veiculados por este ectoparasito.

This study aims to report the occurrence of parasitism byAmblyomma ovale (Koch, 1844) in dogs in the municipality of Apodi, Rio Grande do Norte, Brazil. Specimens were identified as being one female and two males of A. ovale, besides; the animal was infested by five females of Rhipicephalus(Boophilus) microplus and seven females and three males of R. sanguineus. The finding ofA. ovale confirms results in the literature that these ticks, reported in several species of wild carnivores, can also infect dogs in Brazil. The distribution of this tick species in several Brazilian states has already been confirmed, but this is the first report in the State of Rio Grande do Norte. This finding highlights the risk of the carrying of emerging and re-emerging pathogens to peridomestic hosts are as, either because of the frequency of these ticks in wild environments or the presence of infected wild animals near peridomestic environments, exposing domestic dogs to parasitism byA. ovale ticks and, therefore, to agents potentially carried by this ectoparasite.

Porcine circovirus-2 (PCV-2) infection is currently considered an important disease of swine. The pathogenic agent was first described in Brazil in 2000. This study detected the PCV-2 DNA in four Brazilian pig tissues collected between 1978 and 1979. This observation is the oldest description of this virus in Brazil.

O sequenciamento e a análise filogenética a partir da seqüência nucleotídica do gene que codifica a proteína VP2 foram realizados com o intuito de caracterizar os agentes causadores de dois surtos da doença infecciosa bursal em lotes de poedeiras do estado Minas Gerais, em 2004. Os resultados indicam que os surtos analisados podem estar relacionados com o vírus de origem vacinal.

Sequencing and phylogenetic analysis based on the nucleotide sequence of the gene encoding VP2 protein was carried out in order to characterize the agent of two outbreaks of infectious bursal disease in layer flocks in the state of Minas Gerais in 2004. The results indicate the outbreaks could be related to the vaccinal virus.

O herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) é o agente da menigoencefalite herpética bovina. A doença neurológica, associada à infecção pelo BoHV-5, apresenta altas taxas de letalidade em bovinos jovens e está disseminada no Brasil. A prevenção das perdas causadas pela infecção pelo herpesvírus está baseada, principalmente, na imunização dos animais. Nesse sentido, foi delineada uma comparação entre isolados de BoHV-5, buscando selecionar o isolado mais antigênico para a formulação de vacinas. As formulações inativadas foram produzidas com os isolados ISO9898292, SV507, SV163, 1807 e EVI145 e administradas a cinco grupos de 10 ovelhas cada, que receberam duas doses vacinais por via intramuscular com intervalo de 21 dias. Foram realizadas coletas de sangue para análise de presença de anticorpos por soroneutralização e acompanhamento dos animais até o 63° dia após a primo-vacinação. Foram observados dois picos na curva de anticorpos, o primeiro no dia 14, após a vacinação, quando os títulos médios de anticorpos variaram entre 23,1 e 138,6. O segundo pico foi observado 14 dias após a revacinação, quando os títulos médios variaram entre 301,3 e 1017,5. No 42° dia após a revacinação, foi observada variação de título entre 82,4 e 305,9. A diferença entre as médias de títulos de anticorpos de cada grupo de animais sugere uma menor antigenicidade do isolado ISO9898292 em relação aos demais, demonstrando uma possível variação antigênica entre os isolados. Todos os isolados, com exceção do ISO9898292, mostraram-se imunogênicos para a indução de anticorpos.

Herpesvirus bovine 5 (BoHV-5) is the agent of bovine herpetic menigoencephalitis. The neurological disease associated with the infection is highly lethal in young cattle and it is widespread in Brazil. Control of the clinical signs caused by herpesviruses is based mainly on the immunization of cattle. A comparative study was performed among Brazilian BoHV-5 isolates to select the more antigenic virus. Inactivated vaccines were formulated using isolates ISO9898292, SV507, SV163, 1807 and EVI145 and administered to five groups of 10 sheep, each animal receiving two intramuscular doses with a 21 days interval. Blood collection for serology by virusneutralization were performed until the 63rd day after the first vaccination, two peaks in the curve of antibodies were observed, the first on day 14, ranged from 23.l to 138.6. The second peak was observed 14 days after the booster, and ranged from 301.3 to 1017.5. In the 42nd day after the booster, it was observed a titer variation from 82.4 to 305.9. The differences among antibody titers of each group of suggests a lower antigenicity of isolate ISO9898292 in comparison with the others, demonstrating a possible antigenic variation among the isolates. Thus, all isolates, with exception of ISO9898292, were immunogenic for the induction of neutralizing antibodies.