Se determinó la sobrevida de 3 cepas de Arcobacter butzleri en el interior de trofozoítos de Acanthamoeba castellanii utilizando cultivos axénicos de la ameba, los que fueron inoculados con las cepas bacterianas e incubados a 26 °C en aerobiosis durante 240 h. La interacción bacterias/amebas fue monitorizada mediante microscopía de contraste de fase. Las tasas de sobrevida bacteriana en el interior de las amebas fueron establecidas a través del recuento de unidades formadoras de colonias mediante ensayos de protección con gentamicina. Todas las cepas de A. butzleri fueron capaces de sobrevivir en el interior de la ameba al menos durante 240 h, lo que sugiere, por un lado, que A. butzleri puede resistir los procesos de digestión propios de la ameba, al menos por el lapso aquí analizado y, por el otro, que A. castellanii podría actuar como reservorio ambiental de esta bacteria y, probablemente, como vehículo de transmisión de A. butzleri.

The survival of three Arcobacter butzleri strains inside Acanthamoeba castellanii was assessed using axenic cultures of A. castellanii that were inoculated with the tested strains and incubated at 26 °C under aerobic conditions for 240 h. The behavior of bacteria in contact with amoebae was monitored using phase contrast microscopy. The bacterial survival rate within amoebae was assessed through counting colony forming units, using the gentamicin protection assay. All A. butzleri strains were able to survive during 240 h within the amoebae, thus suggesting that (i) A. butzleri resists the amoebic digestion processes at least for the analyzed time; (ii) that A. castellanii could serve as an environmental reservoir for this bacterium, probably acting as a transmission vehicle for A. butzleri.

Resumen: La producción agrícola moderna requiere gran cantidad de agroquímicos derivados del petróleo, por lo que su producción y uso contaminan el ambiente, además de generar daños en la salud de los seres vivos. Una alternativa para mantener un nivel rentable de producción, con un menor uso de agroquímicos, y enfocando la agricultura hacia un manejo sustentable, es la aplicación de microorganismos fijadores de nitrógeno. De esta forma, se busca implementar alternativas que permitan reducir los costos (económicos y ambientales) sin afectar la productividad de los cultivos. Este trabajo se enfocó a generar una tecnología sustentable a base de cepas nativas de rhizobia, potencialmente útiles como biofertilizantes, aplicable a cultivos agrícolas en localidades del estado de Chihuahua. En 11 muestras de suelos con actividad agrícola se evaluó la densidad de poblaciones bacterianas, a niveles de 1 × 102 a 6.6 × 103 unidades formadoras de colonias (UFC g-1), mostrándose el efecto negativo de la aplicación de fertilizante químico a nivel de las poblaciones microbianas del suelo. Algunas cepas presentaron una baja tasa de supervivencia in vitro, se obtuvo una colección de 24 cepas provenientes de suelo y 7 de nódulos radiculares. Las 31 cepas se identificaron mediante el análisis de secuencias del gen 16S rDNA, encontrando principalmente Rhizobium y Ensifer. Se evaluó el crecimiento de las cepas en medio de cultivo bajo diferentes condiciones fisiológicas (pH de 4.0, 5.5, 6.8 y 8.0; temperatura de 32 y 42 ºC; NaCl de 0.01, 0.51 y 0.85 moles L-1). Se aislaron cepas con capacidad de crecimiento en condiciones que se consideran adversas y que sugieren una mayor flexibilidad fisiológica y capacidad de adaptación a las condiciones ambientales (pH, temperatura, osmolaridad, fuente de C y energía). La diferencia en efectividad de las cepas inoculadas en leguminosas hace evidente la necesidad de diseñar un inoculante multicepa como parte de una alternativa encaminada hacia la agricultura sustentable.

Abstract: Modern agricultural production requires high amounts of agrochemical derivatives of petroleum. Their production and use contaminate the atmosphere, generating damage to health of living beings. An alternative to the exclusive use of agrochemicals, while maintaining a profitable agricultural production and aiming for sustainable management, is the application of nitrogen fixing microorganisms. In this way, this alternative reduces costs (economic and environmental) without affecting crop productivity. Our objective was to generate a technology with potentially useful native rhizobia strains as biofertilizers, applied to agricultural crops in localities of the state of Chihuahua. In 11 agricultural soil samples, bacterial populations were evaluated, finding levels from 1 × 102 a 6.6 × 103 training units of colonies (UFC g-1); showing the negative effect of chemical fertilizers on microbial soil populations. Some strains showed very low survival capacity in vitro. We obtained a collection of 24 strains isolated from soil and 7 strains isolated from root nodules. The 31 isolates were identified by 16S rDNA sequencing, mainly Rhizobium and Ensifer were found. Growth in culture medium was evaluated under different physiological conditions (pH 4.0, 5.5, 6.8 and 8.0; temperature of 32 and 42 ºC, and NaCl concentration of 0.01, 0.51 and 0.85 mol L-1). Strains with capacity to grow under adverse conditions were obtained. This capacity suggests physiological flexibility and adaptation to environmental conditions. The difference in effectiveness observed for inoculated strains on leguminous crops visibly shows the necessity of multistrain inoculants as an alternative for sustainable agriculture.

La calidad del aire de los ambientes internos puede estar influenciada por distintas partículas suspendidas en la atmósfera (polvo, polen, bacterias, hongos, virus) que pueden causar daños a documentos y presentar reacciones alérgicas en personas que trabajan con éstos. Con este trabajo, se identificaron hasta género los microorganismos presentes en el ambiente del archivo central, Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, que podrían causar alergias respiratorias en los trabajadores de esta área. Para las muestras de ambiente se empleó el método de sedimentación en placa utilizando agar papa dextrosa y se midieron temperatura y humedad relativa durante cada muestreo. Asimismo, se aplicó una encuesta a los trabajadores con el fin de conocer sintomatología respiratoria sugestiva que pudieran presentar por el manejo de documentos y se tomaron muestras de fosas nasales a algunos de ellos. Se aislaron del ambiente 14 géneros entre hongos, levaduras y bacterias, y dos categorías de microorganismos no identificadas. Los géneros fúngicos predominantes fueron Mucor spp., y Penicillium spp., con un 36,6% y 27,5%, respectivamente, del total de colonias aisladas. Las formas levaduriformes principalmente del género Rhodotorula, y bacterianas con predominio de formas cocoides fueron aisladas en menor proporción. No se encontró correlación estadísticamente significativa entre el promedio de unidades formadoras de colonia con temperatura y humedad relativa del ambiente. Además, en las muestras de fosas nasales sólo se encontró microbiota normal de nariz, lo cual indica que los síntomas respiratorios sugestivos que presentan los trabajadores no estuvieron influenciados directamente por la presencia de esporas de hongos en el ambiente del archivo central.

Air quality of indoor environments can be influenced by different particles suspended in the atmosphere (dust, pollen, bacteria, fungi, and virus) that could cause damage to documents and induce allergic reactions in people working with these documents. In this work, we identified until genera the microorganisms present in the environment of the central archive of Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia; specifically those that could cause respiratory allergies to personnel of this area. For the environment samples, we used the open Petri dish sedimentation method using potato dextrose agar, and measured temperature and relative humidity during each sampling. Also, a survey was taken of the workers to record respiratory symptoms that could arise from handling documents. Samples were taken from the nostrils of some of these workers. Fourteen genera among fungi, yeasts, and bacteria, and two non identified categories were isolated from the environment. The predominant fungal genera were Mucor spp. and Penicillium spp. with 36.6% and 27.5% of the total of isolated colonies, respectively. Yeast, mainly Rhodotorula genera, and bacteria with prevalence coccus forms were isolated in smaller proportions. There was not statistically significant correlation among the average of colony forming units and the temperature and relative humidity in the environment. In addition, nostril samples yielded only normal microbiota of the nose, indicating that suggestive respiratory symptoms workers presented are not directly influenced by the presence of fungal spores in the environment at the central archive.

Objective: To evalúate the presence of supragingival bacterial plaque and Porphyromona gingivalis before and after the implementation of an educational program for oral hygiene. Methods: 30 scholars were enrolled for 3 months, in order to strenghten their oral hygiene technique and obtain a gingival sulcus bacterial plaque sample monthly. Results: Porphyromona gingivalis was present in 100% of cases. After 30 days of intervention, oral hygiene reduction in O'Leary rate was 21.15%) and bacteria colony forming units in 21.51%o. After 60 days, O'Leary Índex declined in 29.45%> and bacteria colony forming units in 16.12%o. Conclusions: The implementation of an oral hygiene program has a direct impact in the composition of the gingival sulcus bacterial plaque and the decrease of Porphyromona gingivalis colony forming units, mainly at 30 days intervention

Objetivo: Evaluar antes y después de la aplicación de un programa de intervención de higiene bucal la presencia de placa bacteriana supragingival y de Porphyromona gingivalis. Pacientes y Método: A 30 escolares se les realizó mensualmente un muestreo de placa bacteria del surco gingival, índice de OEeary y reforzamiento de la técnica de higiene bucal; durante tres meses. Resultados: La bacteria Porphyromona gingivalis estuvo presente en el 100% de los casos durante todo el período de intervención. A los 30 días de la intervención de higiene bucal la disminución del índice de OEeary fue de un 21,15% y las unidades formadoras de colonias bacterianas en un 21,51%o. Luego a los 60 días el índice de OEeary disminuyó en un 29,45%o y las unidades formadoras de colonias en un 16,12%o. Conclusión: Se concluye que la implementación de un programa de intervención de higiene bucal influye directamente en la composición de la placa bacteriana del surco gingival disminuyendo el número de unidades formadoras de colonias de Porphyromona gingivalis en la medida que la higiene bucal mejora. La mayor disminución fue a los 30 días

Introducción. Un recuento superior a 10(5) unidades formadoras de colonias por ml de aspirado duodenal se considera la "prueba de referencia" para el diagnóstico de proliferación bacteriana intestinal, a pesar de su caracter invasivo. La prueba de hidrógeno en el aliento, con lactulosa, se aplica como alternativa diagnóstica no invasiva, pero el fundamento para el empleo de lactulosa carece de solidez. Objetivos. Aportar evidencia experimental para sustentar el uso de lactulosa en la prueba de hidrógeno y validarla frente al cultivo de aspirado duodenal. Materiales y métodos. Para fundamentar el uso de lactulosa se comparó la cinética de la lactasa intestinal frente a lactulosa con su cinética frente a la lactosa. Con el fin de validar la prueba de hidrógeno, ésta se aplicó a 47 niños afectados por trastornos gastrointestinales y los resultados se compararon con los de la prueba de referencia. Mediante una tabla de contingencia se estimó la validez y con el índice kappa, la concordancia. Resultados. La cinética mostró que la lactasa es 240 veces menos eficiente que la lactulosa. La sensibilidad de la prueba de hidrógeno fue de 85,7% (82,0%-89,4%), la especificidad de 90,9% (89,3%-92,5%), el valor diagnóstico positivo de 80% (76,5%-83,5%) y el valor diagnóstico negativo de 93,8% (92,1%-95,4%). El índice kappa de 0,785 (0,54-0,95) indicó una importante concordancia entre las pruebas diagnósticas. Conclusiones. Se aporta evidencia experimental para sustentar el uso de la lactulosa en la prueba de hidrógeno y se valida ésta frente al patrón de referencia como prueba tamiz para diagnosticar la proliferación bacteriana intestinal.

Introduction.The standard method for diagnosis of small intestinal bacterial overgrowth is a duodenal aspirate that produces a coliform count greater than 105 colonic forming units/ml. Because this is an invasive procedure, the lactulose breath hydrogen test is considered as a non-invasive alternative. Better experimental support is required, however, for the routine use of lactulose in diagnosis. Objective. Experimental evidence is provided to support the use of lactulose in the breath hydrogen test. Validation of the test is accomplished by comparison to the duodenal aspirate culture. Materials and methods. A rational basis for the use of lactulose was established by a comparison of the kinetics of lactulose and lactose on intestinal lactase. For validation, the hydrogen test was applied to 47 children suffering from gastrointestinal disorders, and the results compared with aspirate culture counts. The validity of the hydrogen test was assessed by a contingency table and the degree of agreement established by the kappa index. Results. The kinetics data showed that lactase is 240 times less efficient in presence of lactulose than it is in presence of lactose. The sensitivity of the breath hydrogen test was 85.7% (82.0-89.4%), its specificity 90.9% (89.3-92.5%), the predictive positive value 80.0% (76.5-83.5%) and the predictive negative value 93.8% (92.1-95.4%); the kappa index=0.785 (0.54-0.95) showed excellent agreement between the two diagnostic tests. Conclusion. The results provided experimental support for the use of lactulose in the breath hydrogen test, and it was validated as screening test in the diagnosis of small intestinal bacterial overgrowth.

OBJETIVO: Avaliar o potencial de contaminação de águas residuárias da suinocultura. MÉTODOS: As águas residuárias da suinocultura foram estocadas em um tanque. Depois de 0, 30, 60, 90 e 120 dias de retenção hidráulica, foram incorporadas em lisímetros preenchidos com solos argilosos, arenosos e médios. Esses lisímetros foram então submetidos à simulação de duas condições climáticas: estação de chuvas e estiagem. O número de unidades formadoras de colônias de coliformes totais, coliformes fecais e estreptococos fecais foi medido nos efluentes do tanque de estocagem (para os diversos períodos de retenção hidráulica), nos percolados dos lisímetros e nos três tipos de solo. As análises microbiológicas foram realizadas através da técnica de membrana filtrante. As análises de pH foram realizadas potenciometricamente. RESULTADOS: Para os três microrganismos, as reduções bacterianas máximas no tanque de estocagem foram obtidas a partir de 90 dias de retenção. A quantificação bacteriana nos percolados dos três solos foi caracterizada por reduções elevadas. Em relação aos três tipos de solo, os maiores valores de redução bacteriana foram verificados nos solos médios, devido à sua acidez (pH < 7,0). Para os coliformes fecais a retenção hidráulica não foi suficiente para permitir a adequação sanitária das águas residuárias e sua utilização na irrigação (valores acima de 1 000 UFC.100 mL-1). Nesse caso, a incorporação desses resíduos nos solos foi caracterizada como uma segunda etapa de tratamento. CONCLUSÕES: A retenção da água residuária, seguida da aplicação no solo, mostrou-se eficiente na minimização do efeito contaminante dos resíduos da suinocultura. Recomenda-se uma diminuição no tempo de estocagem das águas residuárias da suinocultura, de 120 para 90 dias.

OBJECTIVE: To assess the potential for contamination of wastewaters from pig farming. METHODS: Wastewaters from pig farming were stored in a tank. After 0, 30, 60, 90, and 120 days of hydraulic retention, they were added to lysimeters filled with argillaceous, sandy, or medium soil. Finally, these lysimeters were submitted to simulations of either a rainy season or a dry season. The number of colony-forming units (CFUs) of total coliforms, fecal coliforms, and fecal streptococci was measured in the effluents of the storage tank (for the various periods of hydraulic retention), in the percolate from the lysimeters, and in the three types of soil. The microbiological analyses were carried out using the membrane filter technique. The pH analyses were done potentiometrically. RESULTS: For the three microorganisms, the largest decrease in bacterial counts in the storage tanks occurred with 90 or 120 days of retention. There was a marked decrease in the bacterial count in the percolates of the three soils. For the three soil types the greatest reduction in bacterial counts was found in medium soil, due to its acidity (pH < 7.0). Hydraulic retention was not sufficient to ensure the sanitary adequacy of the wastewaters and their use for irrigation, given that fecal coliform values were above 1 000 CFU per 100 mL. Therefore, adding the residues to the soil was considered a second stage of treatment. CONCLUSIONS: The retention of wastewaters followed by adding them to soil was effective in minimizing the contaminating effect of pig farming residues. The storage time for wastewaters from pig farming could be decreased from 120 to 90 days.