Abstract Introduction: Bromeliads are a source of proteases that have not been fully studied. Objectives: To evaluate the proteolytic activity of wild fruits of Bromelia karatas L. under different temperature, pH and NaCl conditions, and to estimate the thermal stability of their proteases. Materials and methods: The effect of pH (6, 7, 8, 9, 10 and 12), incubation temperatures (30, 40, 50, 60 and 70 °C) and NaCl concentrations (5, 10 and 20 %) on the proteolytic activity of the fruits was compared. The thermal stability of the proteases was assessed at 30, 50 and 70 °C for 240 minutes. The molecular weights and isoelectric points of the proteases were estimated by non-reducing two-dimensional zymography. The data were analyzed using a one-factor ANOVA and Tukey's test (α = 0.05). Results and discussion: The proteolytic activity of B. karatas fruit extract (8.59 U·mg-1) was greater than that of Ananas comosus (L.) Merr. variety comosus (3.42 U·mg-1). The activity was higher at pH 6 and 7 and in concentrations lower than 5 % NaCl. Proteases were stable at 30 and 50 °C for 210 minutes. The two-dimensional zymogram, under non-reducing conditions, showed at least 40 light zones with apparent molecular weights between 27.3 and 290 kDa, potentially representing proteases. Conclusion: The proteases of B. karatas have potential for application in the food industry.
Resumen Introducción: Las bromelias son fuente de proteasas que no se han estudiado totalmente. Objetivos: Evaluar la actividad proteolítica de frutos silvestres de Bromelia karatas L. bajo distintas condiciones de temperatura, pH y NaCl, y estimar la estabilidad térmica de las proteasas. Materiales y métodos: Se comparó el efecto del pH (6, 7, 8, 9, 10 y 12), temperaturas de incubación (30, 40, 50, 60 y 70 °C) y concentraciones de NaCl (5, 10 y 20 %) sobre la actividad proteolítica de los frutos. La estabilidad térmica de las proteasas se evaluó a 30, 50 y 70 °C durante 240 minutos. Los pesos moleculares y los puntos isoeléctricos de las proteasas se estimaron por zimografía bidimensional no reductora. Los datos se analizaron mediante un ANOVA de un factor y la prueba de comparaciones múltiples de medias de Tukey (α = 0.05). Resultados y discusión: La actividad proteolítica del extracto de frutos de B. karatas (8.59 U·mg-1) fue mayor que la de Ananas comosus (L.) Merr. variedad comosus (3.42 U·mg-1). La actividad fue mayor en valores de pH 6 y 7 y en concentraciones menores de 5 % de NaCl. Las proteasas se mantuvieron estables a 30 y 50 °C durante 210 minutos. El zimograma bidimensional, bajo condiciones no reductoras, mostró por lo menos 40 zonas claras con pesos moleculares aparentes entre 27.3 y 290 kDa, que representan potencialmente proteasas. Conclusión: Las proteasas de B. karatas tienen potencial de aplicación en la industria alimentaria.